检索结果-内蒙古大学图书馆

结核分枝杆菌Rv2645刺激ISG15的表达上升促进体外丙型肝炎病毒的增殖

病毒学报 2017年第3期33卷 372-379页

作者：卢芳芳谭杨付忠晓刘鹏章晓联武汉大学病毒学国家重点实验室湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室武汉大学医学研究院武汉大学基础医学院免疫学系武汉430071

为研究结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,***)与丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)感染之间的相关关系,本文研究毒性毒株*** H37Rv的RD13区中的Rv2645基因对免疫细胞中干扰素刺激基因(Interferonstimulated gene 15,ISG15)表达的影响,进而探讨ISG15的表达与HCV感染之间的相关性。利用携带Rv2645基因的无毒牛结核分枝杆菌卡介苗(Bacille calmette guerin,BCG)(即rBCG::Rv2645,rBCG)与亲本BCG分别感染小鼠或刺激小鼠巨噬细胞系RAW264.7,运用RT-qPCR以及蛋白印迹的方法检测,比较rBCG与BCG感染对小鼠CD4+T细胞及RAW264.7细胞中ISG15的mRNA及蛋白质表达的影响。同时克隆ISG15真核表达质粒和ISG15的沉默表达质粒-ISG15-shRNA,运用RT-qPCR及蛋白印迹分别检测ISG15过表达及沉默后,对HCV感染的人肝癌细胞系Huh7.5.1中HCV的mRNA、HCV非结构蛋白NS3及核心蛋白Core的表达。我们发现相对于BCG,携带Rv2645的BCG感染之后脾脏CD4+T细胞及体外RAW264.7中ISG15的mRNA及蛋白质的水平明显升高。此外,ISG15过表达导致Huh7.5.1中HCV的mRNA、NS3蛋白及Core蛋白的水平明显升高,而ISG15沉默后ISG15和HCV的mRNA的水平明显下调。本研究首次发现*** Rv2645能上调小鼠CD4+T细胞及巨噬细胞中ISG15的表达;而ISG15能促进Huh7.5.1中HCV增殖。本研究对阐明***毒性菌株H37Rv的Rv2645基因的功能,以及为研究MTB感染与HCV感染的分子机制提供参考依据。

关键词：结核分枝杆菌-M.tb Rv2645 丙型肝炎病毒(HCV) BCG::Rv2645 ISG15

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IFN-λ4与HCV感染最新研究进展

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生命的化学 2015年第4期35卷 491-494页

作者：李宁侯炜武汉大学基础医学院医学病毒学研究所/病毒学国家重点实验室武汉430071

干扰素(interferon,IFN)为体内主要的抗病毒细胞因子,新发现的III型干扰素IFN-λ4与丙型肝炎病毒(HCV)的自发清除或治疗无效密切相关。IFN-λ4只能存在于携带IFNL4-ΔG等位基因(rs368234815)个体,它是预测HCV清除的最佳宿主因素。IFN-λ... 详细信息

干扰素(interferon,IFN)为体内主要的抗病毒细胞因子,新发现的III型干扰素IFN-λ4与丙型肝炎病毒(HCV)的自发清除或治疗无效密切相关。IFN-λ4只能存在于携带IFNL4-ΔG等位基因(rs368234815)个体,它是预测HCV清除的最佳宿主因素。IFN-λ4也通过IFN-λ受体复合物传递信号,并通过激活JAK-STAT途径诱导干扰素刺激基因(IFN-stimulatedgene,ISG)的表达。IFN-λ4能诱导抗病毒活性,却同时影响了HCV的有效清除。因此,解决IFN-λ4这种看似矛盾的功能问题,可能会对HCV感染和干扰素生物学的免疫反应产生重要的新见解。

关键词： Ⅲ型干扰素(IFN-λ) 丙型肝炎病毒单核苷酸多态性(SNP)

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中国湖北汉族人群HLA-DRB1基因多态性研究

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武汉大学学报（医学版） 2006年第6期27卷 748-752页

作者：孙孝云侯炜罗凡丁晓华杨光锡谷达夫石罔贤杨占秋武汉大学期刊社武汉4300722 武汉大学医学院病毒学国家重点实验室/病毒学研究所武汉430071 日本福岛县立医科大学微生物系

