检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物制品学杂志 2014年第2期27卷 262-266页

作者：龚燕燕殷欣唐存多邬敏辰曾妍江南大学药学院江苏无锡214122 江南大学工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122 江南大学无锡医学院江苏无锡214122

目的利用宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)阿魏酸酯酶与木聚糖酶协同降解小麦麸皮,制备阿魏酸(ferulic acid,FA)。方法将工程酵母菌*** GS115/AusfaeA和GS115/Ausxyn11A经甲醇诱导发酵,分别获得重组阿魏酸酯酶和木聚糖酶。在pH 5.0、40... 详细信息

目的利用宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)阿魏酸酯酶与木聚糖酶协同降解小麦麸皮,制备阿魏酸(ferulic acid,FA)。方法将工程酵母菌*** GS115/AusfaeA和GS115/Ausxyn11A经甲醇诱导发酵,分别获得重组阿魏酸酯酶和木聚糖酶。在pH 5.0、40℃、料液比1∶60(g∶ml)、水解10 h的条件下,探讨木聚糖酶添加量、阿魏酸酯酶与木聚糖酶协同作用对阿魏酸酯酶水解去淀粉麦麸(destarched wheat bran,DSWB),释放FA的影响,并检测酶解产物FA的体外抗氧化活性。结果在0.5g DSWB中单独加入56U阿魏酸酯酶时,FA的释放率为碱提等量麸皮总FA含量的19.48%;在此基础上添加木聚糖酶,能促进阿魏酸酯酶进一步释放FA,当木聚糖酶添加量为300 U时,FA的释放率从19.48%上升至70.10%;木聚糖酶单独作用于DSWB未检测到FA的释放;在反应体系中先添加木聚糖酶,能释放1.23 mg FA,比先添加阿魏酸酯酶提高了0.3 mg;随着FA浓度的增加,FA的还原能力及其对DPPH自由基和羟基自由基的清除能力均呈稳定增长,各浓度FA对羟基自由基的清除能力均高于对DPPH自由基的清除能力。结论阿魏酸酯酶与木聚糖酶之间存在协同作用,双酶共同作用,有利于小麦麸皮的降解,提高FA的释放率。

关键词：宇佐美曲霉阿魏酸酯酶木聚糖酶小麦麸皮协同作用阿魏酸

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用双标记时间分辨荧光免疫法同时检测黄曲霉毒素B_1和赭曲霉毒素A

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卫生研究 2009年第4期38卷 385-388页

作者：黄飚张珏马智鸿张艺朱岚金坚谢敏浩江苏省原子医学研究所无锡214063 江南大学医药学院

目的采用双标记时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立同时检测黄曲霉毒素B1(AFB1)和赭曲霉毒素A(OTA)的高灵敏分析方法。方法将AFB1-HRP、OTA-BSA包被96孔板为固相抗原,与游离AFB1、OTA共同竞争有限的抗AFB1多克隆抗体或抗OTA单克隆抗体... 详细信息

目的采用双标记时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立同时检测黄曲霉毒素B1(AFB1)和赭曲霉毒素A(OTA)的高灵敏分析方法。方法将AFB1-HRP、OTA-BSA包被96孔板为固相抗原,与游离AFB1、OTA共同竞争有限的抗AFB1多克隆抗体或抗OTA单克隆抗体,以稀土离子Eu3+标记的羊抗兔抗体、Sm3+标记羊抗鼠抗体进行示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立AFB1/OTA-TRFIA。结果该方法检测AFB1的灵敏度为0.02μg/L,测量范围为0.02～100μg/L,批内和批间变异系数(CV)分别为3.2%和7.3%,平均回收率为88.1%;检测OTA的灵敏度为0.05μg/L,测量范围为0.05～50μg/L,批内和批间CV分别为2.9%和7.9%,平均回收率为89.9%,AFB1/OTA-TRFIA检测时,AFB1与OTA不相互干扰。样品经双标记AFB1/OTA-TRFIA与单标记AFB1-TRFIA、OTA-TRFIA同时检测,与AFB1-TRFIA两者检测AFB1结果的相关系数为0.972,与OTA-TRFIA两者检测OTA结果的相关系数为0.981,说明结果相符。结论AFB1/OTA-TRFIA灵敏度高,可测范围宽,稳定性好,一次操作可以同时得到AFB1、OTA的两个结果,是一种简便、快速、经济的可进行大批量样品筛查的方法。

