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IL-6通过促进人胎盘间充质干细胞上CD73的表达调节其迁移、黏附和增殖能力

中华微生物学和免疫学杂志 2022年第12期42卷 940-948页

作者：张恒超赵楠楠张加深韩凯悦赵雅萱戚荣栾希英滨州医学院免疫学教研室烟台264003

目的探讨IL-6影响人胎盘间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPMSCs)表面CD73的表达,以及调节其迁移、黏附和增殖的作用机制。方法流式细胞术(flow cytometry,FCM)和Western blot分析外源性IL-6和hPMSCs分泌的IL-6对hPMSCs上CD73表达的影响。单克隆抗体阻断和Western blot方法检测IL-6对hPMSCs中信号转导及转录激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)磷酸化的影响。实时无标记动态细胞分析技术(real-time cellular analysis,RTCA)分析慢病毒转染后低表达CD73的hPMSCs和APCP(5′-α,β亚甲基-二磷酸腺苷)预处理后hPMSCs的迁移、黏附和增殖变化。结果FCM与Western blot检测结果显示,外源性和hPMSCs分泌的IL-6均能促进CD73在hPMSCs上的表达(P<0.001,P<0.01)。IL-6R抑制剂处理后,hPMSCs上CD73表达明显下降(P<0.01);IL-6可上调hPMSCs内STAT3磷酸化和CD73水平(P<0.05,P<0.01),而加入STAT3抑制剂后,CD73表达下降(P<0.01)。RTCA分析结果显示,敲低hPMSCs上CD73的表达后,hPMSCs的黏附和增殖能力均明显降低(P<0.01,P<0.05),迁移能力明显上升(P<0.05)。使用APCP抑制hPMSCs上CD73水解酶活性后,hPMSCs同样表现出黏附和增殖能力明显降低,而迁移能力增强(P<0.05)。结论IL-6能够通过JAK/STAT3通路增强hPMSCs上CD73的表达,进而影响其迁移、黏附和增殖能力。

关键词：间充质干细胞胎盘 IL-6 CD73 迁移黏附增殖

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HLA-A＊3101、B＊4001、B＊5801、DRB1＊1602 等位基因与遵义地区汉族肾综合征出血热发病的相关性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第11期30卷 1004-1007页

作者：秦娜琳兰惠琴徐林汤贤英孙万邦姚新生罗军敏遵义医学院免疫学教研室 563003

目的探讨HLA-A＊31、B＊40、B＊58、DRB1＊16位点基因多态性与遵义地区汉族肾综合征出血热（HFRS）的关联性.方法采用群体研究方法,应用聚合酶链反应-序列特异性引物（PCR-SSP）技术对100例HFRS患者（患者组）和100例健康对照者（健... 详细信息

目的探讨HLA-A＊31、B＊40、B＊58、DRB1＊16位点基因多态性与遵义地区汉族肾综合征出血热（HFRS）的关联性.方法采用群体研究方法,应用聚合酶链反应-序列特异性引物（PCR-SSP）技术对100例HFRS患者（患者组）和100例健康对照者（健康对照组）进行HLA-A＊31、B＊40、B＊58、DRB1＊16基因亚型分型,比较基因频率（GF）,并计算其相对危险度（RR）.结果 HFRS患者组HLA-A＊3101、B＊5801、DRB1＊1602的基因频率均较对照组明显增高（RR=13.825,x2=4.296,P=0.038 RR=2.614,x2=6.133,P=0.013 RR=8.523,x2=8.865,P=0.003）,差异有统计学意义（P均＜0.05）患者组HLA-B＊4001的基因频率较对照组明显降低（RR=0.414,x2=6.640,P=0.010）,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论遵义地区汉族人群中,HLA-A＊3101、B＊5801、DRB1＊1602等位基因与HFRS呈正相关,HLA-B＊4001等位基因与HFRS呈负相关.

关键词：人类白细胞抗原基因亚型肾综合征出血热相关性

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两株登革2型病毒E基因重组质粒免疫BALB／c小鼠产生特异性抗体水平的比较

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第3期29卷 229-233页

作者：王娇左丽王丛李学政贵阳医学院免疫学教研室 550004

目的用含登革2型病毒（Dengue type2virus，DEN2）B株和NGC株E基因部分序列pcDNA3．1重组质粒初次和加强免疫BALB／c小鼠，观察免疫小鼠体液免疫应答的差异。方法用两株含DEN2E基因部分序列（1～476bp）的pcDNA3．1重组质粒与含有佐剂... 详细信息

