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主题

53 篇 斜带石斑鱼
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12 篇 生长激素
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9 篇 赤点石斑鱼
9 篇 生长
8 篇 尼罗罗非鱼
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7 篇 基因表达
7 篇 性逆转
7 篇 石斑鱼
6 篇 基因克隆
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5 篇 促黄体素释放激素...
5 篇 rapd
5 篇 季节变化
5 篇 组织分布
5 篇 表达分析
5 篇 遗传多样性
5 篇 表达

机构

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16 篇 海南大学
14 篇 惠州学院
13 篇 华南农业大学
10 篇 有害生物控制与资...
5 篇 广东省大亚湾水产...
4 篇 广州大学
4 篇 水生经济动物研究...
4 篇 国家淡水渔业工程...
4 篇 广东省海洋渔业试...
4 篇 中山大学生命科学...
3 篇 华南师范大学
3 篇 广东海洋大学
3 篇 广东省水生经济动...
2 篇 番禺国家级罗非鱼...
2 篇 阳江职业技术学院
2 篇 遗传资源与进化国...
2 篇 河南理工大学
2 篇 中国水产科学研究...
2 篇 有害生物控制与资...

作者

137 篇 林浩然
92 篇 张勇
70 篇 刘晓春
37 篇 李水生
34 篇 李文笙
15 篇 刘云
14 篇 马细兰
14 篇 周立斌
13 篇 王庆
12 篇 蒙子宁
12 篇 吴金英
12 篇 赵会宏
11 篇 陈嘉兴
11 篇 肖玲
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9 篇 彭诚
9 篇 刘永坚
9 篇 张海发
8 篇 赵密
8 篇 田丽霞

语言

197 篇 中文

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斜带石斑鱼granulin基因克隆及其功能初步分析

斜带石斑鱼granulin基因克隆及其功能初步分析

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：赵密郭银陈慧敏肖玲刘晓春张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

石斑鱼是一种名贵的海产鱼类,是一种雌雄同体雌性先熟的种类,其生活史存在性反转现象.Granulin蛋白是一种自分泌生长因子,在很多条件下与胰岛素样生长因子IGF具有相似的功能,在生长发育中发挥重要的作用.我们在斜带石斑鱼的天然性反转...

石斑鱼是一种名贵的海产鱼类,是一种雌雄同体雌性先熟的种类,其生活史存在性反转现象.Granulin蛋白是一种自分泌生长因子,在很多条件下与胰岛素样生长因子IGF具有相似的功能,在生长发育中发挥重要的作用.我们在斜带石斑鱼的天然性反转转录组中发现了三种granulin基因,分别命名为granulin1,granulin2和granulin3.其中granulin1和granulin2基因在雄鱼中的表达量是雌鱼表达量的三十多倍,granulin3基因在雄鱼中的表达量是雌鱼表达量的0.5倍,表明了granulin基因在石斑鱼的性反转中起到了一定的作用.我们对三种granulin基因进行了RACE扩增,granulin1的全长3350 bp,其开放阅读框(ORF)为2217bp,编码739个氨基酸;granulin2的全长为1378 bp,其开放阅读框为888 bp,编码296个氨基酸;granulin3的全长为3237 bp,其开放阅读框为2433 bp,编码811个氨基酸.利用双分子荧光互补(BiFC)技术,构建了pBIFC-VN 155-granulin1、pBIFC-VN 155-granulin2、pBIFC-VN 155-granulin3三种N段真核表达质粒和pBIFC-VC 155-ARl、pBIFC-VC 155-AR2、pBIFC-VC 155-ERαt、pBIFC-VC 155-ERβ1、pB IFC-VC 155-Erβ2、pBIFC-VC155-LHR1、pBIFC-VC 155-LHR2、pBIFC-VC 155-FSHR八种不同激素受体的C端真核表达质粒,逐个将3种N段真核表达质粒分别与8种C段真核表达质粒共转染到293T细胞,若N段表达质粒与C段表达质粒有相互作用,则可以观察到荧光现象.结果：pBIFC-VN155-granulin3与pBIFC-VC155-ERα在细胞内结合出现的荧光信号,表明granulin3与雌激素受体ERα可以相互作用.具体作用机制,还需进一步验证.

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人工养殖条件下赤点石斑鱼的激素变化研究

人工养殖条件下赤点石斑鱼的激素变化研究

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：吴永丽周立斌肖玲王翔李水生张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

在自然条件下，赤点石斑鱼为雌雄同体、雌性先熟种类，从发生性别分化开始时表现为雌性性别，当雌鱼发育到一定年龄及大小时，才发生性逆转。但在养殖条件环境下，有一定比例的原发性雄鱼出现。本研究以人工养殖条件下赤点石斑鱼为研究...

