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银杏二萜内酯葡胺注射液及其银杏二萜内酯成分抗人脐静脉内皮细胞氧糖剥夺损伤的转录组学研究

中草药 2023年第13期54卷 4233-4244页

作者：徐小波武子寅张新庄曹亮王振中肖伟南京中医药大学江苏南京210023 江苏康缘药业股份有限公司江苏连云港222001 中药制药过程新技术国家重点实验室江苏连云港222001

目的研究银杏二萜内酯葡胺注射液(Diterpene Ginkgolides Meglumine Injection,DGMI)及其银杏二萜内酯成分抗人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells-T1,HUVEC-T1)氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的潜在作用通路。方法采用CCK-8法分别测定不同浓度银杏内酯A(ginkgolide A,GA)、银杏内酯B(ginkgolide B,GB)、银杏内酯K(ginkgolide K,GK)和DGMI对HUVEC-T1细胞的毒性,明确药物处理细胞浓度;采用转录组测序技术对溶剂对照组(二甲基亚砜)、模型组(OGD/R 4 h/24 h)及给药组(造模+不同剂量DGMI、GA、GB、GK处理)的细胞样本分别进行转录组测序;通过生物信息学分析方法,以GEO数据库中缺血性脑卒中患者转录组数据为参考,采用基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)、差异基因富集等分析方法完成对HUVEC-T1 OGD模型及不同浓度药物抗OGD损伤能力的评价,阐明DGMI及其功效成分的潜在作用机制。结果GSEA分析显示,临床缺血性脑卒中患者血液转录组数据分析获得的疾病富集通路与本实验细胞模型测序结果获得的富集通路相似度为55.6%;DGMI、GA、GB、GK处理组与模型组相比,显著富集的主要信号通路包括FcεRI、NOD样受体、有丝分裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等。差异基因分析显示,与对照组相比,模型组共筛选出439个差异基因,差异基因的基因本体(gene ontology,GO)分析主要富集在应激反应过程,京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析主要富集在磷脂酶D、FcεRI、NOD样受体和血小板活化等信号通路;与模型组相比,给药组差异基因的GO分析主要富集在造血和代谢过程,KEGG分析主要富集在血小板活化、磷脂酶D等信号通路。结论HUVEC-T1 OGD模型模拟了部分缺血性脑卒中的病理特征;DGMI、GA、GB、GK均具有抗OGD损伤作用,发挥抗OGD损伤作用的关键基因及信号通路主要集中在抗炎、抗凋亡、调控血小板活化等生物学过程,可能通过下调FcεRI、NOD样受体、MAPK和VEGF信号通路,干预血小板活化、磷脂酶D等信号通路发挥作用。

关键词：银杏二萜内酯葡胺注射液银杏内酯A 银杏内酯B 银杏内酯K 人脐静脉内皮细胞氧糖剥夺模型转录组测序

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UPLC-Q-TOF-MS/MS快速分析六味地黄苷糖片化学成分

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中草药 2021年第21期52卷 6473-6484页

作者：樊晓荃付娟胡军华肖伟王振中南京中医药大学江苏南京210000 江苏康缘药业股份有限公司江苏连云港222001 中药制药过程新技术国家重点实验室江苏连云港222001

目的采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对六味地黄苷糖片中的化学成分进行分析和鉴定。方法色谱柱为Phenomenex Luna C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.3%甲酸水溶液作为流动相,梯度洗脱,体积流量1 mL/min,柱温35℃,进样量10μL;采用... 详细信息

目的采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对六味地黄苷糖片中的化学成分进行分析和鉴定。方法色谱柱为Phenomenex Luna C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.3%甲酸水溶液作为流动相,梯度洗脱,体积流量1 mL/min,柱温35℃,进样量10μL;采用电喷雾离子源,负离子模式下采集数据,根据精确质荷比、二级碎片离子信息,结合对照品和文献数据鉴定六味地黄苷糖片中的化学成分。结果共鉴定和推测出71个化合物,其中25个来自酒萸肉、19个来自熟地黄、31个来自牡丹皮、2个来自泽泻、3个来自茯苓、2个来自山药。其中22个化合物经对照品验证。结论基本明确了六味地黄苷糖片的化学物质基础,为六味地黄苷糖片的质量控制及药效物质基础研究提供了参考。

关键词：六味地黄苷糖片质谱分析质量控制化学成分谱酒萸肉熟地黄牡丹皮泽泻茯苓山药

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脂多糖致大鼠发热特点与机制研究进展

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世界科学技术-中医药现代化 2020年第7期22卷 2198-2204页

