检索结果-内蒙古大学图书馆

苏州大学学报（医学版） 2012年第5期32卷 629-633,673页

作者：尤红娟刘雯赵金金徐志辉党景东刘转转郑葵阳汤仁仙徐州医学院病原生物学与免疫学教研室江苏徐州221004

目的建立高效表达可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)蛋白的原核表达载体,获得高生物学活性的TRAIL蛋白。方法取健康人外周血提取总RNA,RT-PCR扩增TRAIL基因的胞外区片段,克隆入原核表达载体pET30a中,经双酶切、PCR及测序鉴定... 详细信息

目的建立高效表达可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)蛋白的原核表达载体,获得高生物学活性的TRAIL蛋白。方法取健康人外周血提取总RNA,RT-PCR扩增TRAIL基因的胞外区片段,克隆入原核表达载体pET30a中,经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆。重组载体转化感受态细胞BL21,优化蛋白表达条件;亲和层析法纯化重组蛋白;SDS-PAGE蛋白电泳、Western blot鉴定。重组蛋白与TRAIL蛋白标准品分别作用Huh-7细胞,CCK8、流式细胞术检测蛋白生物学作用。结果 DNA测序结果证实成功构建重组质粒pET30a/TRAIL,SDS-PAGE蛋白电泳、Western blot显示pET30a/TRAIL诱导的为可溶性的His-rTRAIL。CCK8、流式细胞术检测结果显示,与TRAIL蛋白标准品相比,His-rTRAIL对Huh-7细胞具有良好的促凋亡作用。结论成功构建高效表达可溶性TRAIL蛋白的原核表达载体pET30a/TRAIL,表达的可溶性蛋白His-rTRAIL具有高度的生物学作用,为肿瘤的生物学治疗提供新的实验依据。

关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体克隆原核表达凋亡

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徐州市≥15岁居民过量饮酒现状调查

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中国公共卫生 2012年第10期28卷 1304-1306页

作者：吴洪敏娄培安陈培培张盼张雷余加席黄水平陈娜张宁徐州医学院公共卫生学院流行病与卫生统计教研室江苏徐州221002 徐州市疾病预防控制中心

目的了解江苏省徐州市≥15岁居民过量饮酒现状,为今后健康教育和采取行为干预措施提供科学依据。方法采用多阶段分层随机抽样方法对在徐州市抽取的44 791名≥15岁居民进行问卷调查。结果徐州市≥15岁居民过量饮酒率为11.65%,标化率为12.... 详细信息

目的了解江苏省徐州市≥15岁居民过量饮酒现状,为今后健康教育和采取行为干预措施提供科学依据。方法采用多阶段分层随机抽样方法对在徐州市抽取的44 791名≥15岁居民进行问卷调查。结果徐州市≥15岁居民过量饮酒率为11.65%,标化率为12.35%;其中城市居民过量饮酒率为11.19%,标化率为11.86%,农村居民过量饮酒率为11.79%,标化率为12.49%,城市与农村居民过量饮酒率比较,差异无统计学意义(P>0.05);5 219名过量饮酒者中,过量饮酒1～2次/周者占37.77%,过量饮酒3～4次/周者占23.41%,每天或几乎每天过量饮酒者占38.82%;其中城市和农村居民过量饮酒频次为1～2次/周、3～4次/周、每天或几乎每天者分别占44.93%、28.18%、26.89%和35.71%、22.05%、42.24%,城市与农村居民过量饮酒频次比较,差异有统计学意义(Z=-8.463,P=0.000);不同特征居民过量饮酒率比较,不同性别、年龄、文化程度、职业、婚姻状况和人均年收入居民的过量饮酒率间差异均有统计学意义(P<0.01)。结论徐州市≥15岁居民过量饮酒率较高,农村居民每天或几乎每天过量饮酒者多于城市居民。

关键词：过量饮酒频次居民

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小鼠胰岛素样生长因子-1基因体外克隆及表达的研究

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徐州医学院学报 2012年第4期32卷 226-229页

作者：彭长凌朱裕华张丽袁红花朱孝荣徐州医学院实验动物中心江苏徐州221002 徐州医学院神经生物学教研室

目的探讨小鼠胰岛素样生长因子-1（IGF-1）基因提取、鉴定及重组质粒转染COS-7细胞表达。方法通过RT—PCR获取小鼠骨骼肌IGF-1的eDNA，将该基因亚克隆入重组质粒p1（peDNA3．1-Nestin—EGFP）中，构建重组质粒p2（peDNA3．1-Nestin—EGF... 详细信息

