检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧与兽医 2016年第4期48卷 94-97页

作者：臧金凤吴锦艳陈妍王光祥尹双辉栾志舫曹小安尚佑军张志东刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 河北农业大学动物医学院河北保定071001

利用PCR技术从布鲁氏菌S2疫苗株中扩增获得外膜蛋白(OMP)31基因,构建了原核表达质粒p GEX-6P-1-OMP31,并转入大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达,应用Western blot方法鉴定表达产物,并以纯化的OMP31重组蛋白为诊断用抗原,通过反应条件优化,初... 详细信息

利用PCR技术从布鲁氏菌S2疫苗株中扩增获得外膜蛋白(OMP)31基因,构建了原核表达质粒p GEX-6P-1-OMP31,并转入大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达,应用Western blot方法鉴定表达产物,并以纯化的OMP31重组蛋白为诊断用抗原,通过反应条件优化,初步建立布鲁氏菌抗体ELISA检测方法。以羊布鲁氏菌病普查检测血清120份为样本,与试管凝集试验进行比较分析。结果:成功构建了p GEX-6P-1-OMP31原核表达载体,并在BL21中得以诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析表明,重组蛋白分子质量约为52 ku,优化试验确定抗原的最佳包被浓度为3μg/m L,血清最佳稀释度为1∶20。试管凝集试验血清样本的阳性率为83%,采用OMP31作为包被抗原的阳性检出率为79%,二者的符合率为95%。研究表明,OMP31作为间接ELISA包被抗原用于羊布鲁氏菌病血清学检测具有良好的反应性和特异性。

关键词：布鲁氏菌 OMP31蛋白原核表达间接ELISA

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第二近红外窗口荧光Ag_2Te量子点的合成

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高等学校化学学报 2015年第7期36卷 1264-1268页

作者：王佳梅朱春楠朱东亮田智全林毅庞代文武汉大学生物医学分析化学教育部重点实验室化学与分子科学学院病毒学国家重点实验室高等研究院武汉430072

以巯基辛烷为表面配体,通过调控Ag前体和Te前体的比例,制备了第二近红外窗口荧光Ag2Te量子点.采用透射电子显微镜(TEM)、X射线衍射光谱(XRD)、X射线光电子能谱(XPS)、紫外-可见-近红外吸收光谱和荧光光谱等对产物进行了表征.结果表明,... 详细信息

以巯基辛烷为表面配体,通过调控Ag前体和Te前体的比例,制备了第二近红外窗口荧光Ag2Te量子点.采用透射电子显微镜(TEM)、X射线衍射光谱(XRD)、X射线光电子能谱(XPS)、紫外-可见-近红外吸收光谱和荧光光谱等对产物进行了表征.结果表明,制得了粒径均一、分散性好的油溶性Ag2Te量子点,其最大荧光发射波长位于1320 nm,荧光量子产率高达4.2%.

关键词：近红外 Ag2Te 量子点荧光

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结核分枝杆菌对巨噬细胞岩藻糖转移酶家族基因表达的影响

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中国生化药物杂志 2016年第3期36卷 19-22页

作者：胡锋潘勤章晓联武汉大学病毒学国家重点实验室/湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室/武汉大学医学研究院/武汉大学基础医学院免疫学系湖北武汉430071

目的研究结核分枝杆菌标准株H37Rv(inactivated H37Rv,i H37Rv)刺激巨噬细胞RAW264.7细胞后,对岩藻糖转移酶家族中的10个糖基转移酶表达的影响。方法用热灭活的i H37Rv刺激小鼠巨噬细胞系RAW264.7,用qRT-PCR(quantitative realtime polymerase chain reaction)检测i H37Rv分别刺激RAW264.7细胞0 h、4 h、8 h、12 h后对巨噬细胞中10个岩藻糖基转移酶的mRNA表达水平的影响。凝集素染色和流式细胞术检测岩藻糖转移酶对应的糖苷的表达变化。结果 i H37Rv分别刺激RAW264.7细胞0 h、4 h、8 h、12 h后,岩藻糖转移酶1(FUT1)基因的表达随着刺激时间的延长而逐步下调。凝集素染色和流式细胞术检测显示特异性结合岩藻糖转移酶-FUT1对应糖苷的小扁豆凝集素(lens culinaris agglutinin,LCA)在i H37Rv刺激巨噬细胞12 h后结合巨噬细胞上对应的糖苷的能力下降了4.6%。结论 FUT1糖基转移酶在i H37Rv刺激巨噬细胞后发生下调,其有可能作为结核分枝杆菌感染的诊断分子标志和治疗新靶点。

