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C组轮状病毒主要基因全片段扩增及武汉地方株Wu82的VP6和VP7编码基因序列分析

中国人兽共患病学报 2007年第12期23卷 1167-1171页

作者：王远虹周璇小林宣道朱泽荣刘满清杨占秋武汉市疾病预防控制中心武汉430022 日本札幌医科大学卫生系武汉大学医学院病毒研究所病毒学国家重点实验室

目的建立C组轮状病毒VP6、VP7、VP4和NSP4基因全片段扩增方法;明确武汉地方株Wu82与其他毒株的系统发生关系。腹泻患者大便。方法PAGE筛查病毒;设计9对引物RT-PCR扩增VP6、VP7、VP4和NSP4基因;VP6、VP7序列及亲水位点分析。结果Wu82VP6... 详细信息

目的建立C组轮状病毒VP6、VP7、VP4和NSP4基因全片段扩增方法;明确武汉地方株Wu82与其他毒株的系统发生关系。腹泻患者大便。方法PAGE筛查病毒;设计9对引物RT-PCR扩增VP6、VP7、VP4和NSP4基因;VP6、VP7序列及亲水位点分析。结果Wu82VP6和VP7基因核酸序列与其它人C组轮状病毒相比同源性分别为98.45%～97.12%和99.34%～94.83%。结论C组轮状病毒基因非常保守,进化缓慢。2001年武汉地方株Wu82与1995年武汉地方株208株相比,VP7和VP6抗原表位存在差异。

关键词：轮状病毒 C组基因序列测定进化分析亲水性分析

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人3型腺病毒广州分离株基因组的进化分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第1期27卷 14-17页

作者：周荣苏晓波张其威曾其毅朱冰张楚瑜吴后波吴灶和龚四堂广州医学院附属广州市儿童医院 510120 中国科学院南海海洋研究所中国科学院研究生院武汉大学病毒学国家重点实验室

目的研究人3型腺病毒（human adenovirus type 3，HAdV-3）全基因组序列的基本特征并进行基因组的进化分析。方法取患儿鼻咽分泌物进行病毒分离，用中和试验和PCR进一步鉴定分型；克隆酶切片段并测序，利用软件对腺病毒基因组蛋白进行... 详细信息

目的研究人3型腺病毒（human adenovirus type 3，HAdV-3）全基因组序列的基本特征并进行基因组的进化分析。方法取患儿鼻咽分泌物进行病毒分离，用中和试验和PCR进一步鉴定分型；克隆酶切片段并测序，利用软件对腺病毒基因组蛋白进行进化树分析。结果分离得到2株HAdV-3，基因组全长分别为35273bp和35269bp，2株均含有39个DNA编码序列和2个RNA编码序列。非编码区均保守，存在回文序列和反转重复序列。进化分析表明HAdV-3及其他B组腺病毒与猿腺病毒21型具有更近的进化关系。结论获得广州地区分离的2株HAdV-3，基因组全长35273bp和35269bp；人B组腺病毒与猿腺病毒存在一定的进化关系。

关键词：人3型腺病毒(HAdV-3) 基因组序列分析

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男性不育症患者X染色体雄激素受体基因外显子1、3、4状态筛选研究

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中国优生与遗传杂志 2007年第6期15卷 15-17,24页

作者：魏魏董长垣刘军苗聪秀长治市妇幼保健院 046011 武汉大学医学院病毒学国家重点实验室长治医学院生殖研究所

目的研究雄激素受体（androgen receptor,AR）基因与特发无精症之间的关系。方法运用分子生物学方法分别检测35名无精症患者和20名对照组正常男性雄激素受体基因的3个功能区的DNA片段,结果实验组患者和正常男性AR外显子1中（CAG）n重复... 详细信息

目的研究雄激素受体（androgen receptor,AR）基因与特发无精症之间的关系。方法运用分子生物学方法分别检测35名无精症患者和20名对照组正常男性雄激素受体基因的3个功能区的DNA片段,结果实验组患者和正常男性AR外显子1中（CAG）n重复数在11~27之间,两组无显著差别,35例无精症患者用PCR扩增出雄激素受体外显子3（exon3）片段35例（100%）和外显子4（exon4）片段34例（97.15%）,20名正常已生育男性扩增出AR外显子3（exon3）片段20例（100%）和外显子4（exon4）片段20例（100%）。结论（CAG）n基因多态性与男性精子生成障碍无相关性,exon4缺失通过影响靶细胞核的类固醇激素-受体结合物数量在精子发生中的作用需进一步探讨。

关键词：男性不育症雄激素受体基因 (CAG)n多态性外显子3 外显子4

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2000-2007武汉市A组轮状病毒分子流行病学监测及疫苗LLR使用后的流行趋势初步分析

2000-2007武汉市A组轮状病毒分子流行病学监测及疫苗LLR使用后的...

