检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2016年第2期32卷 164-167页

作者：王俊虹杨帆魏茂提天津市职业与环境危害防制重点实验室武警后勤学院救援医学系部队卫生统计和流行病学教研室300309 天津市职业与环境危害防制重点实验室武警后勤学院军事心理学教研室300309 不详

目的构建、表达和纯化相思子毒素B(ATB)链蛋白并分析其抗原性和毒性。方法运用密码子优化软件优化ATB基因,合成目的基因亚克隆至原核载体p QE-80L构建表达质粒p QE80L-ATB,转化至*** M15获得表达工程菌株,并对诱导表达条件和纯化条件进... 详细信息

目的构建、表达和纯化相思子毒素B(ATB)链蛋白并分析其抗原性和毒性。方法运用密码子优化软件优化ATB基因,合成目的基因亚克隆至原核载体p QE-80L构建表达质粒p QE80L-ATB,转化至*** M15获得表达工程菌株,并对诱导表达条件和纯化条件进行优化;通过Western blot检测重组蛋白的抗原性;采用人正常肺上皮细胞Beas-2B和胃黏膜细胞GES-1进行重组蛋白的细胞毒性实验。结果 ATB开放阅读框架全长804 bp,编码268个氨基酸残基;表达工程菌株在30℃、1 mmol/L IPTG,3 h后获得包涵体形式表达的目的蛋白,相对分子质量均约为30 000,经Ni-NTA亲和层析柱纯化后纯度达97%以上,Western blot和MTS实验结果表明,目的蛋白能特异性识别抗相思子毒素多克隆抗体且无毒性。结论重组ATB蛋白实现高表达,具有良好的抗原性,为相关疫苗研究奠定基础。

关键词：相思子毒素B链抗原性生物恐怖

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急性ST段抬高心肌梗死合并亚临床甲状腺功能减退症患者的临床特点与转归分析

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武警后勤学院学报（医学版） 2017年第6期26卷 479-484页

作者：刘映川陶靖隆舒雯张梅武警后勤学院附属医院天津300162 武警后勤学院救援医学系部队流行病学与卫生统计学教研室天津300309

【目的】本研究通过观察急性ST段抬高心肌梗死合并亚临床甲状腺功能减退症患者的临床特点及转归,探究亚临床甲状腺功能减退症与急性心肌梗死间的关系。【方法】419例行急诊经皮冠状动脉介入治疗的患者依据诊断及排除标准筛分为亚临床甲... 详细信息

【目的】本研究通过观察急性ST段抬高心肌梗死合并亚临床甲状腺功能减退症患者的临床特点及转归,探究亚临床甲状腺功能减退症与急性心肌梗死间的关系。【方法】419例行急诊经皮冠状动脉介入治疗的患者依据诊断及排除标准筛分为亚临床甲状腺功能减退症组和甲状腺功能正常组。对研究对象的一般情况、生化检查、冠状动脉病变评价、心脏超声及住院期间临床转归资料进行统计学分析。【结果】亚临床甲状腺功能减退症组患者与甲状腺功能正常组患者相比较,白细胞计数(P=0.018)、中性粒细胞计数(P=0.030)及百分比(P=0.003)、血小板分布宽度(P=0.003)、低密度脂蛋白胆固醇(P=0.020)、尿酸(P=0.008)、血肌酐(P=0.038)水平升高;血红蛋白(P=0.023)和游离甲状腺素(P<0.001)水平降低;左室射血分数水平明显降低(P=0.026);发生严重心律失常,尤其是心房颤动(P<0.001)和心力衰竭(P<0.001)的比例明显增高;多因素Logistic回归分析,年龄(OR=1.036,95%CI:1.009~1.065,P=0.010)、高血压(OR=2.251,95%CI:1.295~3.914,P=0.004)和促甲状腺素(OR=1.066,95%CI:1.012~1.123,P=0.016)是院内发生心肌梗死并发症的独立危险因素,而高密度脂蛋白胆固醇(OR=0.273,95%CI:0.101~0.736,P=0.010)是其保护性因素。【结论】亚临床甲减可能通过影响脂质代谢、炎症反应、左室射血分数和临床转归,与急性ST段抬高心肌梗死的发生发展具有相关性。

关键词：急性ST段抬高心肌梗死亚临床甲状腺功能减退症冠状动脉病变 Gensini评分

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三种人冠状病毒纤突蛋白与人受体分子对接研究

引用

武警后勤学院学报（医学版） 2017年第5期26卷 392-396,F0003页

作者：陶靖隆王爱昕关超玲王俊虹赵国平魏茂提武警后勤学院救援医学系部队流行病学与卫生统计学教研室天津300162 武警甘肃总队武威支队甘肃武威733000

【目的】通过对急性呼吸窘迫综合症冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-Co V)、NL63型冠状病毒NL63(human coronavirus NL63,NL63-Co V)和中东呼吸道冠状病毒(Middle-East respiratory syndrome coronavirus,MERSCo V)纤突蛋白受体结合域(receptor binding domain,RBD)与人受体相互作用的蛋白质结构进行分析,探索计算机计算模拟技术在研究蛋白质-蛋白质相互作用中的价值。【方法】根据发表的蛋白质结构数据,使用ZDOCK软件包进行配体-受体分子对接模型构建,利用RDOCK软件包对分子对接结果进行评分。比较晶体结构数据和模型数据,以评分结果评价计算机模拟的效果。【结果】计算机模拟配体-受体分子对接研究结果显示SARS-Co V与h ACE2对接复合物近天然构象模型16个、NL63-Co V与h ACE2复合物近天然构象43个、MERS-Co V与CD26复合物近天然构象5个;对接模型与晶体结构贴合比对后主链间均方根偏差最小值为0.291?,最大值为2.011?。其中,SARS-Co V、NL63-Co V与h ACE2相互作用通过单个位点的氨基酸残基间盐桥实现,而MERS-Co V与CD26相互作用通过两个不同位点残基间的盐桥作用实现。【结论】冠状病毒蛋白质-人受体分子对接模拟研究结果与已发表的分子生物学实验所得到结果一致,提示通过计算模拟的方法可以实现病毒入侵机理的初步探索。然而在模拟实验过程中,如果有分子生物学实验数据支持,计算机模拟研究将更高效、准确和稳定。