关键词：结核分枝杆菌巨噬细胞糖基转移酶

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家畜布鲁氏菌外膜蛋白OMP25基因的原核表达及其应用

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黑龙江畜牧兽医 2016年第7期 29-32,37页

作者：臧金凤陈妍吴锦艳王光祥尹双辉栾志舫曹小安尚佑军张志东刘湘涛张超中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046 河北农业大学动物医学院河北保定071001 石家庄市兽用生物制品供应站石家庄050000

为了获得活性良好的布鲁氏菌基因工程抗原,对Brucella OMP25蛋白进行原核表达及初步应用,试验采用PCR方法从布鲁氏菌病S2疫苗株中扩增获得OMP25基因,构建了原核表达质粒p GEX-6P-1-OMP25,转化入大肠杆菌BL21中,经过IPTG诱导表达,应用Wes... 详细信息

为了获得活性良好的布鲁氏菌基因工程抗原,对Brucella OMP25蛋白进行原核表达及初步应用,试验采用PCR方法从布鲁氏菌病S2疫苗株中扩增获得OMP25基因,构建了原核表达质粒p GEX-6P-1-OMP25,转化入大肠杆菌BL21中,经过IPTG诱导表达,应用Western-blot方法鉴定表达产物,并以纯化的OMP25重组蛋白为诊断用抗原,通过反应条件优化,初步建立Brucella抗体ELISA检测方法。又以羊布鲁氏菌普查检测血清120份为样本,采用试管凝集试验进行了比较分析。结果表明:成功构建了pGEX-6P-1-OMP25原核表达载体,并在BL21中得以诱导表达,经SDSPAGE和Western-blot分析,重组蛋白分子质量约为49 ku,优化试验确定抗原的最佳包被浓度为3.5μg/m L,血清最佳稀释度为1∶20。试管凝集试验血清样本的阳性率为83%,采用OMP25作为包被抗原的阳性检出率为68%,二者的符合率为85%。说明OMP25作为间接ELISA包被抗原用于羊布鲁氏菌血清学检测具有良好的反应性和特异性。

关键词：布鲁氏菌 OMP25蛋白克隆原核表达间接ELISA

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2011—2014年中国间日疟流行特征及病例住院治疗的影响因素

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中华预防医学杂志 2016年第4期50卷 306-311页

作者：李中杰张子科周升耿启彬孙军玲周晓农杨维中中国疾病预防控制中心传染病预防控制处传染病监测预警中国疾病预防控制中心重点实验室北京102206 浙江大学医学院附属第一医院检验科武汉大学病毒学国家重点实验室中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织热带病合作中心国家热带病国际联合研究中心

目的分析2011—2014年中国进入间日疟消除阶段后疾病流行特征，以及间日疟病例住院治疗的影响因素。方法在全国疾病监测信息报告管理系统中收集2011—2014年的间日疟个案（临床与实验室病例）和人口数据，从寄生虫病防治信息管理系统... 详细信息

目的分析2011—2014年中国进入间日疟消除阶段后疾病流行特征，以及间日疟病例住院治疗的影响因素。方法在全国疾病监测信息报告管理系统中收集2011—2014年的间日疟个案（临床与实验室病例）和人口数据，从寄生虫病防治信息管理系统中收集2011—2014年间日疟病例的流行病学调查数据（含输入病例和本地病例等信息）（不包括中国香港、澳门、台湾以及外籍病例）。采用多因素二分类非条件logistic回归模型分析间日疟病例住院的影响因素。结果 2011—2014年，5 656例全国间日疟病例中，输入病例占69.9%（3 951例），本地病例占30.1%（1 705例）；男性占82.7%（4 680例），女性占17.3% （976例）。本地病例中，535例（31.4%）分布在边境县（区），577例（33.8%）分布在省际交接地区；病例数从2011年的1 363例降至2014年53例；2011年存在本地病例的县（区）共有185个，2014年为10个；本省外县（区）感染和省外感染的病例所占比例逐年上升，至2014年分别达到32.1%（17/53）和9.4%（5/53）。输入病例分布在30个省份的614个县（区），来自全球4个洲共57个国家，其中来自东南亚的病例较多，占70.2%（2 772例）。住院治疗的病例占26.4%（1 494例）。与女性、≥65岁或本地病例相比，男性、≤14岁或输入感染会增加病例住院治疗的可能性，其OR （95%CI）分别为1.41 （1.16~1.71）、2.26（1.44~3.56）和2.73 （2.30~3.25）。结论进入消除阶段后，我国间日疟本地病例的数量和发生范围大幅下降，持续发生本地感染病例的地区相当局限；境外输入与国内人口流动导致本地传播的风险需引起关注。

关键词：疟疾,间日流行病学研究疾病影响状态调查

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代谢组及蛋白质组结合分析揭示乙肝病毒对宿主代谢的影响机制