目的:调查湖北汉族人群人类白细胞抗原(HLA)-DRB1基因多态性,获得完整准确的遗传学数据。方法:应用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)方法对213名随机选取无亲缘关系的湖北籍汉族健康体检者或健康献血员进行HLA-PDRB1基因型检测。结... 详细信息

目的:调查湖北汉族人群人类白细胞抗原(HLA)-DRB1基因多态性,获得完整准确的遗传学数据。方法:应用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)方法对213名随机选取无亲缘关系的湖北籍汉族健康体检者或健康献血员进行HLA-PDRB1基因型检测。结果:在213名正常个体中,发现基因频率(GF)较高的有DRB1*1501-1502(GF=11.0%)、*1101-1105(GF=8.5%)、*0901(GF=6.8%)、*1301-1302(GF=6.6%)、DRB4*0101(GF=19.0%)、DRB5*0101(GF=16.9%),低频率等位基因是DRB1*04、*1001和*0101-0103。结论:从基因水平分析了HLA-DRB1基因在湖北汉族群体中的分布特征,提供了一套比较完整准确的DRB1基因频率,为人类学和疾病相关性等研究提供了重要的参考数据。

关键词：遗传多态性 HLA—DRB1基因基因频率等位基因

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HPV16E7-HSP70嵌合型DNA疫苗通过Fas-FasL途径的抗肿瘤作用

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肿瘤防治研究 2013年第2期40卷 144-146页

作者：彭敏解庭波俞娟伍欣星武汉大学人民医院肿瘤诊疗中心武汉430060 武汉大学基础医学部病毒学国家重点实验室分子病毒室武汉生物制品研究所

目的运用表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E7蛋白的肿瘤细胞系B16-HPV16E7,探讨pcd-HPV16mE7-HSP70融合DNA疫苗抗肿瘤的可能机制。方法运用流式细胞术检测IFN-γ对B16-HPV16E7细胞表面Fas分子表达的影响。通过ELISA和流式细胞术检测疫苗免... 详细信息

目的运用表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E7蛋白的肿瘤细胞系B16-HPV16E7,探讨pcd-HPV16mE7-HSP70融合DNA疫苗抗肿瘤的可能机制。方法运用流式细胞术检测IFN-γ对B16-HPV16E7细胞表面Fas分子表达的影响。通过ELISA和流式细胞术检测疫苗免疫后小鼠脾淋巴细胞IFN-γ的分泌和FasL的表达情况。运用体外抗体阻断实验检测Fas-FasL途径对pcd-HPV16mE7-HSP70DNA疫苗抗肿瘤作用的影响。结果 pcd-HPV16mE7-HSP70DNA疫苗可以激活机体的免疫系统,上调细胞因子IFN-γ和E7特异性FasL的表达。IFN-γ可以激活B16-HPV16E7肿瘤细胞表面的Fas分子的表达。拮抗FasL后,疫苗对B16-HPV16E7肿瘤细胞的杀伤作用明显减弱。结论 Fas-FasL途径是pcd-HPV16mE7-HSP70DNA疫苗抗肿瘤作用的重要机制之一。

关键词：宫颈癌 DNA疫苗 Fas FasL

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黄芪提取物对乙型肝炎病毒抗原表达的抑制作用

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医学新知 2011年第4期21卷 254-256页

作者：胡芬杨泽天石铭俊杨占秋熊海蓉武汉大学基础医学院医学病毒学研究所／病毒学国家重点实验室湖北武汉430071

目的探讨黄芪提取物对乙型肝炎病毒（HBV）病毒抗原表达的抑制作用。方法用MTT法测定黄芪提取液在不同浓度下对HepG2．2．15细胞的细胞毒性，ELISA法检测黄芪提取物对HepG2．2．15细胞分泌HBsAg、HBeAg颗粒的影响。结果黄芪提取物对HepG... 详细信息

目的探讨黄芪提取物对乙型肝炎病毒（HBV）病毒抗原表达的抑制作用。方法用MTT法测定黄芪提取液在不同浓度下对HepG2．2．15细胞的细胞毒性，ELISA法检测黄芪提取物对HepG2．2．15细胞分泌HBsAg、HBeAg颗粒的影响。结果黄芪提取物对HepG2．2．15细胞4d和8d的半数毒性浓度（TC50）分别为88．914μg／ml和85．209μg／ml（P〉0．05），对HBeAg4d和8d的治疗指数（TI）分别为1．018和1．342（P〉0．05），对HBsAg4d和8d的治疗指数分别为0．065和0．089（P〉0．05）。结论黄芪提取物抑制HepG2．2．15细胞分泌HBeAg的作用为低效有毒，黄芪提取物对HBsAg抗原分泌无明显抑制作用。

