检索结果-内蒙古大学图书馆

人卵巢cDNA文库中与蛋白激酶Wee1B相互作用的候选分子的筛选及其调控作用

吉林大学学报（医学版） 2016年第5期42卷 866-871,I0001页

作者：刘超任丽莉栾治东孟智超刘乙蒙肖建英锦州医科大学基础医学院发育生物学教研室辽宁锦州121001 锦州医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁锦州121001 锦州医科大学基础医学实验教学中心辽宁锦州121001 锦州医科大学教务处辽宁锦州121001

目的:利用酵母双杂交系统筛选与蛋白激酶Wee1B相互作用的新候选分子,并用生物信息学方法分析其与Wee1B相互作用是否能调控小鼠受精卵早期发育。方法:以pcDNA3.1/V5 His TOPO Wee1B WT质粒为模板构建pGBKT7Wee1B诱饵质粒;制备酵母感受态... 详细信息

目的:利用酵母双杂交系统筛选与蛋白激酶Wee1B相互作用的新候选分子,并用生物信息学方法分析其与Wee1B相互作用是否能调控小鼠受精卵早期发育。方法:以pcDNA3.1/V5 His TOPO Wee1B WT质粒为模板构建pGBKT7Wee1B诱饵质粒;制备酵母感受态细胞,将诱饵质粒pGBKT7Wee1B转化酵母感受态细胞后分别接种SD/Trp(SDO)、SD/Trp/XαGal(SDO/X)和SD/Trp/XαGal/AbA plates(SDO/X/A)培养板检测其对酵母的毒性和自身激活能力,利用Western blotting法检测pGBKT7 Wee1B在酵母中的表达情况;将含有pGBKT7 Wee1B的酵母感受态细胞与人卵巢cDNA文库相融合,利用酵母双杂交系统筛选出阳性克隆,提取阳性克隆的酵母质粒转化大肠杆菌后进行测序鉴定,最终再经酵母重新转化验证。在GenBank中对其进行BLAST分析,根据基因注释推断其在小鼠受精卵发育过程中可能发挥的作用。结果:双酶切鉴定和测序分析,pGBKT7 Wee1B诱饵质粒构建成功。将该质粒转入酵母感受态细胞后在SDO/X/A平皿上无克隆。将pGBKT7Wee1B和pGBKT7空载体转入酵母感受态细胞中,菌液接种于SDO平皿,2个SDO平皿上克隆都均匀生长。从工作板SDO和阳性对照板上挑取阳性克隆扩大培养,裂解细胞提取蛋白,Western blotting法检测示pGBKT7Wee1B对应位置出现条带。含诱饵质粒的酵母菌与人卵巢cDNA文库融合,PCR验证融合后的阳性克隆质粒有插入片段。将质粒测序并经BLAST分析筛选出9个与Wee1B蛋白激酶存在相互作用的蛋白,生物信息学分析可能与小鼠卵母细胞发育和受精卵发育密切相关的蛋白。结论:利用酵母双杂交系统从人卵巢cDNA文库中筛选出9个与Wee1B蛋白激酶相互作用的蛋白,这些筛选蛋白可能通过与Wee1B相互作用调控小鼠卵母细胞成熟和受精卵早期发育。

关键词：蛋白激酶 Wee1B 蛋白相互作用酵母双杂交小鼠受精卵

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人参抗血液和心血管系统衰老作用研究新进展

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药物资讯 2017年第5期6卷 95-100页

作者：张慧娟赖敏卢选珍洪芬芳杨树龙南昌大学医学部临床医学2013级临床实验班江西南昌南昌大学医学部临床医学1313班江西南昌南昌大学医学部临床医学1305班江西南昌南昌大学医学部医学实验教学中心江西南昌基础医学院生理教研室江西南昌