目的用含登革2型病毒（Dengue type2virus，DEN2）B株和NGC株E基因部分序列pcDNA3．1重组质粒初次和加强免疫BALB／c小鼠，观察免疫小鼠体液免疫应答的差异。方法用两株含DEN2E基因部分序列（1～476bp）的pcDNA3．1重组质粒与含有佐剂的重组质粒共同免疫BALB／c小鼠，初次免疫后第14天、28天分别加强免疫1次，共免疫3次。收集初次免疫后第14、28、42、70和98天外周血标本，间接ELISA法测定小鼠血浆特异性IgM／IgG类抗体水平，细胞病变抑制法检测特异性抗体水平。结果不同DEN2毒株E基因部分序列的pcDNA3．1重组质粒初次和加强免疫BALB／c小鼠诱导特异性IgM、IgG类抗体的产生存在差异，B株重组质粒加强免疫小鼠后特异性抗体效价水平较高并持续较长时间。结论DEN2两毒株E基因部分序列重组质粒免疫小鼠后诱生的特异性抗体类别、水平存在差异。

关键词：登革2型病毒 E基因重组质粒 BALB/c小鼠特异性抗体

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两株登革2型病毒E、NS1蛋白基因序列测定及其系统发生分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2004年第4期24卷 287-291页

作者：郝牧左丽舒莉萍李永念贵阳医学院免疫学教研室 550004

目的　对从登革出血热 (denguehemorrhagicfever,DHF)病人血清分离到的一株登革 2型病毒 (denguevirustype 2 ,DEN 2B株 )和DEN 2NGC株作E、NS1蛋白部分基因序列测定并进行系统发生树分析 ,了解其变异及分子进化特征。方法　利用RT PCR... 详细信息

目的　对从登革出血热 (denguehemorrhagicfever,DHF)病人血清分离到的一株登革 2型病毒 (denguevirustype 2 ,DEN 2B株 )和DEN 2NGC株作E、NS1蛋白部分基因序列测定并进行系统发生树分析 ,了解其变异及分子进化特征。方法　利用RT PCR法扩增B株和NGC株E、NS1部分基因片段 ,PCR产物直接测序 ;利用DNAssist软件预测其氨基酸序列 ,以及PHYLIP软件的CLUSTAL方法绘制系统发生树。结果　B株与NGC株E蛋白基因区第 1～ 4 76nt( 4 76bp)碱基序列存在 8个位点的差异 ;编码氨基酸存在 4个位置的不同 ;NS1基因区第 5 89～ 10 0 2nt( 4 13bp)碱基序列存在 7个位点的差异 ,编码氨基酸有 2个位置的改变 ;B株与NGC株和DEN 2 4 4株E区部分片段核苷酸同源性分别为99 .1%和 98.7% ;与NS1区部分片段核苷酸同源性分别为 98.3%和 98.1%。B株E基因、NS1基因序列已登录GenBank ,注册号分别为AY179733和AY2 384 71。结论　B株E、NS1基因序列和氨基酸序列与NGC株存在差异 ;B株与我国海南 1989年流行的DEN 2 4 4株和NGC株系统进化关系较近。

关键词：登革2型病毒 E基因 NS1基因系统发生树基因序列登革出血热

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登革病毒Ⅱ型对人脐静脉血管内皮细胞通透性的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2011年第7期31卷 592-596页

作者：任玮左丽吕秉乐崔冬冰贵阳医学院免疫学教研室 550004

目的研究登革病毒Ⅱ型（DENV-2）对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）通透性的影响。方法DENV一2病毒滴定，DENV-2接种HUVEC单层细胞，用间接免疫荧光法动态观察DENV-2感染HUVEC的情况（30min，1、3、6、12、24、30、36、42、48、72b），... 详细信息

目的研究登革病毒Ⅱ型（DENV-2）对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）通透性的影响。方法DENV一2病毒滴定，DENV-2接种HUVEC单层细胞，用间接免疫荧光法动态观察DENV-2感染HUVEC的情况（30min，1、3、6、12、24、30、36、42、48、72b），实时定量荧光PCR方法检测病毒载量，transwell法检测DENV-2对HUVEC通透性的影响，透射电镜观察细胞超微结构的改变。结果DENV－2对HUVEC通透性的影响30min时作用最为明显，其次为42h时。且病毒载量与HUVEC通透性改变呈正相关。透射电镜结果显示有细胞微绒毛脱落，胞质溶解，部分核膜间隙增宽，甚至是细胞核中也存在裂隙，部分线粒体嵴消失甚至空化，线粒体髓样变，包膜不完整。结论DENV-2对HUVEC通透性有影响，为探究登革病毒的发病机制提供一定的理论依据。