关键词：黄芪 HepG2.2.15细胞体外 HBV抗原 ELISA

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AcMNPV肌动蛋白核定位基因的亚细胞定位

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病毒学报 2012年第2期28卷 172-177页

作者：王倩陈继征王云王学军陈新文南京医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系江苏省人类功能基因组实验室南京210093 中国科学院武汉病毒研究所病毒学国家重点实验室武汉430071

当前细胞核内肌动蛋白的功能是一个研究热点,核内存在肌动蛋白并参与细胞核内发生的许多生命活动。杆状病毒是迄今唯一报道的利用核内肌动蛋白进行复制增殖的病原微生物,为核内肌动蛋白的结构与功能的研究提供了独特的系统。有报道显示A... 详细信息

当前细胞核内肌动蛋白的功能是一个研究热点,核内存在肌动蛋白并参与细胞核内发生的许多生命活动。杆状病毒是迄今唯一报道的利用核内肌动蛋白进行复制增殖的病原微生物,为核内肌动蛋白的结构与功能的研究提供了独特的系统。有报道显示AcMNPV的ie-1,pe38,ac4,he65,ac102和ac152基因与肌动蛋白单体的核转运有关,然而关于这六个基因的亚细胞定位及其在肌动蛋白入核过程中的功能并没有深入的研究。本文首次揭示了这六个基因的亚细胞定位,IE1和AC152是全细胞分布,PE38和AC102也为核质分布,但主要分布在细胞核中,而AC4和HE65定位于细胞质。但AC102和IE1可以分别介导AC4和HE65入核。同时我们发现当使用外源强启动子OpIE2,在转染ie-1或pe38之后表达ac4和he65可以部分招募肌动蛋白单体入核,而时序性共转染这四个基因则可招募最多肌动蛋白单体入核。对肌动蛋白核定位基因在细胞中的定位分析为进一步了解杆状病毒介导肌动蛋白入核的分子机理提供支持。

关键词： AcMNPV 肌动蛋白核定位基因肌动蛋白核转运

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丙型肝炎病毒核心蛋白通过FOXO1/PGC-1α途径上调磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶的转录

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微生物学报 2012年第1期52卷 52-59页

作者：陈继征王倩徐松南京医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系江苏省人类功能基因组实验室南京210093 中国科学院武汉病毒研究所病毒学国家重点实验室武汉430071

【目的】分析丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(CORE)稳定表达对磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶(PCK1)转录水平的影响,并分析HCV CORE调控PCK1转录的分子机制,为进一步阐明HCV感染致2型糖尿病机理的探讨提供新的思路。【方法】利用反转录病毒表达系... 详细信息

【目的】分析丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(CORE)稳定表达对磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶(PCK1)转录水平的影响,并分析HCV CORE调控PCK1转录的分子机制,为进一步阐明HCV感染致2型糖尿病机理的探讨提供新的思路。【方法】利用反转录病毒表达系统构建稳定表达HCV CORE的Huh7-lunet-core细胞系。采用Real-time PCR和萤光素酶报告基因技术检测Huh7-lunet-core细胞系中PCK1、FOXO1以及PGC-1α转录水平变化,并结合Western blot分析FOXO1的活性变化。【结果】HCV CORE的稳定表达显著增强PCK1的转录水平,HCV CORE不影响FOXO1的转录和表达水平,但降低FOXO1的磷酸化水平,激活了FOXO1的转录活性,并增强PGC-1α的mRNA表达水平。【结论】HCV CORE在Huh7-lunet细胞中的稳定表达激活FOXO1的转录活性,并与PGC-1α协同作用,上调PCK1的转录,从而导致肝糖异生过度发生,对HCV CORE调控PCK1转录的分子机制的揭示可能为HCV感染相关的糖尿病的治疗提供新的靶点。

关键词： HCV CORE 2型糖尿病胰岛素抵抗磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶糖异生 FOXO1 PGC-1α

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草血竭抗流感病毒的研究

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武汉大学学报（医学版） 2006年第1期27卷 72-74页

