检索结果-内蒙古大学图书馆

数理医药学杂志 2005年第5期18卷 429-432页

作者：伍景平张蔚英高平陈冬峨董长垣武汉大学医学院病毒学国家重点实验室武汉大学医学院病毒研究所分子病毒与癌研究室武汉430071

为研究蓝舌病毒作为异源溶癌病毒的安全性,选择生理状态良好的小鼠作为受试对象,研究BTV-HbC3、BTV-10接种小鼠的半数致死量,并检测小鼠体内产生抗体的效价及各组织中病毒的含量。实验结果表明,BTV-HbC3、BTV-10不能在小鼠正常组织中增... 详细信息

为研究蓝舌病毒作为异源溶癌病毒的安全性,选择生理状态良好的小鼠作为受试对象,研究BTV-HbC3、BTV-10接种小鼠的半数致死量,并检测小鼠体内产生抗体的效价及各组织中病毒的含量。实验结果表明,BTV-HbC3、BTV-10不能在小鼠正常组织中增殖,并且小鼠体内能产生抗BTV的特异性抗体,抗体在注射病毒后的第17天左右效价最高,两型病毒之间无显著性差异。

关键词：溶癌病毒 BTV-HbC3 BTV-10 毒性试验

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新的核苷类化合物β-L-D4A的化学合成及体外抗HBV作用

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药学学报 2005年第9期40卷 825-829页

作者：吴金明林菊生谢娜邱国福胡先明温州医学院附属第一医院消化内科浙江温州325000 华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所湖北武汉430030 武汉大学药学院病毒学国家重点实验室湖北武汉430072

目的以D型谷氨酸为原料,通过一系列化学转化,合成了新的核苷类化合物βLD4A,并初步探索其体外抗HBV作用。方法合成βLD4A,用红外光谱、核磁共振氢谱和质谱确证目标化合物的结构,以2.2.15细胞(HepG2细胞进行HBV基因组转染后所得)培养为基... 详细信息

目的以D型谷氨酸为原料,通过一系列化学转化,合成了新的核苷类化合物βLD4A,并初步探索其体外抗HBV作用。方法合成βLD4A,用红外光谱、核磁共振氢谱和质谱确证目标化合物的结构,以2.2.15细胞(HepG2细胞进行HBV基因组转染后所得)培养为基础,Southern印迹法检测不同浓度化合物体外抑制HNVDNA复制作用,并求出50%抑制的药物浓度,即EC50。以四噻唑蓝(MTT)比色分析法检测不同浓度药物的细胞毒性,求出IC50。结果化合物βLD4A经红外光谱、核磁共振氢谱和质谱确证;2.2.15细胞培养上清液病毒DNA的Southern印迹、自显影结果显示病毒的抑制呈明显的浓度依赖性,计算出EC50为0.2μmol·L-1,胞内DNA的Southern印迹、自显影显示类似的结果;细胞毒性实验显示IC50为200μmol·L-1。结论体外实验显示βLD4A具有明显的抑制病毒DNA复制作用,且无明显的细胞毒性,TI值为1000,高于临床用Lamivudine(750),有望开发为临床抗HBV用药。

关键词：核苷类化合物 β-L-D4A 化学合成乙肝病毒

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肝癌患者肝组织中2.2kb乙型肝炎病毒基因组剪接变异体结构及功能的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2002年第1期16卷 11-15页

作者：林旭闻玉梅万大方钱耕荪顾健人复旦大学医学院卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032 上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室

目的　研究肝癌患者肝组织中 2 2kb乙型肝炎病毒基因组剪接变异体的结构和功能。方法　PCR扩增 12对肝癌组织及癌旁肝组织中的乙型肝炎病毒 (HepatitisBvirus,HBV)全基因组。克隆 3 2kb全长HBV基因组及 2 2kb剪接变异体基因组 ,测序... 详细信息