关键词：黄曲霉毒素B1 赭曲霉毒素A 时间分辨荧光免疫分析抗体食品检测

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脑缺血再灌注损伤大鼠重要脏器钙调神经磷酸酶活性变化及阿司匹林的干预作用

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中国老年学杂志 2010年第5期30卷 640-642页

作者：邱丽颖杨志勇杜斌范红斌李英王晓岚程建青江南大学医药学院基础医学部江苏无锡214122

目的观察脑缺血再灌注(CIR)损伤时脑、心和肾组织钙调神经磷酸酶(CaN)活性变化。方法线栓法制作局部脑缺血2h,再灌注24、48和72h模型,生化法测定脑、心和肾组织CaN活性,并观察60kg/mg阿司匹林(ASA)对其影响。结果再灌注24h时,模型组与... 详细信息

目的观察脑缺血再灌注(CIR)损伤时脑、心和肾组织钙调神经磷酸酶(CaN)活性变化。方法线栓法制作局部脑缺血2h,再灌注24、48和72h模型,生化法测定脑、心和肾组织CaN活性,并观察60kg/mg阿司匹林(ASA)对其影响。结果再灌注24h时,模型组与假手术组脑组织及肾组织的CaN活性无显著差异。模型组心脏的CaN活性明显低于假手术组。ASA对脑和肾的CaN活性无明显影响,但使心CaN活性于正常水平。再灌注48h时,脑和肾组织明显升高,均与其各自假手术组有显著差异。心脏CaN活性仍低于其假手术组,但与24h模型组无显著差异。再灌注72h时,脑CaN活性进一步升高,与其假手术组、24和48h均有显著差异;心CaN活性恢复至正常水平;肾CaN活性仍维持在48h时的较高水平。ASA使脑和肾的CaN活性维持在正常水平,对心CaN活性无明显影响。结论脑缺血-再灌注时,不同组织CaN活性变化不同,这可能与在应激过程中不同器官磷酸化反应不同有关。ASA在维持其稳定中有重要作用。

关键词：脑缺血-再灌注重要脏器钙调神经磷酸酶大鼠阿司匹林

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阿司匹林抗脑缺血/再灌注损伤的作用及机制

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中国药理学通报 2006年第8期22卷 972-976页

作者：邱丽颖余涓陈崇宏江南大学医学系江苏无锡214000 福建医科大学药学院福建福州350004

目的观察阿司匹林对大鼠脑缺血/再灌损伤72h的保护作用及机制。方法线栓法制作局部大脑缺血2h、再灌72h模型,观察60mg·kg-1阿司匹林对脑损伤面积、水肿程度及死亡率的影响;并从抗凋亡、能量代谢及钙调神经磷酸酶活性变化探讨其机... 详细信息

目的观察阿司匹林对大鼠脑缺血/再灌损伤72h的保护作用及机制。方法线栓法制作局部大脑缺血2h、再灌72h模型,观察60mg·kg-1阿司匹林对脑损伤面积、水肿程度及死亡率的影响;并从抗凋亡、能量代谢及钙调神经磷酸酶活性变化探讨其机制。结果阿司匹林明显缩小再灌注72h引起的脑损伤范围,减轻水肿,降低死亡率,明显降低脑细胞凋亡数目,提高Bcl2/Bax,改善能量代谢,抑制钙调神经磷酸酶的异常升高。结论阿司匹林对脑缺血/再灌损伤72h有明显保护作用,其机制可能与抗凋亡、提高Bcl2/Bax、改善能量代谢及对钙调神经磷酸酶的影响有关。

关键词：阿司匹林脑缺血/再灌注损伤凋亡 Bcl-2/Bax 能量代谢钙调神经磷酸酶

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下调TRPC5的表达对卵巢癌细胞耐药性影响的研究

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中国细胞生物学学报 2019年第4期41卷 681-687页

