目的:基于转录组测序探究组织损伤模型中滑膜间充质干细胞来源外泌体(Synovial Mesenchymal Stem Cell-Derived Exosomes,SMSC-Exos)在颞下颌关节骨关节炎(Temporomandibular Joint Osteoarthritis,TMJ OA)中发挥软骨修复作用的关键功能性微小RNA(microRNAs,miRNAs)。方法:收集骨关节炎与非骨关节炎患者滑膜组织,提取SMSC-Exos进行miRNA测序并作差异分析;对差异miRNA靶基因进行基因本体论((Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,筛选关键功能性miRNA;构建白细胞介素-1β(Interleukin-1 beta,IL-1β)诱导的兔髁突软骨细胞炎症微环境模型;在炎症模型中过表达目标miRNA,采用qRT-PCR方法检测目标miRNA对软骨表型因子Ⅱ型胶原α1链(Collagen Type II Alpha 1 Chain,COL2A1)、蛋白多糖(Aggrecan,ACAN)与炎症因子人金属肽酶含血小板反应蛋白基元5((a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 5,ADAMTS5)、环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX2)m RNA表达水平的影响。结果:(1)成功分离培养并鉴定滑膜间充质干细胞及其外泌体;(2)对骨关节炎与非骨关节炎患者SMSC-Exos进行miRNA测序,筛选出16个差异表达miRNA,GO&KEGG分析显示,miR-429的靶基因主要参与生长发育相关过程,并富集于炎症通路;(3)在兔髁突软骨细胞炎症微环境模型中对miR-429进行功能验证,qRT-PCR结果显示,炎性软骨细胞过表达miR-429后,COL2A1、ACAN mRNA表达升高(P<0.05),ADAMTS5和COX2 mRNA表达降低(P<0.05)。结论:骨关节炎与非骨关节炎患者SMSC-Exos中存在差异表达的miRNA,其中miR-429在骨关节炎条件下显著下调,过表达miR-429对炎症髁突软骨细胞具有软骨修复和炎症抑制作用。
暂无评论