人参皂苷(Ginsenosides, GS)是人参的主要的抗衰老成分,衰老是体内外多因素共同作用于机体后的综合表现,GS在抗血液和心血管系统衰老中起到重要作用。Rg1可激活端粒酶并抑制端粒长度缩短而延缓造血干细胞衰老;GS明显降低血管平滑肌细胞(... 详细信息

人参皂苷(Ginsenosides, GS)是人参的主要的抗衰老成分,衰老是体内外多因素共同作用于机体后的综合表现,GS在抗血液和心血管系统衰老中起到重要作用。Rg1可激活端粒酶并抑制端粒长度缩短而延缓造血干细胞衰老;GS明显降低血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells, VSMCs)增殖力并增加PPAR-γ表达,减少自由基产生,增加NO释放,对心血管系统起保护作用;人参提取物可减少负性细胞因子表达,延缓血管老化;人参三七川芎提取物通过下调NAD(P)H氧化酶p47phox表达而使ROS产生减少,延缓血管紧张素Ⅱ诱导的内皮细胞衰老;人参皂甙Rbl和人参皂甙Re均可减少缺血再灌注(Ischemia reperfusion, IR)心肌细胞的凋亡;人参皂甙Rb1可能具有抑制缺血再灌注心肌细胞凋亡的作用,从而减轻心肌IR损伤;实验表明人参皂甙Rb1对老龄大鼠心肌收缩有抑制作用。本文综述了近期有关于GS抗血液及心血管系统衰老作用及其机制的研究进展,将为其临床防治血液及心血管系统衰老相关疾病提供理论依据。

关键词：人参皂苷衰老血液系统端粒与端粒酶心血管系统

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一氧化氮与肝缺血再灌注损伤相关性研究新进展

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药物资讯 2017年第5期6卷 101-107页

作者：张亚奇丁宁向圆圆曾永芬洪芬芳杨树龙南昌大学医学部临床1315班江西南昌南昌大学医学部麻醉1202班江西南昌南昌大学医学部临床1314班江西南昌南昌大学医学部医学实验教学中心江西南昌南昌大学医学部基础医学院生理教研室江西南昌

肝缺血再灌注损伤(hepatic ischemia reperfusion injury, HIRI)时,体内NO、eNOS减少,iNOS增多。NO减少时,肝窦收缩微循环障碍;肝脏细胞水肿、坏死、凋亡;亚硝酸盐还原为NO增多。NO涉及HIRI的多个环节。损伤早期,eNOS激活产生NO有保护作... 详细信息

肝缺血再灌注损伤(hepatic ischemia reperfusion injury, HIRI)时,体内NO、eNOS减少,iNOS增多。NO减少时,肝窦收缩微循环障碍;肝脏细胞水肿、坏死、凋亡;亚硝酸盐还原为NO增多。NO涉及HIRI的多个环节。损伤早期,eNOS激活产生NO有保护作用,但eNOS过度表达且其衍生NO生物利用度过高可加重肝损伤;而iNOS晚期因大量产生NO产生保护作用。缺血预处理、缺血后处理以及药物预处理则可通过增强eNOS、降低iNOS活性而增加血清NO并降低丙二醛含量,发挥肝脏围术期保护功能。本文综述了近年来NO与HIRI相关性新研究进展。

关键词：肝脏缺血再灌注损伤一氧化氮一氧化氮合酶

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赤道几内亚比奥科岛恶性疟原虫MSP-1和MSP-2基因多态性研究

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中国当代医药 2017年第13期24卷 9-12页

作者：陈江涛李健潘雪峰 Urbano Monsuy Eyi Rocio Apicante Matesa Maximo Miko Ondo Obono Carlos Sala Ehapo 查广才黄广黄芝秀林敏汕头大学医学院组织胚胎教研室广东汕头515041 广东省惠州市中心人民医院检验医学中心广东惠州516008 中国援赤道几内亚医疗队广东广州518000 湖北医药学院基础医学院湖北十堰442000 马拉博地区医院医学实验室赤道几内亚马拉博999115 韩山师范学院生命科学与食品科技学院广东潮州521041

