检索结果-内蒙古大学图书馆

中国人兽共患病学报 2016年第12期32卷 1091-1095页

作者：章莹宗红英何立蔡国斌武汉大学基础医学院医学遗传学系武汉430071 武汉大学基础医学院人体寄生虫学教研室武汉430071

目的对刚地弓形虫1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构化酶(TgDXR)基因进行克隆、表达、纯化和生物学特性分析。方法收集、纯化RH株弓形虫速殖子,提取cDNA和基因组DNA;PCR扩增TgDXR的基因片段;构建成熟TgDXR/pET-24b重组原核表达载体;经双... 详细信息

目的对刚地弓形虫1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构化酶(TgDXR)基因进行克隆、表达、纯化和生物学特性分析。方法收集、纯化RH株弓形虫速殖子,提取cDNA和基因组DNA;PCR扩增TgDXR的基因片段;构建成熟TgDXR/pET-24b重组原核表达载体;经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆;在大肠杆菌BL21中用IPTG诱导表达。亲和层析纯化重组TgDXR蛋白,并对该蛋白的生物学特性和酶的动力学活性进行分析。结果从弓形虫RH株的cDNA和基因组DNA中分别扩增出长度为1 542bp和5 464bp的TgDXR片段,成功构建重组质粒;SDS-PAGE结果表明,目的基因在大肠杆菌中高效表达。重组蛋白的相对分子量约50kDa。酶活性实验显示,Mg2+、Mn2+是最佳金属螯合离子,反应最佳pH值为7.5,该酶活性抑制剂膦胺霉素(Fosmidomycin)对该酶蛋白的IC50为0.52μmol/L。结论 RH株刚地弓形虫TgDXR可在原核表达系统中高效表达,该重组蛋白具有生物学活性,并有望作为弓形虫特异性药物靶标。

关键词：刚地弓形虫 DXR 克隆表达膦胺霉素

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丙烯硫脲对日本血吸虫感染小鼠肝脏病变的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2001年第6期19卷 351-353页

作者：何立蒋明森蔡国斌杨孟祥易新元曾宪芳武汉大学医学院寄生虫学教研室中南大学湘雅医学院寄生虫学教研室长沙410078

目的　观察丙烯硫脲对日本血吸虫感染小鼠肝脏病变的影响。方法　小鼠感染日本血吸虫尾蚴 2 2d后 ,隔日一次按 30 0mg/kg腹腔注射酚酶抑制剂丙烯硫脲 ,至感染后 4 2d剖杀动物 ,观察日本血吸虫感染小鼠肝脏的病理变化。结果　与感染对照... 详细信息

目的　观察丙烯硫脲对日本血吸虫感染小鼠肝脏病变的影响。方法　小鼠感染日本血吸虫尾蚴 2 2d后 ,隔日一次按 30 0mg/kg腹腔注射酚酶抑制剂丙烯硫脲 ,至感染后 4 2d剖杀动物 ,观察日本血吸虫感染小鼠肝脏的病理变化。结果　与感染对照组相比 ,实验组小鼠肝脏表现为散在分布的炎性细胞浸润灶 ,中心未见虫卵 ,仅见一些颗粒状物质。其平均直径和面积均较感染对照组的典型虫卵肉芽肿显著减小 (P <0 .0 1)。结论　感染小鼠腹腔注射丙烯硫脲后肝脏内未见虫卵肉芽肿的形成。

关键词：日本血吸虫丙烯硫脲肝脏病理变化感染

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rVvhA诱导小鼠单核巨噬细胞凋亡的作用及其机制

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第3期30卷 239-244页

作者：王波金疆钟毓红赵志超杨军楼永良严杰温州医学院检验医学院浙江省医学遗传学重点实验室325035 浙江大学医学院病原生物学教研室

目的研究重组创伤弧菌溶细胞素（rVvhA）诱导小鼠单核巨噬细胞（J774A．1）凋亡的作用及机制。方法MTT法、电子透射电镜、流式细胞仪结合AnnexinV-PI标记法、线粒体膜电位和caspase活性检测等方法测定rVvhA诱导J774A．1凋亡的作用。结果... 详细信息

