检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2019年第5期29卷 104-108页

作者：刘志昊穆大业占玲俊章晓联武汉大学基础医学院免疫学系病毒学国家重点实验室湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室和医学研究院武汉430071 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的采用两种结核分枝杆菌培养法(BACTEC MGIT 960培养法与罗氏(L?wenstein-Jensen,L-J)培养法)同时验证利福平(rifampin,RIF)在结核感染小鼠模型中的治疗效果,探讨采用BACTEC MGIT 960培养系统在结核感染的小鼠模型中的应用价值。方法... 详细信息

目的采用两种结核分枝杆菌培养法(BACTEC MGIT 960培养法与罗氏(L?wenstein-Jensen,L-J)培养法)同时验证利福平(rifampin,RIF)在结核感染小鼠模型中的治疗效果,探讨采用BACTEC MGIT 960培养系统在结核感染的小鼠模型中的应用价值。方法实验分为BACTEC MGIT 960培养组与L-J培养组,经尾静脉注射1.0×10~6 CFU/mL H37Rv菌液感染36只C57BL/6雌性小鼠,感染一周后18只小鼠采用利福平治疗四周,18只小鼠注射等量磷酸缓冲液(PBS)作为对照,用BACTEC MGIT 960快速培养与罗氏培养法对36只小鼠肺、脾及肝组织匀浆液进行培养。结果采用BACTEC MGIT 960培养法,RIF治疗组中肝、肺及脾组织培养物的报阳时间分别为(187.11±10.20) h、(347.22±12.70) h、(276.39±13.09) h,对照组为(142.50±11.70) h、(251.67±16.63) h、(230.28±7.22) h,组间对比差异有显著性(P<0.001);罗氏培养法,RIF治疗组中肝、肺及脾组织荷菌量分别为(5.15±0.15) log_(10) CFU、(3.30±0.23) log_(10) CFU、(3.40±0.25) log_(10) CFU,对照组荷菌量分别为(5.90±0.25) log_(10) CFU、(3.88±0.31) log_(10) CFU、(4.15±0.30) log_(10) CFU,组间对比差异有显著性(P<0.001)。结论采用BACTEC MGIT 960培养法和罗氏培养法进行荷菌量检测,其培养结果相符,但是前者检测出阳性结果时间平均缩短一半,并且区分度也较高,说明BACTEC MGIT 960培养法在动物模型的荷菌量检测中更有优势,可运用于结核感染动物模型中荷菌量的检测。

关键词：结核分枝杆菌 BACTEC MGIT 960 罗氏培养法小鼠模型

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人博卡病毒微滴数字PCR定量方法的建立

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中南民族大学学报（自然科学版） 2018年第3期37卷 32-36页

作者：邓幼平刘颖娟王笑臣刘佳明杨占秋赵东赤武汉大学中南医院儿科武汉430071 武汉大学中南医院检验科武汉430071 武汉大学医学院医学病毒学研究所病毒学国家重点实验室武汉430071

为准确、快速地从临床鼻咽拭子样本中筛选出人博卡病毒(HBoV)感染的阳性样本,以HBoV-sh9基因的保守区序列为检测靶标合成引物和探针,建立了微滴数字PCR(dd PCR)检测HBoV的方法.结果表明:HBoV dd PCR方法具有较高的特异性,在(0.5~6.8)... 详细信息

为准确、快速地从临床鼻咽拭子样本中筛选出人博卡病毒(HBoV)感染的阳性样本,以HBoV-sh9基因的保守区序列为检测靶标合成引物和探针,建立了微滴数字PCR(dd PCR)检测HBoV的方法.结果表明:HBoV dd PCR方法具有较高的特异性,在(0.5~6.8)×10~3copies/μL HBoV DNA浓度范围内,具有良好的线性和精确度,定量限低至0.5 copies/μL.182份临床样本检测结果显示:HBoV感染的阳性率为8.24%.此建立的HBoV dd PCR方法在定量限、准确性和重复性上较常规PCR优势明显,不受样品基质和扩增效率的影响.

