检索结果-内蒙古大学图书馆

徐州医学院学报 2014年第12期34卷 871-873页

作者：曾凡强王德广徐州医学院解剖学教研室江苏徐州221002

目的构建人类SIRT6蛋白硝基化位点突变体，用于其活性调节机制的研究。方法以野生型pCD—NA3．1-SIRT6-FLAG真核表达重组体为模板，用定点突变PCR的方法获得SIRT6的酪氨酸突变体；突变产物转化大肠杆菌DH5α进行筛选、序列测定；野生型... 详细信息

目的构建人类SIRT6蛋白硝基化位点突变体，用于其活性调节机制的研究。方法以野生型pCD—NA3．1-SIRT6-FLAG真核表达重组体为模板，用定点突变PCR的方法获得SIRT6的酪氨酸突变体；突变产物转化大肠杆菌DH5α进行筛选、序列测定；野生型和突变型重组体转到293H细胞，Westernblot鉴定SIRT6的表达。结果①经PCR法得到了SIRT6的突变重组体；②SIRT6突变重组体测序图谱与预期结果完全一致；③Westernblot检测野生和突变型SIRT6蛋白能表达。结论获得了能真核表达硝基化位点的突变型SIRT6蛋白的重组体。

关键词： SIRT6 硝基化位点突变体真核表达

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根管感染中产甲烷古细菌基于mcrA序列的系统发育分析

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口腔生物医学 2014年第4期5卷 181-184页

作者：韦艳霞郑纪伟杨锋刘佃滨徐州医学院病原生物学与免疫学教研室江苏徐州221004 徐州医学院口腔医学院江苏徐州221004

目的:分析根管感染中产甲烷古细菌的多样性,建立基于功能基因--甲基辅酶M还原酶(methyl coenzyme M reductase,MCR)基因α亚基(mcr A)的系统发育树。方法:利用一对特异性引物选择性扩增感染根管中产甲烷古细菌的mcr A片段,在此基础上建... 详细信息

目的:分析根管感染中产甲烷古细菌的多样性,建立基于功能基因--甲基辅酶M还原酶(methyl coenzyme M reductase,MCR)基因α亚基(mcr A)的系统发育树。方法:利用一对特异性引物选择性扩增感染根管中产甲烷古细菌的mcr A片段,在此基础上建立mcr A克隆文库。通过蓝白斑筛选的方法,筛选出阳性重组克隆子,进一步通过基因测序获得重组克隆子中的插入片段mcr A序列。利用Clustalx和Mega 4软件包分析mcr A序列,对其进行同源性比较和系统发育学分析。结果:4例根管样本的其中1例检出了产甲烷古细菌;构建了基于mcr A序列的系统发育树。随机选出的8个mcr A克隆片段高度同源,均为类口腔甲烷短杆菌序列型。结论:本例根管感染中产甲烷古细菌的多样性局限于类口腔甲烷短杆菌序列型。

关键词：根管感染产甲烷古细菌 mcrA 基因系统发育

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徐州市农村地区居民糖尿病认知情况调查

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中国健康教育 2014年第5期30卷 446-448页

作者：黄凯王盈王芳张琪温雨婷黄水平徐州医学院公共卫生学院徐州医学院临床医学系 2010级江苏徐州221000 徐州医学院公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室江苏徐州221000

目的了解徐州农村地区居民对糖尿病的认知情况及其影响因素,为健康教育策略的制定与糖尿病的预防提供依据。方法对徐州农村地区1028位居民进行随机抽样问卷调查,采用χ2分析、Logistic多因素回归分析等方法,对糖尿病的认知率、认知度及... 详细信息

