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南昌大学学报（医学版） 2023年第4期63卷 13-18页

作者：付宏伟万慧芳刘卓琦陈春香万福生南昌大学附属妇幼保健院检验科南昌330006 南昌大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室南昌330006 南昌大学医学实验教学中心南昌330006 南昌大学抚州医学院生化与分子生物学教研室江西抚州344000

目的探究川芎嗪(TMP)对人宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。方法用含有质量浓度为0、0.25、0.50、1.00和2.00 mg·mL^(-1) TMP的培养基处理人宫颈癌SiHa细胞后,用CCK-8法检测细胞增殖能力;用Transwell小室检测细胞侵袭、... 详细信息

目的探究川芎嗪(TMP)对人宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。方法用含有质量浓度为0、0.25、0.50、1.00和2.00 mg·mL^(-1) TMP的培养基处理人宫颈癌SiHa细胞后,用CCK-8法检测细胞增殖能力;用Transwell小室检测细胞侵袭、迁移能力;用蛋白免疫印记法检测细胞内上皮-间质转化(EMT)相关蛋白、基质金属蛋白酶2/7/9(MMP2/7/9)和PI3K/AKT/GSK-3β通路相关蛋白的表达水平。结果在0.25~2.00 mg·mL^(-1)浓度范围内,TMP对SiHa细胞的增殖、侵袭和迁移表现出浓度依赖性的抑制作用(P<0.05或P<0.01);与0 mg·mL^(-1) TMP处理组相比,0.50、1.00和2.00 mg·mL^(-1) TMP处理组细胞内E-Cadherin、PI3K、p-AKT及p-GSK-3β表达水平显著上升,而N-cadherin、Vimentin、β-Catenin和MMP2/7/9的表达水平显著下降(P<0.05或P<0.01)。结论TMP可能通过激活PI3K/AKT/GSK-3β信号通路抑制EMT过程和MMPs表达,抑制人宫颈癌SiHa细胞增殖、侵袭和转移。

关键词：川芎嗪侵袭转移 PI3K/AKT/GSK-3β通路宫颈癌人

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牛磺酸通过调控AKT/GSK-3β通路抑制结直肠癌细胞侵袭转移

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南昌大学学报（理科版） 2021年第6期45卷 585-593,600页

作者：陈春香万慧芳李淑英钟小菊万福生南昌大学抚州医学院生化与分子生物学教研室江西抚州344000 南昌大学医学实验教学中心江西南昌330031 南昌大学基础医学院生化与分子生物学教研室江西南昌330006

观察糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)在牛磺酸(Tau)抑制结直肠癌(CRC)侵袭转移中的作用,探讨Tau抑制结直肠癌侵袭转移分子机制。选用人结直肠癌SW480和HT29细胞为研究对象,用浓度为40~200 mmoL Tau处理细胞;Transwell小室和细胞划痕愈合实验... 详细信息

观察糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)在牛磺酸(Tau)抑制结直肠癌(CRC)侵袭转移中的作用,探讨Tau抑制结直肠癌侵袭转移分子机制。选用人结直肠癌SW480和HT29细胞为研究对象,用浓度为40~200 mmoL Tau处理细胞;Transwell小室和细胞划痕愈合实验检测细胞侵袭、迁移能力,Western blot检测细胞EMT标志性蛋白(E-cadherin,N-cadherin,Vimentin),基质金属蛋白酶2/7(MMP2/7)和AKT/GSK-3β通路相关蛋白水平。与正常对照组比较,Tau可浓度依赖性抑制CRC细胞侵袭和迁移,上调CRC上皮标志物E-cadherin表达,下调EMT间质标志物N-cadherin,Vimentin和MMPs表达;降低AKT和p-AKT水平,提高PTEN,GSK-3β及p-GSK-3β表达水平(P<0.05)。与p-EGFP-GSK-3β或Tau组比较,p-EGFP-GSK-3β+Tau组细胞迁移和侵袭数量有显著性降低(P<0.01);与Tau组或p-EGFP-GSK-3β组比较,p-EGFP-GSK-3β+Tau组E-Cadherin、GSK-3β蛋白表达有显著升高(P<0.01),而N-Cadherin,Vimentin,β-Catenin,MMP2/7和AKT蛋白表达均有显著降低(P<0.01)。牛磺酸可通过调控AKT/GSK-3β通路抑制结直肠癌细胞侵袭转移。