关键词：冠状病毒纤突蛋白蛋白质-蛋白质对接打分函数

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重组蓖麻毒素与相思子毒素B链嵌合体蛋白的制备与分析

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武警后勤学院学报（医学版） 2015年第9期24卷 696-699页

作者：王俊虹杨帆魏茂提徐忠伟武警后勤学院救援医学系部队卫生统计和流行病学教研室天津300309 天津市职业与环境危害防制重点实验室天津300309 武警后勤学院基础部军事心理学教研室天津300309 武警后勤学院科研部中心实验室天津300309

【目的】观察蓖麻毒素(ricin toxin,RT)、相思子毒素(abrin toxin,AT)B链的嵌合体蛋白原核表达并分析其抗原性和毒性。【方法】利用柔性linker-(G4S)3连接两个毒素B链基因(RTB和ATB),优化嵌合体基因RTB-ATB后构建表达质粒p QE80LRTB/ATB... 详细信息

【目的】观察蓖麻毒素(ricin toxin,RT)、相思子毒素(abrin toxin,AT)B链的嵌合体蛋白原核表达并分析其抗原性和毒性。【方法】利用柔性linker-(G4S)3连接两个毒素B链基因(RTB和ATB),优化嵌合体基因RTB-ATB后构建表达质粒p QE80LRTB/ATB,转化至*** M15获得表达工程菌株,并对诱导表达条件和纯化条件进行优化;通过Western印迹检测RTB-ATB的抗原性;采用人正常肺上皮细胞Beas-2B和胃黏膜细胞GES-1进行嵌合体蛋白的细胞毒性实验。【结果】RTB-ATB全长1 647bp,编码549个氨基酸残基;*** M15在诱导条件为30℃、1 mmol/L IPTG,3 h后获得包涵体形式表达的目的蛋白,相对分子量约为60×103Da,经Ni柱纯化后纯度达98.9%;Western blotting印迹结果表明嵌合体蛋白保持RTB和ATB原有各自的抗原性;MTS实验结果表明目的蛋白无毒性。【结论】嵌合体蛋白RTB-ATB实现高表达,具有良好的抗原性,为研制针对RT和AT的双价疫苗奠定基础。

关键词：蓖麻毒素相思子毒素 B链嵌合体抗原性

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HKU1型冠状病毒纤突蛋白受体结合域研究进展

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武警医学 2019年第1期30卷 89-92页

作者：陶靖隆王玉梁关超玲王俊虹赵国平魏茂提武警湖南总队医院传染科长沙410000 武警机动第二总队第六支队广州510000 武警后勤学院救援医学系部队流行病学与卫生统计学教研室天津300309

人冠状病毒(human coronavirus,HCoV)是引起人类感染的一类重要病毒。该类病毒危害最为严重当属2002—2003年的严重呼吸道综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARSCoV)[1],SARS-CoV的传播和流行造成世界范围... 详细信息

关键词： HKU1型冠状病毒纤突蛋白结构预测生物信息学

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人冠状病毒冠状病毒HKU1 Spike蛋白受体结合域结构预测

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武警后勤学院学报（医学版） 2016年第6期25卷 421-423,427,F0002页

作者：陶靖隆王爱昕张伟王俊虹赵国平胡役兰周卫红魏茂提武警后勤学院救援医学系部队流行病学与卫生统计学教研室天津300309 武警后勤学院学员二旅天津300309 南开大学药物化学生物学国家重点实验室天津300071

【目的】探索人冠状病毒HKU1（human HKU1 coronavirus,h HKU1-CoV）Spike蛋白受体结合域（receptor binding domain,RBD）蛋白结构。【方法】利用已经发表的h HKU1-CoV Spike基因序列,通过蛋白建模获得该冠状病毒Spike空间结构,运用PDB... 详细信息

【目的】探索人冠状病毒HKU1（human HKU1 coronavirus,h HKU1-CoV）Spike蛋白受体结合域（receptor binding domain,RBD）蛋白结构。【方法】利用已经发表的h HKU1-CoV Spike基因序列,通过蛋白建模获得该冠状病毒Spike空间结构,运用PDBsum平台进行蛋白结构分析。【结果】人冠状病毒HKU1-CoV Spike氨基酸序列（***27881.1）535~673位可能存在RBD,二级结构显示该区域共有4个β折叠股、6个α螺旋,2个β-α-β单元。蛋白质空间结构分析显示RBD可分为核心区和Loop区。核心区由2个平行的β折叠股和4个α螺旋顺序链接组成,Loop区位于核心区外围,由ASN589-PRO673之间氨基酸构成1个含有3个边缘的柔性区域和2个反向平行的β折叠共同组成的腔隙结构,该区域可能是h HKU1-Co V与宿主受体作用的关键部位。【结论】h HKU1-CoV Spike蛋白与宿主受体作用的关键部位可能位于SER606~PRO673,这与已知结构的β冠状病毒相同区域在Loop区存在差异,但冠状病毒受体尚需进一步探索。

关键词：蛋白质结构预测同源建模穿线法人冠状病毒HKU1 Spike蛋白受体结合域

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