目的研究重组创伤弧菌溶细胞素（rVvhA）诱导小鼠单核巨噬细胞（J774A．1）凋亡的作用及机制。方法MTT法、电子透射电镜、流式细胞仪结合AnnexinV-PI标记法、线粒体膜电位和caspase活性检测等方法测定rVvhA诱导J774A．1凋亡的作用。结果MTT结果显示rVvhA能够抑制J774A．1生长。2．0溶血单位（HU）／ml和3．0HU／ml的rVvhA作用J774A．18h后，透射电镜观察细胞和线粒体形态发生凋亡改变；流式细胞仪检测凋亡率分别为（7．80±0．62）％、（12．33±0．12）％，均高于正常组（3．07±0．67）％；线粒体膜电位也下降，流式细胞仪结果显示绿色荧光率分别是9．8％、39．2％。其中3．0HU／mlrVvhA作用组，caspase-3、9活性增加，并且具有时间依赖性，而caspase-8活性没有明显改变。3．0HU／mlrVvhA加caspase-3抑制剂（Ac—DEVD-FMK）或caspase-9抑制剂（Ac—LEHD-FMK）的凋亡率与3．0HU／mlrVvhA作用组相比都降低，分别为（6．23±3．95）％、（9．60±3．14）％；同时caspase-3、9活性也下降。结论rVvhA具有诱导J774A．1凋亡的生物学活性；其机制可能与依赖caspase的线粒体途径有关。

关键词：创伤弧菌溶细胞素 J774A.1 凋亡线粒体

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腺苷预处理培养大鼠心肌细胞后酶活性变化和超微结构观察

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解剖学杂志 2001年第5期24卷 435-439页

作者：陶圣祥张友云杨家齐袁玉林雷岳山武汉大学医学院人体解剖学教研室

目的 :应用组化方法和透射电镜 ,观察腺苷预处理培养大鼠心肌细胞琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶及Ca2 +,Mg2 +依赖性ATP酶活性细胞超微结构的变化。方法 :取SD大鼠乳鼠心室肌细胞在无菌状态下 ,用DMEM常规培养 5天后分四组 :正常对照组... 详细信息

目的 :应用组化方法和透射电镜 ,观察腺苷预处理培养大鼠心肌细胞琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶及Ca2 +,Mg2 +依赖性ATP酶活性细胞超微结构的变化。方法 :取SD大鼠乳鼠心室肌细胞在无菌状态下 ,用DMEM常规培养 5天后分四组 :正常对照组、拟缺血再灌注组、拟缺血预处理组、腺苷预处理组 ,用组化方法检测心肌酶活性 ;以透射电镜观察细胞形态结构变化。结果 :在缺血预处理组和腺苷预处理组琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶、Ca2 +,Mg2 +依赖性ATP酶活性均高于拟缺血再灌注组 ,且细胞结构保存良好 ;缺血预处理组、腺苷预处理组与正常对照组无显著性差异。结论

关键词：心肌腺苷细胞培养心肌细胞酶活性超微结构预处理

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川芎嗪对青霉素致痫大鼠神经元内c-fos表达的影响

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武汉大学学报（医学版） 2002年第4期23卷 322-325页

作者：朱晓琴张端莲伍静文余英胡祁生陈静芳武汉大学医学院组织胚胎学教研室武汉430071 武汉大学医学院生理学教研室武汉430071

目的:用免疫组织化学方法观察川芎嗪（TM）对青霉素致痫大鼠大脑皮层神经元内c-fos表达的影响。方法:使用青霉素癫痫模型,采用BL-410生物机能实验系统记录双侧大脑皮层癫痫放电,观察腹腔注射TMP对大鼠癫痫放电大脑皮层神经元内c-fos表... 详细信息

目的:用免疫组织化学方法观察川芎嗪（TM）对青霉素致痫大鼠大脑皮层神经元内c-fos表达的影响。方法:使用青霉素癫痫模型,采用BL-410生物机能实验系统记录双侧大脑皮层癫痫放电,观察腹腔注射TMP对大鼠癫痫放电大脑皮层神经元内c-fos表达的影响。结果:腹腔注射TMP（20-40mg/kg）后,大脑皮层神经元内c-fos表达较对照组明显降低。结论:TMP能明显抑制c-fos的表达,具有抗癫痫放电作用。