关键词：牛磺酸糖原合酶激酶-3β 侵袭转移上皮-间质转化结直肠癌

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构建“三位一体”的医学机能学实验“金课”的探索与实践

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浙江医学教育 2022年第2期21卷 102-105页

作者：于利刘卓李胜陶牟华锦州医科大学基础医学院锦州121001 锦州医科大学基础医学实验教学中心机能实验教学平台锦州121001 锦州医科大学基础医学院药理学教研室锦州121001

医学实验教学对于医学人才培养至关重要,实验教学质量的提高迫在眉睫。以“动物实验与人体实验相结合、基础理论与临床实践技能相结合、实体实验与虚拟仿真实验相结合”的“三位一体”的医学机能学整合实验,带来了全新的医学机能学实验... 详细信息

医学实验教学对于医学人才培养至关重要,实验教学质量的提高迫在眉睫。以“动物实验与人体实验相结合、基础理论与临床实践技能相结合、实体实验与虚拟仿真实验相结合”的“三位一体”的医学机能学整合实验,带来了全新的医学机能学实验内容、教学模式和方法手段,也开拓了全新的实验教学改革发展方向和理念。锦州医科大学医学机能学整合实验课程改革,面向临床医学、运动康复、医学实验技术等专业本科生,进行了模块化课程内容创新设计、教学方法和手段的升级创新,以及新型医学机能学实验平台的构建等方面的探索和实践,以此为基础形成了全新的医学机能学实验教学新模式、新方法和新内容,也为建设医学机能学实验“金课”奠定了扎实的基础,明确了努力的方向。

关键词：基础医学医学机能学实验人体机能学实验虚拟仿真

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骨髓间充质干细胞对衰老猕猴胸腺及脾脏结构和功能的影响

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中国组织工程研究 2023年第19期27卷 2953-2959页

作者：潘杭朱向情何洁杨再玲田川吕冠柯阮光萍叶丽何志旭舒莉萍潘兴华贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心贵州省贵阳市550004 中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室、云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室、昆明市干细胞与再生医学重点实验室、基础医学实验室云南省昆明市650032 贵州医科大学基础医学院免疫学教研室、细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室、贵州省再生医学重点实验室、省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室、中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州省贵阳市550004 贵州医科大学附属医院肿瘤医院贵州省贵阳市550004 四川省医学科学院、四川省人民医院四川省成都市610000 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州省遵义市563100

背景:随着年龄的增长,脾脏的结构和功能发生改变,胸腺在青春期之后逐渐萎缩退化,导致机体发生免疫功能障碍。目的:探讨骨髓间充质干细胞对衰老猕猴胸腺及脾脏结构和功能的作用。方法:筛选出平均年龄25岁老年猕猴6只,随机分为老年组和老... 详细信息

