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第六届“全国石斑鱼类繁育与养殖产业化”论坛

作者：王登东李水生孙颖肖玲刘云张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

石斑鱼是我国及东南亚国家重要的海水养殖鱼类.斜带石斑鱼和褐点石斑鱼杂交产生的虎龙斑(Epinephelus fuscogutatus♀×***♂)相对其母本具有显著的生长优势,这将是我国石斑鱼产业中具有显著价值的养殖种类.该石斑鱼获得了两个亲本... 详细信息

石斑鱼是我国及东南亚国家重要的海水养殖鱼类.斜带石斑鱼和褐点石斑鱼杂交产生的虎龙斑(Epinephelus fuscogutatus♀×***♂)相对其母本具有显著的生长优势,这将是我国石斑鱼产业中具有显著价值的养殖种类.该石斑鱼获得了两个亲本优秀的生产特性,但目前对其杂交优势的分子机制仍有待研究.基于RNA测序和基因表达谱,我们实施了虎龙斑与两个亲本生长性状相关的比较转录组分析.在脑和肝脏两个组织中,分别获得了662和5329个差异表达基因(DEGs),对其进行GO富集,它们主要集中在metabolic process和catalytic activity两个GO term上.进一步分析显示,杂交子一代脑组织中的GnRH1、GnRH3以及肝脏中GH/IGF轴相关基因(如IGF-1,IGF-2b,IGFBP-1,IGFBP-2,IGFBP-4 and IGFBP-5a)显著上调,这与杂交石斑鱼生长优势的特点相吻合.

关键词：虎龙斑杂交优势分子机制调控途径

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集约化养殖花鳗鲡幼苗水体水质指标检测

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科学养鱼 2015年第8期37卷 52-53页

作者：肖诗斌陶宇王振园李桂峰孙际佳刘丽华南农业大学动物科学学院广东广州510642 中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州510275

国内目前所谓鱼类工厂化养殖多为室内流水集约化养殖,与采用封闭循环水的工厂化养殖差别很大。在广东省惠州市财兴实业有限公司集约化花鳗鲡幼苗养殖场,我们进行了1个水处理周期（7天）的水质监测,试图通过水体中p H、溶氧、氨氮、亚硝... 详细信息

国内目前所谓鱼类工厂化养殖多为室内流水集约化养殖,与采用封闭循环水的工厂化养殖差别很大。在广东省惠州市财兴实业有限公司集约化花鳗鲡幼苗养殖场,我们进行了1个水处理周期（7天）的水质监测,试图通过水体中p H、溶氧、氨氮、亚硝酸盐的指标的变化,探讨养鳗池水质因子之间作用关系。

关键词：工厂化养殖水体水质流水养殖水质因子处理周期氨氮浓度养殖池水质监测封闭循环半封闭式

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雌激素对斜带石斑鱼GnIH转录调节的分子机制研究

雌激素对斜带石斑鱼GnIH转录调节的分子机制研究

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第六届“全国石斑鱼类繁育与养殖产业化”论坛

作者：王晴晴郭银李高飞佘晴晴刘晓春林浩然有害生物控制与资源利用国家重点实验室中山大学生命科学大学院水生经济动物研究所广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

目前,在鱼类生殖轴(下丘脑-垂体-性腺)上检测到高表达的雌激素受体信号,表明了雌激素受体介导的雌激素效应调控着整个生殖活动的上下游.但是对于调控GnIH神经元的潜在机制知道的很少.首先,对斜带石斑鱼进行性腺切除和雌激素补偿实验.GnI... 详细信息

目前,在鱼类生殖轴(下丘脑-垂体-性腺)上检测到高表达的雌激素受体信号,表明了雌激素受体介导的雌激素效应调控着整个生殖活动的上下游.但是对于调控GnIH神经元的潜在机制知道的很少.首先,对斜带石斑鱼进行性腺切除和雌激素补偿实验.GnIH在性腺切除组下丘脑中的表达显著高于性腺切除并埋植E2胶条的组,表明斜带石斑鱼中E2对于GnIH是抑制作用.那E2对GnIH转录调节的分子机制是怎样的昵？在随后的研究中,克隆得到斜带石斑鱼GnIH的5'侧翼序列,其中包括转录起始位点上游片段1524bp以及第一外显子片段74bp.用构建好的斜带石斑鱼GnIH启动子的重组质粒GnIH-1524,研究了斜带石斑鱼GnIH的启动子在HEK 293T细胞系中的活性.将GnIH启动子重组载体和斜带石斑鱼pcDNAERβ1表达载体共转染至HEK 293T细胞系中,结果表明,10-7M的雌激素处理共转染pcDNA-ERβ1能够使得GnIH启动子活性显著降低,而只转染pcDNA空载的时候,E2处理HEK 293T细胞系和对照组间无差异.