作者：傅倩云朱瑞宇方罗吴妙莲蔡志波金坚浙江大学医学院附属儿童医院杭州310003 江南大学药学院无锡214122

为探究瞬时受体通道5(transient receptor potential canonical 5, TRPC5)是否参与影响卵巢癌细胞对紫杉醇(paclitaxel, PTX)的耐药性,转染TPRC5-siRNA至A2780/PTX细胞。MTT检测A2780/WT、A2780/PTX和A2780/PTX细胞+siTRPC5对紫杉醇的敏感性;RT-PCR和Western blot检测TRPC5、P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)的mRNA和蛋白表达水平;细胞免疫荧光检测β-catenin、c-myc和Cyclin D1蛋白的表达水平。MTT、RT-PCR和Western blot结果显示, A2780/PTX细胞对PTX的敏感性(IC50=84.4μmol/L)低于A2780/WT细胞(IC50=1.98μmol/L), A2780/PTX细胞的TRPC5和P-gp的mRNA和蛋白表达水平显著高于A2780/WT细胞;用siTRPC5敲低A2780/PTX细胞TRPC5的表达水平,可显著减少其P-gp的表达量,降低A2780/PTX细胞对PTX的敏感性。细胞免疫荧光实验结果显示,降低A2780/PTX细胞TRPC5的表达水平,细胞核中β-catenin的表达量减少,且Cyclin D1和c-myc的表达量也明显降低。TRPC5参与影响卵巢癌细胞对紫杉醇的耐药性,并且通过Wnt/β-catenin信号通路影响耐药蛋白P-gp的表达进而影响其耐药性。

关键词：瞬时受体通道5 P-糖蛋白卵巢癌紫杉醇耐药性 Wnt/β-catenin通路

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TRPV4对高血压小鼠胸主动脉内皮细胞钙离子稳态的调节作用

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蚌埠医学院学报 2018年第10期43卷 1314-1317页

作者：张卡毛爱琴阚昊张鹏马鑫江南大学药学院江南大学无锡医学院

目的:探讨瞬时受体电位香草素亚型4(transient receptor potential vanilloid type 4,TRPV4)在高血压小鼠胸主动脉内皮细胞中对于钙离子稳态的调节作用。方法:通过高盐饮食诱导小鼠高血压模型,分别在细胞和组织水平上使用钙离子荧光探针... 详细信息

目的:探讨瞬时受体电位香草素亚型4(transient receptor potential vanilloid type 4,TRPV4)在高血压小鼠胸主动脉内皮细胞中对于钙离子稳态的调节作用。方法:通过高盐饮食诱导小鼠高血压模型,分别在细胞和组织水平上使用钙离子荧光探针Flou-4/AM标记胸主动脉内皮细胞内钙,测定在TRPV4特异性激动剂GSK1016790A刺激下高盐饮食组和普通饮食组中细胞的钙离子浓度变化。结果:在胸主动脉内皮细胞的细胞和组织水平上通过使用GSK1016790A特异性激活TRPV4通道,普通饮食组和高盐饮食组细胞内钙离子浓度均增高(P<0.05),但和普通饮食组相比较,高盐饮食组在GSK1016790A刺激下钙离子荧光强度增幅低于普通饮食组(P<0.05)。结论:TRPV4参与了小鼠胸主动脉内皮细胞钙稳态的调节,通过激活TRPV4,促进内皮细胞外钙离子内流进入胞内,从而维持细胞内钙离子的稳态,而在病理模型,高盐饮食诱导的高血压状态下,TRPV4调节小鼠胸主动脉内皮细胞钙内流的作用受损。

关键词：高血压胸主动脉内皮细胞钙离子

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表面活性剂类多肽A_6KA_6K的自组装及机理研究

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高等学校化学学报 2011年第8期32卷 1774-1778页

作者：马鑫孟庆斌寇莹莹梁远军郭磊倪才华刘克良江南大学化学与材料工程学院无锡214122 军事医学科学院毒物药物研究所北京100850 北京大学药学院药学系北京100191

设计合成了一种表面活性剂类多肽A6K的二倍体A6KA6K.圆二色谱分析表明,其二级结构主要为无规则卷曲结构并伴有少量的α-螺旋;透射电子显微镜和动态光散射分析表明,其在水溶液中能自组装形成纳米囊泡状结构.芘荧光分子探针研究结果表明,... 详细信息

设计合成了一种表面活性剂类多肽A6K的二倍体A6KA6K.圆二色谱分析表明,其二级结构主要为无规则卷曲结构并伴有少量的α-螺旋;透射电子显微镜和动态光散射分析表明,其在水溶液中能自组装形成纳米囊泡状结构.芘荧光分子探针研究结果表明,自组装体存在的疏水微区域将芘分子包裹在其中,证明这种多肽在溶液中可形成胶束类的自组装体,并计算了其临界胶束浓度.与已报道的表面活性剂类多肽A6K相比,所设计的肽序列A6KA6K由于在较长的疏水链段区域中存在亲水性氨基酸K,对疏水相互作用有影响,使得含有14个氨基酸的肽自组装形成纳米囊泡状结构.