关键词：川芎嗪癫痫大脑皮层青霉素 c-fos原癌基因

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硫酸腺嘌呤预处理对大鼠缺血心肌细胞的保护

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武汉大学学报（医学版） 2004年第2期25卷 154-156,F004页

作者：胡成俊董峰雷岳山宋健陈锡昌武汉大学医学院人体解剖学教研室武汉430071 武汉大学医学院生理学教研室武汉430071

目的 :探讨硫酸腺嘌呤预处理对大鼠缺血心肌细胞凋亡的保护。方法 :应用注入腺苷前质———硫酸腺嘌呤复制大鼠心脏预处理模型 ,并与经典的预处理模型对比 ,观察心肌细胞的改变。结果 :两种方式的预处理都可降低心肌MDA含量及血清CK活... 详细信息

目的 :探讨硫酸腺嘌呤预处理对大鼠缺血心肌细胞凋亡的保护。方法 :应用注入腺苷前质———硫酸腺嘌呤复制大鼠心脏预处理模型 ,并与经典的预处理模型对比 ,观察心肌细胞的改变。结果 :两种方式的预处理都可降低心肌MDA含量及血清CK活性 ,抑制心肌细胞凋亡。结论 :硫酸腺嘌呤预处理对大鼠缺血心肌有保护作用。

关键词：硫酸腺嘌呤心肌预处理缺血保护细胞凋亡

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结肠癌干细胞标志物和信号通路的研究进展

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生命科学 2019年第8期31卷 802-811页

作者：张子怡林泉任叶春雨金燕延边大学医学院延吉133002 延边大学医学院细胞生物学与医学遗传学教研室延吉133002

结肠癌是一种最常见的消化道恶性肿瘤,世界范围内其发病率位列第三。大部分的结肠癌患者死亡由肿瘤的复发转移和耐药性所致,而这些过程都有肿瘤干细胞的参与。因此,靶向肿瘤干细胞将成为未来根治结肠癌的重要研究方向,而结肠癌干细胞标... 详细信息

结肠癌是一种最常见的消化道恶性肿瘤,世界范围内其发病率位列第三。大部分的结肠癌患者死亡由肿瘤的复发转移和耐药性所致,而这些过程都有肿瘤干细胞的参与。因此,靶向肿瘤干细胞将成为未来根治结肠癌的重要研究方向,而结肠癌干细胞标志物的发现则为其提供了新思路。同时,因结肠癌干细胞的生长依赖多种信号通路的作用,故其相关信号通路靶向药物的研究也将是一大发展方向。该文就目前关于结肠癌干细胞标志物及其相关信号通路抑制剂的研究进展作一综述。

关键词：结肠癌干细胞生物学标志物信号通路肿瘤转移抑制剂

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维生素A酸对体外培养小鼠囊胚细胞毒性的研究

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华中科技大学学报（医学版） 2008年第6期37卷 788-790,842页

作者：熊彦娥张端莲武汉科技大学医学院解剖学教研室武汉430062 武汉大学医学院组织胚胎学教研室武汉430071

目的观察维生素A酸(RA)对体外培养小鼠囊胚细胞毒性作用。方法获取妊娠3.5d小鼠囊胚,分别在含0、1和10μmol/LRA的M199培养液中培养24h,用荧光染料Propidium(PI)和Bisbenzimide(Hoechst 33258)特异性染色,分别计数囊胚内细胞总数以及内... 详细信息

目的观察维生素A酸(RA)对体外培养小鼠囊胚细胞毒性作用。方法获取妊娠3.5d小鼠囊胚,分别在含0、1和10μmol/LRA的M199培养液中培养24h,用荧光染料Propidium(PI)和Bisbenzimide(Hoechst 33258)特异性染色,分别计数囊胚内细胞总数以及内细胞群(ICM)和滋养层(TE)细胞数。结果RA可导致小鼠囊胚内细胞总数以及ICM和TE细胞数减少。结论RA对小鼠早期胚胎的发育具有细胞毒性作用,从而影响早期胚胎的生长发育。

关键词：维生素A酸细胞毒性小鼠

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EGF受体和IGF-1受体在人鼻咽癌组织中的表达及临床意义