关键词：斜带石斑鱼雌激素 GnIH 启动子转染

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雌激素受体beta介导E2对斜带石斑鱼两种kiss基因的反馈调节

雌激素受体beta介导E2对斜带石斑鱼两种kiss基因的反馈调节

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第六届“全国石斑鱼类繁育与养殖产业化”论坛

作者：郭银王晴晴姚谧刘晓春林浩然有害生物控制与资源利用国家重点实验室中山大学生命科学大学院水生经济动物研究所广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

Kisspeptin由Kiss基因编码,在青春期启动和生殖活动中扮演着重要角色,并且在啮齿动物中已经证明Kisspeptin可以促进GtH的合成和释放.众所周知,雌激素可以反馈调控GnRH的释放,但是GnRH神经元上并没有雌激素受体的表达,但是Kiss神经元上... 详细信息

Kisspeptin由Kiss基因编码,在青春期启动和生殖活动中扮演着重要角色,并且在啮齿动物中已经证明Kisspeptin可以促进GtH的合成和释放.众所周知,雌激素可以反馈调控GnRH的释放,但是GnRH神经元上并没有雌激素受体的表达,但是Kiss神经元上面有雌激素受体、雄激素受体以及孕激素受体的表达,所以Kiss神经元被认为是性类固醇激素反馈调节中的"纽带".雌激素同样在青春期启动和雌性生殖轴中发挥着重要作用,发挥作用主要是通过两个雌激素受体α和β.我们研究了斜带石斑鱼雌激素受体ERβ在雌激素反馈调节中的作用.卵巢切除1龄大小的斜带石斑鱼,发现kiss2、GnRH1和Fshβ的mRNA水平均有显著性升高,而且卵巢切除并补偿雌激素后,kiss2、GnRH1和Fshβ的mRNA水平又恢复至假手术水平.以上结果说明,在青春期前的斜带石斑鱼中,雌激素对于生殖轴上的反馈调节是负反馈调节.所以,ERβ在E2对两种kiss基因的负反馈调节中发挥着怎么样的作用呢？接下来在293T细胞中,运用瞬时细胞转染的方法共转染含有kiss1或kiss2的启动子载体,最后发现两个雌激素受体ERβ1和ERβ2在10-7 M E2雌激素刺激下,显著性地抑制kiss1和kiss2的启动子活性.最后,在脑中分别共定位了ERβ1或ERβ2与kiss1或kiss2.结果证明斜带石斑鱼两种雌激素受体ERβ1和ERβ2可以介导E2对斜带石斑鱼kiss1和kiss2的负反馈调节.

关键词：斜带石斑鱼 kiss1 kiss2 ERβ1 ERβ2 负反馈性腺切除

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斜带石斑鱼GnRH/GnRH-R的结合特性

斜带石斑鱼GnRH/GnRH-R的结合特性

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第六届“全国石斑鱼类繁育与养殖产业化”论坛

作者：佘晴晴王晴晴郭银李高飞姚谧刘晓春林浩然有害生物控制与资源利用国家重点实验室中山大学生命科学大学院水生经济动物研究所广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广州 510275

促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)是由下丘脑合成和分泌的十肽激素,是动物生殖过程中的重要激素之一,是下丘脑-垂体-性腺生殖轴(hypothalamus pituitary gonadal axis,HPG)的关键信号分子,它与脑垂体促性腺激... 详细信息

促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)是由下丘脑合成和分泌的十肽激素,是动物生殖过程中的重要激素之一,是下丘脑-垂体-性腺生殖轴(hypothalamus pituitary gonadal axis,HPG)的关键信号分子,它与脑垂体促性腺激素分泌细胞上的促性腺激素释放激素受体(gonadotropin releasing hormone receptor,GnRH-R)结合后,刺激促性腺激素(gonadotropin,GtH)的合成和分泌,在脊椎动物的性腺发育、性成熟和繁殖功能的维持中起着至关重要的调节作用。在硬骨鱼的进化中,随着基因组的复制,GnRH及其内源性的受体的种类和数量都有所增加,在鲈形目的斜带石斑鱼中,发现了三种GnRH(sbGnRH、cGnRH、sGnRH)和五种GnRHR(ecGnRHR-1A、ecGnRHR-1B、ecGnRHR-2A、ecGnRHR-2B、ecGnRHR-2C),并且已经克隆得到了这三种GnRH基因和五种GnRHR基因ORF(open reading frame)全长,为了进一步的阐明GnRH/GnRH-R在斜带石斑鱼这种雌雄同体,先雌后雄的鲈形目鱼类中对生殖调控的作用以及GnRH基因启动的下游信号及细胞内信号变化情况,本论文以斜带石斑鱼为对象,通过用COS-7细胞系进行转染试验研究了斜带石斑鱼两种GnRHR(ecGnRHR-1B、ecGnRHR-2A)和三种GnRH的结合特性。