背景:随着年龄的增长,脾脏的结构和功能发生改变,胸腺在青春期之后逐渐萎缩退化,导致机体发生免疫功能障碍。目的:探讨骨髓间充质干细胞对衰老猕猴胸腺及脾脏结构和功能的作用。方法:筛选出平均年龄25岁老年猕猴6只,随机分为老年组和老年治疗组各3只;老年治疗组猕猴经股静脉输注超顺磁性铁纳米颗粒标记的第4代骨髓间充质干细胞(1×10^(7)个/kg),1次/d,连续输注3 d,老年组猕猴在同一时间输注等体积的生理盐水;猕猴最后一次输注骨髓间充质干细胞5个月后给予安乐死处理,取出胸腺以及脾脏组织;苏木精-伊红染色观察胸腺组织和脾脏组织的结构变化;免疫荧光染色分析胸腺组织中各种T细胞亚群以及衰老相关基因蛋白P21的表达量变化;免疫组织化学染色分析脾脏组织中各种T细胞亚群以及衰老相关基因蛋白P21的表达量变化;安乐死处理猕猴之前抽取各组猕猴股静脉血5 mL,运用酶联免疫分析外周血血清中衰老相关分泌表型肿瘤坏死因子α和白细胞介素1α的分泌水平。结果与结论:①超顺磁性铁纳米颗粒标记的骨髓间充质干细胞经过股静脉输注入猕猴体内能够成功定植在衰老胸腺和脾脏组织中发挥作用;②骨髓间充质干细胞移植治疗后,衰老猕猴中胸腺部分组织出现清晰的皮质与髓质交界,脂肪细胞减少,出现胸腺小体,向正常的胸腺组织结构转变;衰老猕猴中脾脏组织出现清晰的红髓与白髓分界,脾小体的边缘多完整,且巨噬细胞减少,向正常的脾脏组织结构转变;③与老年组相比,老年治疗组衰老胸腺和脾脏组织中CD3^(+)、CD4^(+)以及CD8^(+)T细胞的表达量呈现增高的趋势,老年治疗组衰老胸腺和脾脏组织中P21蛋白的表达量呈现显著下降趋势;④与老年组相比,老年治疗组外周血中衰老相关分泌表型肿瘤坏死因子α以及白细胞介素1α的分泌水平呈现显著下降趋势;⑤上述结果表明,通过骨髓间充质干细胞的移植治疗,能够改善老年猕猴胸腺及脾脏组织的结构和功能。

关键词：干细胞骨髓间充质干细胞猕猴胸腺脾脏抗衰老免疫衰老相关分泌表型

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基于CRISPR/Cas的分子诊断技术在病毒检测中的应用

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检验医学与临床 2024年第20期21卷 3100-3104页

作者：尹佳祺折小娟和林洁(综述) 季乐乐(审校) 空军军医大学学员六大队24中队陕西西安710032 空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室陕西西安710032 空军军医大学国家级基础医学实验教学示范中心陕西西安710032

2019年,新型冠状病毒感染疫情的爆发对快速、特异、灵敏、简便且廉价的诊断技术提出了迫切需求,分子诊断技术成为备受关注的热点。但目前常用的聚合酶链反应分子诊断技术存在诸多局限性。近年来,新兴的规律间隔成簇短回文重复序列及其... 详细信息

2019年,新型冠状病毒感染疫情的爆发对快速、特异、灵敏、简便且廉价的诊断技术提出了迫切需求,分子诊断技术成为备受关注的热点。但目前常用的聚合酶链反应分子诊断技术存在诸多局限性。近年来,新兴的规律间隔成簇短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas)系统作为新型基因编辑工具为解决上述需求提供了可能。本研究综述了CRISPR/Cas系统的作用机制,并以不同Cas蛋白类型为线索,重点综述了多种CRISPR分子诊断技术及平台的原理及应用,同时关注其在病毒检测领域中的研究进展,并对CRISPR分子诊断技术的发展现状进行了总结。尽管CRISPR分子诊断技术目前处于起步阶段,存在污染、脱靶效应及序列依赖等局限性,该技术在分子诊断领域仍表现出革命性的发展潜力。

关键词： CRISPR 分子诊断 Ⅱ类Cas蛋白病毒检测小分子检测

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锌指蛋白ZBTB20敲低的血管平滑肌细胞稳转株的构建及鉴定

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实用心脑肺血管病杂志 2023年第6期31卷 79-83页

作者：赵倩陈玉霞王平任安经宋金超上海理工大学上海市200093 上海理工大学附属市东医院麻醉科上海市200082 海军军医大学基础医学院病理生理学教研室上海市200433 海军军医大学基础医学院基础医学实验教学中心上海市200433

目的构建并鉴定锌指蛋白ZBTB20敲低的血管平滑肌细胞稳转株。方法本实验时间为2022-04-18至2022-11-29。设计合成针对ZBTB20基因的短发夹RNA(shRNA),构建ZBTB20干扰慢病毒载体——pHBLVZBTB20 shRNA,包装ZBTB20干扰慢病毒。将人肺动脉... 详细信息