作者：杨彪胡玉梅刘文君姜涛耿婷曹亮王振中肖伟江苏康缘药业股份有限公司连云港222001 中药制药过程新技术国家重点实验室连云港222001

发热是机体在病原体入侵时所产生的一种复杂的防御性反应,对生物的生存意义重大。同时,发热作为炎症反应的主要标志之一,是科研工作者的重点研究对象。脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠发热模型常用于解热药物研究中,但不同研究... 详细信息

发热是机体在病原体入侵时所产生的一种复杂的防御性反应,对生物的生存意义重大。同时,发热作为炎症反应的主要标志之一,是科研工作者的重点研究对象。脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠发热模型常用于解热药物研究中,但不同研究者所得的结果有较大差别。本文就LPS致大鼠发热的特点与机制方面的研究进展进行了整理,以期对发热模型建立以及解热实验研究提供一些帮助。

关键词：脂多糖发热特点机制

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基于 UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS 技术的桂枝茯苓胶囊化学成分分析

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中国中药杂志 2020年第4期45卷 861-877页

作者：杨慧敏杨彪胡玉梅曹亮王振中朱克近肖伟中国药科大学江苏南京211198 江苏康缘药业股份有限公司江苏连云港222001 中药制药过程新技术国家重点实验室江苏连云港222001

采用UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS技术对桂枝茯苓胶囊中的化学成分进行表征。液相条件:ZORBAX RRHD Eclipes Plus C18(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1,柱温30℃;质谱条件:... 详细信息

采用UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS技术对桂枝茯苓胶囊中的化学成分进行表征。液相条件:ZORBAX RRHD Eclipes Plus C18(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1,柱温30℃;质谱条件:采用电喷雾离子源,正、负离子全扫描模式下采集数据,根据精确质荷比,二级碎片离子信息,结合对照品和文献数据共指认出桂枝茯苓胶囊制剂中200个化学成分,其中40个化合物经对照品验证。结果为其质量平衡研究以及药效物质基础的深入研究奠定了基础。

关键词：桂枝茯苓胶囊 UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS 化学成分谱

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基于中红外光谱技术桂枝茯苓胶囊浓缩过程快速检测方法研究

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中草药 2022年第16期53卷 5026-5033页

作者：王玉琴徐芳芳张欣吴云张永超章晨峰王振中南京中医药大学江苏南京210023 江苏康缘药业股份有限公司江苏连云港222001 中药制药过程新技术国家重点实验室江苏连云港222001

目的应用衰减全反射中红外光谱(mid-infrared spectroscopy,MIRS)技术建立桂枝茯苓胶囊(Guizhi Fuling Capsules,GFC)浓缩过程中没食子酸、芍药苷、苯甲酸、苯甲酰芍药苷及挥发油桂皮醛和肉桂酸的定量分析模型,实现GFC浓缩过程的质量控... 详细信息

目的应用衰减全反射中红外光谱(mid-infrared spectroscopy,MIRS)技术建立桂枝茯苓胶囊(Guizhi Fuling Capsules,GFC)浓缩过程中没食子酸、芍药苷、苯甲酸、苯甲酰芍药苷及挥发油桂皮醛和肉桂酸的定量分析模型,实现GFC浓缩过程的质量控制。方法以HPLC检测值为参照,采集GFC浓缩过程的MIRS,结合偏最小二乘(partial least square,PLS)法分别建立6种指标性成分的定量模型。结果没食子酸、芍药苷、苯甲酸、肉桂酸、苯甲酰芍药苷及桂皮醛的校正集相关系数(rcal)分别为0.992、0.977、0.986、0.985、0.974、0.980,验证集相关系数(rpre)分别为0.985、0.961、0.988、0.993、0.978、0.975,校正均方根误差(corrected root mean square errors,RMSEC)分别为0.132、0.771、0.042、0.044、0.075、0.185,预测相对偏差(relative standard error of prediction,RSEP)和相对误差均小于10%。结论MIRS技术具有快速方便、结果可靠的优点,可以应用于GFC浓缩过程中挥发油桂皮醛和肉桂酸及其他指标性成分的测定,为GFC浓缩过程的在线监控提供了一种新方法。

关键词：桂枝茯苓胶囊中红外光谱挥发油没食子酸芍药苷桂皮醛肉桂酸质量控制移动窗口偏最小二乘组合间隔偏最小二乘定量分析

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微波消解ICP-MS法同时测定虾青素包合物中24种元素

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食品工业 2017年第9期38卷 275-281页

作者：李红娟李曼曼杨林勇高如意王振中萧伟江苏康缘药业股份有限公司连云港222001 中药制药过程新技术国家重点实验室连云港222001

使用微波消解-电感耦合等离子体质谱仪,建立虾青素包合物中Li,Be,B,Mg,Al,Ti,V,Cr,Mn,Fe,Co,Ni,Cu,Zn,Ga,As,Sr,Cd,Sn,Ba,Hg,Tl,Pb和Bi共24种元素的测定方法。虾青素包合物经微波消解后,以内标法改善基体效应及干扰,利用ICP-MS测定虾青... 详细信息