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武汉大学学报（医学版） 2009年第3期30卷 294-298,I0001页

作者：孟晓萍卢硕周绪红袁玉林彭涛李俊叶林峰武汉大学医学院法医学教研室湖北武汉430071 武汉大学医学院解剖学教研室湖北武汉430071 武汉大学中南医院耳鼻咽喉科湖北武汉430071

目的:研究表皮生长因子受体(EGFR)和胰岛素生长因子-1受体(IGF-1R)在人鼻咽癌(NPC)组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测NPC组织及鼻咽非肿瘤组织EGFR和IGF-1R蛋白以及用RT-PCR法检测EGFR和IGF-1R mRNA的表达。结果:E... 详细信息

目的:研究表皮生长因子受体(EGFR)和胰岛素生长因子-1受体(IGF-1R)在人鼻咽癌(NPC)组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测NPC组织及鼻咽非肿瘤组织EGFR和IGF-1R蛋白以及用RT-PCR法检测EGFR和IGF-1R mRNA的表达。结果:EGFR和IGF-1R蛋白在NPC组织的过表达率分别为65.3%(49/75)和56%(42/75),在鼻咽非肿瘤组织中过表达率分别为0%和14.3%(3/21)。鼻咽癌组与对照组相比,EGFR蛋白表达有统计学意义(P<0.01),鼻咽癌组织中EGFR和IGF-1R蛋白的过表达对不同年龄、性别的患者无统计学差异,但与淋巴结转移、远处转移、复发和5年生存率有相关性(P<0.01或P<0.05)。鼻咽癌组与对照组相比,IGF-1R mRNA和EGFR mRNA表达亦有统计学差异(P<0.01或/P<0.05)。EGFR和IGF-1R两者在鼻咽癌中表达呈正相关(r=0.367,P=0.001)。结论:EGFR和IGF-1R mRNA和蛋白过度表达可能与鼻咽癌的复发和转移有关,检测EGFR和IGF-1R mRNA和蛋白过度表达可作为判断鼻咽癌复发和转移的潜在指标之一。

关键词：鼻咽癌 EGF受体 IGF-1受体免疫组织化学 RT-PCR

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下调CD59对急性T系白血病细胞株Jurkat凋亡相关分子的影响

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中国免疫学杂志 2017年第5期33卷 693-696页

作者：高美华李华侨李冰王忠丛蓓蓓王冰青岛大学医学院免疫学教研室青岛266071 青岛大学医学院遗传学教研室青岛266071 青岛大学医学院科研处青岛266071

目的:探讨下调CD59对急性T系白血病细胞株Jurkat凋亡相关分子的影响。方法:运用RNAi慢病毒为载体下调急性T系白血病Jurkat细胞株CD59的表达;激光共聚焦观察转染效率及CD59分子的定位;Real-time-PCR、Western blot筛选下调效果最好的一... 详细信息

目的:探讨下调CD59对急性T系白血病细胞株Jurkat凋亡相关分子的影响。方法:运用RNAi慢病毒为载体下调急性T系白血病Jurkat细胞株CD59的表达;激光共聚焦观察转染效率及CD59分子的定位;Real-time-PCR、Western blot筛选下调效果最好的一组细胞,用其做后续的分子生物学水平的实验;Western blot检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、Survivin蛋白表达量的变化;ELISA检测各组的细胞培养上清中IL-3、TNF-β的表达。结果:激光共聚焦观察到转染各组的转染效率在90%以上,CD59分子主要位于细胞膜;Real-time-PCR筛选得出下调A组的转染效果最好;Western blot结果显示下调A组的CD59蛋白的表达量减少最明显,将RNAi-CD59-A定义为RNAi-CD59作为实验组进行后续实验;实验组能增强Bax、Caspase-3蛋白的表达(P<0.05),抑制Bcl-2、Survivin蛋白的表达(P<0.05);ELISA结果显示下调组IL-3表达水平降低(P<0.05),TNF-β的表达水平升高(P<0.05)。结论:下调D59基因表达可使急性T系白血病细胞株Jurkat的促凋亡分子表达增高,促增殖分子表达降低。

关键词： CD59 凋亡 Jurkat 转染

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