检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2003年第1期23卷 38-41页

作者：丁晓华杨占秋肖红陈晓湘徐芳玲侯炜文利武汉大学医学院病毒学研究所武昌430071

目的　用RT PCR方法扩增肾综合征出血热病人血样品中的汉滩病毒RNA ,对扩增产物进行测序并分析汉滩病毒基因组的变异。方法　用引物PⅠ PⅡ对 2 2例血样品中的汉滩病毒RNA进行第一次PCR扩增 ,PⅠ PⅡ扩增样品再用PⅠ 1 PⅡ 2引物进行... 详细信息

目的　用RT PCR方法扩增肾综合征出血热病人血样品中的汉滩病毒RNA ,对扩增产物进行测序并分析汉滩病毒基因组的变异。方法　用引物PⅠ PⅡ对 2 2例血样品中的汉滩病毒RNA进行第一次PCR扩增 ,PⅠ PⅡ扩增样品再用PⅠ 1 PⅡ 2引物进行槽式RT PCR扩增 ,将扩增效果良好的PCR产物进行测序 ,对测序结果用生物化学软件进行同源性比较和进化树分析。其中HV2 2 6样品用引物P1 P2进行RT PCR扩增。结果　 2 2例肾综合征病人血样品用PⅠ PⅡ和P1 P2引物扩增有 19例阳性 ,其中编号W6 13、W1141样品用PⅠ 1 PⅡ 2进行槽式扩增后对其扩增产物直接进行测序。HV2 2 6号样品用引物P1 P2进行扩增后 ,其扩增产物也直接进行测序。对该 3株序列测定结果进行比较分析发现 ,编号W6 13、W1141样品核苷酸序列与HV114株的同源性为 84% ,而与HTN76 118株的同源性为 99%。HV2 2 6号样品与HV114有 95 %的同源性 ,而与HTN76 118有 82 %的同源性。进化树分析表明 ,W6 13,W1141与HTN76 118株位于同一分枝 ,而HV2 2 6与HV114、A9株处于同一分枝。结论　湖北地区汉滩病毒至少存在 2个亚型 ,其中W6 13、W1141与HTN76 118的核苷酸序列高度同源 ,属于同一亚型。而HV2 2 6与HV114属于另一亚型。

关键词： RT-PCR 汉滩病毒核苷酸肾综合征出血热序列分析发生树

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

汉滩病毒M片段的核苷酸序列变异和系统发生树分析

引用

病毒学报 2003年第2期19卷 169-172页

作者：丁晓华杨占秋肖红陈晓湘徐芳玲侯炜文利武汉大学医学院病毒学研究所武汉430071

The total RNA was extracted from two clinical blood samples of HFRS patients and the RNA was amplified by RT-PCRThe amplified DNA fragment of sample 613 involved nucleotides 1,471-1,873,and the sample 226 involved 540-1,244 nucleotides of M fragment of Hantaan virusThen the amplified PCR products were sequenced directlyThe sequencing results demonstrated that there was 84% identity between sample 613 and HV114 virus strain,but was 99% between sample 613 and HTN76-118 strainHowever,in sample 226,there was 95% sequence identity with HV114,82% with HTN76-118The results of phylogenetic tree analysis showed that HV613 was located in the same linage with HTN76-118,the HV226 was in the same linage with HV114 and A9

关键词：汉滩病毒 M片段核苷酸变异系统发生树序列分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

空心莲子草类盐抗汉坦病毒作用研究

引用

中国药学杂志 2006年第22期41卷 1713-1715页

作者：侯炜杨占秋毛琳李晶晶肖红程丽文利周俊武汉大学医学院病毒学研究所病毒学国家重点实验室武汉430071

目的明确空心莲子草类盐抗汉坦病毒（HV）的作用机制。方法采用噻唑兰（MTT）比色法检测细胞活性、免疫荧光法（IFA）和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测病毒滴度和病毒核酸，以确定空心莲子草类盐细胞内抗HV作用。结果空心莲子草... 详细信息

