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68Ga－NOTA－CD44多肽的制备及其靶向CD44 ＋三阴性乳腺癌干细胞的研究

中华核医学与分子影像杂志 2025年第5期45卷 294-299页

作者：杨蕊朱锐颖宿晨程凯周洁贾贞达梦婷赵久达陈道桢江南大学附属妇产医院、南京医科大学附属无锡妇幼保健院优生优育遗传研究所，无锡　214002 海东市第二人民医院检验科，海东　810600 青海大学附属医院乳腺疾病诊疗中心，西宁　810000

目的:进行CD44 ＋CD24 －三阴性乳腺癌(TNBC)干细胞样细胞富集及生物学行为研究，并构建 68Ga标记的CD44多肽[ 68Ga－1，4，7－三氮杂环壬烷－1，4，7－三乙酸(NOTA)－CD44p]，评价其对TNBC干细胞样细胞表面标志物C... 详细信息

目的:进行CD44 ＋CD24 －三阴性乳腺癌(TNBC)干细胞样细胞富集及生物学行为研究，并构建 68Ga标记的CD44多肽[ 68Ga－1，4，7－三氮杂环壬烷－1，4，7－三乙酸(NOTA)－CD44p]，评价其对TNBC干细胞样细胞表面标志物CD44的靶向能力。方法:采用悬浮球培养法，进行TNBC细胞株MDA－MB－231与非TNBC细胞株MCF－7中的CD44 ＋CD24 －细胞亚群的富集培养。采用流式细胞仪检测不同组干细胞标志物的表达情况，用细胞划痕实验检测CD44 ＋CD24 －细胞亚群迁移能力，通过Transwell侵袭实验评价CD44 ＋CD24 －细胞亚群的侵袭能力。制备 68Ga－NOTA－CD44p，并用高效液相色谱(HPLC)法对其进行纯化和鉴定。通过细胞摄取和阻断实验评价 68Ga－NOTA－CD44p对CD44 ＋ TNBC细胞的靶向能力。采用两独立样本 t检验和单因素方差分析(最小显著差异 t检验)进行数据分析。结果:悬浮球培养法成功富集CD44 ＋CD24 － TNBC干细胞样细胞球。与非TNBC细胞MCF－7细胞相比，TNBC细胞MDA－MB－231细胞表现出更好的成球能力[(18.50±3.73)与(31.83±4.92)个;t＝5.29， P<0.001]以及更高的CD44 ＋CD24 －细胞亚群占比[(24.97±8.12)%与(90.93±4.46)%;F＝170.10， t＝14.93，均 P<0.001]。CD44 ＋CD24 － MDA－MB－231组较CD44 ＋CD24 － MCF－7组细胞的伤口愈合率[(71.00±11.00)%与(28.33±4.16)%;F＝42.91， t＝8.02，均 P<0.001]、侵袭率[(60.60±16.87)%与(24.16±8.15)%;F＝11.83， t＝4.40，均 P<0.01]明显升高。MDA－MB－231对 68Ga－NOTA－CD44p具有较强的摄取能力，CD44p阻断后摄取能力下降。结论:与CD44 ＋CD24 － MCF－7相比，CD44 ＋CD24 － MDA－MB－231表现出更高的恶性生物学行为;68Ga－NOTA－CD44p可靶向TNBC干细胞样细胞表面标志物CD44，研究为以肿瘤干细胞为靶点的TNBC靶向治疗手段的建立奠定了基础。

关键词：乳腺肿瘤同位素标记镓放射性同位素抗原 CD44 干细胞肿瘤细胞，培养的

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基于基因测序技术分析乳腺癌中微生物菌群的研究进展

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南京医科大学学报（自然科学版） 2024年第7期44卷 992-1001页

作者：王清华李溯杨蕊陈道桢江南大学附属妇产医院优生优育遗传研究所江苏无锡214002 南京医科大学附属无锡妇幼保健院优生优育遗传研究所江苏无锡214002 青海省海东市第二人民医院院长办公室青海海东810600

乳腺癌中存在独特的细菌群落,与正常乳腺组织、乳腺良性疾病以及癌旁组织在数量和多样性上均存在显著差异。乳腺癌不同分子分型、病理分级和分期之间的菌群结构也不同,这表明微生物菌群可能在乳腺癌的发生、发展及治疗中发挥重要的作用... 详细信息

乳腺癌中存在独特的细菌群落,与正常乳腺组织、乳腺良性疾病以及癌旁组织在数量和多样性上均存在显著差异。乳腺癌不同分子分型、病理分级和分期之间的菌群结构也不同,这表明微生物菌群可能在乳腺癌的发生、发展及治疗中发挥重要的作用。然而,受种族和地域差异、样本量、测序深度等方面的影响,目前的研究结果存在差异,且缺乏系统性的综述。因此,文章通过总结乳腺癌微生物菌群测序的最新研究进展,系统分析了乳腺癌组织与非癌组织、乳腺癌不同分子分型、病理分级和分期之间微生物的组成差异,并对微生物菌群在乳腺癌诊断及治疗中的作用进行展望和讨论,以期为基于微生物菌群的乳腺癌诊断及治疗提供全新视角。