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第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：王远虹杨占秋小林宣道周敦金周璇朱泽荣刘满清彭劲松武汉市疾病预防控制中心武汉大学医学院病毒研究所病毒学国家重点实验室日本札幌医科大学卫生系

目的:比较成人和儿童腹泻患者中 A 组轮状病毒的流行特征和基因型分布,对成人和儿童腹泻患者中 A 组轮状病毒的关联作些探讨。并对轮状疫苗 LLR 投入使用前后轮状病毒流行情况作初步分析。材料:2000.12—2006.12采集武汉市8家医

关键词：

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空心莲子草类盐抗汉坦病毒作用研究

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中国药学杂志 2006年第22期41卷 1713-1715页

作者：侯炜杨占秋毛琳李晶晶肖红程丽文利周俊武汉大学医学院病毒学研究所病毒学国家重点实验室武汉430071

目的明确空心莲子草类盐抗汉坦病毒（HV）的作用机制。方法采用噻唑兰（MTT）比色法检测细胞活性、免疫荧光法（IFA）和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测病毒滴度和病毒核酸，以确定空心莲子草类盐细胞内抗HV作用。结果空心莲子草... 详细信息

目的明确空心莲子草类盐抗汉坦病毒（HV）的作用机制。方法采用噻唑兰（MTT）比色法检测细胞活性、免疫荧光法（IFA）和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测病毒滴度和病毒核酸，以确定空心莲子草类盐细胞内抗HV作用。结果空心莲子草类盐对HV无直接灭活作用，也不能阻止HV的吸附，这表现在各药物浓度组病毒滴度均在5．7以上；空心莲子草类盐有抑制HV生物合成作用，在质量浓度为40-320mg·L^-1内，随着药物质量浓度的增加，病毒滴度、细胞培养液中病毒核酸的阳性稀释度逐渐降低，抗病毒指数逐渐增加，并表现出量效关系，药物治疗组的病毒滴度明显低于病毒对照组（P〈0.05）。结论空心莲子草类盐在体外通过抑制病毒生物合成而发挥抗HV作用。

关键词：汉坦病毒空心莲子草体外抗病毒实验

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盐酸阿比朵尔抗腺病毒7型的实验研究

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武汉大学学报（医学版） 2006年第1期27卷 66-68页

作者：石丽桥杨占秋何静刘媛媛肖红武汉大学医学院病毒学研究所/病毒学国家重点实验室武汉430071

目的:明确抗病毒新药盐酸阿比朵尔体外抗腺病毒7型(ADV-7)的作用方式。方法:主要通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性、病毒滴定3种方法从药物抗病毒生物合成、药物直接杀伤病毒以及药物抗病毒吸附3方面检测盐酸... 详细信息

目的:明确抗病毒新药盐酸阿比朵尔体外抗腺病毒7型(ADV-7)的作用方式。方法:主要通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性、病毒滴定3种方法从药物抗病毒生物合成、药物直接杀伤病毒以及药物抗病毒吸附3方面检测盐酸阿比朵尔的作用方式。结果:盐酸阿比朵尔对ADV-7无直接杀伤作用,也不能阻止ADV-7的吸附和穿入,各用药组均出现典型的CPE,但盐酸阿比朵尔能明显抑制ADV-7的生物合成作用,对细胞的半数毒性浓度(CC50)为85.37 mg/L,对ADV-7的半数有效浓度(IC50)为15.39 mg/L,治疗指数(TI)为5.55,且随着药物浓度的增加,病毒所致的CPE效应逐渐减弱,培养液中的病毒滴度也逐渐降低,而病毒抑制率则明显升高。结论:盐酸阿比朵尔在体外通过抑制病毒生物合成而发挥抗ADV-7的作用,其具体作用机制有待进一步研究。

关键词：盐酸阿比朵尔腺病毒7型药物抗病毒

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盐酸阿比朵尔抗呼吸道合胞病毒机制初探

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武汉大学学报（医学版） 2006年第1期27卷 69-71页

作者：何静杨占秋石丽桥刘媛媛肖红武汉大学医学院病毒学研究所/病毒学国家重点实验室武汉430071

目的:明确盐酸阿比朵尔抗吸道合胞病毒(RSV)Long株的活性并探讨其抗病毒机制。方法:通过细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,观察盐酸阿比朵尔抗RSV的作用。结果:盐酸阿比朵尔的半数毒性浓度(TD50)为85.39 mg/L,当该药... 详细信息

目的:明确盐酸阿比朵尔抗吸道合胞病毒(RSV)Long株的活性并探讨其抗病毒机制。方法:通过细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,观察盐酸阿比朵尔抗RSV的作用。结果:盐酸阿比朵尔的半数毒性浓度(TD50)为85.39 mg/L,当该药浓度为25 mg/L时,药物抗病毒生物合成组、药物直接作用组、药物抗吸附4 h组、药物抗病毒吸附8 h组的病毒抑制率分别能达到81.61%,79.57%,40.39%和78.60%。4组相应的药物半数有效浓度(ED50)为11.52,8.74,25.36和10.40 mg/L。结论:盐酸阿比朵尔在体外能明显抑制RSV引起的CPE效应,病毒抑制率随药物浓度的增加而增高,盐酸阿比朵尔能通过多种途径发挥抗RSV的作用。