在自然条件下，赤点石斑鱼为雌雄同体、雌性先熟种类，从发生性别分化开始时表现为雌性性别，当雌鱼发育到一定年龄及大小时，才发生性逆转。但在养殖条件环境下，有一定比例的原发性雄鱼出现。本研究以人工养殖条件下赤点石斑鱼为研究对象，研究一龄和二龄赤点石斑鱼激素的变化。我们通过常规组织学方法研究赤点石斑鱼性腺的变化，实验结果表明：一龄赤点石斑鱼性腺部分为Ⅱ期性腺、兼性性腺和雄性性腺;二龄赤点石斑鱼性腺发育时期有Ⅱ期性腺、Ⅲ期卵巢、Ⅳ期卵巢、Ⅵ期卵巢以及兼性性腺和雄性性腺。进一步测量血清中雌二醇(E2)和11-酮基睾酮(11-KT)含量，发现E2主要在卵巢成熟期的鱼血清中浓度较高，而11-KT在性腺为兼性和雄性的鱼血清中浓度较高。此外，本研究将进一步探讨赤点石斑鱼生殖轴相关基因及雌、雄激素受体(ERα、ERβ1、ERβ2和AR)基因的表达。

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斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)Ⅱ型促黄体生成素受体的克隆及其功能初步研究

斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)Ⅱ型促黄体生成素受体的克隆及...

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：陈慧敏黄敏伟彭诚肖玲李琳丽刘云张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

石斑鱼是我国南方沿海地区主要海水养殖鱼类之一,具有重要的经济价值.石斑鱼为典型的雌雄同体鱼类,其生殖调控主要受生殖内分泌因子和环境因素的调控.现已发现,在鱼类存在两种促性腺激素：促卵泡生成素(FSH)和促黄体生成素(LH),它们通...

石斑鱼是我国南方沿海地区主要海水养殖鱼类之一,具有重要的经济价值.石斑鱼为典型的雌雄同体鱼类,其生殖调控主要受生殖内分泌因子和环境因素的调控.现已发现,在鱼类存在两种促性腺激素：促卵泡生成素(FSH)和促黄体生成素(LH),它们通过与其受体：FSHR和LHR结合发挥作用.本研究在对斜带石斑鱼全基因组的序列分析的基础上,发现了一种新的LH受体,将其命名为LHR2,另一LH受体命名为LHR1.我们通过基因克隆等方法,得到LHR2的ORF区全长,共编码693个氨基酸.通过I-TASSER在线软件对LHR2进行三级结构的预测,发现其为七次跨膜蛋白,与另外两种受体的结构相似,同属于GPCR家族成员.分别构建了LHR2及LHR1的表达质粒,转染293-T细胞后,用hCG、hLH、hFSH、equine LH (eLH)作为刺激剂,通过双荧光素酶报告基因系统检测细胞内cAMP的变化情况,以探究LHR2是否有生物学活性.实验结果表明,在hCG或eLH的刺激下,转染LHR1或LHR2的细胞内的cAMP浓度均有不同程度的上升,且升高的幅度与刺激剂的浓度在一定范围内呈正相关的关系.上述实验结果说明,斜带石斑鱼的两种LH受体：LHR1和LHR2,都能与hCG或eLH发生相互作用,激活下游的信号通路.这是首次在海水鱼类中发现两种功能性LHR,对于研究石斑鱼的性别调控有重要意义.

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视黄酸信号在斜带石斑鱼雌性分化中的作用研究

视黄酸信号在斜带石斑鱼雌性分化中的作用研究

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：刘云王庆李琳丽赵密叶智锋陈嘉兴张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

斜带石斑鱼是典型的雌雄同体雌性先熟鱼类,首次性分化均为雌性.斜带石斑鱼首先分化为雌性的分子机制还知之甚少.在哺乳类,视黄酸(retinoic acid,RA)是启动生殖细胞减数分裂的关键信号,减数分裂在性分化的早期启动是性别向雌性发育的标...