关键词：斜带石斑鱼 GnRH GnRHR 结合特性

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养殖密度、水质和分级对水泥池鱖鱼苗种培育的影响

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广东农业科学 2015年第16期42卷 84-88页

作者：古勇明卢薛胥鹏曾爽周磊曾雷李朝兵佛山市百容水产良种有限公司广东佛山528216 有害生物控制与资源利用国家重点实验室/水生经济动物研究所/广东省水生经济动物良种繁育重点实验室/中山大学生命科学学院广东广州510275

为研究养殖密度、水质和分级对水泥池鳜苗种培育的影响，以翘嘴鳜鱼苗（体长0．7～1cm）为对象，在不同密度下投喂麦瑞加拉鲮进行试验。结果表明：（1）小规格苗种（〈2．5cm）的放养密度宜在4000尾／m^3左右，大规格苗种（2．5～6．5c... 详细信息

为研究养殖密度、水质和分级对水泥池鳜苗种培育的影响，以翘嘴鳜鱼苗（体长0．7～1cm）为对象，在不同密度下投喂麦瑞加拉鲮进行试验。结果表明：（1）小规格苗种（〈2．5cm）的放养密度宜在4000尾／m^3左右，大规格苗种（2．5～6．5cm）的放养密度不宜超过800尾／m^3。（2）养殖水体中氨氮和亚硝酸盐的浓度均与鳜鱼苗养殖密度成显著正相关，水泥池中进行鳜鱼苗种培育不宜密度过高，密度越高，疾病暴发的风险越大。（3）分级过筛选取鳜苗体长为2～3、5-6、8-9cm时的3个节点进行，保持饱食投喂，能较好地提高鳜鱼苗种的整齐度，降低残食率，提高成活率。

关键词：翘嘴鳜苗种培育养殖密度水质分级

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两种杂交石斑鱼及其亲本的形态差异分析

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水产学报 2014年第6期38卷 778-785页

作者：王燕张勇张海发黄文肖玲李水生杨宇晴林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东省海洋渔业试验中心

为研究两种杂交石斑鱼及其亲本的形态差异,实验采用传统形态学测定与现代框架测定结合的方法,测定了青龙斑(斜带石斑鱼♀×鞍带石斑鱼♂)和虎龙斑(棕点石斑鱼♀×鞍带石斑鱼♂)及其亲本的可数性状和可量性状,并进行相关统计分... 详细信息

为研究两种杂交石斑鱼及其亲本的形态差异,实验采用传统形态学测定与现代框架测定结合的方法,测定了青龙斑(斜带石斑鱼♀×鞍带石斑鱼♂)和虎龙斑(棕点石斑鱼♀×鞍带石斑鱼♂)及其亲本的可数性状和可量性状,并进行相关统计分析。结果显示,在外观方面,青龙斑与亲本相比,其斜带边缘清晰连贯,而虎龙斑体侧分布有不同于亲本的大型环状斑;在外部形态框架方面,青龙斑背鳍前端及躯干形态都偏向于母本,呈现出背腹部压缩的细长型,而虎龙斑背鳍前端的框架形态偏向于母本、躯干的框架形态却偏向于父本,呈现出两种框架形态组合的特点。综合传统可量数据和框架数据聚类分析、判别分析和主成分分析的结果表明:两种杂交石斑鱼在外部形态方面更偏向于母本。

关键词：杂交石斑鱼亲本形态差异可数性状分析可量性状分析

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中国南方沿海13种石斑鱼类的分子系统进化关系分析

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中山大学学报（自然科学版） 2014年第4期53卷 123-130页

作者：陈兴汉郭梁李明明蒙子宁林浩然阳江职业技术学院生命科学与技术系广东阳江529566 中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州510275

石斑鱼类(Groupers)是世界性海洋经济鱼类,也是中国南方沿海省份重要的海水增养殖对象,其种类繁多,由于缺乏明显的种间外部形态区别特征,石斑鱼的分类一直是鱼类系统分类学的一个难题,存在着较多的争议和混淆。为了从分子水平揭示石斑... 详细信息

