背景:丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)是导致肝细胞疾病的重要病毒,目前尚无有效疫苗.HCV包膜糖蛋白E1-E2的免疫原性弱,E1E2上含有丰富的N-糖基化修饰的糖链,研究显示糖链可能遮盖病毒抗原表位,从而抑制和影响病毒的免疫原性,导致...
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背景:丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)是导致肝细胞疾病的重要病毒,目前尚无有效疫苗.HCV包膜糖蛋白E1-E2的免疫原性弱,E1E2上含有丰富的N-糖基化修饰的糖链,研究显示糖链可能遮盖病毒抗原表位,从而抑制和影响病毒的免疫原性,导致病毒免疫逃逸.目的:本研究拟改造E1E2的N-糖链,筛选出能比野生型的免疫原性增强的糖基化突变体;并通过B细胞表面的CD19分子将HCV-E2靶向递呈到B细胞,研究这种靶向性抗原是否能够通过激活B细胞诱导丙肝特异性中和抗体和细胞毒性T细胞免疫反应,为研制新型免疫原性增强的治疗性HCV疫苗提供新的策略.
检测丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)包膜蛋白E2糖基化位点对体液免疫功能的影响。野生型E2基因和糖基化突变体型E2基因的真核表达质粒DNA分别肌肉注射BALB/C小鼠,免疫3次,末次免疫后第10 d,眼眶摘眼球取血清,断椎处死小鼠,同时设...
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检测丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)包膜蛋白E2糖基化位点对体液免疫功能的影响。野生型E2基因和糖基化突变体型E2基因的真核表达质粒DNA分别肌肉注射BALB/C小鼠,免疫3次,末次免疫后第10 d,眼眶摘眼球取血清,断椎处死小鼠,同时设阴性对照和空载质粒对照。血清标本用ELISA检测特异性IgG及其亚类IgG1I、gG2α表达水平,观测特异性体液免疫反应和脾细胞分泌细胞因子水平。与阴性对照和空载组对比,E2和N-糖基化突变体质粒DNA免疫小鼠都能诱导产生强烈的特异性免疫反应(P<0.01),并且N-糖基化突变体(560、576位糖基化突变体)质粒DNA与野生型E2相比,其特异性IgG效价明显降低(P<0.05),IL-4分泌水平明显降低(P<0.05)。E2糖蛋白的560、576位N-糖基化位点是诱导体液免疫反应所需要的,除去560、576位N-糖基化会降低E2诱导的体液免疫应答。
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