检索结果-内蒙古大学图书馆

水凝胶上培养的原代人脐静脉内皮细胞感染登革病毒Ⅱ型对细胞产生IL-29的表达影响

中华微生物学和免疫学杂志 2015年第1期35卷 7-13页

作者：崔丽丽余芳芳马静裴华左丽贵阳医学院免疫学教研室 550004

目的：利用水凝胶（hydrogel）模拟人血管内皮细胞基底膜弹性硬度，以登革病毒2型（DENV-2）NGC株感染接种于水凝胶为基底的原代人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVECs），观察HUVECs在不同弹性硬度材质上... 详细信息

目的：利用水凝胶（hydrogel）模拟人血管内皮细胞基底膜弹性硬度，以登革病毒2型（DENV-2）NGC株感染接种于水凝胶为基底的原代人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVECs），观察HUVECs在不同弹性硬度材质上培养产生IL-29的情况。方法分离培养原代HUVECs，将细胞接种于水凝胶，以MOI（multiplicity of infection）＝10的DENV-2感染原代HUVECs，流式细胞术检测48 h细胞凋亡率及病毒感染率，并送检mRNA基因表达谱芯片，通过实时荧光定量PCR及双抗体夹心ELISA法检测IL-29的表达情况。结果 DENV-2感染原代HUVECs 48h，培养于水凝胶上的细胞的病毒感染率较低，细胞凋亡率与未感染组比较，差异无统计学意义（P＞0．05），基因芯片检测发现IL-29的产生与普通塑料培养瓶接种的脐静脉内皮细胞受到DENV-2感染后存在差异，实时荧光定量PCR和双抗体夹心ELISA法检测IL-29的表达，差异均存在统计学意义（P＜0．05）。结论水凝胶模拟人血管内皮细胞基底膜硬度，用DENV-2感染接种于水凝胶上脐静脉内皮细胞，基因芯片检测发现IL-29的产生，与体外正常培养条件下受到DENV-2感染后存在差异，水凝胶的建立可能为DENV发病机制的研究提供一个新的模型。

关键词：登革病毒 IL-29 水凝胶人脐静脉内皮细胞

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人γδT细胞TCR分子与结核杆菌多肽抗原特异性结合的证据

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第1期25卷 15-20页

作者：陈勇李柏青蚌埠医学院免疫学教研室 233003

目的　探讨γδT细胞对结核杆菌抗原 (Mtb Ag)识别的分子机制。方法　采集人外周血 (PB) ,分别经抗TCRγδ PE和FITC标记的Mtb Ag及其纯化的不同组分 ,结核杆菌高分子量蛋白组分 (Mtb HW Ag)、低分子量多肽组分 (Mtb LW Ag)或Mtb Ag峰 ... 详细信息

目的　探讨γδT细胞对结核杆菌抗原 (Mtb Ag)识别的分子机制。方法　采集人外周血 (PB) ,分别经抗TCRγδ PE和FITC标记的Mtb Ag及其纯化的不同组分 ,结核杆菌高分子量蛋白组分 (Mtb HW Ag)、低分子量多肽组分 (Mtb LW Ag)或Mtb Ag峰 3单一主肽抗原 (Mtb Ag Pk3)进行双标记染色 ,或使用过量Mtb Ag先与细胞预处理 ,然后再做上述染色 ,用流式细胞仪检测γδT细胞上结合的抗TCRγδ PE荧光强度变化。将人外周血PBMC经Mtb Ag刺激 2 4h后 ,使用抗TCRγδ PE和Mtb Ag FITC染色 ,用激光共聚焦显微镜观察γδT细胞表面TCRγδ分子的聚集。结果　经流式细胞仪分析 ,Mtb Ag及其纯化的Mtb LW Ag、Mtb Ag Pk3均可与γδT细胞发生特异性直接结合 ,而且Mtb Ag可有效阻断抗TCRγδ单抗与γδT细胞的结合。而Mtb HW Ag与γδT细胞并无特异性结合效应。经激光共聚焦显微镜观察 ,Mtb Ag可显著激活γδT细胞而诱导TCRγδ分子发生功能性聚集化。结论　γδT细胞通过其表面的TCRγδ分子可直接结合Mtb Ag ,而Mtb Ag Pk3多肽可能是Mtb Ag发挥其结合效应的有效成分。Mtb Ag可激活γδT细胞并诱导TCRγδ分子聚集 ,而可能参与功能性脂筏 (raft)的形成。