目的研究赤道几内亚比奥科岛(Bioko Island)恶性疟原虫分离株裂殖子表面蛋白1(PfMSP-1)基因和裂殖子表面蛋白2(PfMSP-2)基因分型。方法从比奥科岛采集疟疾患者血样181份,用显微镜法和荧光定量PCR鉴定虫种。采用巢式PCR分别扩增PfMSP-1和... 详细信息

目的研究赤道几内亚比奥科岛(Bioko Island)恶性疟原虫分离株裂殖子表面蛋白1(PfMSP-1)基因和裂殖子表面蛋白2(PfMSP-2)基因分型。方法从比奥科岛采集疟疾患者血样181份,用显微镜法和荧光定量PCR鉴定虫种。采用巢式PCR分别扩增PfMSP-1和PfMSP-2中具有型特异性的片段,进行等位基因分型。结果 PfMSP-1基因分型:181份恶性疟患者血样中有178份扩增出PfMSP-1基因片段(98.34%),其中K1、MAD20和RO33基因型片段分别为171份(94.48%)、175份(96.69%)和126份(69.61%)。混合感染率为97.24%;PfMSP-2基因分型:181份血样中有173份PfMSP-2基因片段(95.58%),其中48份(26.52%)单独扩增到3D7型基因片段,4份(2.21%)单独扩增到FC27型基因片段,混合感染率为66.85%。结论赤道几内亚比奥科岛PfMSP-1和PfMSP-2等位基因型分布范围极广。混合感染是比奥科岛疟疾的主要类型。

关键词：恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1 裂殖子表面蛋白2 比奥科岛

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酵母双杂交技术筛选与蛋白激酶Wee1相互作用的蛋白

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中国生化药物杂志 2016年第3期36卷 23-26页

作者：刘超刘乙蒙栾治东任丽莉孟智超肖建英辽宁医学院基础医学院发育生物学教研室辽宁锦州121001 辽宁医学院基础医学院神经生物学教研室辽宁锦州121001 辽宁医学院基础医学实验教学中心辽宁锦州121001 辽宁医学院教务处辽宁锦州121001

目的应用酵母双杂交技术筛选出与Wee1蛋白激酶相互作用的候选分子,为进一步研究Wee1的分子功能提供理论基础。方法利用分子克隆的方法重组酵母双杂交质粒p GBKT7-Wee1,并验证其在酵母中的毒性、自激活能力和表达。利用酵母双杂交技术从... 详细信息

目的应用酵母双杂交技术筛选出与Wee1蛋白激酶相互作用的候选分子,为进一步研究Wee1的分子功能提供理论基础。方法利用分子克隆的方法重组酵母双杂交质粒p GBKT7-Wee1,并验证其在酵母中的毒性、自激活能力和表达。利用酵母双杂交技术从人卵巢c DNA文库中筛选出与Wee1蛋白相互作用的蛋白,并在酵母中重新验证其相互作用。结果成功构建p GBKT7-Wee1诱饵质粒,验证了其无毒性及自激活能力,且可以在酵母中表达,可进一步进行酵母双杂交的筛选工作。结论利用酵母双杂交系统筛选出与Wee1相互作用的候选分子30个,为揭示蛋白激酶Wee1可能通过与其他蛋白相互作用进而调控细胞周期进程。

关键词： Wee1 酵母双杂交蛋白互作

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免疫相关性肝纤维化的研究进展

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大家健康（上旬版） 2016年第2期 298-299页

作者：熊美丽李勇文李丽桂林医学院药理学教研室广西桂林 541000 基础医学实验教学中心广西桂林 541000

肝纤维化是代谢性疾病，病毒感染，药物损伤，和自身免疫等攻击靶向肝细胞和胆管产生慢性损伤的共同病理过程。慢性肝损伤表现为肝脏实质细胞发生坏死、凋亡，间质细胞增生主要表现为肝星状细胞活化、增殖，细胞外基质过度增生，最终导... 详细信息