目的　研究肝癌患者肝组织中 2 2kb乙型肝炎病毒基因组剪接变异体的结构和功能。方法　PCR扩增 12对肝癌组织及癌旁肝组织中的乙型肝炎病毒 (HepatitisBvirus,HBV)全基因组。克隆 3 2kb全长HBV基因组及 2 2kb剪接变异体基因组 ,测序并比较它们基因结构的差异。将 2 2kbHBV剪接体基因组与全长基因组共同转染HepG2 细胞 ,分别以HBV全长基因组特异性引物及剪接变异体特异性引物对转染后细胞内HBV核心颗粒进行PCR检测 ,以判定 2 2kbHBV剪接变异体对全长HBV复制功能的影响。结果　 2 2kbHBV基因组剪接变异体见于所有的癌组织及癌旁组织。相同模板量获得的扩增产物进行图象扫描分析 ,发现癌组织中 2 2kbHBV基因组剪接变异体与全长HBV的比值高于癌旁组织。序列分析表明 ,2 2kbHBV剪接变异体保留 5′端包装信号以及与完整的X基因、C及preC基因。细胞转染结果显示 ,加入 2 2kb剪接变异体共转染 ,细胞中 3 2kb全长HBV基因组的复制量可增强 3～ 7倍。结论　肝组织内普遍存在 2 2kbHBV基因组剪接变异体 ,该变异体在癌组织中的相对量高于癌旁组织。 2 2kbHBV基因组剪接变异体可使全长HBV基因组复制增强 ,提示可能与肝癌的发生。

关键词：乙型肝炎病毒 RNA剪接聚合酶链反应肝癌

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痢疾杆菌全基因组序列及基因组岛的分析

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中国工程科学 2002年第10期4卷 40-47页

作者：刘红杨帆张笑冰张继瑜杨国威董杰薛颖侯云德袁正宏闻玉梅徐建国陈洪松马大龙王宇杨剑沈岩强伯勤吴洪涛贺秉坤吕渭川金奇病毒基因工程国家重点实验室北京100052 毒基因工程国家重点实验室北京100052 复旦大学分子病毒学实验室上海200032 中国预防医学科学院流行病学和微生物学研究所北京102206 北京大学医学部肝病研究所北京100083 人类基因组北方研究中心北京100176 华北制药集团石家庄050000

福氏 2a志贺菌 (Shigellaflexneriserotype 2a)是引起人类细菌性痢疾的主要病原体。本文在国际上首次完成了福氏 2a志贺菌 30 1株 (Sf30 1) (我国细菌性痢疾的优势流行株 )的全基因组核苷酸序列测定和初步分析。该基因组包括一条由 4 6 ... 详细信息

福氏 2a志贺菌 (Shigellaflexneriserotype 2a)是引起人类细菌性痢疾的主要病原体。本文在国际上首次完成了福氏 2a志贺菌 30 1株 (Sf30 1) (我国细菌性痢疾的优势流行株 )的全基因组核苷酸序列测定和初步分析。该基因组包括一条由 4 6 0 72 0 3个碱基对 (bp)组成的环状染色体和一个含 2 2 16 18bp的侵袭性大质粒pCP30 1以及另外两个小质粒。通过将Sf30 1的染色体序列与其亲源关系相近的非致病性大肠杆菌K - 12菌株MG16 5 5进行比较基因组学研究 ,发现Sf30 1的染色体上有 5 72Kb特异性序列 ,并形成了 32 0个长度大于 5 0bp的“痢疾岛” (Shigella island ,SIs) ,其中大于 1Kb的共计 131个。这些岛共包含 5 19个开放读码框架 (OpenReadingFrames,ORFs) ,多数SIs的一侧或两侧均伴有插入序列元件、转座子或者tRNAs。G +C含量及密码子使用频率等分析显示出部分SIs的外源性。通过结构及ORF编码产物功能的分析 ,鉴别出 9个可能与痢疾杆菌致病性有关的“毒力岛” ,其中