关键词： γδT细胞 TCR 结核杆菌多肽抗原人外周血 FITC 激光共聚焦显微镜特异性结合脂筏分子

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德国洋甘菊精油对咪喹莫特诱导的BALB/c小鼠皮肤银屑病样损害的作用研究

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临床皮肤科杂志 2025年第5期 269-275页

作者：吕曹华廖国艳葛维维吕荫宜吴双杜云婷陈光台州市第二人民医院皮肤科台州学院医学院病原生物与免疫学教研室辽宁省肿瘤医院检验科

目的：研究德国洋甘菊精油（MCEO）预处理对咪喹莫特（imiquimod,IMQ）诱导的BALB/c小鼠银屑病样皮肤炎症的保护作用。方法：取28只6～8周体重约为20 g的雌性BALB/c小鼠，随机分为3组：正常对照组（n=8）、IMQ模型组（n=12）和MCEO预处... 详细信息

目的：研究德国洋甘菊精油（MCEO）预处理对咪喹莫特（imiquimod,IMQ）诱导的BALB/c小鼠银屑病样皮肤炎症的保护作用。方法：取28只6～8周体重约为20 g的雌性BALB/c小鼠，随机分为3组：正常对照组（n=8）、IMQ模型组（n=12）和MCEO预处理+IMQ组（n=8）。正常对照组小鼠予橄榄油外涂背部皮肤，每日2次，连续7日；IMQ模型组小鼠予IMQ外涂背部皮肤，每日1次，连续7日；MCEO预处理+IMQ组小鼠予MCEO外涂背部皮肤预处理，每日2次，连续7日，随后予IMQ（每日1次）+MCEO（每日2次）连续外涂背部7日。每日观察小鼠皮损情况，根据银屑病皮损面积及严重程度指数（psoriasis area and severity index,PASI）进行评分，HE染色观察皮肤损伤情况。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（quantitative realtime reverse transcriptase polymerase chain reaction,qRT-PCR）检测小鼠皮肤组织中炎性细胞因子白细胞介素（IL）-6和IL-1βm RNA的表达水平，采用液相芯片技术（Luminex）检测小鼠外周血中炎性细胞因子IL-1β、肿瘤坏死因子（TNF）-α、干扰素（IFN）-γ、IL-10和IL-17A的水平。Western blotting法观察小鼠皮肤组织中丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路蛋白的表达水平。结果：与正常对照组相比，IMQ模型组小鼠背部出现明显的红斑、鳞屑和银屑病样皮损，表皮角化过度伴角化不全，炎性细胞浸润。与IMQ模型组相比，MCEO预处理+IMQ组中MCEO预处理明显改善了小鼠皮损情况，角化过度和角化不全明显减轻，仅见少量炎性细胞浸润；小鼠皮肤组织中IL-6和IL-1β mRNA以及外周血中IL-1β、TNF-α和IFN-γ的表达水平均显著降低（P均<0.05）；小鼠皮肤组织中p-PI3K/PI3K、pm TOR/mTOR和p-p38/p38 MAPK蛋白的表达水平均显著降低（P均<0.05）。结论：MCEO预处理可明显改善IMQ诱导的小鼠皮肤银屑病样损害及皮肤炎性细胞浸润，其保护性作用机制与MCEO预处理抑制PI3K/mTOR和p38 MAPK信号通路活性、下调皮肤组织和外周血中IL-6、IL-1β、TNF-α和IFN-γ等炎性细胞因子的表达水平密切相关。

关键词：德国洋甘菊精油预处理银屑病咪喹莫特 BALB/c小鼠炎症

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基于环糊精的环境敏感型水凝胶的研究进展

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药学学报 2010年第8期45卷 960-965页

作者：袁园张莉武警医学院药剂学教研室天津300162

介绍基于环糊精环境敏感型水凝胶及其在给药系统中的应用,为其在药剂学中的应用提供理论依据。通过查阅近年国内外文献,对基于环糊精的物理、化学和生物化学刺激敏感型水凝胶的材料分类、设计原理、作用机制及其应用特点进行详细的阐述... 详细信息

介绍基于环糊精环境敏感型水凝胶及其在给药系统中的应用,为其在药剂学中的应用提供理论依据。通过查阅近年国内外文献,对基于环糊精的物理、化学和生物化学刺激敏感型水凝胶的材料分类、设计原理、作用机制及其应用特点进行详细的阐述。目前,对基于环糊精的各种环境敏感型水凝胶的研究备受关注,其感应病变部位各种环境信息的变化,实现药物控制释放。虽然迄今为止多数仍停留在实验研究阶段,但可以预见该类水凝胶在智能给药系统研究领域有着广阔的应用前景。