关键词：微生物组乳腺癌基因测序技术

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藤黄酸下调蛋白C受体表达杀伤三阴性乳腺癌干细胞的作用机制

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4888-4898页

作者：李溯王清华达梦婷杨蕊陈道桢南京医科大学附属无锡妇幼保健院优生优育医学遗传研究所江苏省无锡市214002 江南大学附属妇产医院优生优育医学遗传研究所江苏省无锡市214002 青海大学附属医院乳腺疾病诊疗中心青海省西宁市810000 青海省海东市第二人民医院院长办公室青海省海东市810600

背景:藤黄酸对乳腺癌具有很强的细胞毒性,可有效杀伤三阴性乳腺癌干细胞,但潜在的机制尚不清楚。目的:探讨藤黄酸对三阴性乳腺癌干细胞的杀伤作用及可能的机制。方法:使用PharmMapper数据库预测藤黄酸的靶点蛋白,使用String网站构建各... 详细信息

背景:藤黄酸对乳腺癌具有很强的细胞毒性,可有效杀伤三阴性乳腺癌干细胞,但潜在的机制尚不清楚。目的:探讨藤黄酸对三阴性乳腺癌干细胞的杀伤作用及可能的机制。方法:使用PharmMapper数据库预测藤黄酸的靶点蛋白,使用String网站构建各药物靶点蛋白互作网络关系,使用Cytoscape软件构建活性成分-作用靶点网络,通过R语言软件对潜在靶点进行KEGG信号通路富集分析。采用CCK-8法检测不同浓度藤黄酸对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231活力的影响,筛选适宜的作用浓度。采用细胞球培养法富集MDA-MB-231细胞干细胞,经过不同浓度(0,0.5,1.0,2.0μmol/L)藤黄酸作用24 h,TUNEL荧光染色与流式细胞仪检测干细胞凋亡,qPCR与Western blot检测蛋白C受体表达,Western blot检测p-PI3K、p-AKT、Caspase-3和Cleaved Caspase-3蛋白表达;将干细胞分4组培养:空白对照组(干细胞不做任何处理)、siRNA-NC组、siRNA-蛋白C受体组和siRNA-蛋白C受体+PI3K激动剂组,培养36 h后,采用Western blot法检测p-PI3K、p-AKT、Caspase-3和Cleaved Caspase-3蛋白表达。结果与结论:(1)网络药理学发现,三阴性乳腺癌干细胞标志物蛋白C受体是藤黄酸的作用靶点之一;KEGG富集分析涉及细胞凋亡、上皮生长因子受体、RAS和PI3K-AKT信号通路等;(2)CCK-8检测结果显示,藤黄酸可抑制MDA-MB-231细胞活力,半数抑制浓度IC50值为(1.18±0.34)μmol/L,因此后续实验选择浓度0.5,1.0,2.0μmol/L;(3)TUNEL荧光染色和流式细胞术检测证实,藤黄酸以剂量依赖的方式诱导三阴性乳腺癌干细胞凋亡(P <0.05);qPCR和Western blot检测证实,藤黄酸可下调蛋白C受体mRNA和蛋白表达,下调Caspase-3、p-PI3K和p-AKT蛋白表达,上调Cleaved Caspase-3蛋白表达(P <0.05);siRNA-蛋白C受体转染实验也进一步证实,敲低三阴性乳腺癌干细胞蛋白C受体表达可提升Cleaved Caspase-3蛋白表达(P <0.05)、下调PI3K/AKT信号通路磷酸化水平(P <0.05),而应用PI3K激动剂740 Y-P能够降低Cleaved Caspase-3蛋白表达(P <0.05)、提升p-PI3K和p-AKT的磷酸化水平(P <0.05),一定程度上改善细胞凋亡情况;(4)结果表明,藤黄酸可能通过下调蛋白C受体来发挥三阴性乳腺癌及干细胞杀伤及诱导凋亡作用,进一步的分子机制可能和PI3K/AKT信号通路抑制有关。

关键词：三阴性乳腺癌干细胞网络药理学藤黄酸分子机制信号通路

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HER2放射性分子探针应用于肿瘤诊疗的研究进展

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分子影像学杂志 2024年第7期47卷 757-763页

作者：查圆郭旭高晓敏杨蕊姚荧南京医科大学无锡医学中心江苏南京211166 南京医科大学附属无锡市妇幼保健院药学部江苏无锡214002 江南大学医学院江苏无锡214002 无锡市妇幼保健院优生优育遗传医学研究所江苏无锡214002