目的明确空心莲子草类盐抗汉坦病毒（HV）的作用机制。方法采用噻唑兰（MTT）比色法检测细胞活性、免疫荧光法（IFA）和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测病毒滴度和病毒核酸，以确定空心莲子草类盐细胞内抗HV作用。结果空心莲子草类盐对HV无直接灭活作用，也不能阻止HV的吸附，这表现在各药物浓度组病毒滴度均在5．7以上；空心莲子草类盐有抑制HV生物合成作用，在质量浓度为40-320mg·L^-1内，随着药物质量浓度的增加，病毒滴度、细胞培养液中病毒核酸的阳性稀释度逐渐降低，抗病毒指数逐渐增加，并表现出量效关系，药物治疗组的病毒滴度明显低于病毒对照组（P〈0.05）。结论空心莲子草类盐在体外通过抑制病毒生物合成而发挥抗HV作用。

关键词：汉坦病毒空心莲子草体外抗病毒实验

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

98例宫颈癌人乳头状瘤病毒16型E6基因突变及多态性分析

引用

中华微生物学和免疫学杂志 2008年第11期28卷 989-992页

作者：丁晓华蔡红斌张帆梁雨杨占秋武汉大学医学院病毒学研究所 430071 武汉大学中南医院妇瘤科

目的研究湖北地区宫颈癌患者人乳头状瘤病毒16型（HPV16）E6基因点突变分布及频率，与国内外其他研究人员发现的踊突变进行对比，分析历突变在宫颈癌发生中的意义。方法从宫颈癌患者手术切除标本中提取组织DNA，用HPV16E6特异性引物进行... 详细信息

目的研究湖北地区宫颈癌患者人乳头状瘤病毒16型（HPV16）E6基因点突变分布及频率，与国内外其他研究人员发现的踊突变进行对比，分析历突变在宫颈癌发生中的意义。方法从宫颈癌患者手术切除标本中提取组织DNA，用HPV16E6特异性引物进行PCR扩增，对扩增的历基因片段进行测序分析。结果在35例宫颈癌组织DNA中有18例发生历基因178位核苷酸的突变，变突频率为51．43％，相应核苷酸改变为Asp—Glu，442位核苷酸有4例发生核苷酸序列的改变，突变频率为11．43％，另有10例发生1～2个核苷酸序列的改变。结论湖北地区98例宫颈癌患者人乳头状瘤病毒历基因存在高频率的178和442位核苷酸突变，一些为新发现的核苷酸序列的突变，这些突变在宫颈癌发生中的作用有待于进一步研究。

关键词：宫颈癌人乳头状瘤病毒16型序列分析突变

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

湖北省武汉地区啮齿动物汉坦病毒S基因的特征分析

引用

中华流行病学杂志 2012年第8期33卷 828-831页

作者：刘东瀛刘婧李金林陈文罗凡李晴杨占秋武汉大学医学病毒学研究所病毒学国家重点实验室430071 武汉大学医学病毒学研究所医学微生物学教研室430071 南通大学医学院厦门大学医学院基础医学部

目的了解湖北省武汉地区啮齿动物自然感染汉坦病毒（HV）情况以及流行的基因型和亚型。方法2000--2003年、2009--2011年秋冬季在武汉地区新洲、江夏区野外及居民区采用夹夜法捕鼠。对捕获的动物进行分类鉴定并取肺脏用间接免疫荧光法检... 详细信息

目的了解湖北省武汉地区啮齿动物自然感染汉坦病毒（HV）情况以及流行的基因型和亚型。方法2000--2003年、2009--2011年秋冬季在武汉地区新洲、江夏区野外及居民区采用夹夜法捕鼠。对捕获的动物进行分类鉴定并取肺脏用间接免疫荧光法检测病毒抗原。抗原阳性的样本，采用RT-PCR方法扩增部分S片段核苷酸序列，构建系统发生树并进行基因分型。结果2000--2003年捕获啮齿类动物437只，HV抗原阳性鼠肺标本24份，病毒携带率为5．49％。2009--2011年捕获啮齿类动物173只，HV抗原阳性鼠肺标本7份，病毒携带率为4．05％。褐家鼠为当地的优势鼠种。22份标本成功地用汉滩病毒（HTNV）、汉城病毒（SEOV）特异引物扩增部分S基因片段并测序。17只（13只褐家鼠，4只黑线姬鼠）鼠肺标本中扩增出SEOV部分S基因片段（nt588-1147），分别属于第3亚型和2个新的基因亚型。5只黑线姬鼠的鼠肺标本中扩增出HTNV部分S基因片段（nt615～1141），分别属于第7亚型和1个新的亚型。结论武汉地区流行的HV为SEOV和HTNV，并发现新的基因亚型，SEOV可能“溢出”感染黑线姬鼠。