关键词：表面活性剂类多肽自组装荧光探针纳米囊泡

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鼠李糖乳杆菌对斑马鱼脊髓损伤后肠道炎症的抑制作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2020年第4期46卷 680-686页

作者：赵丽萍黄术兵张博枰周芝兰贾雪冰孙孟菲乔晨萌陈雪申延琴崔春江南大学无锡医学院神经退行和损伤研究室江苏无锡214122

目的:探讨斑马鱼脊髓损伤(SCI)对肠道炎症发生发展的影响,阐明鼠李糖乳杆菌GG株(LGG)减轻肠道炎症的作用及机制。方法:14条正常斑马鱼随机分为正常饮食组(n=7)和LGG饮食组(LGG组,n=7),喂养21 d后取肠道组织,采用RT-qPCR法检测斑马鱼肠... 详细信息

目的:探讨斑马鱼脊髓损伤(SCI)对肠道炎症发生发展的影响,阐明鼠李糖乳杆菌GG株(LGG)减轻肠道炎症的作用及机制。方法:14条正常斑马鱼随机分为正常饮食组(n=7)和LGG饮食组(LGG组,n=7),喂养21 d后取肠道组织,采用RT-qPCR法检测斑马鱼肠道组织中肠屏障相关分子β防御素样肽-1(DEFBL1)、紧密连接蛋白2a(TJP2a)、黏液素2.1(MUC2.1)和黏液素5.3(MUC5.3)mRNA表达水平。48条手术斑马鱼随机分为假手术+正常饮食组、假手术+LGG组、SCI+正常饮食组和SCI+LGG组,每组12条,术后喂养25 d(每组n=6)取肠道组织,采用RT-qPCR法检测肠道炎症相关分子肿瘤坏死因子(TNF-α)、Toll样受体2(TLR-2)和白细胞介素6(IL-6)mRNA表达水平,术后分别喂养7 d(每组n=3)和28 d(每组n=3)取斑马鱼肠道组织,用肠道菌群高通量16S rRNA测序检测肠道菌群变化。结果:与正常饮食组比较,LGG组正常斑马鱼肠道组织中DEFBL1和TJP2a mRNA表达水平明显升高(t=-2.387,P<0.05;t=-12.482,P<0.01),MUC2.1和MUC5.3 mRNA表达水平明显降低(t=2.497,P<0.05;t=3.173,P<0.05)。与假手术+正常饮食组比较,SCI+正常饮食组斑马鱼肠道组织中TNF-α、TLR-2和IL-6 mRNA表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01);与SCI+正常饮食组比较,SCI+LGG组斑马鱼肠道组织中TNF-α、TLR-2和IL-6 mRNA表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。与正常饮食组(假手术+正常饮食组和SCI+正常饮食组)比较,假手术+LGG组和SCI+LGG组斑马鱼肠道内致病菌属(气单胞菌属、弧菌属)和条件致病菌属(脱硫弧菌属、短波单胞菌属)的丰度明显降低。结论:LGG能抑制斑马鱼SCI引起的肠道炎症,其机制可能与肠屏障相关分子表达水平增加和肠道致病菌丰度降低有关。

关键词：鼠李糖乳杆菌脊髓损伤斑马鱼肠道炎症肠道菌群

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木聚糖酶EvXynll^TS耐热性与其N端二硫键的相关性分析

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微生物学报 2013年第4期53卷 346-353页

作者：闵柔李剑芳高树娟张慧敏吴静邬敏辰江南大学药学院无锡214122 江南大学食品学院无锡214122 江南大学无锡医学院无锡214122

【目的】以糖苷水解酶11 家族耐热木聚糖酶EvXyn11TS为研究对象，定点突变其编码基因Syxyn11，揭示EvXyn11TS耐热性与其N端二硫键的相关性。【方法】对不同来源的、与EvXyn11TS一级结构相似度较高的若干11家族木聚糖酶进行多序列同源比... 详细信息