斜带石斑鱼是典型的雌雄同体雌性先熟鱼类,首次性分化均为雌性.斜带石斑鱼首先分化为雌性的分子机制还知之甚少.在哺乳类,视黄酸(retinoic acid,RA)是启动生殖细胞减数分裂的关键信号,减数分裂在性分化的早期启动是性别向雌性发育的标志事件.在本研究中,我们通过分析石斑鱼不同性腺发育时期的转录组数据发现： RA合成酶编码基因aldh1 a2和aldh1 a3的表达量在原始生殖细胞增殖期(50d-11od)显著上升,并在卵原细胞启动减数分裂时期(180d-240d)高表达,随着卵母细胞进入生长期后表达量持续下降,在成熟的卵巢中检测不到表达.而RA分解酶编码基因(cyp26a1,cyp26b1和cyp26c1)在早期性腺发育过程中都处于低表达状态,而在性分化结束后表达上升.这些数据表明,在斜带石斑鱼性腺发生早期合成了大量的RA.为了进一步研究视RA信号在性分化中的作用,我们采用RA合成酶的抑制剂4-二乙氨基苯甲醛(DEAB)进行投喂实验.结果表明：在180天,DEAB投喂组的生殖细胞数量显著低于对照组;在210天,DEAB投喂组没有生殖细胞;而DEAB+RA拯救组的生殖细胞数量与对照组无明显区别.这些结果表明：石斑鱼性腺发育早期RA信号较强,能够刺激石斑鱼早期PGC的增殖以及减数分裂的启动,进而促使性腺朝雌性发育.

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激素诱导卵巢分化期斜带石斑鱼性逆转机制研究

激素诱导卵巢分化期斜带石斑鱼性逆转机制研究

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：王庆肖玲李琳丽刘云刘晓春李水生张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

外源激素能够诱导鱼类性别转变,外源雄激素17α-甲基睾丸酮(17-methyltestosterone,MT)广泛应用于诱导性成熟石斑鱼性逆转,但是停止MT处理诱导出的雄鱼又转变回雌鱼,能否通过MT诱导卵巢分化期的幼鱼产生永久性的雄鱼尚不清楚。本研究通...

外源激素能够诱导鱼类性别转变,外源雄激素17α-甲基睾丸酮(17-methyltestosterone,MT)广泛应用于诱导性成熟石斑鱼性逆转,但是停止MT处理诱导出的雄鱼又转变回雌鱼,能否通过MT诱导卵巢分化期的幼鱼产生永久性的雄鱼尚不清楚。本研究通过MT诱导孵化后90天左右处于卵巢分化期的幼鱼性逆转,并从性腺组织学、基因袁达水平和激素水平方面研究了MT诱导卵巢分化期幼鱼性逆转过程。通过连续性腺组织切片发现,MT投喂会抑制卵巢腔的形成,停止MT投喂后性腺组织出现雌性生殖细胞但是没有卵巢腔生成;进一步通过细胞增殖和细胞凋亡,追踪DMRT1蛋白表达的细胞发现,在诱导雄性性腺生成过程是先形成输出小管,之后在输出小管周围开始出现雄性生殖细胞,之后才开始精子发生过程。检测性别相关基因表达水平发现,雄性性别相关基因dmrt1表达水平随着投喂时间的进行表达量增加,但是cyp11b和sox9的表达水平没有变化;雌性性别相关基因cyp19a1a和foxl2随着投喂的进行表达量降低;进一步我们检测激素水平发现随着MT投喂的进行11-KT水平维持不变但是E2的水平下降,当停止MT处理时E2又回到雌鱼水平,表明MT投喂只是抑制了雌激素的生成并没有产生出内生的雄激素。综上所述,我们的研究发现MT诱导卵巢分化期的斜带石斑鱼性逆转过程是先抑制卵巢腔的形成并生成输出小管,然后在输出小管周围开始出现雄性生殖细胞,之后开始精子发生,在整个过程中雌激素受到抑制但是并不会产生内生的雄激素,因此当停止MT投喂后,诱导出的雄性性腺转变成没有卵巢腔的雌性性腺。

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斜带石斑鱼超声检测技术的建立

斜带石斑鱼超声检测技术的建立

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：叶智锋陈嘉兴王晶陈枭李水生张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

超声检测技术现已广泛用于医学领域，是一项非常成熟的无损伤检测技术。国内外已将超声检测技术引用至水产养殖领域，主要用于无损性别鉴定和体内器官识别，且已在欧洲大比目鱼，中华鲟，西伯利亚鲟等鱼类中得到有效应用。石斑鱼是雌雄...