关键词：环糊精包合物环境敏感水凝胶药物传递药物控制释放组织工程

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T_(H1)T_(H2)型细胞因子对人绒毛膜组织hCG分泌的影响

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免疫学杂志 2002年第6期18卷 485-486页

作者：王越陈晓牛秀珑潘菊芬武警医学院免疫学教研室天津300162 武警医学院附属医院妇产科天津300162 天津医科大学免疫学教研室天津300070

本研究应用人妊娠早期新鲜绒毛组织体外分泌人绒毛膜促性腺激素(hCG)的模型，探讨T_(H1)/T_(H2)型细胞因子对hCG分泌的影响，初步阐明T_(H1)型/T_(H2)型细胞因子在人类早期妊娠中的免疫调节作用，为今后临床诊断及治疗提供参考依据。

关键词： TH1/TH2型细胞因子绒毛膜组织促性腺激素早期妊娠免疫调节

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青蒿素的免疫抑制作用及其调控机制研究

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中国药理学通报 2011年第6期27卷 848-854页

作者：李覃陈虹梅昕那春祺韦娜曹波白淑芳天津武警医学院免疫学教研室天津市职业与环境危害生物标志物重点实验室天津武警医学院生药学教研室天津300162

目的初步探讨青蒿素(artemisinin,Art)体内外发挥免疫抑制作用的调控机制。方法体外研究检测Art对小鼠淋巴细胞增殖及细胞毒性的影响。体内研究中,通过迟发型超敏反应(delayed-type hypersensitivity,DTH)小鼠模型,分析不同剂量Art对小... 详细信息

目的初步探讨青蒿素(artemisinin,Art)体内外发挥免疫抑制作用的调控机制。方法体外研究检测Art对小鼠淋巴细胞增殖及细胞毒性的影响。体内研究中,通过迟发型超敏反应(delayed-type hypersensitivity,DTH)小鼠模型,分析不同剂量Art对小鼠DTH的效应;RT-PCR技术检测Th1和Th2细胞转录因子T-bet及GATA-3的基因表达;ELISA法检测转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)的含量;Western blot方法检测p38丝裂酶原激活蛋白激酶(p38 MAPK)蛋白的活性表达水平。结果 Art明显抑制刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)诱导的T淋巴细胞增殖;与地塞米松相比,具有更高的安全性。体内给药后,Art能够减轻DTH小鼠耳肿胀;降低小鼠的脾指数和胸腺指数;调节Th1/Th2细胞分化过程中特异性转录因子T-bet和GATA-3的mRNA表达水平;增加TGF-β1水平;抑制p38 MAPK的磷酸化活性表达。结论提取自传统中草药的Art是一种高效低毒的新型免疫调节剂,通过多种途径发挥免疫抑制作用。

关键词：青蒿素免疫抑制迟发型超敏反应 Th1 Th2 p38 MAPK

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氦氖激光照射胸腺区促进荷瘤小鼠T细胞的CD59表达与活化信号转导

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中国激光 2009年第10期36卷 2603-2608页

作者：徐鹤高美华青岛大学医学院免疫学教研室山东青岛266071

探讨低功率氦氖激光照射对荷瘤小鼠T细胞CD59表达及其功能的影响。将(BALB/C)小鼠分为4组:Ⅰ组不做处理;Ⅱ组仅致瘤;Ⅲ组致瘤后每日照射胸腺区;Ⅳ组致瘤后隔日照射胸腺区。致瘤后第20天处死小鼠,分离培养胸腺T细胞。采用噻唑蓝(MTT)比... 详细信息

探讨低功率氦氖激光照射对荷瘤小鼠T细胞CD59表达及其功能的影响。将(BALB/C)小鼠分为4组:Ⅰ组不做处理;Ⅱ组仅致瘤;Ⅲ组致瘤后每日照射胸腺区;Ⅳ组致瘤后隔日照射胸腺区。致瘤后第20天处死小鼠,分离培养胸腺T细胞。采用噻唑蓝(MTT)比色法测T细胞增殖,用免疫组化和免疫荧光测T细胞CD59表达量,然后用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测T细胞活化后白介素2(IL-2)水平,用激光共聚焦测T细胞胞浆内钙离子变化,以及用流式细胞术测T细胞活化为CD2+5T细胞的能力。结果表明,照射组肿瘤生长受抑;荷瘤组T细胞的CD59表达量、白介素2水平、增殖能力、钙离子浓度及活化的CD2+5T细胞水平均低于正常组,但照射组明显高于非照射组。由此可见,激光照射促进了荷瘤小鼠T细胞CD59的表达,增强了其活化信号的转导。