关键词：福氏2a志贺菌301株全基因组序列测定痢疾岛毒力岛痢疾杆菌痢疾传染病

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表达脑啡肽基因的单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子载体的构建、包装和扩增

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中华麻醉学杂志 2001年第12期21卷 734-736页

作者：王锷郭曲练曹晖吴小兵毕好生白念岳程智刚华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科武汉市现在430030 中南大学湘雅医院麻醉科中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室

目的对单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子质粒装载脑啡肽基因，并进行包装和扩增后，评价其在疼痛的转基因治疗上的作用。方法将ｐＣＭＶＨＰＰＥ质粒中的人前脑啡肽原基因插入单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子质粒ｐＨＳＶＩＲＥＳｌａｃＺ，再用单纯疱... 详细信息

目的对单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子质粒装载脑啡肽基因，并进行包装和扩增后，评价其在疼痛的转基因治疗上的作用。方法将ｐＣＭＶＨＰＰＥ质粒中的人前脑啡肽原基因插入单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子质粒ｐＨＳＶＩＲＥＳｌａｃＺ，再用单纯疱疹病毒温敏株辅助在ＢＨＫ－２１细胞中包装、扩增，通过检测ｌａｃＺ的表达反映扩增子病毒滴度。结果酶切鉴定证实重组子构建成功，重组扩增子质粒的包装、扩增由ＢＨＫ－２１细胞的形态变化和Ｘ－ｇａｌ原位检测载体ｌａｃＺ的表达证实，扩增子假型病毒滴度达１×１０６ＴＵ／ｍｌ。结论本研究构建、包装、扩增的携带外源脑啡肽基因的假型病毒有较高感染性，这种扩增子病毒可作为疼痛基因治疗的实验研究的有力工具。

关键词：疱疹病毒Ⅰ型脑啡肽类基因治疗扩增子病毒疼痛镇痛阿片肽

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应用固定化金属亲和层析纯化His6融合甲状旁腺激素相关蛋白

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中国生物制品学杂志 1999年第2期12卷 94-97页

作者：钭理强周小明刘红兵安乃莉姚立红郭应禄张智清北京医科大学第一医院泌尿外科研究所北京100034 同济医科大学附属同济心血管内科武汉430030 中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室北京100052

应用原核细胞高效表达载体在大肠杆菌表达了N端带 6个组氨酸的重组人PTHrP。利用其对金属鳌合层析介质的亲合性 ,采用含盐咪唑梯度洗脱 ,一步纯化即可得到纯度大于 90 %且具有生物学活性的重组PTHrP ,并进一步制备了抗PTHrP单克隆抗体... 详细信息

应用原核细胞高效表达载体在大肠杆菌表达了N端带 6个组氨酸的重组人PTHrP。利用其对金属鳌合层析介质的亲合性 ,采用含盐咪唑梯度洗脱 ,一步纯化即可得到纯度大于 90 %且具有生物学活性的重组PTHrP ,并进一步制备了抗PTHrP单克隆抗体。应用His6纯化标签的固定化金属亲和层析 (IMAC) ,极大地方便了目的蛋白的纯化 ,为进一步研究PTHrP的生物学特性及其在临床诊断治疗中的应用奠定了基础。

关键词：亲和层析 PTHrP IMAC 纯化

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Epstein-Barr病毒载体介导的白细胞介素12在肝癌细胞中的靶向表达

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中华实验和临床病毒学杂志 1998年第4期12卷 306-309页

作者：王自力梁国栋付士红施侣元王芝山侯云德武汉同济医科大学中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室

目的研究白细胞介素－１２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１２，ＩＬ－１２）在肝癌细胞靶向性表达，探索肝癌基因治疗新方法。方法将白介素－１２分别克隆到带有人甲胎蛋白启动子和增强子的Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ（ＥＢ）病毒载体中，... 详细信息