超声检测技术现已广泛用于医学领域，是一项非常成熟的无损伤检测技术。国内外已将超声检测技术引用至水产养殖领域，主要用于无损性别鉴定和体内器官识别，且已在欧洲大比目鱼，中华鲟，西伯利亚鲟等鱼类中得到有效应用。石斑鱼是雌雄同体，先雌后雄鱼类。实际操作中，为了确定石斑鱼的性别，常采用组织学切片法和激素检测法。两种方法对石斑鱼皆有较大损伤，不利于实际生产和科学研究，因而亟需建立无损的检测方法。本研究以四龄到六龄斜带石斑鱼为研究对象，通过体外超声检测和剖腹检查对比，总结性腺和主要器官的超声图像特征，并辅以组织学切片法确认性腺时期和类型，建立起斜带石斑鱼的鳔、胃、脊柱、肠道、眼部、四期卵巢的检测技术，还将进一步建立各时期卵巢和精巢、心脏、食道等器官的识别技术。本研究建立的无损性腺鉴定和体内器官识别技术为超声检测在斜带石斑鱼上的应用提供了重要依据。

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斜带石斑鱼基因组数据可视化系统构建

斜带石斑鱼基因组数据可视化系统构建

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：王登东唐驻景王庆刘云刘晓春李水生张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

人类基因组图谱绘制完成后，尤其近几年来测序技术快速的进步和生物信息学的迅猛发展，人们越来越多地从基因和基因组层面去对生命现象和机理进行研究。随着生物序列的爆炸式增长，对海量数据的分析和可视化已成为生命科学领域的一项重...

人类基因组图谱绘制完成后，尤其近几年来测序技术快速的进步和生物信息学的迅猛发展，人们越来越多地从基因和基因组层面去对生命现象和机理进行研究。随着生物序列的爆炸式增长，对海量数据的分析和可视化已成为生命科学领域的一项重要课题，基因组数据可视化在基因结构分析，功能研究等方面具有重要意义。由于基因组数据十分庞大，相较于桌面式基因组浏览器，基于web的基因组浏览器有着便利性和数据传播等优势而成为主要发展方向。目前功能强大、应用广泛的主要有UCSCGenomeBrowser、Ensembl GenomeBrowser、NCBI Map Viewer、GBrowse、JBrows等;其中UCSC、NCBI和Ensembl应用最为广泛，而GBrowse等新一代基因组浏览器采用了最新的网络技术，且具有开源和可定制的特点从而被多个机构和项目采用。随着斜带石斑鱼(Epinephineus Coioides)基因组的测序、组装和基因注释完成，我们着手构建了石斑鱼基因组数据可视化系统，以方便科研人员对石斑鱼基因的结构和功能展开科学研究。本系统采用了JBrowse基因组浏览器作为核心组件之一，并利用网页技术展示基因序列、结构和功能注释等详细信息。此外，为了更好地辅助分析，本系统整合了Blast等信息学工具，实现了斜带石斑鱼基因组序列、基因结构和注释信息的可视化和分析功能。

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探索miRNA21介导的斜带石斑鱼干扰素γ对TRAF6的精细调控

探索miRNA21介导的斜带石斑鱼干扰素γ对TRAF6的精细调控

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：彭弯李高飞姚谧张勇林浩然卢丹琪中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

针对病害频发这一我国渔业健康持续发展所面临的最大问题,本文以斜带石斑鱼为研究对象,进一步探究miRNA介导干扰素γ(IFNγ)在病原识别和递呈过程中的关键作用.IFNγ是具有广谱抗病毒功能和调节免疫系统的Ⅱ型干扰素.相比于哺乳动物中...

针对病害频发这一我国渔业健康持续发展所面临的最大问题,本文以斜带石斑鱼为研究对象,进一步探究miRNA介导干扰素γ(IFNγ)在病原识别和递呈过程中的关键作用.IFNγ是具有广谱抗病毒功能和调节免疫系统的Ⅱ型干扰素.相比于哺乳动物中只发现的一种IFNγ,斜带石斑鱼中存在两种IFNγ (IFNγ1和IFNγ2).先前的离体实验结果表明斜带石斑鱼的IFNγ1和IFNγ2重组蛋白不仅可上调病原识别通路上重要的接头分子TRAF6蛋白的表达,同时也调节miRNA-21-5p表达.通过靶点预测软件发现TRAF6的3'UTR上存在两个miRNA21的结合位点(分别命名为b1和b2),因此我们进一步探究TRAF6和miRNA21之间的关系.我们克隆得到TRAF6 3'UTR区,分别构建了pmiR-TRAF6 wt,pmiR-TRAF6 bl mut,pmiR-TRAF6 b2 mut和pmiR-TRAF6 b1 and b2 mut荧光素酶表达载体.双荧光素酶报告基因检测实验表明,与Negtive Control+pmiR-TRAF6 3UTR wt组相比,miRNA21 mimic+pmiR-TRAF6 3UTR wt组的荧光值是上升的.miRNA21 inhibitor刺激石斑鱼头肾单核细胞后,miR21的表达水平是显著下降的,TRAF6蛋白的表达却是显著上升的;以上结果表明,miRNA21和TRAF6之间存在一定的联系,但可能不是直接的靶点关系.