关键词：登革病毒人脐静脉血管内皮细胞通透性

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肾衰宁对系膜细胞产生细胞间黏附分子的影响

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天津医药 2006年第3期34卷 183-184页

作者：王景明孙奕天津武警医学院附属医院肾内科 300162 武警医学院免疫学教研室

目的:探讨具有益气固本、化瘀泄浊作用的中药复方制剂肾衰宁灌肠液(简称肾衰宁,SSN)防治慢性肾功能衰竭(CRF)的作用机制。方法:采用双抗夹心ELISA法,观察体外培养的人肾小球系膜细胞分别加入重组rhIL-1β(A组)及rhIL-1β+SSN大鼠血清(B... 详细信息

目的:探讨具有益气固本、化瘀泄浊作用的中药复方制剂肾衰宁灌肠液(简称肾衰宁,SSN)防治慢性肾功能衰竭(CRF)的作用机制。方法:采用双抗夹心ELISA法,观察体外培养的人肾小球系膜细胞分别加入重组rhIL-1β(A组)及rhIL-1β+SSN大鼠血清(B组)后产生细胞间黏附分子1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)的水平。结果:A组人肾小球系膜细胞产生ICAM-1和VCAM-1增加,B组低于A组,且随SSN药物浓度的增加ICAM-1和VCAM-1越少。结论:SSN对rhIL-1β刺激后肾小球系膜细胞所产生的ICAM-1和VCAM-1有明显的抑制作用,提示SSN抑制系膜细胞自分泌ICAM-1和VCAM-1是预防肾小球硬化发生发展的重要作用机制之一。

关键词：肾衰宁灌肠肾小球膜肾功能衰竭,慢性胞间粘附分子1 血管细胞粘附分子-1

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白藜芦醇抗肝癌Bel-7402及调节荷瘤鼠IL-8分泌机制的研究

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中药材 2008年第5期31卷 697-702页

作者：李覃王伟李彤天津武警医学院免疫学教研室天津300162 天津武警医学院附属医院肾病科天津300162 武警新疆总队医院特检科新疆乌鲁木齐830000

目的:探讨白藜芦醇离体与在体对肝癌细胞Bel-7402的抑制作用及可能的效应机制。方法:MTT比色法测定Bel-7402细胞生长抑制率,Western blotting测定Bel-7402细胞Bcl-2水平,流式细胞术分析细胞周期,流式细胞染色检测细胞内IL-8,半定量RT-PC... 详细信息

目的:探讨白藜芦醇离体与在体对肝癌细胞Bel-7402的抑制作用及可能的效应机制。方法:MTT比色法测定Bel-7402细胞生长抑制率,Western blotting测定Bel-7402细胞Bcl-2水平,流式细胞术分析细胞周期,流式细胞染色检测细胞内IL-8,半定量RT-PCR与双抗体夹心ELISA法检测荷瘤小鼠IL-8 mRNA表达与含量。结果:白藜芦醇可以时间-剂量依赖性抑制Bel-7402细胞增殖,诱导凋亡,影响细胞周期分布。此外,白藜芦醇还能剂量依赖性抑制荷瘤小鼠细胞内IL-8产生及其mRNA与蛋白含量。结论:白藜芦醇离体与在体均能发挥有效的抗肝癌生物学活性和免疫调节作用。

关键词：白藜芦醇细胞凋亡肝癌免疫调节

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结核杆菌抗原活化的γδT细胞中ZAP-70的酪氨酸磷酸化特点

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中华微生物学和免疫学杂志 2004年第11期24卷 874-877页

作者：吕合作陈勇吴俊英李柏青蚌埠医学院免疫学教研室 233003

目的　观察结核杆菌抗原 (Mtb Ag)活化的γδT细胞信号转导分子ZAP 70酪氨酸磷酸化的特点。方法　用Mtb Ag和抗CD3单克隆抗体 (CD3McAb)体外刺激人外周血单个核细胞(PBMC) ,诱导活化 ,在含IL 2的培养液中扩增培养 ,分别获得Mtb Ag激活... 详细信息

目的　观察结核杆菌抗原 (Mtb Ag)活化的γδT细胞信号转导分子ZAP 70酪氨酸磷酸化的特点。方法　用Mtb Ag和抗CD3单克隆抗体 (CD3McAb)体外刺激人外周血单个核细胞(PBMC) ,诱导活化 ,在含IL 2的培养液中扩增培养 ,分别获得Mtb Ag激活的T细胞 (MtbAT)和CD3McAb激活的T细胞 (CD3AT)。再分别用Mtb Ag和CD3McAb刺激 ,在不同时间内提取细胞裂解液 ,用抗酪氨酸磷酸化蛋白抗体作免疫沉淀 ,用抗ZAP 70单克隆抗体进行免疫印迹。结果　MtbAT中γδT细胞可达 6 0 %～ 80 % ,CD3AT中CD3+ 细胞可达 90 %以上 ,而γδT细胞 <10 % ;MtbAT细胞用Mtb Ag再刺激后 15min时出现ZAP 70的酪氨酸磷酸化 ,30min达高峰 ,可持续到 6 0～ 12 0min ,而CD3AT用CD3McAb再刺激后仅在 5min时检测到ZAP 70的磷酸化。结论　与CD3McAb对普通T细胞的作用比较 ,Mtb Ag刺激可优先活化γδT细胞 ,其对γδT细胞ZAP 70活化的特点是 :较慢、较强。