目的探讨小鼠胰岛素样生长因子-1（IGF-1）基因提取、鉴定及重组质粒转染COS-7细胞表达。方法通过RT—PCR获取小鼠骨骼肌IGF-1的eDNA，将该基因亚克隆入重组质粒p1（peDNA3．1-Nestin—EGFP）中，构建重组质粒p2（peDNA3．1-Nestin—EGFP—IGF-1），脂质体转染COS-7细胞，ELISA检测细胞培养基中IGF-1蛋白量。结果克隆IGF-1基因eDNA与GenBank中该基因序列-致，重组质粒转染COS-7细胞培养基中均含有IGF-1蛋白。结论IGF-1基因成功构建到重组质粒p2中，且能在COS-7细胞中过表达。

关键词：胰岛素样生长因子-1 小鼠克隆转染表达

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特异性siRNA沉默LASP-1对HepG2细胞增殖和迁移的影响

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苏州大学学报（医学版） 2012年第2期32卷 184-188页

作者：孔凡运胡丽娜张海清李向阳尤红娟汤仁仙郑葵阳徐州医学院病原生物学与免疫学教研室江苏徐州221002

目的应用RNA干扰技术沉默细胞内LASP-1蛋白的表达,探讨LASP-1蛋白对人肝癌HepG2细胞增殖和迁移的作用。方法根据LASP-1 mRNA编码序列设计RNA干扰靶点并构建特异性小干扰RNA(siRNA),通过脂质体转染入HepG2细胞,采用Western blot法检测LAS... 详细信息

目的应用RNA干扰技术沉默细胞内LASP-1蛋白的表达,探讨LASP-1蛋白对人肝癌HepG2细胞增殖和迁移的作用。方法根据LASP-1 mRNA编码序列设计RNA干扰靶点并构建特异性小干扰RNA(siRNA),通过脂质体转染入HepG2细胞,采用Western blot法检测LASP-1蛋白的表达。采用CCK-8增殖实验、平板克隆形成实验、Transwell和划痕愈合实验方法,观察HepG2细胞增殖及迁移情况。结果 (1)LASP-1 siRNA对LASP-1蛋白表达水平有显著的下调作用(P<0.05)。(2)体外实验结果显示,与HepG2组及阴性对照组相比,siRNA组HepG2细胞增殖和克隆形成率明显被抑制(P<0.05),其迁移能力也下降(P<0.05)。结论下调LASP-1蛋白表达可显著抑制HepG2细胞的增殖和迁移能力,提示LASP-1在肝癌细胞恶性增殖和转移过程中具有重要作用,为临床上寻找抑制肝癌增殖转移的靶点提供新的思路和方法。

关键词： LASP-1 RNA干扰 HepG2细胞增殖迁移

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透射电镜样品制备中常见污染问题的探讨

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徐州医学院学报 2012年第2期32卷 92-94页

作者：于红丽董富兴戚大石熊晔董红燕徐州医学院神经生物学研究中心江苏徐州221002 徐州医学院神经生物学教研室

透射电镜生物样品制备最常用的是超薄切片法,超薄切片技术的制片过程很复杂,要求很细致,稍有不慎便会造成污染,影响图片质量.本文就如何减少样品制备污染问题,总结了本实验室长期以来的制样经验,供广大电镜工作者,特别是初学者借鉴.

关键词：透射电镜制样污染

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鞘内注射IL-1ra对CCI大鼠神经病理性疼痛的影响及可能机制

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徐州医学院学报 2012年第6期32卷 351-355页

作者：马腾飞周丽王允李梅彭冰谷淑玲徐州医学院药理学教研室江苏徐州221004 徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室江苏徐州221002

目的观察白细胞介素1受体拮抗剂（intedeukin-1 receptorantagonist，IL-1ra）对坐骨神经慢性压迫性损伤（chronicconstrictioninjury，CCI）大鼠神经病理性疼痛的影响及可能机制。方法采用大鼠CCI模型。雄性SD大鼠随机分为假手术组、CC... 详细信息