使用微波消解-电感耦合等离子体质谱仪,建立虾青素包合物中Li,Be,B,Mg,Al,Ti,V,Cr,Mn,Fe,Co,Ni,Cu,Zn,Ga,As,Sr,Cd,Sn,Ba,Hg,Tl,Pb和Bi共24种元素的测定方法。虾青素包合物经微波消解后,以内标法改善基体效应及干扰,利用ICP-MS测定虾青素包合物中的元素。所测得的24种元素标准曲线的相关系数r>0.999 4,检出限在0.009~2.867μg·L^(-1)之间,回收率在78.3%~120.5%之间,相对标准偏差(RSD)≤5.6%(n=6)。标准物质中24个元素的测定值基本都在标准值范围内。该方法分析速度快、灵敏度高、重复性好,可以用于虾青素包合物中多种元素的质量控制。

关键词：虾青素包合物 ICP-MS 微波消解元素分析微量元素

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过程控制技术对桂枝茯苓胶囊质量的影响

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中国中药杂志 2015年第6期40卷 1017-1022页

作者：李家春王金玲伍静玲黄文哲王振中萧伟江苏康缘药业股份有限公司江苏连云港222001 中国药科大学江苏南京210009 中药制药过程新技术国家重点实验室江苏连云港222001

通过应用过程控制技术前后内控指标波动情况,评价过程质量控制对桂枝茯苓胶囊内在质量的影响。采用统计分析的方法,对应用过程控制技术前(2009—2011年)96批样品及应用过程控制技术后(2012—2014年)96批样品中主要质控指标进行统计分析... 详细信息

通过应用过程控制技术前后内控指标波动情况,评价过程质量控制对桂枝茯苓胶囊内在质量的影响。采用统计分析的方法,对应用过程控制技术前(2009—2011年)96批样品及应用过程控制技术后(2012—2014年)96批样品中主要质控指标进行统计分析。依据桂枝茯苓胶囊内控质量标准,对192批药品进行分析,结果显示所有批次内控指标均符合规定,应用过程控制技术后内控指标与应用过程控制技术前质量均一性存在较为显著地差异。应用过程控制技术可提高桂枝茯苓胶囊批间质量的一致性。

关键词：桂枝茯苓胶囊过程控制质量均一性

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基于偏最小二乘法建立大株红景天片素片硬度近红外光谱预测模型

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中草药 2023年第8期54卷 2446-2452页

作者：陈露萍徐芳芳张欣吴云王振中肖伟南京中医药大学江苏南京210023 江苏康缘药业股份有限公司江苏连云港222001 中药制药过程新技术国家重点实验室江苏连云港222001

目的基于近红外光谱(near infrared spectrum,NIRS)技术,建立一种快速预测大株红景天片(Rhodiola grandiflora Tablets,RGT)素片硬度的方法。方法采集共600个生产样本与自制样本的NIRS,通过比较不同光谱预处理方法与不同特征变量筛选条... 详细信息

目的基于近红外光谱(near infrared spectrum,NIRS)技术,建立一种快速预测大株红景天片(Rhodiola grandiflora Tablets,RGT)素片硬度的方法。方法采集共600个生产样本与自制样本的NIRS,通过比较不同光谱预处理方法与不同特征变量筛选条件下模型的优劣,建立偏最小二乘(partial least-square,PLS)算法模型,另采集120个样本的NIRS对模型进行外部验证,预测RGT素片硬度。结果建立的素片硬度PLS模型中,无预处理的光谱采用全波段建模的模型效果最佳,预测模型的校正集相关系数(correlation coefficient of training set,R_(cal))与验证集相关系数(correlation coefficient of verification set,R_(pre))分别为0.9719与0.9887,相关性良好,预测均方根误差(root mean square error of prediction,RMSEP)为2.03 N,性能偏差比(ratio of performance to deviation,RPD)为6.68,预测相对偏差(relative standard to deviation,RSEP)为4.24%,模型内部验证的平均相对预测误差为2.82%,外部验证的平均相对预测误差为4.59%,均<5%,对不合格素片的检出率高达97.33%。结论NIRS分析技术结合PLS算法建立的RGT素片硬度预测模型具有良好的模型性能与预测能力,为RGT素片硬度的无损检测提供了一种新方法。