代谢组及蛋白质组结合分析揭示乙肝病毒对宿主代谢的影响机制

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第十九届全国波谱学学术会议

作者：李洪德朱万娣张磊柯雷和花吴香玉郭林陈新文王玉兰唐惠儒中国科学院生物磁共振重点实验室波谱与原子分子物理国家重点实验室武汉磁共振中心(中国科学院武汉物理与数学研究所) 中国科学院武汉病毒研究所病毒学国家重点实验室武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室浙江大学感染性疾病诊治协同创新中心复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室

乙肝病毒感染是导致肝炎、脂肪肝和肝细胞肝癌的主要病因之一。我们针对乙肝病毒如何影响宿主代谢规律,使用宿主细胞对乙肝病毒感染的代谢应答作为模型,采用代谢组、蛋白质组及定量转录数据相结合的系统生物学方法,测量分析了乙肝病毒... 详细信息

乙肝病毒感染是导致肝炎、脂肪肝和肝细胞肝癌的主要病因之一。我们针对乙肝病毒如何影响宿主代谢规律,使用宿主细胞对乙肝病毒感染的代谢应答作为模型,采用代谢组、蛋白质组及定量转录数据相结合的系统生物学方法,测量分析了乙肝病毒感染导致的细胞代谢组、蛋白质组以及转录变化,对关键代谢途径与乙肝病毒感染之间的关系进行了验证。研究发现乙肝病毒感染导致宿主细胞的代谢发生了系统性的改变,主要表现为乙肝病毒复制可以

关键词：乙肝病毒乙肝病毒感染宿主细胞 HBV 代谢组结合分析

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量子点合成的调控：从活细胞合成到“准生物”合成

量子点合成的调控：从活细胞合成到“准生物”合成

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全国环境纳米技术及生物效应学术研讨会

作者：赵静雅陈刚崔然刘茴茴熊玲红谷亦平谢志雄张志凌胡斌赵怡芳庞代文生物医学分析化学教育部重点实验室武汉大学化学与分子科学学院病毒学国家重点实验室武汉大学高等研究院武汉大学口腔医学院武汉大学生命科学学院

半导体荧光量子点、碳点、石墨烯、碳纳米管、贵金属原子簇、硅点等等,都不同程度地具有发光性质,构成了一大类在生物医学中具有广阔应用前景的功能纳米材料。然而,规模化精确可控制备成为其应用瓶颈（也是整个纳米科技领域亟待解决的...

半导体荧光量子点、碳点、石墨烯、碳纳米管、贵金属原子簇、硅点等等,都不同程度地具有发光性质,构成了一大类在生物医学中具有广阔应用前景的功能纳米材料。然而,规模化精确可控制备成为其应用瓶颈（也是整个纳米科技领域亟待解决的重大科学问题之一）。因此,从新的角度探索具有独特荧光性质的典型纳米材料——量子点的可控制备具有非常重要的意义。能否科学地利用生物体系稳健精准的调控机制来解决纳米生物标记材料制备中化学反应过程精确控制难题呢?为此,我们进行了十年的探索,提出"时-空耦合调控活细胞合成策略"。通过精心设计和简单的化学操作使细胞内原本完全不可能相遇的生化反应（或代谢）途径在恰当的时间和合适的空间相遇,在细胞内实现了多色荧光量子点的可控合成。在真菌细胞--酵母细胞内合成出多色荧光CdSe量子点[1,2];在细菌细胞--金黄色葡萄球菌细胞内合成出荧光CdS0.5Se0.5量子点[3]。在对细胞内量子点合成的分子机理研究[2]基础上,将"时-空耦合"原理从细胞内扩展至细胞外模拟的"准生物体系",即人为构建由金属离子、酸根离子、氨基酸、肽、辅酶和酶等共同组成的简单水溶液合成体系,成功实现了溶度积常数非常小以至于难以在水相中控制其晶体生长过程的超小纳米材料的合成。采用"准生物合成"新方法,合成出不含有毒重金属、超小粒径、近红外Ag2Se量子点[4],甚至还合成出了仅1.8nm的超小粒径而同时又具有优异磁性和近红外荧光性质的Ag2Se@Mn双功能量子点[5]。由于"活细胞合成"和"准生物合成"新方法所得到的量子点荧光性质优异,在实际生物体系的应用中也显示出非常突出的优势[3-6]。

关键词：

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超小粒径磁性-近红外荧光Ag2Se@Mn量子点

超小粒径磁性-近红外荧光Ag2Se@Mn量子点

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中国化学会第30届学术年会

作者：赵静雅陈刚谷亦平张志凌赵怡芳庞代文武汉大学生物医学分析化学教育部重点实验室、化学与分子科学学院、病毒学国家重点实验室、高等研究院武汉大学口腔生物医学工程教育部重点实验室、口腔医学院