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体外诱导斜带石斑鱼卵母细胞成熟技术的初步探索

体外诱导斜带石斑鱼卵母细胞成熟技术的初步探索

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：唐霖彭诚赵密张勇刘云李水生林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

水产养殖的主要目标之一是获得大量可育的卵,斜带石斑鱼作为重要的海水养殖鱼类,有关其卵母细胞成熟调控的研究几乎是一片空白.对此,本研究旨在建立体外诱导石斑鱼卵子成熟和卵子排放的技术,并进一步探索石斑鱼卵成熟的分子机制.对性成...

水产养殖的主要目标之一是获得大量可育的卵,斜带石斑鱼作为重要的海水养殖鱼类,有关其卵母细胞成熟调控的研究几乎是一片空白.对此,本研究旨在建立体外诱导石斑鱼卵子成熟和卵子排放的技术,并进一步探索石斑鱼卵成熟的分子机制.对性成熟的斜带石斑鱼进行性腺解剖,根据直径大小可初步将其未成熟的卵泡(follicle)分为5个发育时期：原始生长期(Primary growth stage,PG,～0.08 mm);卵黄发生前的时期(Previtellogenic stage,PV,～0.18 mm);卵黄积累早期(Early vitellogenic stage,EV, ～).25 mm);卵黄积累中期(Midvitell-ogenicstage,MV,～0.35 mm);卵黄积累完全时期(Full-grown immature stage,FG,～0.45 mm).用FG期的卵泡进行体外诱导成熟试验,发现L15培养基对于细胞的形态的维持效果最好.进一步对L15培养基进行了浓度梯度的试验,发现浓度(60％-100％)对细胞培养过程中的形态影响并无明显差异,使用100％的L15培养基进行体外诱导成熟试验.在大部分淡水鱼类和少数海水鱼类中,已有研究鉴定得出了两种主要的鱼类卵母细胞成熟诱导激素(MIH)：DHP (17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one)和20βS (17,20,21-trihydroxy-4-Pregnen-3-one),本研究使用HCG,DHP和20βs作为刺激剂进行成熟诱导试验.(1)直接单独加入HCG(10IU,100IU),DHP(100nM,300nM),20βS(100nM,300nM)不能诱导FG期卵泡成熟;(2)同时加入两种刺激剂：100IU HCG+100nM DHE 100IU HCG+100nM 20βS,100nMDHP+100nM20βS也无法诱导FG期卵泡成熟;(3)加入100IU HCG诱导1,3,6小时后再加入DHP(100nM,300nM)或20βS(100nM,300nM)也不能诱导FG期卵泡成熟.以上结果表明,斜带石斑鱼的卵母细胞成熟机制较为复杂,暂时仍无法确定其MIH是哪一种性类固醇激素,其体外诱导卵母细胞成熟技术仍须继续探索.

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基于赤点石斑鱼转录组的SSR标记开发

基于赤点石斑鱼转录组的SSR标记开发

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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛

作者：陈枭李玉谢桢桢蒙子宁夏军红张勇林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州 510275

赤点石斑鱼是我国沿海常见的经济鱼类,近年来由于人类的过度捕捞、环境污染以及气候变化等因素,种质资源出现了极度退化。微卫星分子标记(SSR,simple sequence repeat)的开发对赤点石斑鱼的遗传背景信息、制定相应的保护措施具有积极的...

赤点石斑鱼是我国沿海常见的经济鱼类,近年来由于人类的过度捕捞、环境污染以及气候变化等因素,种质资源出现了极度退化。微卫星分子标记(SSR,simple sequence repeat)的开发对赤点石斑鱼的遗传背景信息、制定相应的保护措施具有积极的作用。转录组可以提供基因表达、基因调控和蛋白质氨基酸组成等信息。随着高通量测序的发展和成熟,EST数据不断增加,从转录组中筛选SSR标记已经得到广泛的应用。本研究基于课题组未发表的赤点石斑鱼转录组数据,使用misa软件检测SSR位点,并用primer3进行引物设计,从中选取119条重复数较多的SSR序列进行扩增特异性和多态性检测。合成的引物首先在一个斜带石斑鱼个体中检验扩增特异性,然后再选择扩增特异性高,条带清晰的引物进行群体扩增。初步实验结果显示有5对赤点石斑鱼微卫星分子标记含有多态性。本研究为将来赤点石斑鱼物种的保护和繁育及相关遗传学研究提供了基础。

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