目的了解徐州农村地区居民对糖尿病的认知情况及其影响因素,为健康教育策略的制定与糖尿病的预防提供依据。方法对徐州农村地区1028位居民进行随机抽样问卷调查,采用χ2分析、Logistic多因素回归分析等方法,对糖尿病的认知率、认知度及其相关因素进行分析。结果被调查居民对糖尿病的总体认知率为36.8%,对糖尿病概念、症状、并发症、危险因素和预防方法的认知率分别为37.8%、34.4%、28.5%、48.1%和38.1%。单因素分析显示,居民对糖尿病的认知度与年龄、职业、文化程度、人均月收入和健康教育程度(P<0.01)有关;Logistic多因素回归分析显示,居民对糖尿病的认知度与文化程度(OR=1.947)、健康教育程度(OR=1.778)和年龄(OR=0.653)有关。结论徐州市农村地区居民对糖尿病的认知不足,加强健康宣传教育可有效提高居民特别是中老年居民对糖尿病的认知度;宣传内容应注重疾病知识与健康行为相结合。

关键词：农村糖尿病认知度健康教育

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大肠埃希菌MG1655 Lon蛋白酶编码基因敲除株的构建

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徐州医学院学报 2014年第7期34卷 471-473页

作者：韦艳霞李阳刘佃滨徐州医学院病原生物学与免疫学教研室江苏徐州221004 徐州医学院口腔医学院

目的构建Lon蛋白酶编码基因缺失的大肠埃希菌（*** MG1655）菌株。方法PCR扩增基因序列，该序列两端与Lon蛋白酶基因部分序列同源，中间部分为氯霉素抗性基因。电转化法将该片段转入大肠埃希菌MG1655。利用宿主菌-大肠埃希菌MG1655内pK... 详细信息

目的构建Lon蛋白酶编码基因缺失的大肠埃希菌（*** MG1655）菌株。方法PCR扩增基因序列，该序列两端与Lon蛋白酶基因部分序列同源，中间部分为氯霉素抗性基因。电转化法将该片段转入大肠埃希菌MG1655。利用宿主菌-大肠埃希菌MG1655内pKIM6编码的入重组系统，以PCR产物中的氯霉素抗性基因替代靶基因-Lon编码基因。氯霉素抗性平板筛选阳性重组体，琼脂糖凝胶电泳和DNA测序两种方法鉴定lon敲除突变株。结果氯霉素抗性平板成功筛选出重组菌株，基因检测结果表明Lon编码基因被氯霉素抗性基因替代。结论本研究通过该方法成功获得了***1655蛋白酶编码基因lon敲除突变株，为探讨大肠埃希菌Lon在牙菌斑形成中的作用奠定了基础。

关键词： Lon蛋白酶基因敲除大肠埃希菌牙菌斑

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浅谈如何培养医学研究生的科研能力

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科教文汇 2014年第18期 90-90,94页

作者：高锦徐州医学院神经生物学教研室江苏徐州221000

培养和提高医学研究生的创新意识和科研实践能力是医学研究生教育的重要目标和内容。在研究生带教过程中要注重培养其科学的思维方法、从临床上发现和解决科学问题的能力、获取信息的能力、重视学术交流,从而培养出医学领域的一流创新... 详细信息

培养和提高医学研究生的创新意识和科研实践能力是医学研究生教育的重要目标和内容。在研究生带教过程中要注重培养其科学的思维方法、从临床上发现和解决科学问题的能力、获取信息的能力、重视学术交流,从而培养出医学领域的一流创新人才。

关键词：医学研究生科研能力科学思维

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塞来昔布预防唑来膦酸注射液不良反应的实验研究

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徐州医学院学报 2014年第11期34卷 758-759页

作者：辛力王锋赵德勇柯明池韩天徐州医学院附属医院骨科江苏徐州221002 徐州医学院流行病学教研室江苏徐州221004

目的观察塞来昔布预防唑来膦酸注射液不良反应的效果。方法40例确诊的绝经后女性骨质疏松症患者随机双盲分为观察组和对照组，每组20例。观察组在静脉输注唑来膦酸注射液当时、当晚、次日晚口服塞来昔布200mg各1次，对照组口服安慰剂，... 详细信息