研制既小、弛豫率又高、荧光强、且低毒的磁性-近红外双功能量子点是生物医学对生物标记纳米材料领域提出的挑战。传统的合成方法:如种子生长法、高温热解法等制得的AgSe量子点要么具有较大的粒径、要么在油相转水相过程中会包覆较厚的... 详细信息

研制既小、弛豫率又高、荧光强、且低毒的磁性-近红外双功能量子点是生物医学对生物标记纳米材料领域提出的挑战。传统的合成方法:如种子生长法、高温热解法等制得的AgSe量子点要么具有较大的粒径、要么在油相转水相过程中会包覆较厚的表面层,都不能满足制备超小粒径磁性-近红外双功能量子点的需要。本实验室发展的准生物合成法制备的AgSe量子点具有超小粒径,且可直接分散在水中[1]。在此基础上,我们采用准生物体系合成超小粒径AgSe量子点,作为主体材料。由于在这些超小粒径的AgSe量子点表面富含Ag,因此,采用离子介导表面组成调节法,制得了超小粒径磁功能化的近红外AgSe@Mn量子点,其平均粒径仅1.8 nm,具有优异的近红外荧光性能（荧光量子产率:13.2%）和磁性能(纵向弛豫率1.87 mMs,是目前临床MRI造影剂Gd-DTPA的4倍),不含有毒重金属元素。结合电穿孔技术,发展了一种可靠的瞬时且高效标记（几毫秒电穿孔,几分钟即完成标记,标记效率>90%）微囊泡的方法。基于AgSe@Mn量子点同时具有的优异磁共振成像和近红外荧光成像能力以及良好的稳定性,实现了微囊泡的活体行为长时间实时跟踪,并原位、无损、半定量揭示了其在活体全身中的动态分布。

关键词：量子点小粒径近红外磁性活体成像

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大黄素体外抗柯萨奇病毒B_4的实验研究

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中南民族大学学报（自然科学版） 2015年第1期34卷 56-61页

作者：刘钊马年钟研杨占秋中南民族大学学报编辑部武汉430074 武汉大学医学院医学病毒所病毒学国家重点实验室武汉430071

为研究大黄素的体外抗柯萨奇病毒B4（CVB4）作用,以病毒唑为阳性对照药,用MTT法从药物抑制病毒增殖、直接杀灭和抗吸附3种方式评价了大黄素抗CVB4效果,并用实时定量PCR检测了大黄素对CVB4基因mRNA表达的影响,用空斑法测定了大黄素对病... 详细信息

为研究大黄素的体外抗柯萨奇病毒B4（CVB4）作用,以病毒唑为阳性对照药,用MTT法从药物抑制病毒增殖、直接杀灭和抗吸附3种方式评价了大黄素抗CVB4效果,并用实时定量PCR检测了大黄素对CVB4基因mRNA表达的影响,用空斑法测定了大黄素对病毒感染细胞不同时间空斑形成率的影响.结果表明：大黄素不能直接杀灭病毒或阻断病毒吸附细胞,但能显著抑制病毒在细胞内的生物合成,其IC50=（14.10±0.74）μM,TI=（4.35±0.60）,能显著降低细胞内CVB4基因mRNA表达（p〈0.05）,其抑制作用发生在病毒进入细胞0-4 h.故大黄素主要通过抑制CVB4穿入细胞后复制环节发挥抗病毒作用,并具有时间依赖性和剂量依赖性.

关键词：大黄素柯萨奇病毒B4 抗病毒作用

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IFN-λ4与HCV感染最新研究进展

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生命的化学 2015年第4期35卷 491-494页

作者：李宁侯炜武汉大学基础医学院医学病毒学研究所/病毒学国家重点实验室武汉430071

干扰素(interferon,IFN)为体内主要的抗病毒细胞因子,新发现的III型干扰素IFN-λ4与丙型肝炎病毒(HCV)的自发清除或治疗无效密切相关。IFN-λ4只能存在于携带IFNL4-ΔG等位基因(rs368234815)个体,它是预测HCV清除的最佳宿主因素。IFN-λ... 详细信息

干扰素(interferon,IFN)为体内主要的抗病毒细胞因子,新发现的III型干扰素IFN-λ4与丙型肝炎病毒(HCV)的自发清除或治疗无效密切相关。IFN-λ4只能存在于携带IFNL4-ΔG等位基因(rs368234815)个体,它是预测HCV清除的最佳宿主因素。IFN-λ4也通过IFN-λ受体复合物传递信号,并通过激活JAK-STAT途径诱导干扰素刺激基因(IFN-stimulatedgene,ISG)的表达。IFN-λ4能诱导抗病毒活性,却同时影响了HCV的有效清除。因此,解决IFN-λ4这种看似矛盾的功能问题,可能会对HCV感染和干扰素生物学的免疫反应产生重要的新见解。

关键词： Ⅲ型干扰素(IFN-λ) 丙型肝炎病毒单核苷酸多态性(SNP)

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