关键词：汉坦病毒啮齿动物基因系统发生分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

siRNA对HeLa细胞膀胱癌相关蛋白基因表达的抑制作用

引用

武汉大学学报（医学版） 2011年第6期32卷 709-712,732页

作者：左泽华张力伍欣星赵旻武汉大学医学院病毒学研究所湖北武汉430071

目的:构建抑癌基因膀胱癌相关蛋白(BLCAP)基因高效真核siRNA载体,转染人宫颈癌细胞系HeLa,构建BLCAP基因沉默细胞系,以观察靶向siRNA对BLCAP基因的表达抑制作用。方法:设计并重组靶向siRNA各3条,分别命名为pRNA-U6.1-B1,B2,B3-siRNA,重... 详细信息

目的:构建抑癌基因膀胱癌相关蛋白(BLCAP)基因高效真核siRNA载体,转染人宫颈癌细胞系HeLa,构建BLCAP基因沉默细胞系,以观察靶向siRNA对BLCAP基因的表达抑制作用。方法:设计并重组靶向siRNA各3条,分别命名为pRNA-U6.1-B1,B2,B3-siRNA,重组体经脂质体转染细胞,通过荧光显微镜观察细胞内质粒表达情况,并采用RT-PCR和Western blot方法检测转染前后BLCAP基因mRNA及蛋白的表达,验证RNAi作用的特异性及时效性。结果:同对照组相比,各BLCAP siRNA均可引起靶基因表达水平的显著性下降(P<0.05),尤以pRNA-U6.1-B2-siRNA的作用效果最强(P<0.01);而空脂质体组及阴性对照siRNA组的靶基因表达水平则无明显变化。将pRNA-U6.1-B2-siRNA转染细胞后12,24,48h均可观察到靶基因表达的显著性降低(P<0.05),其中在24h后达到最强抑制效果。结论:不同序列的siRNA,对靶基因的干扰效率不同;BLCAP基因siR-NA能够特异、高效性的抑制靶基因的表达;抑制作用在24h达到高峰,并可维持到转染后48h。试验结果为进一步研究采用RNA干扰技术进行宫颈癌的生物治疗奠定了基础。

关键词：宫颈癌 siRNA BLCAP基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

蓝舌病毒HbC株靶向性杀死小鼠荷MA782肿瘤的研究

引用

武汉大学学报（医学版） 2004年第4期25卷 372-374,379,T003页

作者：罗翔董长垣郭淑芳邓靖卢莉莉黎莉武汉大学医学院病毒学研究所武汉430071

目的 :将蓝舌病毒湖北株 (BTV HbC)做为一种具有潜在性治疗效能的生物制剂来治疗MA782肿瘤。方法 :首先用BTV HbC病毒感染体外培养的MA782细胞。同时将MA782细胞接种于小鼠皮下 ,复制出了小鼠荷MA782肿瘤的动物模型 ,然后将BTV HbC病毒... 详细信息

目的 :将蓝舌病毒湖北株 (BTV HbC)做为一种具有潜在性治疗效能的生物制剂来治疗MA782肿瘤。方法 :首先用BTV HbC病毒感染体外培养的MA782细胞。同时将MA782细胞接种于小鼠皮下 ,复制出了小鼠荷MA782肿瘤的动物模型 ,然后将BTV HbC病毒直接进行瘤体注射。结果 :小鼠荷MA782肿瘤的明显退缩 ,和体外处理的结果是一致的。结论 :证实了BTV HbC病毒是一种有效的治疗恶性肿瘤的新型生物制剂。

关键词：溶瘤病毒蓝舌病毒 MA782恶性肿瘤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

MTT分析法、空斑减数法及CPE观察法评估药物体外抗病毒效果的比较与分析

引用

武汉大学学报（医学版） 2005年第2期26卷 199-202页

作者：刘媛媛杨占秋何静石丽桥肖红武汉大学医学院病毒学研究所武汉430071

目的:比较MTT分析法、空斑减数试验及细胞病变效应(CPE)观察3种方法在评估药物体外抗病毒效果分析中的优劣,为选择适宜的药物体外抗病毒效果的检测方法提供实验依据。方法:分别采用 CPE法、MTT分析法和空斑减数试验法评价大黄素于体外... 详细信息