关键词：微滴数字聚合酶链式反应人博卡病毒拷贝数阳性率

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病毒与宿主细胞的糖基化修饰及相关功能

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生物化学与生物物理进展 2017年第10期44卷 898-907页

作者：向田章晓联武汉大学病毒学国家重点实验室湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室武汉大学医学研究院武汉大学基础医学院免疫学系武汉430071

病毒的复制和对宿主的入侵与自身结构蛋白的糖基化修饰密切相关.对于宿主而言,在病毒感染宿主和宿主抗病毒的过程中,宿主的糖基化过程一方面可抑制病毒的复制和入侵,另一方面可促进病毒对宿主的感染,抑制宿主糖苷酶可抑制病毒的复制.从... 详细信息

病毒的复制和对宿主的入侵与自身结构蛋白的糖基化修饰密切相关.对于宿主而言,在病毒感染宿主和宿主抗病毒的过程中,宿主的糖基化过程一方面可抑制病毒的复制和入侵,另一方面可促进病毒对宿主的感染,抑制宿主糖苷酶可抑制病毒的复制.从病毒方面来看,由于病毒自身缺乏糖基化修饰系统,病毒的糖基化过程是借宿主细胞内的合成系统对自身进行糖基化修饰.病毒的糖基化过程对病毒蛋白的折叠与稳定、病毒的感染和入侵、参与识别宿主细胞受体和参与病毒的免疫逃逸等过程起着重要的作用.随着糖基化研究技术的发展,以糖基化为基础的功能应用也越来越深入:如新型病毒疫苗和新型抗病毒药物的研制,以糖蛋白质组学研究为基础的质谱技术和生物信息学方法的发展,以及利用糖基化对病毒性疾病的诊断和治疗等,这些均为糖基化深入研究发展奠定了基础.本文就病毒与宿主细胞糖基化过程、相关功能以及研究应用等进展作一综述.

关键词：糖基化修饰病毒宿主

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结核分枝杆菌Rv2645刺激ISG15的表达上升促进体外丙型肝炎病毒的增殖

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病毒学报 2017年第3期33卷 372-379页

作者：卢芳芳谭杨付忠晓刘鹏章晓联武汉大学病毒学国家重点实验室湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室武汉大学医学研究院武汉大学基础医学院免疫学系武汉430071

为研究结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,***)与丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)感染之间的相关关系,本文研究毒性毒株*** H37Rv的RD13区中的Rv2645基因对免疫细胞中干扰素刺激基因(Interferonstimulated gene 15,ISG15)表达的影响,进而探讨ISG15的表达与HCV感染之间的相关性。利用携带Rv2645基因的无毒牛结核分枝杆菌卡介苗(Bacille calmette guerin,BCG)(即rBCG::Rv2645,rBCG)与亲本BCG分别感染小鼠或刺激小鼠巨噬细胞系RAW264.7,运用RT-qPCR以及蛋白印迹的方法检测,比较rBCG与BCG感染对小鼠CD4+T细胞及RAW264.7细胞中ISG15的mRNA及蛋白质表达的影响。同时克隆ISG15真核表达质粒和ISG15的沉默表达质粒-ISG15-shRNA,运用RT-qPCR及蛋白印迹分别检测ISG15过表达及沉默后,对HCV感染的人肝癌细胞系Huh7.5.1中HCV的mRNA、HCV非结构蛋白NS3及核心蛋白Core的表达。我们发现相对于BCG,携带Rv2645的BCG感染之后脾脏CD4+T细胞及体外RAW264.7中ISG15的mRNA及蛋白质的水平明显升高。此外,ISG15过表达导致Huh7.5.1中HCV的mRNA、NS3蛋白及Core蛋白的水平明显升高,而ISG15沉默后ISG15和HCV的mRNA的水平明显下调。本研究首次发现*** Rv2645能上调小鼠CD4+T细胞及巨噬细胞中ISG15的表达;而ISG15能促进Huh7.5.1中HCV增殖。本研究对阐明***毒性菌株H37Rv的Rv2645基因的功能,以及为研究MTB感染与HCV感染的分子机制提供参考依据。

关键词：结核分枝杆菌-M.tb Rv2645 丙型肝炎病毒(HCV) BCG::Rv2645 ISG15

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HCV感染人肝癌Huh7.5.1细胞后差异表达的lncRNA及其对细胞增殖的影响

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病毒学报 2017年第2期33卷 192-199页

作者：付忠晓李舒向田谢焱章晓联武汉大学病毒学国家重点实验室/湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室/武汉大学医学研究院/武汉大学基础医学院免疫学系武汉430071

丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是导致人类肝脏疾病的重要病原体。长链非编码RNA(Long noncoding RNA,lncRNA)参与了许多疾病和生物过程的调控,但是lncRNA在HCV感染中的作用还了解很少。本研究旨在筛选HCV感染人肝癌细胞系Huh7.5.... 详细信息

丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是导致人类肝脏疾病的重要病原体。长链非编码RNA(Long noncoding RNA,lncRNA)参与了许多疾病和生物过程的调控,但是lncRNA在HCV感染中的作用还了解很少。本研究旨在筛选HCV感染人肝癌细胞系Huh7.5.1后差异表达的长链非编码RNA(lncRNA),并研究相关lncRNA对细胞增殖及周期相关基因表达的影响。首先,分析HCV感染Huh7.5.1细胞72h前后lncRNA芯片表达谱;然后采用实时荧光定量PCR(Reverse tanscription-quantitative real time PCR,RT-qPCR)的方法对芯片中差异表达明显的17条lncRNA进行细胞水平验证;进一步采用CCK8以及ki67细胞增殖实验研究差异表达最明显的lncRNA对细胞增殖的影响;最后采用RT-qPCR探讨lncRNA对细胞周期蛋白基因cyclin B1/D1/E1的mRNA表达的影响。lncRNA芯片检测结果与RT-qPCR验证的相符的lncRNA中,发现HCV感染Huh7.5.1细胞后上调和下调最明显的两条lncRNA分别是RP11-288L9.1与ADAM20P1,而沉默RP11-288L9.1能抑制细胞周期蛋白基因cyclin B1/D1/E1的表达水平,并抑制Huh7.5.1细胞增殖。首次发现HCV感染后上调的RP11-288L9.1能促进细胞周期蛋白基因的表达水平和Huh7.5.1细胞增殖,另一种下调的ADAM20P1对细胞增殖影响不大。研究结果为HCV感染及肝癌细胞增殖提供了潜在的诊断标志物和治疗的新型靶点,具有一定的参考价值。

关键词：丙型肝炎病毒(HCV) 长链非编码RNA 细胞增殖细胞周期相关基因

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通过NIR-Ⅱ成像和蛋白质组学分析鉴定潜在的肿瘤生物标志物

通过NIR-Ⅱ成像和蛋白质组学分析鉴定潜在的肿瘤生物标志物

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中国药理学会分析药理学专业委员会成立大会暨第三届全国分析药理学学术大会

作者：周晖杨靖肖玉玲徐平洪学传病毒学国家重点实验室武汉大学药学院武汉430072 病毒学国家重点实验室武汉大学药学院武汉430072 军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室国家蛋白质科学中心(北京)北京蛋白质组研究中心蛋白质药物国家工程研究中心北京军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室国家蛋白质科学中心(北京)北京蛋白质组研究中心蛋白质药物国家工程研究中心北京102206 病毒学国家重点实验室武汉大学药学院武汉430072 西藏大学医学院拉萨850000

目的：建立快速可靠的靶向分子研究体系，鉴定特异的肝病潜在治疗靶点，用于指导临床治疗。方法：建立蛋白质组结合近红外二区成像的差异表达蛋白筛选及体内活性验证的研究体系。结果：微型染色体维持蛋白(MCM)是DNA 复制的重要组成部... 详细信息

目的：建立快速可靠的靶向分子研究体系，鉴定特异的肝病潜在治疗靶点，用于指导临床治疗。方法：建立蛋白质组结合近红外二区成像的差异表达蛋白筛选及体内活性验证的研究体系。结果：微型染色体维持蛋白(MCM)是DNA 复制的重要组成部分，可作为诊断癌症的新型生物标志物。

关键词：近红外二区肝癌 MC

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KNK437抑制乙型肝炎病毒复制及转录

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病毒学报 2017年第1期33卷 24-35页

作者：胡康洪黄亚运穆敬芳程智逵朱祥湖北工业大学生物医药研究院中德生物医学中心武汉430068 中国科学院武汉病毒研究所病毒学国家重点实验室武汉430071

乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)在肝细胞内复制过程中,病毒反转录酶(P蛋白)与前基因组RNA(Pregenomic RNA,pgRNA)上的RNA包装信号ε形成P-ε复合物,启动反转录合成和核衣壳装配。封闭P-ε相互作用是一种极具吸引力的抗HBV策略。已... 详细信息

乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)在肝细胞内复制过程中,病毒反转录酶(P蛋白)与前基因组RNA(Pregenomic RNA,pgRNA)上的RNA包装信号ε形成P-ε复合物,启动反转录合成和核衣壳装配。封闭P-ε相互作用是一种极具吸引力的抗HBV策略。已知P-ε形成RNP复合物正常发挥活性时,需要热休克蛋白(Heat-shock proteins,Hsps)参与。本研究探索Hsps抑制剂KNK437对HBV复制及转录的影响。主要运用了三种工作模型:HepG2.2.15细胞系、瞬时转染1.05×HBV(pCH9-3091)质粒的Huh7细胞系和瞬时转染1.3×HBV(pGEM-1.3×HBV)质粒的Huh7细胞系。采用CCK-8方法检测KNK437的细胞毒性,ELISA测定细胞培养液上清中HBsAg和HBeAg的分泌水平;q-PCR和qRT-PCR分别检测细胞内HBV核衣壳中DNA和细胞内HBV RNA水平;Western blotting检测细胞内衣壳亚单位(core)表达水平;qRT-PCR检测细胞内Hsps本身的转录水平。结果表明:20μM KNK437对细胞没有毒性,且在该浓度下KNK437除HepG2.2.15模型外,均下调HBV HBsAg和HBeAg的胞外分泌,抑制细胞内HBV核衣壳中DNA合成,降低细胞内HBV RNA转录水平,最低可使DNA水平降至1.5%左右,RNA水平降至30%左右,从而表明KNK437抑制HBV复制和转录。在HepG2.2.15中的Western blotting显示,KNK437明显减少细胞内衣壳亚单位(core)表达水平。KNK437也抑制Hsp70,Hsp90b,Hsp40等三种热休克蛋白RNA的转录,从而验证了它的确是一种泛Hsps抑制剂。本研究结果显示KNK437具有潜在抗HBV应用前景。

关键词：乙型肝炎病毒(HBV) 热休克蛋白(Hsps) KNK437 抑制剂

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关于新型冠状病毒命名的思考与建议

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中国科技术语 2020年第2期22卷 5-10页

作者：张冬梅姜世勃石正丽谭文杰卢洪洲曹彬张文宏刘叔文钟劲肖庚富谢幼华邓凯赵金存杨子峰宋敬东陆路黄竞荷应天雷王乔施莽徐建青安静鲁凤民高福舒跃龙郭德银广东药科大学医药商学院广东广州510006 复旦大学上海医学院上海200032 中国科学院武汉病毒所湖北武汉430071 中国疾病预防控制中心北京102206 复旦大学附属公共卫生临床中心上海201058 中日友好医院呼吸与危重症医学科/中国医学科学院呼吸病学研究院/国家呼吸疾病临床研究中心北京100029 复旦大学附属华山医院上海200040 南方医科大学药学院广东广州510515 中国科学院上海巴斯德研究所上海200031 中山大学中山医学院广东广州510080 广州医科大学附属第一医院/广州健康呼吸研究院/呼吸疾病国家重点实验室广东广州510120 中山大学医学院(深圳) 广东深圳510006 首都医科大学基础医学院北京100069 北京大学基础医学院北京100191 中山大学公共卫生学院(深圳) 广东深圳510006

2019年12月,一种由新型冠状病毒(2019-nCoV)引起的病毒性肺炎开始在武汉暴发流行。2020年2月11日,世界卫生组织(WHO)将新型冠状病毒肺炎命名为COVID-19(冠状病毒病2019),国际病毒分类学委员会(ICTV)的冠状病毒研究小组(CSG)建议把新型... 详细信息

2019年12月,一种由新型冠状病毒(2019-nCoV)引起的病毒性肺炎开始在武汉暴发流行。2020年2月11日,世界卫生组织(WHO)将新型冠状病毒肺炎命名为COVID-19(冠状病毒病2019),国际病毒分类学委员会(ICTV)的冠状病毒研究小组(CSG)建议把新型冠状病毒命名为SARS-CoV-2(严重急性呼吸综合征冠状病毒2),既没有与疾病名称一致,也没有完全真实地显示该病毒本身的特征,因而立即引发关注和争议。基于COVID-19的病原学、流行病学和临床特征的基本信息,建议将新型冠状病毒命名为“人类冠状病毒2019”(human coronavirus 2019,简称HCoV-19)。文章回顾并评价了CSG的命名方法,指出他们使用基于基因序列信息进行病毒命名的方法并不合适,建议采用传统的联系疾病的病毒命名方法对具有明显疾病特点的病毒如2019-nCoV进行命名。