肝纤维化是代谢性疾病，病毒感染，药物损伤，和自身免疫等攻击靶向肝细胞和胆管产生慢性损伤的共同病理过程。慢性肝损伤表现为肝脏实质细胞发生坏死、凋亡，间质细胞增生主要表现为肝星状细胞活化、增殖，细胞外基质过度增生，最终导致肝脏内纤维结缔组织异常沉积。肝纤维化是慢性肝脏炎症病变的病理过程，其中免疫细胞在炎症反应中发挥了重要作用。本文对近年来免疫细胞如何发挥调节肝纤维化的进程进行综述。

关键词：肝纤维化肝星状细胞巨噬细胞自然杀伤细胞 TGF -β

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白三烯B4与类风湿关节炎的治疗

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中国老年学杂志 2016年第7期36卷 1752-1754页

作者：詹雪琴谢文慧吴丽梦叶健芳李红英林春平洪芬芳杨树龙南昌大学医学部生理教研室江西南昌330006 南昌大学南昌大学医学实验教学部江西南昌330006 南昌大学基础医学院江西南昌330006

类风湿关节炎（RA）病理机制未明,目前对RA的治疗主要集中在控制疼痛和炎症、阻断骨质破坏的发展以及改善关节功能上[1]。传统治疗药物由于其系统用药的特性,在治疗的同时也产生一定的不良反应。白三烯（LT）B4是白细胞产生的一种脂质介... 详细信息

类风湿关节炎（RA）病理机制未明,目前对RA的治疗主要集中在控制疼痛和炎症、阻断骨质破坏的发展以及改善关节功能上[1]。传统治疗药物由于其系统用药的特性,在治疗的同时也产生一定的不良反应。白三烯（LT）B4是白细胞产生的一种脂质介质,系膜磷脂在磷脂酶（PL）A2作用下的花生四烯酸（AA）下游产物。研究证明在RA患者的关节腔和滑液中存在高浓度的LTB4。

关键词：类风湿关节炎白三烯B4 磷脂酶A2 5-脂氧酶

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大鼠巨噬细胞感染弓形虫的基因表达谱分析

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中国人兽共患病学报 2016年第4期32卷 371-375页

作者：赵志军董辉汪涛郭雅琪钟利王姝殷国民林茹宁夏医科大学总医院医学实验中心银川750004 宁夏临床病原微生物重点实验室银川750004 九江学院基础医学院病原生物学教研室九江332000 宁夏医科大学检验学院银川750004

目的分析大鼠腹腔和肺泡巨噬细胞感染弓形虫RH株的基因表达谱差异。方法以弓形虫RH株速殖子感染SD大鼠腹腔和肺泡巨噬细胞0h、6h后提取细胞总RNA,采用NimbleGen 12x135K微阵列基因表达分析芯片检测差异表达基因,并对部分表达变化的基因... 详细信息

目的分析大鼠腹腔和肺泡巨噬细胞感染弓形虫RH株的基因表达谱差异。方法以弓形虫RH株速殖子感染SD大鼠腹腔和肺泡巨噬细胞0h、6h后提取细胞总RNA,采用NimbleGen 12x135K微阵列基因表达分析芯片检测差异表达基因,并对部分表达变化的基因进行Real time PCR验证。结果表达分析芯片涵盖大鼠26 419个基因,对差异表达基因(Fold Change≥4.0)进行聚类分析显示,经弓形虫RH株作用6h和0h的RNA表达谱相比,大鼠肺泡巨噬细胞上调的基因有49个(主要包括Zfp90,Map4k4,Mrpl42等),下调的基因有130个(主要包括Pitx1,Chpt1,Chd6等)。大鼠腹腔巨噬细胞上调的基因有136个(主要包括Map2k3,Il17b,Phka2等),下调的272个(主要包括Tlr2,Tgfb2,Wnt2等)。GO、Pathway分析差异表达的基因,大鼠腹腔巨噬细胞能够引发更多和弓形虫有关的信号通路变化,其肺泡巨噬细胞则不能引起这一效应。Real time PCR和基因芯片检测结果一致。结论大鼠腹腔和肺泡巨噬细胞感染弓形虫不同的表现型,可能和其基因表达差异引起的信号通路变化有关。