关键词：医用光学免疫病理学氦氖激光照射免疫调节 CD59 胸腺T细胞小鼠

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妊娠高血压综合征发病中免疫调节机制的研究

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免疫学杂志 2004年第2期20卷 128-130页

作者：王越叶路付正英潘菊芬武警医学院免疫学教研室天津300162 武警医学院附属医院妇产科天津300162 天津医科大学免疫学教研室天津300070

目的　探讨T细胞表型亚群及TH1 TH2 功能亚群在妊娠高血压综合征 (妊高征 )发病中的免疫调节机制。方法　选择妊高征患者 2 8例及同期分娩的正常健康产妇 2 0例。植物血凝素 (PHA)诱导的外周血T细胞表型及TH1 型 TH2 型细胞因子分别应... 详细信息

目的　探讨T细胞表型亚群及TH1 TH2 功能亚群在妊娠高血压综合征 (妊高征 )发病中的免疫调节机制。方法　选择妊高征患者 2 8例及同期分娩的正常健康产妇 2 0例。植物血凝素 (PHA)诱导的外周血T细胞表型及TH1 型 TH2 型细胞因子分别应用流式细胞仪和ELISA法进行检测。结果　与对照组相比 ,妊高征患者外周血的CD3+ T细胞变化不明显 ;轻度患者CD4 + T细胞变化不明显 ,而中、重度患者则增加明显 ;CD8+ T细胞随病情加重而逐渐减少。妊高征患者IL 2和IFN γ水平较正常对照组明显升高 ,其升高程度与病情加重呈正相关 ;IL 4水平变化不显著 ,轻度患者的IL 10水平变化不显著 ,而中、重度患者明显降低。结论　妊高征的发生可能与CD4 + /CD8+ T细胞比例失调 ,以及TH1 TH2 功能亚群向TH1

关键词：妊娠高血压综合征 T细胞表型亚群流式细胞仪 TH1/TH2功能亚群

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人胎盘源间充质干细胞通过CD73/Nrf2途径抑制Th1细胞分泌TNF-α减轻急性移植物抗宿主病小鼠肝损伤机制研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2023年第9期43卷 663-670页

作者：吴沄桦张恒超韩凯悦赵雅萱栾希英滨州医学院免疫学教研室烟台264003

目的:探究人胎盘源间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPMSCs)通过CD73/核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)途径抑制CD4^(+)IFN-γ+T(Th1)细胞分泌TNF-α减轻急性移植物抗宿主病(graft versus-host disease,GVHD)小鼠肝损伤的作用机制。方法:流式细胞术分析GVHD小鼠外周血和肝组织中Th1细胞对TNF-α的表达以及CD4^(+)IFN-γ+TNF-α+T(TNF-α+Th1)细胞上PD-1的表达水平。采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、马松(Masson)染色和免疫荧光染色观察各组GVHD小鼠肝组织病理变化,并进一步用HE染色观察各组GVHD小鼠皮肤和肺组织病理变化。体外建立非条件性外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)向Th1细胞诱导方案,检测TNF-α+Th1细胞比例以及其Nrf2和磷酸化细胞核内核因子-κB(phosphorylated nuclear factor-kappa B,p-NF-κB)的平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)。结果:与正常对照组相比,GVHD发病高峰组小鼠外周血和肝组织中TNF-α+Th1细胞比例和TNF-α+Th1细胞对PD-1的表达明显升高(P<0.01);hPMSCs干预可降低小鼠外周血和肝组织中TNF-α+Th1细胞比例(P<0.001),促进小鼠外周血和肝组织中TNF-α+Th1细胞对PD-1的表达(P<0.01,P<0.001),然而shCD73对小鼠外周血和肝组织中TNF-α+Th1细胞的干预效果明显减弱(P<0.05,P<0.01)。肝组织病理学分析结果显示,肝脏中TNF-α+Th1细胞比例分别与Suzuki′s评分、胶原面积和α-SMA的MFI呈正相关(P<0.001)。同样,皮肤和肺组织病理学分析结果也显示,外周血中TNF-α+Th1细胞比例分别与皮肤的Cetkovic-Cvrlje评分和肺的Qiao Shukai评分呈正相关(P<0.001)。PBMCs活化实验也显示hPMSCs能下调TNF-α+Th1细胞比例(P<0.01),上调TNF-α+Th1细胞对PD-1的表达(P<0.05);进一步分析发现hPMSCs可增强TNF-α+Th1细胞中Nrf2的MFI(P<0.05),减弱p-NF-κB的MFI(P<0.01)。结论:hPMSCs可能通过CD73/Nrf2途径上调PD1的表达,抑制TNF-α+Th1细胞形成,进而减轻GVHD小鼠肝损伤。