目的观察塞来昔布预防唑来膦酸注射液不良反应的效果。方法40例确诊的绝经后女性骨质疏松症患者随机双盲分为观察组和对照组，每组20例。观察组在静脉输注唑来膦酸注射液当时、当晚、次日晚口服塞来昔布200mg各1次，对照组口服安慰剂，用副反应量表（TESS）评定不良反应。结果在首次使用塞来昔布后8h、第2日、第3日3个评分时段，观察组TESS评分低于对照组（t=6．585、5．351和5．667，P=0．001）。结论在静脉输注唑来膦酸注射液后3天内使用塞来昔布能有效地减少唑来膦酸注射液的不良反应。

关键词：塞来昔布唑来膦酸骨质疏松不良反应

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神经粘附分子NCAM140基因RNA干扰质粒的构建与鉴定

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现代生物医学进展 2014年第2期14卷 251-255,285页

作者：陈芳芳李俐陈慧珍肖成华高殿帅徐州医学院神经生物学实验室江苏徐州221002 徐州医学院病理生理教研室江苏徐州221002 徐州医学院附属医院神经内科江苏徐州221002

目的:构建有效的小鼠神经粘附分子(NCAM140)基因的RNA干扰(RNAi)质粒载体,为研究NCAM140参与的细胞信号通路转导、其生物学作用以及以NCAM140为靶点的基因治疗提供稳定转染的RNAi质粒。方法:使用基因序列软件设计、筛选符合公开文献筛... 详细信息

目的:构建有效的小鼠神经粘附分子(NCAM140)基因的RNA干扰(RNAi)质粒载体,为研究NCAM140参与的细胞信号通路转导、其生物学作用以及以NCAM140为靶点的基因治疗提供稳定转染的RNAi质粒。方法:使用基因序列软件设计、筛选符合公开文献筛选参数的4条靶序列以及1条阴性对照序列,由上海吉玛技术有限公司合成。与载体质粒pGPU6/GFP/Neo重组后,分别命名为pSi-nca1、pSi-nca2、pSi-nca3、pSi-nca4和pSi-control。转染大肠杆菌感受态细胞。选择阳性克隆进行DNA测序鉴定,Western blot方法进行干扰靶点的筛选。选取干扰效率最高的质粒转染MN9D细胞,普通光学显微镜分别计数同一视野细胞总数及GFP阳性细胞数,计算转染效率。结果:酶切和DNA测序结果证实shRNA正确插入pGPU6/GFP/Neo质粒;Western blot结果显示与空质粒对照组比较,pSi-nca4组细胞NCAM140表达明显下调,细胞转染效率为62%。结论:成功构建靶向小鼠NCAM140基因的RNAi质粒,为NCAM140参与的细胞信号通路的研究以及以NCAM140为靶点的基因治疗提供了稳定转染细胞的干扰质粒,为研究其生物学作用奠定了分子生物学基础。

关键词： NCAM140 RNAi 质粒

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快速斑点酶标法检测抗丝聚蛋白抗体

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延安大学学报（医学科学版） 2014年第4期12卷 1-4页

作者：秦苏萍李慧王晓天李小翠郑葵阳汤仁仙徐州医学院病原生物学与免疫学教研室江苏徐州221004

目的建立一种快速、简便的抗丝聚蛋白抗体（anti-filaggrin antibody,AFA）的检测方法。方法采用快速斑点酶标法（Rapid-Dot-ELISA,R-Dot-ELISA）检测15份AFA阳性的类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者和15份AFA阴性的正常... 详细信息