关键词：冠状病毒肺炎 2019新型冠状病毒人类冠状病毒2019 冠状病毒病2019

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基于蛋白质组学和近红外Ⅱ区成像的肝病靶向分子研究

基于蛋白质组学和近红外Ⅱ区成像的肝病靶向分子研究

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中国药理学会分析药理学专业委员会成立大会、第三届全国分析药理学学术大会暨贵州省药学会药学青年专业委员会成立大会

作者：洪学传徐平肖玉玲徐福春病毒学国家重点实验室武汉大学药学院军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室国家蛋白质科学中心(北京)北京蛋白质组研究中心蛋白质药物国家工程研究中心西藏大学医学院

目的:建立快速可靠的靶向分子研究体系,鉴定特异的肝病潜在治疗靶点,用于指导临床治疗。方法:建立蛋白质组结合近红外二区成像的差异表达蛋白筛选及体内活性验证的研究体系。结果:通过蛋白质组鉴定到肝癌靶向分子微小染色体维持蛋白MCM... 详细信息

目的:建立快速可靠的靶向分子研究体系,鉴定特异的肝病潜在治疗靶点,用于指导临床治疗。方法:建立蛋白质组结合近红外二区成像的差异表达蛋白筛选及体内活性验证的研究体系。结果:通过蛋白质组鉴定到肝癌靶向分子微小染色体维持蛋白MCM2在肝癌组织中显著上调(>5倍癌/癌旁),并且结合肝癌小鼠模型的近红外二区体内荧光成像发现MCM2

关键词：靶向分子

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通过NIR-Ⅱ成像和蛋白质组学分析鉴定潜在的肿瘤生物标志物

通过NIR-Ⅱ成像和蛋白质组学分析鉴定潜在的肿瘤生物标志物

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中国药理学会分析药理学专业委员会成立大会、第三届全国分析药理学学术大会暨贵州省药学会药学青年专业委员会成立大会

作者：周晖杨靖肖玉玲徐平洪学传病毒学国家重点实验室武汉大学药学院军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室国家蛋白质科学中心(北京)北京蛋白质组研究中心蛋白质药物国家工程研究中心西藏大学医学院

目的:建立快速可靠的靶向分子研究体系,鉴定特异的肝病潜在治疗靶点,用于指导临床治疗。方法:建立蛋白质组结合近红外二区成像的差异表达蛋白筛选及体内活性验证的研究体系。结果:微型染色体维持蛋白(MCM)是DNA复制的重要组成部分,可作... 详细信息

目的:建立快速可靠的靶向分子研究体系,鉴定特异的肝病潜在治疗靶点,用于指导临床治疗。方法:建立蛋白质组结合近红外二区成像的差异表达蛋白筛选及体内活性验证的研究体系。结果:微型染色体维持蛋白(MCM)是DNA复制的重要组成部分,可作为诊断癌症的新型生物标志物。通过蛋白质组鉴定到肝癌靶向分子微小染色体维持蛋白MCM2在肝癌组织中显著上调(>5倍癌/癌旁),MCM2与肝癌患者分期和生存期相关,抑制MCM2能显著影响肝癌细胞系增殖。在细胞水平研究表明,MCM2可能通过影响细胞周期蛋白CDKs 2/7,阻滞S期发展进而影响肝癌细胞增殖,揭示了MCM2与CDK2/7的复杂调控关系。我们开发了一种新型NIR-Ⅱ(第二近红外窗口,1000-1700 nn)小有机荧光染料(CH1055),这比传统的近红一区外成像更有优势。将CH1055与MCM2抗体结合后得到新型探针CH1055-MCM2,发现其在小鼠体内对肝癌具有很强的靶向性。讨论:MCM2是潜在的肝癌靶点,这种新型NIR-Ⅱ探针具有很大的潜力,可用于肝细胞癌的早期诊断和精确的图像引导肿瘤切除手术。

关键词：近红外二区肝癌 MC

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