石斑鱼类(Groupers)是世界性海洋经济鱼类,也是中国南方沿海省份重要的海水增养殖对象,其种类繁多,由于缺乏明显的种间外部形态区别特征,石斑鱼的分类一直是鱼类系统分类学的一个难题,存在着较多的争议和混淆。为了从分子水平揭示石斑鱼类的系统进化关系,应用线粒体细胞色素b基因(Cyt b)及两个核糖体RNA基因(16S和12S)序列联合构建系统进化树对中国近海石斑鱼亚科3属13种进行种类鉴定及亲缘关系分析,探讨了石斑鱼类的分子系统进化。结果表明:①线粒体基因序列在石斑鱼类种间存在较大的变异,种内变异极小,是进行石斑鱼类种类鉴定较为适宜的分子标记;②所研究的3属13种石斑鱼类中,石斑鱼属与九棘鲈属的亲缘关系较近,与鳃棘鲈属的较远;③赤点石斑鱼和青石斑鱼、蜂巢石斑鱼与鲑点石斑鱼、斜带石斑鱼与棕斑石斑鱼两两间具有较近的亲缘关系。

关键词：石斑鱼类 Cyt b 16S rRNA 12S rRNA 分子系统进化

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广东沿海3个斜带石斑鱼养殖群体的RAPD和线粒体Cyt b基因序列变异分析

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南方水产科学 2014年第4期10卷 27-33页

斜带石斑鱼（Epinephelus coioides）为中国南方重要的海水增养殖经济鱼类,但过度捕捞和人工养殖的快速扩张导致了其自然资源衰退和遗传多样性降低。文章采用随机扩增多态DNA（RAPD）和线粒体细胞色素b（Cyt b）基因序列分析方法,对惠... 详细信息

斜带石斑鱼（Epinephelus coioides）为中国南方重要的海水增养殖经济鱼类,但过度捕捞和人工养殖的快速扩张导致了其自然资源衰退和遗传多样性降低。文章采用随机扩增多态DNA（RAPD）和线粒体细胞色素b（Cyt b）基因序列分析方法,对惠州、深圳和湛江3个斜带石斑鱼养殖群体进行了遗传多样性状况和遗传差异的研究。结果表明：1）相比较于线粒体Cyt b基因序列分析,RAPD技术在研究斜带石斑鱼种内遗传变异方面具有更高的灵敏性和多态性;2）相比较于其他已经报道的石斑鱼类,斜带石斑鱼的遗传多样性较低,RAPD检测到的多态位点百分率（P）为40.57%,究其原因,可能是受过度捕捞和人工养殖的影响;3）RAPD检测到的群体间遗传相似度（Ⅰ）高达0.967 1～0.980 8,而Cyt b的核苷酸多样性仅为0.003 8;斜带石斑鱼养殖群体间的遗传差异显然很小,具有相似的遗传背景。文章还探讨了斜带石斑鱼线粒体Cyt b基因的特点,并针对目前斜带石斑鱼的养殖现状提出了相应保护遗传多样性的对策与建议。

关键词：斜带石斑鱼 RAPD 线粒体Cyt b 遗传变异

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激素诱导斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)雄性化的研究

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海洋与湖沼 2014年第6期45卷 1317-1323页

作者：黄文杨宪宽徐新肖玲李水生赵会宏张海发张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广州510275 华南农业大学动物科学学院广州510642 广东省海洋渔业试验中心惠州516081 海南大学海洋学院海口570228

石斑鱼属雌雄同体雌性先成熟鱼类,低龄鱼卵巢先成熟,表现为雌性,高龄鱼才性转变为雄性。本实验通过持续跟踪取样,分析了人工养殖条件下斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)在36月龄内的性腺发育过程,发现其性分化完成后,雌性卵巢在9月龄... 详细信息

石斑鱼属雌雄同体雌性先成熟鱼类,低龄鱼卵巢先成熟,表现为雌性,高龄鱼才性转变为雄性。本实验通过持续跟踪取样,分析了人工养殖条件下斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)在36月龄内的性腺发育过程,发现其性分化完成后,雌性卵巢在9月龄后开始发育。因此,采取投喂含有雄激素甲基睾酮(MT)饲料的方法,可以在石斑鱼卵巢发育之前,成功诱导8月龄的斜带石斑鱼幼鱼向雄性方向发育。结果表明,以MT 10mg/kg饲料的剂量投喂3个月能够有效诱导卵巢未发育的幼鱼往雄性方向发育;但停止投喂MT后,幼鱼精巢又开始出现退化,不会继续往雄性方向发展,而转变为雌性。以上结果表明,斜带石斑鱼性别决定和分化除了受遗传因子和内分泌调控外,还受到年龄、体型和群体、环境等因子的影响,人工投喂MT激素的作用并不能从根本上影响石斑鱼幼鱼的性腺发育的方向,只有在持续剂量的MT激素诱导下,石斑鱼幼鱼才能发育为成熟的雄鱼。

关键词：斜带石斑鱼甲基睾酮性别分化性腺发育

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