关键词：近红外光谱技术偏最小二乘法大株红景天片硬度素片无损检测

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基于UPLC-Q-TOF-MS/MS及网络药理学探讨麻杏止哮颗粒治疗哮喘的有效成分和作用机制

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中草药 2023年第17期54卷 5508-5521页

作者：王玉于桂芳胡军华周茆肖伟王振中南京中医药大学江苏南京210023 江苏康缘药业股份有限公司江苏连云港222001 中药制药过程新技术国家重点实验室江苏连云港222001

目的基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术和网络药理学探讨麻杏止哮颗粒治疗哮喘的有效成分和作用机制。方法通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术及中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库筛选麻杏止哮颗粒的活性成分和相关靶点;利用Disgenet、Geneca... 详细信息

目的基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术和网络药理学探讨麻杏止哮颗粒治疗哮喘的有效成分和作用机制。方法通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术及中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库筛选麻杏止哮颗粒的活性成分和相关靶点;利用Disgenet、Genecards数据库检索哮喘疾病靶点,利用韦恩图绘制平台获取共有靶点,并将信息导入Cytoscope3.9.1软件和STRING在线分析平台,进行网络拓扑学分析,构建药物关键活性成分-关键靶点网络和药物-有效成分-核心靶点网络;基于核心靶点通过DAVID数据库进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析。结果结合质谱分析与数据库筛选得到药物活性成分24个,药物靶点147个,疾病靶点1483个,共同靶点106个,关键活性成分23个;经蛋白质相互作用分析及网络拓扑分析后,获取核心靶点10个,分别是肿瘤坏死因子、白细胞介素-6、细胞肿瘤抗原p53、白细胞介素-1β、血管内皮生长因子A、表皮生长因子受体、分裂原活化蛋白激酶3、半胱氨酸蛋白酶3、基质金属蛋白酶9、纤连蛋白1,药物有效成分5个,包括槲皮素、异鼠李素、汉黄芩素、柚皮素、儿茶素;GO富集到基因功能69个,KEGG富集到基因通路70条,分析结果表明,麻杏止哮颗粒治疗哮喘的作用机制是通过调节晚期糖基化终末化产物-晚期糖基化终末产物受体信号通路在糖尿病并发症中的作用、分裂原活化蛋白激酶信号通路、白细胞介素-17信号通路、磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B信号通路、人类巨细胞病毒感染通路等来发挥治疗哮喘的作用。结论初步揭示了麻杏止哮颗粒治疗哮喘的有效成分和作用机制,为麻杏止哮颗粒药效物质基础研究奠定基础,为质量控制提供参考依据。

关键词：麻杏止哮颗粒哮喘 UPLC-Q-TOF-MS/MS 网络药理学槲皮素异鼠李素汉黄芩素柚皮素儿茶素

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基于近、中红外光谱的热毒宁注射液制剂过程投料和二次热处理工序快速检测方法研究

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中草药 2022年第21期53卷 6706-6715页

作者：童枫徐芳芳张欣李执栋吴云章晨峰王振中南京中医药大学江苏南京210023 江苏康缘药业股份有限公司江苏连云港222001 中药制药过程新技术国家重点实验室江苏连云港222001

目的应用近红外光谱(near-infrared reflectance spectroscopy,NIRS)与中红外光谱(mid-infrared reflectance spectroscopy,MIRS)技术,对热毒宁注射液(Reduning Injection,RI)制剂过程的投料和二次热处理工序中6种质控指标进行快速检测,提高制剂过程的质量控制水平。方法利用NIRS透射技术与MIRS衰减全反射技术,结合偏最小二乘法(partial least squares,PLS),经过光谱预处理方法的优选以及波段筛选,分别建立绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、栀子苷、断氧化马钱子苷和固含量的快速预测模型,以校正集相关系数(rcal)、验证集相关系数(rpre)、校正均方根误差(root mean square error of calibration,RMSEC)、交叉验证均方根误差(root mean square error of cross validation,RMSECV)、预测相对误差(relative standard error of prediction,RSEP)为评价指标,评价模型性能。结果NIRS预测模型的6个质控指标的RMSEC和RMSECV均小于0.3,RSEP小于4.0%;MIRS预测模型的6个质控指标的RMSEC和RMSECV均小于0.4,RSEP均小于5.0%,建立的PLS模型具有模型性能好、预测精度高的优点。结论NIRS及MIRS分析技术,均可用于RI投料和二次热处理工序中6种质控指标的快速检测,模型RSEP在5%以内,方法操作简单,结果可靠。

关键词：近红外光谱中红外光谱热毒宁注射液制剂过程光谱预处理波段筛选偏最小二乘法绿原酸新绿原酸隐绿原酸栀子苷断氧化马钱子苷固含量

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