【目的】以糖苷水解酶11 家族耐热木聚糖酶EvXyn11TS为研究对象，定点突变其编码基因Syxyn11，揭示EvXyn11TS耐热性与其N端二硫键的相关性。【方法】对不同来源的、与EvXyn11TS一级结构相似度较高的若干11家族木聚糖酶进行多序列同源比对，发现只有耐热的EvXyn11TS在其N端存在一个二硫键（Cys5－Cys32）;运用分子动力学模拟预测该N端二硫键存在与否对木聚糖酶热稳定性的影响。以人工合成的Syxyn11为母本，采用PCR技术将其编码Cys5的密码子TGT突变为编码Thr5的ACT，构建去除了N端二硫键的突变酶（EvXyn11M）的编码基因Syxyn11M;分别将Syxyn11和Syxyn11M在毕赤酵母GS115中进行表达，并分析表达产物EvXyn11TS和EvXyn11M的温度和pH特性。【结果】酶学性质研究结果表明：EvXyn11M的最适温度Topt由突变前的85℃降至70℃;EvXyn11TS在90℃的半衰期t1/290为32 min，而EvXyn11M在70℃的半衰期t1/270仅为8.0 min。【结论】运用分子动力学模拟预测了N端二硫键对EvXyn11TS耐热性的重要作用，并通过定点突变验证之，为其它与耐热EvXyn11TS一级结构相似的、11家族常温高比活性木聚糖酶的耐热性改造提供了新的技术策略。

关键词：木聚糖酶耐热性 N端二硫键分子动力学模拟定点突变

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L929细胞条件培养基诱导培养的小鼠原代巨噬细胞生物学特性对比

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生物工程学报 2020年第7期36卷 1431-1439页

作者：王伟秦贻王亚茹邹节节陈静陈金武张雁耿明徐忠东戴敏潘礼龙合肥师范学院生命科学学院安徽合肥230601 安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 江南大学医学院江苏无锡214122

本研究旨在对比分析小鼠骨髓源巨噬细胞(BMDM)和腹腔巨噬细胞(PM)原代培养及巨噬细胞生物学特性差异,为合理选择原代巨噬细胞培养方法提供参考依据。原代培养小鼠BMDM和PM,细胞计数仪测定细胞数量,倒置显微镜观察形态学变化,流式细胞仪... 详细信息

本研究旨在对比分析小鼠骨髓源巨噬细胞(BMDM)和腹腔巨噬细胞(PM)原代培养及巨噬细胞生物学特性差异,为合理选择原代巨噬细胞培养方法提供参考依据。原代培养小鼠BMDM和PM,细胞计数仪测定细胞数量,倒置显微镜观察形态学变化,流式细胞仪检测细胞纯度,CCK-8法测定细胞增殖,中性红吞噬实验测定细胞吞噬功能,实时荧光定量PCR分析巨噬细胞表型变化。结果显示,BMDM原代培养获取的细胞数量显著高于PM(P<0.01),PM贴壁及伸展时间早于BMDM。BMDM中F4/80+CD11b+百分比(98.30%±0.53%)高于PM(94.83%±1.42%),但无统计学差异(P>0.05)。在L929细胞条件培养基培养体系中,BMDM增殖能力显著高于PM(P<0.001)。吞噬实验发现,基础状态下BMDM吞噬能力显著高于PM(P<0.01),经LPS刺激24h后,除低剂量LPS(0.1μg/mL)外,BMDM吞噬能力均显著高于PM(P<0.01或P<0.001),提示BMDM吞噬能力在基础和激活状态下均强于PM。巨噬细胞极化实验发现,基础状态下Tnfα在BMDM中表达显著高于PM(P<0.001),Arg1和Ym1在BMDM中表达显著低于PM(P<0.001),这一差异在极化诱导剂(LPS+IFN-γ或IL-4)处理后依然存在。上述结果表明,原代培养BMDM较PM可获取更多细胞,且两种细胞在吞噬功能和极化状态上存在一定生物学差异,应谨慎合理选择巨噬细胞原代培养方法。

关键词：巨噬细胞原代培养增殖吞噬功能极化

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