人表皮生长因子受体2(HER2)在多种肿瘤中异常表达或突变,促进与细胞增殖和肿瘤发生相关的多种信号通路的启动,是肿瘤诊疗的重要靶点之一。核医学利用放射性示踪技术精确定位病灶,通过PET/SPECT显像技术实现肿瘤早期诊断及治疗监测。HER... 详细信息

人表皮生长因子受体2(HER2)在多种肿瘤中异常表达或突变,促进与细胞增殖和肿瘤发生相关的多种信号通路的启动,是肿瘤诊疗的重要靶点之一。核医学利用放射性示踪技术精确定位病灶,通过PET/SPECT显像技术实现肿瘤早期诊断及治疗监测。HER2放射性分子探针,包括抗体、小分子多肽、亲合体及锚蛋白重复蛋白等类型,正处于积极研发及临床前/早期临床研究阶段,为核医学领域研究热点之一。本文基于HER2放射性分子探针种类与乳腺癌、卵巢癌、胃癌等HER2阳性肿瘤疾病分类,对核医学技术应用于HER2阳性肿瘤诊疗的研究进展作一综述。

关键词： HER2 放射性分子探针核医学放射性核素乳腺癌卵巢癌胃癌非小细胞肺癌

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68Ga－NOTA－CD44多肽的制备及其靶向CD44＋三阴性乳腺癌干细胞的研究

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中华核医学与分子影像杂志 2025年第5期

作者：杨蕊朱锐颖宿晨程凯周洁贾贞达梦婷赵久达陈道桢江南大学附属妇产医院、南京医科大学附属无锡妇幼保健院优生优育遗传研究所无锡海东市第二人民医院检验科海东青海大学附属医院乳腺疾病诊疗中心西宁

目的进行CD44+CD24-三阴性乳腺癌(TNBC)干细胞样细胞富集及生物学行为研究, 并构建68Ga标记的CD44多肽[68Ga-1, 4, 7-三氮杂环壬烷-1, 4, 7-三乙酸(NOTA)-CD44p], 评价其对TNBC干细胞样细胞表面标志物CD44的靶向能力。方法采用悬浮球培... 详细信息

目的进行CD44+CD24-三阴性乳腺癌(TNBC)干细胞样细胞富集及生物学行为研究, 并构建68Ga标记的CD44多肽[68Ga-1, 4, 7-三氮杂环壬烷-1, 4, 7-三乙酸(NOTA)-CD44p], 评价其对TNBC干细胞样细胞表面标志物CD44的靶向能力。方法采用悬浮球培养法, 进行TNBC细胞株MDA-MB-231与非TNBC细胞株MCF-7中的CD44+CD24-细胞亚群的富集培养。采用流式细胞仪检测不同组干细胞标志物的表达情况, 用细胞划痕实验检测CD44+CD24-细胞亚群迁移能力, 通过Transwell侵袭实验评价CD44+CD24-细胞亚群的侵袭能力。制备68Ga-NOTA-CD44p, 并用高效液相色谱(HPLC)法对其进行纯化和鉴定。通过细胞摄取和阻断实验评价68Ga-NOTA-CD44p对CD44+ TNBC细胞的靶向能力。采用两独立样本t检验和单因素方差分析(最小显著差异t检验)进行数据分析。结果悬浮球培养法成功富集CD44+CD24- TNBC干细胞样细胞球。与非TNBC细胞MCF-7细胞相比, TNBC细胞MDA-MB-231细胞表现出更好的成球能力[(18.50±3.73)与(31.83±4.92)个;t=5.29, P<0.001]以及更高的CD44+CD24-细胞亚群占比[(24.97±8.12)%与(90.93±4.46)%;F=170.10, t=14.93, 均P<0.001]。CD44+CD24- MDA-MB-231组较CD44+CD24- MCF-7组细胞的伤口愈合率[(71.00±11.00)%与(28.33±4.16)%;F=42.91, t=8.02, 均P<0.001]、侵袭率[(60.60±16.87)%与(24.16±8.15)%;F=11.83, t=4.40, 均P<0.01]明显升高。MDA-MB-231对68Ga-NOTA-CD44p具有较强的摄取能力, CD44p阻断后摄取能力下降。结论与CD44+CD24- MCF-7相比, CD44+CD24- MDA-MB-231表现出更高的恶性生物学行为;68Ga-NOTA-CD44p可靶向TNBC干细胞样细胞表面标志物CD44, 研究为以肿瘤干细胞为靶点的TNBC靶向治疗手段的建立奠定了基础。

关键词：乳腺肿瘤同位素标记镓放射性同位素抗原 CD44 干细胞肿瘤细胞, 培养的

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