目的构建并鉴定锌指蛋白ZBTB20敲低的血管平滑肌细胞稳转株。方法本实验时间为2022-04-18至2022-11-29。设计合成针对ZBTB20基因的短发夹RNA(shRNA),构建ZBTB20干扰慢病毒载体——pHBLVZBTB20 shRNA,包装ZBTB20干扰慢病毒。将人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)接种于6 cm培养皿中,分别加入含8μg/ml polybrene和0.5 ml ZBTB20干扰慢病毒上清液的无血清培养液3 ml(实验组)和含8μg/ml polybrene和0.5 ml含无意义干扰序列的慢病毒的无血清培养液3 ml(阴性对照组)进行转染,48 h后加入嘌呤霉素(优化剂量为1.5μg/ml)以筛选转染成功的HPASMCs。采用荧光定量PCR检测两组ZBTB20 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测两组ZBTB20,采用免疫组化试验检测两组ZBTB20表达情况,并进行细胞增殖实验和细胞迁移实验。结果实验组ZBTB20 mRNA相对表达量、ZBTB20均低于阴性对照组(P<0.05)。免疫组化试验结果显示,ZBTB20在阴性对照组的细胞核内高度表达,而在实验组的细胞核内无明显表达,表明ZBTB20敲低的血管平滑肌细胞稳转株构建成功。感染后第2~5天,实验组细胞计数少于对照组,OD值低于阴性对照组(P<0.05)。感染后48 h,实验组划痕愈合面积百分比低于阴性对照组(P<0.05)。结论本实验成功构建了锌指蛋白ZBTB20敲低的血管平滑肌细胞稳转株,且ZBTB20敲低后HPASMCs的增殖和迁移能力明显受到抑制。

关键词：锌指蛋白 ZBTB20 血管平滑肌细胞慢病毒感染

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新医科背景下纳米医学课程教学改革

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基础医学教育 2022年第7期24卷 485-488页

作者：范博刘玉龙李利平翟少东张瑞平山西医科大学第三医院医学实验中心太原030001 山西医科大学药学院药剂学教研室山西医科大学基础医学院化学教研室

新医科建设背景下,实现传统医学教育向以医工、医理、医X交叉学科支撑的医学教育新模式转变对于医学教育改革至关重要。纳米医学作为生命科学与材料科学的交叉前沿,具有典型的医工融合特点。文章以山西医科大学纳米医学课程建设为例,探... 详细信息

新医科建设背景下,实现传统医学教育向以医工、医理、医X交叉学科支撑的医学教育新模式转变对于医学教育改革至关重要。纳米医学作为生命科学与材料科学的交叉前沿,具有典型的医工融合特点。文章以山西医科大学纳米医学课程建设为例,探讨以创新人才培养为中心,学生自主学习为导向,项目驱动教学为手段,运用TBL教学法实施理论课和实践课教学,并有机融合课程思政,对新医科建设背景下的纳米医学课程教学方法进行有效探索。

关键词：纳米医学教学改革医工结合

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中脑腹侧被盖区SIRT1过表达对海洛因依赖小鼠学习记忆和突触结构可塑性的影响

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贵州医科大学学报 2024年第11期49卷 1601-1608页

作者：马旋谭雨维刘美君郑欣雅赵传睿尹丹王茜李豪夏白娟贵州医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室贵州贵安561113 武警贵州省总队医院门诊部贵州贵阳550004 贵州省普通高校自身免疫病研究重点实验室贵州贵安561113

目的探讨中脑腹侧被盖区(VTA)过表达沉默信息调节因子1(SIRT1)对海洛因依赖小鼠学习记忆能力和突触结构可塑性的影响。方法42只C57BL/6J小鼠分为生理盐水对照组(SCG组,n=14)、海洛因依赖组(HDG组,n=14)以及SIRT1过表达海洛因依赖组(SIRT... 详细信息