目的研究白细胞介素－１２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１２，ＩＬ－１２）在肝癌细胞靶向性表达，探索肝癌基因治疗新方法。方法将白介素－１２分别克隆到带有人甲胎蛋白启动子和增强子的Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ（ＥＢ）病毒载体中，得到重组表达载体ｐＥＢＡＦ／Ｐ３５和ｐＥＢＡＦ／Ｐ４０，分别在４种细胞系中作共转染，用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测各细胞系中ＩＬ－１２的表达情况。结果用ｐＥＢＡＦ／Ｐ３５和ｐＥＢＡＦ／Ｐ４０共转染４种细胞后ＩＬ－１２基因只在产生甲胎蛋白的肝癌细胞（ＨｅｐＧ２）中表达，活性检测证明，表达的ＩＬ－１２有诱使ＩＦＮ－γ产生的生物学活性。结论本研究在肝癌细胞中靶向性和组织特异性的表达了有活性的ＩＬ－１２，为既能杀死肝癌细胞，又不影响正常肝细胞功能的新型基因治疗方案做了有益的探索。

关键词： IL-12 基因治疗基因表达肝癌

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脑啡肽-αⅠ干扰素的镇痛作用和抗肿瘤作用

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生物化学与生物物理进展 1997年第6期24卷 529-533页

作者：朱千政王晶张笑冰黎孟枫张汝丽陈望秋侯云德军事医学科学院微生物流行病研究所北京100850 同济医科大学微生物教研室武汉430030 预防医学科学院病毒学研究所病毒和基因工程国家重点实验室北京100052 北京医科大学神经科学研究中心北京100038

从大肠杆菌工程菌中纯化脑啡肽 αⅠ干扰素融合蛋白 ,测定其在小鼠脑内的镇痛作用 ,阿片受体结合功能及对肿瘤细胞生长抑制和体内抗肿瘤作用 .结果显示 ,与αⅠ干扰素母体相比 ,融合蛋白具有较强的镇痛作用 ,镇痛作用可为腹腔注射阿片... 详细信息

从大肠杆菌工程菌中纯化脑啡肽 αⅠ干扰素融合蛋白 ,测定其在小鼠脑内的镇痛作用 ,阿片受体结合功能及对肿瘤细胞生长抑制和体内抗肿瘤作用 .结果显示 ,与αⅠ干扰素母体相比 ,融合蛋白具有较强的镇痛作用 ,镇痛作用可为腹腔注射阿片受体拮抗剂Naloxone和Naltrindole反转 ,融合蛋白可竞争3H标记σ型阿片受体配基DPDPE与膜受体结合 .融合蛋白的肿瘤细胞生长抑制和体内抗肿瘤作用也高于母体分子 ,说明脑啡肽和αⅠ干扰素的融合蛋白实现并增强了脑啡肽

关键词：干扰素镇痛作用抗肿瘤作用脑啡肽药理学

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一种改进的杂交瘤细胞电融合方法

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生物物理学报 1994年第1期10卷 179-180页

作者：邹翔刘琴芝裴红英郁文芳安节陈伯权陈刚赵南明南京大学医学院中国预防医学科学院病毒学研究所清华大学生物科学与技术系生物膜与膜生物工程国家重点实验室

一种改进的杂交瘤细胞电融合方法邹翔（南京大学医学院南京２１０００８）刘琴芝，裴红英，郁文芳，安节，陈伯权（中国预防医学科学院病毒学研究所北京１０００５２）陈刚，赵南明（清华大学生物科学与技术系生物膜与膜生物工程国家重... 详细信息

一种改进的杂交瘤细胞电融合方法邹翔（南京大学医学院南京２１０００８）刘琴芝，裴红英，郁文芳，安节，陈伯权（中国预防医学科学院病毒学研究所北京１０００５２）陈刚，赵南明（清华大学生物科学与技术系生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京１０００８４）我们对国...

关键词：细胞电融合杂交瘤

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