目的:比较MTT分析法、空斑减数试验及细胞病变效应(CPE)观察3种方法在评估药物体外抗病毒效果分析中的优劣,为选择适宜的药物体外抗病毒效果的检测方法提供实验依据。方法:分别采用 CPE法、MTT分析法和空斑减数试验法评价大黄素于体外抗疱疹病毒 1 型、疱疹病毒 2 型和柯萨奇病毒增殖的效果,比较 3 种检测方法的结果,并分析该方法的实用性与利弊。结果:在抗疱疹病毒增殖的检测中,MTT法与空斑减数法所测结果具有显著性差异,空斑减数法比MTT法更准确,但对抗柯萨奇病毒增殖的检测,MTT法与空斑减数法无明显差异。结论:MTT法与 CPE法结合,可广泛用于对抗病毒药物的筛选,但对于疱疹病毒类非杀细胞病毒,使用空斑减数法较好。

关键词：细胞病变效应 MTT分析法空斑减数试验抗病毒作用大黄素

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

盐酸阿比朵尔体外抗汉坦病毒药效学研究

引用

中国药学杂志 2009年第3期44卷 183-186页

作者：邓海英杨占秋石丽桥罗凡刘颖娟武汉科技大学医学院武汉430065 病毒学国家重点实验室武汉大学医学病毒学研究所武汉430071

目的探讨盐酸阿比朵尔体外抗汉坦病毒效果。方法采用流式细胞分析法、间接免疫荧光检测病毒抗原评价盐酸阿比朵尔对汉坦病毒感染的作用方式;流式细胞检测法、RT-PCR半定量法对5mg·L-1盐酸阿比朵尔在感染前24h(-24h)、12h(-12h)及... 详细信息

目的探讨盐酸阿比朵尔体外抗汉坦病毒效果。方法采用流式细胞分析法、间接免疫荧光检测病毒抗原评价盐酸阿比朵尔对汉坦病毒感染的作用方式;流式细胞检测法、RT-PCR半定量法对5mg·L-1盐酸阿比朵尔在感染前24h(-24h)、12h(-12h)及感染后0h、2h4个时间点作用后病毒抗原与核酸进行检测。结果感染前给药浓度组及感染后给药浓度组,病毒感染细胞阳性率、荧光强度随浓度增加下降,具有剂量效应,与病毒对照组比较,有统计学意义(P<0.05);5mg·L-1盐酸阿比朵尔在-24h,-12h,0h,2h4个时间点作用后,可明显降低病毒感染阳性率,具有时间效应;-24h、-12h作用后,病毒mRNA表达下降,与病毒对照组比较,有统计学意义(P<0.05)。结论盐酸阿比朵尔体外具有抗汉坦病毒效应,在病毒进入细胞前及细胞后均有抑制作用,不同时间用药以病毒进入细胞前作用更明显,其抗病毒机制有待进一步研究。

关键词：盐酸阿比朵尔汉坦病毒抗病毒作用

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

汉坦病毒受体

引用

病毒学报 2004年第3期20卷 288-290页

作者：徐芳玲杨占秋武汉大学医学院病毒学研究所湖北武汉430071

汉坦病毒感染可引起两种严重威胁人类生命的传染性疾病:肾综合征出血热(HFRS)和肺综合征出血热(HPS)[1,2],这两种疾病都与急性血小板减少和血管渗透性变化有关[3].因此,弄清汉坦病毒与宿主细胞的相互作用及其机制,对控制汉坦病毒性疾病... 详细信息

汉坦病毒感染可引起两种严重威胁人类生命的传染性疾病:肾综合征出血热(HFRS)和肺综合征出血热(HPS)[1,2],这两种疾病都与急性血小板减少和血管渗透性变化有关[3].因此,弄清汉坦病毒与宿主细胞的相互作用及其机制,对控制汉坦病毒性疾病显得尤为重要.整合素对维持血管壁的渗透性和完整性具有重要作用.一种整合素可以在不同的细胞上表达,同一种细胞也可以表达多种不同的整合素,并且不同类型整合素的作用也各有不同.在汉坦病毒与内皮细胞相互作用研究中,细胞整合素受体起到了关键性的作用,致病性汉坦病毒通过细胞膜上β3整合素感染细胞,而非致病性汉坦病毒通过细胞膜上β1整合素感染细胞[4,5].这些都为汉坦病毒的受体和发病机制研究奠定了一定的基础.本文拟对该研究近况作一综述,为汉坦病毒致病机制的深入研究提供参考.

关键词：汉坦病毒受体肾综合征出血热肺综合征出血热感染人类

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：