目的探讨中脑腹侧被盖区(VTA)过表达沉默信息调节因子1(SIRT1)对海洛因依赖小鼠学习记忆能力和突触结构可塑性的影响。方法42只C57BL/6J小鼠分为生理盐水对照组(SCG组,n=14)、海洛因依赖组(HDG组,n=14)以及SIRT1过表达海洛因依赖组(SIRT1-OE+H组,n=14),后两组采用逐日递增注射海洛因液体建立海洛因依赖小鼠模型,SIRT1-OE+H组需先VTA注射rAAV9-rSIRT1腺相关病毒;观察小鼠条件位置偏爱(CPP)及Morris水迷宫(MWM)学习记忆行为;转染rAAV9-rSIRT121 d时,透射电镜观察VTA脑区突触超微结构,蛋白质印迹(Western blot)检测小鼠VTA脑区突触可塑性相关蛋白的表达。结果CPP试验中,与SCG相比较,HDG组小鼠在伴药箱中停留延长、CPP评分增高,SIRT1-OE+H组改变更加显著(P<0.05);MWM的定位航行试验结果显示,第4天和第5天,SIRT1-OE+H组逃避潜伏期延长(P<0.05);空间探索试验结果显示,HDG与SIRT1-OE+H组小鼠穿越平台次数增多(P<0.05),但目标象限停留时间比率、目标象限路程比率差异无统计学意义(P>0.05);透射电镜结果显示,HDG和SIRT1-OE+H组突触后膜致密物增厚,突触界面曲率增大;Western blot结果显示SIRT1-OE+H组中突触素(Syn)、突触后致密区蛋白95(PSD95)、生长相关蛋白43(Gap43)表达较SCG明显增多(P<0.05)。结论SIRT1参与了海洛因依赖过程,其机制可能是SIRT1过表达增强了突触可塑性,促进了海洛因引起的奖赏效应,但SIRT1对空间学习记忆能力的影响不显著。

关键词：沉默信息调节因子1 中脑腹侧被盖区记忆突触可塑性海洛因

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TLR4/NF-κB参与动脉粥样硬化发生发展机制的研究进展

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中国比较医学杂志 2021年第4期31卷 137-142页

作者：李嘉慧王欣佩冷静广西医科大学基础医学院免疫学教研室南宁530021 广西中医药大学广西高发传染病中西医结合转化医学重点实验室南宁530200 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一种以脂质沉积血管为主的慢性疾病,越来越多研究认为免疫介导的炎症反应在AS的发病机制中有着重要的作用。Toll样受体4(toll-like receptor4,TLR4)作为天然免疫模式识别受体家族中的一员,参与AS的... 详细信息

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一种以脂质沉积血管为主的慢性疾病,越来越多研究认为免疫介导的炎症反应在AS的发病机制中有着重要的作用。Toll样受体4(toll-like receptor4,TLR4)作为天然免疫模式识别受体家族中的一员,参与AS的发病各个阶段,因此成为了治疗AS的一个重要靶点。本文就TLR4与AS相关研究进展作一综述。

关键词： Toll样受体4 NF-κB 炎症反应

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基于“超星学习通”的生理学智慧教学探索

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中国医学教育技术 2021年第2期35卷 263-267页

作者：涂永生许小洋章喜明马宁芳李建华王红艳广州医科大学基础医学院生理学教研室广州511436 广州医科大学基础医学院机能实验中心广州511436 广州医科大学基础医学院基础医学实验教学中心广州511436 广州医科大学基础医学院人体组织学与胚胎学教研室广州511436 广州医科大学基础医学院病理学教研室广州511436

智慧教育时代的来临,传统的生理学教学模式亟须改革和完善。文章在生理学教学中探索了基于“超星学习通”的智慧化教学模式,建立了智慧课程,开展了课前—课中—课后一体化、线上线下一体化的智慧教学,并对学生学习过程和综合表现进行了... 详细信息

智慧教育时代的来临,传统的生理学教学模式亟须改革和完善。文章在生理学教学中探索了基于“超星学习通”的智慧化教学模式,建立了智慧课程,开展了课前—课中—课后一体化、线上线下一体化的智慧教学,并对学生学习过程和综合表现进行了高效的智慧化考核和即时智慧反馈,提高了教学效率,促进了教学改革和创新,有利于实践先进的教学理念,加强学生的知识学习和创新能力培养。

关键词：智慧教学智慧课程智慧考核生理学 “超星学习通”

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