作者：罗凡侯炜杨占秋郝建新锡谷达夫森修一武汉大学医学院病毒学研究所/病毒学国家重点实验室武汉430071 湖北中医学院药学系武汉430061 日本福岛县立医科大学微生物系

目的:为研究草血竭体外抗流感病毒作用机理。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性及空斑减数实验测定病毒滴度,以确定草血竭两个有效成分细胞内抗流感病毒的作用。结果:实验发现草血竭水煮醇沉干浸膏和草血竭纯化部分既不能阻断流... 详细信息

目的:为研究草血竭体外抗流感病毒作用机理。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性及空斑减数实验测定病毒滴度,以确定草血竭两个有效成分细胞内抗流感病毒的作用。结果:实验发现草血竭水煮醇沉干浸膏和草血竭纯化部分既不能阻断流感病毒侵入细胞,也不能抑制流感病毒的生物合成,且各药物浓度组均出现典型的细胞病变效应(CPE);但草血竭水煮醇沉干浸膏与草血竭纯化部分能够明显杀灭病毒,即随药物浓度的增加,CPE特征逐渐减弱,病毒滴度也逐渐降低,而空斑减数率明显升高。结论:草血竭在体外通过直接灭活作用发挥抗流感病毒作用。

关键词：草血竭流感病毒抗病毒作用

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板蓝根多糖对小鼠抗流感病毒感染的作用

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华西药学杂志 2008年第6期23卷 666-667页

作者：左娅代明王志勇刘军湖北荆州市第一人民医院药剂科湖北荆州434000 病毒学国家重点实验室/武汉大学动物实验中心湖北武汉430071 武汉大学中南医院药学部湖北武汉430071 病毒学国家重点实验室/武汉大学医学院病毒研究所湖北武汉430071

目的研究板蓝根多糖对小鼠抗流感病毒感染能力的影响。方法将板蓝根多糖溶液腹腔注入流感病毒感染的模型小鼠,观察小鼠的生存时间,计算肺指数,测定小鼠血清中抗病毒IgG的变化及脾细胞IFN-γ的水平。结果注射板蓝根多糖的小鼠存活时间延... 详细信息

目的研究板蓝根多糖对小鼠抗流感病毒感染能力的影响。方法将板蓝根多糖溶液腹腔注入流感病毒感染的模型小鼠,观察小鼠的生存时间,计算肺指数,测定小鼠血清中抗病毒IgG的变化及脾细胞IFN-γ的水平。结果注射板蓝根多糖的小鼠存活时间延长、存活率提高。与病毒对照组比较,肺指数明显降低,血清中抗体IgG的水平升高,脾脏细胞IFN-γ的水平上升。结论板蓝根多糖能促进小鼠非特异性免疫、增强体液的免疫功能,并参与了调节细胞的免疫功能,从而提高了小鼠抵抗流感病毒感染的能力。

关键词：板蓝根多糖流感病毒免疫

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猪脾细胞干扰素在细胞中对疱疹病毒的抑制作用

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武汉大学学报（医学版） 2007年第2期28卷 162-165页

作者：杨光徐芳玲胡远扬蒋文玲刘建军武汉大学医学院病毒学研究所/病毒学国家重点实验室湖北武汉430071 武汉大学生命科学学院湖北武汉430072 广东省人民医院医学研究中心广东广州510080

目的:体外评价猪脾细胞干扰素抗疱疹病毒的活性,为疱疹病毒感染寻找新的治疗手段。方法:主要通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率和病毒抑制率来评价猪脾细胞干扰素体外对单纯疱疹病毒1型(HSV-1)和2型(HSV-2)... 详细信息

目的:体外评价猪脾细胞干扰素抗疱疹病毒的活性,为疱疹病毒感染寻找新的治疗手段。方法:主要通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率和病毒抑制率来评价猪脾细胞干扰素体外对单纯疱疹病毒1型(HSV-1)和2型(HSV-2)的抑制作用。结果:猪脾细胞干扰素对HeLa细胞的半数毒性浓度(TC50)为535.3 IU/ml,对HSV-1和HSV-2的半数有效浓度(IC50)分别为24.6×103IU/L和25.9×103IU/L,治疗指数(TI)为21.8和20.7;其抗病毒效果与人白细胞干扰素及喷昔洛韦一致。结论:猪脾细胞干扰素具有很好的体外抗疱疹病毒作用。

关键词：猪脾细胞干扰素单纯疱疹病毒 HeLa细胞

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