关键词：人胎盘源间充质干细胞 Th1细胞 PD-1 CD73 Nrf2 NF-κB

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前纤维蛋白多克隆抗体对刚地弓形虫在小鼠胚胎成纤维细胞中增殖的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2019年第4期37卷 437-443页

作者：杨瑞熊乙丁郭珊珊廖业夏嫱郭锦锦杜联峰遵义医学院珠海校区免疫学教研室

目的制备抗刚地弓形虫前纤维蛋白(TgPRF)的多克隆抗体,初步研究其对刚地弓形虫在小鼠胚胎成纤维细胞中增殖的影响。方法提取刚地弓形虫RH株RNA、扩增TgPRF基因,并构建pET-30a(+)-TgPRF重组质粒,将其转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞... 详细信息

目的制备抗刚地弓形虫前纤维蛋白(TgPRF)的多克隆抗体,初步研究其对刚地弓形虫在小鼠胚胎成纤维细胞中增殖的影响。方法提取刚地弓形虫RH株RNA、扩增TgPRF基因,并构建pET-30a(+)-TgPRF重组质粒,将其转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,用异丙基-β-D-硫代半乳糖昔(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定蛋白表达情况。目的蛋白经AKTA系统进行亲和层析纯化和超滤浓缩后进行蛋白质印迹分析(Western blotting).将2mg纯化的重组蛋白TgPRF与等体积弗氏完全佐剂混合乳化后,背部皮下多点注射免疫新西兰兔2只,首次免疫后每隔2周,用1mg纯化的重组蛋白空PRF与等体积弗氏不完全佐剂加强免疫3次,末次免疫后10d心脏采血。免疫后血清进行Western blotting鉴定及ELISA抗体效价检测。将胚胎成纤维细胞接种于96孔板中(4×10^3,个细胞/孔),并加入10^4个刚地弓形虫速殖子(RH-GFP)。设空白对照组(A组),抗体干预组(Bl、B2和B3组),阴性血清组(C组)。B1、B2和B3组分别加入1:20、1:80、1:200稀释的抗TgPRF兔血清100μl;C组加入1:20稀释的免疫前兔血清100μl,每组均设3个复孔。培养72h后荧光显微镜观察,通过Imagepro6.0软件分析虫体增殖情况。采用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果PCR扩增TgPRF基因片段为510bp,pET-30a(+)-TgPRF经测序与目的序列完全一致。经IPTG诱导表达,TgPRF蛋白相对分子质量(M1)约为25000,且高表达条带主要存在于上清中。TgPRF蛋白经纯化浓缩后浓度为4mg/ml,Western blotting分析显示,在M1 25000处出现特异性条带。经细胞计数试剂盒(CCK-8法)检测,抗TgPRF血清对胚胎成纤维细胞未见毒性损伤。ELISA检测抗ZgPRF血清抗体效价>1:10^5;各实验组细胞于感染24h时,A组(0.62±0.23)及C组(0.74±0.25)相对虫体数量高于B1组(0.35±0.16)(P<0.05),但与B2和B3组间差异无统计学意义(P>0.05),B1-B3组虫体增殖抑制率分别为43.5%、11.4%、3.6%。感染48h时,A组(3.61±0.66)与C组(3.38±0.78)相对虫体数量明显高于B1-B3组(P<0.01),而B1组(1.09±0.58)与B2组(1.92±0.73)低于B3组(2.47±0.84)(P<0.05),B1-B3组虫体增殖抑制率分别增高至69.9%、46.9%、31.7%;感染72h时,A组(19.90±3.92)与C组(20.61±4.07)相对虫体数量高于B1组(5.58±2.43)与B2组(8.06±2.66)(P<0.01),B3组(16.02±6.46)明显升高。B1-B3组抑制率分别为72.0%、59.5%、19.5%。结论弓形虫TgPRF蛋白能有效刺激新西兰兔产生抗体,且TgPRF兔血清抗体在体外能有效抑制弓形虫速殖子在小鼠胚胎成纤维细胞中的增殖并呈现明显的量效关系,但并不能完全消除虫体。

关键词：刚地弓形虫前纤维蛋白多克隆抗体原核表达

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