关键词：大鼠巨噬细胞弓形虫基因表达谱

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白三烯与动脉粥样硬化关系的研究新进展

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南昌大学学报（医学版） 2016年第6期56卷 80-84页

作者：蔡丽娟杨美雯洪芬芳况晓东杨建华杨树龙南昌大学第四临床医学院南昌330003 南昌大学抚州医学院江西抚州344000 南昌大学医学实验教学部南昌330006 南昌大学基础医学院病理学教研室南昌330006 南昌大学基础医学院生理学教研室南昌330006

白三烯(Leukotrienes,LTs)是由炎性细胞产生具有高度生物活性的炎性介质。动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)及其并发症是当今世界导致死亡的最常见的病因之一。炎症反应是AS的一个关键性致病机制。LTs能促使单核细胞趋向血管内皮细胞,... 详细信息

白三烯(Leukotrienes,LTs)是由炎性细胞产生具有高度生物活性的炎性介质。动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)及其并发症是当今世界导致死亡的最常见的病因之一。炎症反应是AS的一个关键性致病机制。LTs能促使单核细胞趋向血管内皮细胞,并发生黏附和迁移,最后转化为巨噬细胞与泡沫细胞,进一步使血管平滑肌细胞增殖、激活淋巴细胞以及刺激冠状动脉收缩等,参与AS的病程。LTs也通过与其受体结合发挥趋化作用,在启动内皮炎症反应、影响斑块稳定性、导致血管重构等方面发挥重要作用。

关键词：白三烯动脉粥样硬化 5-脂氧合酶炎症

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miR-126在ApoE-/-小鼠颈动脉粥样硬化斑块中的表达

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中风与神经疾病杂志 2016年第4期33卷 296-298页

作者：王婷潘旭东马爱军吴梅肖星孙清琳王兰青岛大学附属医院神经内科山东青岛266100 青岛大学基础医学实验中心人体显微结构学实验室山东青岛266071 青岛大学医学院组织胚胎学教研室山东青岛266071

目的观察微小RNA(miR)-126及靶基因血管细胞粘附分子1(VCAM-1)在载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠颈动脉粥样硬化斑块中的表达,探讨miR-126与动脉粥样硬化斑块形成的关系。方法取8周龄Apo E-/-小鼠24只,随机分为对照组(假手术+普通饮食... 详细信息

目的观察微小RNA(miR)-126及靶基因血管细胞粘附分子1(VCAM-1)在载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠颈动脉粥样硬化斑块中的表达,探讨miR-126与动脉粥样硬化斑块形成的关系。方法取8周龄Apo E-/-小鼠24只,随机分为对照组(假手术+普通饮食)、模型组(颈动脉套管术+高脂饮食)各12只。术后第8周末检测血浆中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的水平,HE染色观察颈总动脉斑块面积/血管面积,荧光定量PCR(RT-PCR)检测斑块内miR-126、VCAM-1 mRNA水平的表达,Western blot检测VCAM-1蛋白水平的表达。结果与对照组相比,模型组血脂水平明显升高(P<0.05);模型组的颈动脉粥样硬化斑块面积/血管面积明显大于对照组(P<0.01);miR-126表达水平在模型组明显低于对照组(P<0.01);VCAM-1的mRNA及蛋白的表达在模型组明显高于对照组(P<0.01)。结论 miR-126在颈动脉粥样硬化斑块中的表达下调可能在斑块形成过程中发挥重要作用。

关键词：动脉粥样硬化 ApoE-/-小鼠 miR-126 VCAM-1

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