关键词：盐酸阿比朵尔呼吸道合胞病毒抗病毒作用

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蓝舌病毒HbC_3株致人宫颈癌HeLa细胞死亡方式的研究

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武汉大学学报（医学版） 2006年第5期27卷 553-555,563,i0001页

作者：陈杰董长垣胡俊张蔚英朱珺武汉大学医学院病毒学研究所/病毒学国家重点实验室武汉430071

目的:研究蓝舌病毒湖北株致人宫颈癌HeLa细胞死亡方式及其作用机制。方法:原位末端标记(TUNEL法)观察病毒诱导细胞凋亡情况;激光扫描共聚焦显微镜检测荧光标记的细胞核及内质网变化;萤光照度仪检测病毒诱导细胞Caspase-3/7,Caspase-8,Ca... 详细信息

目的:研究蓝舌病毒湖北株致人宫颈癌HeLa细胞死亡方式及其作用机制。方法:原位末端标记(TUNEL法)观察病毒诱导细胞凋亡情况;激光扫描共聚焦显微镜检测荧光标记的细胞核及内质网变化;萤光照度仪检测病毒诱导细胞Caspase-3/7,Caspase-8,Caspase-9活性变化。结果:凋亡染色未见明显凋亡细胞,共聚焦检测见细胞核膜不完整,染色质分散,有的凝集在核膜周围,部分染色质外溢,内质网分散,混浊不清,细胞与细胞之间分界不清;萤光照度仪检测酶活性可见Caspase-3/7,Caspase-8,Caspase-9活性均无明显变化。结论:蓝舌病毒湖北株诱导HeLa细胞胀亡而发挥其抑瘤作用。

关键词：溶癌病毒蓝舌病毒湖北株胀亡人宫颈癌HeLa细胞

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发热患者SARS冠状病毒抗体分析

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中国公共卫生 2006年第4期22卷 441-442页

作者：褚小刚龚作炯黄书岚刘建军王鲁文孙小梅叶林柏武汉大学医学院病毒学研究所病毒学国家重点实验室武汉430071 武汉大学人民医院武汉大学生命科学院

目的了解临床发热患者中是否存在严重急性呼吸综合征（SARS）冠状病毒（SARS-CoV）隐性感染或亚临床感染。方法对2003年5月～7月，SARS流行期间湖北地区临床发热患者373例血清进行SARS冠状病毒（SARS-CoV）抗体（IgG、IgM、N蛋白抗体）... 详细信息

目的了解临床发热患者中是否存在严重急性呼吸综合征（SARS）冠状病毒（SARS-CoV）隐性感染或亚临床感染。方法对2003年5月～7月，SARS流行期间湖北地区临床发热患者373例血清进行SARS冠状病毒（SARS-CoV）抗体（IgG、IgM、N蛋白抗体）酶联免疫吸附法（ELISA）检测和分子生物学（RT—PCR）检测。结果373例发热患者中，检出冠状病毒抗体阳性者24例，阳性率6．43％（24／373），其中SARSIgG抗体、IgM抗体、N蛋白抗体阳性率分别为0．54％，1．34％和5．09％，但SARS-CoVRT—PCR检测均为阴性。结论临床发热患者可能存在SARS-CoV隐性或亚临床感染，患者体内产生针对SARS-CoV的保护性抗体，应具有免疫力和抵抗力。

关键词：严重急性呼吸综合征(SARS) SARS冠状病毒隐性感染 SARS抗体

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中国湖北汉族人群HLA-DRB1基因多态性研究

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武汉大学学报（医学版） 2006年第6期27卷 748-752页

作者：孙孝云侯炜罗凡丁晓华杨光锡谷达夫石罔贤杨占秋武汉大学期刊社武汉4300722 武汉大学医学院病毒学国家重点实验室/病毒学研究所武汉430071 日本福岛县立医科大学微生物系

目的:调查湖北汉族人群人类白细胞抗原(HLA)-DRB1基因多态性,获得完整准确的遗传学数据。方法:应用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)方法对213名随机选取无亲缘关系的湖北籍汉族健康体检者或健康献血员进行HLA-PDRB1基因型检测。结... 详细信息

目的:调查湖北汉族人群人类白细胞抗原(HLA)-DRB1基因多态性,获得完整准确的遗传学数据。方法:应用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)方法对213名随机选取无亲缘关系的湖北籍汉族健康体检者或健康献血员进行HLA-PDRB1基因型检测。结果:在213名正常个体中,发现基因频率(GF)较高的有DRB1*1501-1502(GF=11.0%)、*1101-1105(GF=8.5%)、*0901(GF=6.8%)、*1301-1302(GF=6.6%)、DRB4*0101(GF=19.0%)、DRB5*0101(GF=16.9%),低频率等位基因是DRB1*04、*1001和*0101-0103。结论:从基因水平分析了HLA-DRB1基因在湖北汉族群体中的分布特征,提供了一套比较完整准确的DRB1基因频率,为人类学和疾病相关性等研究提供了重要的参考数据。

关键词：遗传多态性 HLA—DRB1基因基因频率等位基因

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