目的建立一种快速、简便的抗丝聚蛋白抗体（anti-filaggrin antibody,AFA）的检测方法。方法采用快速斑点酶标法（Rapid-Dot-ELISA,R-Dot-ELISA）检测15份AFA阳性的类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者和15份AFA阴性的正常健康者血清的AFA。检测中采用不同浓度的丝聚蛋白、不同的封闭液、不同浓度的酶标抗体,摸索检测条件。确定检测条件后,采用R-Dot-ELISA和ELISA法检测100例RA患者和150例包括系统性红斑狼疮（SLE）、强直性脊柱炎等非RA的自身免疫病患者和50例健康者血清的AFA,比较两种方法检测AFA的一致性,并判断R-Dot-ELISA检测AFA对RA的诊断价值。结果丝聚蛋白浓度为40-160μg/m L,封闭液为含1%BSA和10%小牛血清的PBS,酶标抗体稀释度为1∶80-1∶320是较合适的检测条件。R-Dot-ELISA与ELISA法检测AFA,结果一致率为98%（r=0.947,P〈0.05）,对RA诊断的敏感度、特异度等统计学指标无差异。结论 R-Dot-ELISA检测AFA快速、简便,且对RA的诊断具有较高的敏感性及特异性,适用于基层流行病学调查和临床快速诊断。

关键词：快速斑点酶标法抗丝聚蛋白抗体类风湿性关节炎

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混合噬菌体模拟抗原用于华支睾吸虫病诊断的研究

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徐州医学院学报 2014年第11期34卷 734-736页

作者：付琳琳颜超赵昆徐州医学院病原生物学与免疫学教研室江苏徐州221004

目的观察混合噬菌体模拟抗原用于华支睾吸虫病诊断的价值。方法用斑点免疫金银染色法（Dot—IGSS）检测、筛选出阳性的噬菌体单个克隆，将免疫活性强的克隆组合为不同的混合噬菌体抗原。分别用华支睾吸虫成虫抗原和混合噬菌体抗原检测... 详细信息

目的观察混合噬菌体模拟抗原用于华支睾吸虫病诊断的价值。方法用斑点免疫金银染色法（Dot—IGSS）检测、筛选出阳性的噬菌体单个克隆，将免疫活性强的克隆组合为不同的混合噬菌体抗原。分别用华支睾吸虫成虫抗原和混合噬菌体抗原检测采自华支睾吸虫病流行区居民血清中抗华支睾吸虫抗体。结果用免疫反应性最强的噬菌体克隆P1＋P6＋P9组合作为混合噬菌体抗原，以Dot—IGSS法检测680份流行区居民血清，混合噬菌体抗原检测和成虫抗原检测的抗体阳性率分别为17．20％和19．26％，差异无统计学意义。结论混合噬菌体模拟抗原与华支睾吸虫成虫抗原有相似的敏感性和特异性，并可在实验室成批制作生产，有助于提高华支睾吸虫病免疫诊断的效能。

关键词：华支睾吸虫病噬菌体模拟抗原表位诊断

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GDNF的生物学效应对脂筏中胞膜蛋白定位的重要性研究

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现代生物医学进展 2014年第8期14卷 1435-1437页

作者：徐夏红陈静李俐王萌史子啸高殿帅徐州医学院神经生物学与解剖学教研室江苏徐州221000

目的:探讨GDNF的生物学效应对胞膜蛋白在脂筏的定位的影响。方法:首先以PBS或GDNF预处理体外培养的真核细胞,提取脂筏,以免疫印迹方法检测三种胞膜蛋白(RET,NCAM140及integrinβ1)在脂筏的含量变化。结果:GDNF预处理组RET和NCAM140蛋白... 详细信息

目的:探讨GDNF的生物学效应对胞膜蛋白在脂筏的定位的影响。方法:首先以PBS或GDNF预处理体外培养的真核细胞,提取脂筏,以免疫印迹方法检测三种胞膜蛋白(RET,NCAM140及integrinβ1)在脂筏的含量变化。结果:GDNF预处理组RET和NCAM140蛋白在脂筏的含量增加,而integrinβ1蛋白的含量无显著性变化。在脂筏中也可检测到integrinβ1蛋白。结论:GDNF可影响某些胞膜蛋白在细胞膜上的定位,使其招募到脂筏,这可能是GDNF的一种重要生物学效应。

关键词：脂筏 GDNF 胞膜蛋白

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