关键词： γδT细胞 CD3 酪氨酸磷酸化结核杆菌抗原刺激活化细胞裂解液细胞信号转导人外周血单个核细胞

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催乳素对葡萄球菌肠毒素A诱导的人外周血T细胞凋亡的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第12期27卷 1127-1131页

作者：郭继强宋向凤牛志国新乡医学院免疫学教研室 453003

目的探讨催乳素(PRL)在T细胞的活化诱导凋亡(activation induced cell death,AICD)中的作用。方法用葡萄球菌肠毒素(SEA)体外刺激人外周血T细胞作为T细胞AICD的模型,在第2次向模型中加入SEA诱导T细胞凋亡的同时,分别加入3种不同浓度的hP... 详细信息

目的探讨催乳素(PRL)在T细胞的活化诱导凋亡(activation induced cell death,AICD)中的作用。方法用葡萄球菌肠毒素(SEA)体外刺激人外周血T细胞作为T细胞AICD的模型,在第2次向模型中加入SEA诱导T细胞凋亡的同时,分别加入3种不同浓度的hPRL(20、300和1000 ng/ml)进行干预,同时设不含hPRL的对照组。0～24 h内,以MTT法检测T细胞的增殖情况。PI染色后用流式技术检测细胞凋亡情况,并通过琼脂糖凝胶电泳检测T细胞凋亡DNA。流式检测T细胞的Fas和FasL的表达水平变化。Western blot法检测T细胞内凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax。结果在T细胞的AICD模型中高浓度PRL组(300、1000 ng/ml)其T细胞增殖得到显著维持(P<0.05),各PRL处理组T细胞凋亡率比对照组降低了32.9%～78.2%(P<0.05)。PRL组(300、1000 ng/ml)Bax/Bcl-2比值比对照组下降了44.4%～46.0%(P<0.05)。PRL可明显抑制细胞表面Fas和FasL的表达,其中各PRL处理组Fas的细胞阳性率比对照组下降了51.1%～75.0%(P<0.01),FasL的细胞阳性率比对照组下降了28.2%～39.1%(P<0.01)。结论在SEA诱导T细胞的AICD过程中,PRL可通过抑制Fas、FasL和Bax的表达,并提高Bcl-2的表达,来抑制T细胞凋亡,维持T细胞的增殖。

关键词：葡萄球菌肠毒素A 细胞凋亡催乳素增殖活化诱导凋亡

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贵州白纹伊蚊对登革病毒易感性的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2004年第3期18卷 234-237,F002页

作者：舒莉萍左丽赵星陈阿英韦隆华贵阳医学院免疫学教研室 550004

目的　用细胞、分子生物学技术进行贵州省白纹伊蚊不同地理株对登革病毒 (DEN)易感性的研究。方法　采集贵州省 9个地 (州 )市共计 15个县 (区 )白纹伊蚊幼虫标本 ,饲养为成蚊 ;取羽化后 3～ 5日龄期的贵州不同地理株白纹伊蚊 ,用不同... 详细信息

目的　用细胞、分子生物学技术进行贵州省白纹伊蚊不同地理株对登革病毒 (DEN)易感性的研究。方法　采集贵州省 9个地 (州 )市共计 15个县 (区 )白纹伊蚊幼虫标本 ,饲养为成蚊 ;取羽化后 3～ 5日龄期的贵州不同地理株白纹伊蚊 ,用不同型别的DEN分别经口连续感染 3d ,于首次感染后的 4、7、10、14d收集感染成蚊标本 ;制备蚊悬液 ,碘化钠法提取RNA ,用DENNS1基因区通用引物经逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测DEN核酸 ;蚊悬液接种C6 36细胞进行病毒分离 ,制作细胞抗原片 ,经间接免疫荧光法检测DEN抗原 ;同时感染白纹伊蚊海南株作为对照。结果　DEN 1～ 4型国际参考株感染白纹伊蚊贵州省不同地方株 ,其感染比率分别为 12 15、12 15、8 15和 13 15。结论　白纹伊蚊贵州省不同地方株对DEN 1～ 4型国际参考株普遍易感 ,表明贵州省具备引起登革热流行的条件。

关键词：白纹伊蚊 DEN 感染易感性登革病毒成蚊悬液地理株贵州羽化

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