目的观察白细胞介素1受体拮抗剂（intedeukin-1 receptorantagonist，IL-1ra）对坐骨神经慢性压迫性损伤（chronicconstrictioninjury，CCI）大鼠神经病理性疼痛的影响及可能机制。方法采用大鼠CCI模型。雄性SD大鼠随机分为假手术组、CCI组、IL-1ra10mg／L组和IL-1ra1mg／L组（n=8）。yonFrey纤维丝和热痛刺激仪检测大鼠机械性缩足反射阈值和热缩足反射潜伏期，分别于术后第3、5、7天各时间点将大鼠处死，应用免疫组织化学检测脊髓背角神经元磷酸化细胞外信号调节激酶（P—ERK）表达的情况。结果IL-1ra 10mg／L可减轻CCI大鼠术后第3、5、7天机械痛敏与热痛敏，减少脊髓背角神经元中P-ERK表达，其中第5天尤为明显。结论IL-1ra能减轻神经病理性疼痛，其机制可能与阻断IL-1B、降低P-ERK表达有关。

关键词：神经病理性疼痛脊髓磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK) 大鼠

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大鼠少突胶质细胞转录因子2基因真核表达载体的构建

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中国组织工程研究 2012年第42期16卷 7871-7876页

作者：欧阳长杰段线花戚举星曲德伟徐州医学院人体解剖学教研室江苏省徐州市221002

背景:碱性螺旋-环-螺旋转录因子少突胶质细胞转录因子2在脊髓的少突胶质细胞的分化过程中起着关键性的作用。目的:构建大鼠少突胶质细胞转录因子2基因重组真核表达载体,观察其在真核细胞内的表达。方法:从新生大鼠脊髓组织中提取总RNA,... 详细信息

背景:碱性螺旋-环-螺旋转录因子少突胶质细胞转录因子2在脊髓的少突胶质细胞的分化过程中起着关键性的作用。目的:构建大鼠少突胶质细胞转录因子2基因重组真核表达载体,观察其在真核细胞内的表达。方法:从新生大鼠脊髓组织中提取总RNA,采用RT-PCR方法获得目的基因片段,克隆至pGEM-T载体中。经测序确证后将少突胶质细胞转录因子2cDNA片段与pEGFP-N1载体定向连接。将鉴定正确的重组体pEGFP-N1-Olig2以脂质体法转染至COS-7细胞中,反转录PCR鉴定少突胶质细胞转录因子2mRNA的表达,免疫印迹法检测少突胶质细胞转录因子2蛋白质表达水平。结果与结论:克隆了少突胶质细胞转录因子2的cDNA,并构建了其真核表达载体pEGFP-N1-Olig2,经限制性内切酶酶切鉴定及测序分析证实了其序列的正确性;转染72h时免疫印迹分析显示,COS-7/pEGFP-N1-Olig2实验组COS-7细胞表达Olig2-GFP融合蛋白。提示实验成功构建pEGFP-N1-Olig2真核表达载体,并且在COS-7细胞中得到高效表达。

关键词：少突胶质细胞转录因子2 重组质粒基因表达转染 COS-7细胞碱性螺旋-环-螺旋转录因子组织构建组织工程

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蒙特利尔认知评估量表在脑出血后认知损害筛查中的应用

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徐州医学院学报 2012年第1期32卷 57-59页

作者：王伟刘涵李晓泉樊红彬徐州医学院神经病学教研室江苏徐州221002 徐州医学院附属医院神经内科江苏徐州221002

目的探讨蒙特利尔认知评估量表（Montreal Cognitive Assessment,MoCA）在脑出血后认知损害筛查中的应用.方法应用简易精神状态量表（Mini-Mental State Examination,MMSE）、MoCA对88例脑出血患者和61例健康人进行神经心理评估.行CT... 详细信息

目的探讨蒙特利尔认知评估量表（Montreal Cognitive Assessment,MoCA）在脑出血后认知损害筛查中的应用.方法应用简易精神状态量表（Mini-Mental State Examination,MMSE）、MoCA对88例脑出血患者和61例健康人进行神经心理评估.行CT或MRI检查,详细收集患者一般资料（包括年龄、性别、受教育程度）及血管性危险因素（vascular risk factor,VRF）如血压、血脂等,将以上神经心理学量表评定结果、血管性危险因素进行对比研究及相关分析.结果 ①MMSE、MoCA总分在脑出血组和对照组都有相关性（P〈0.05）.②脑出血组和对照组MMSE总分均高于MoCA评定总分（P〈0.05）.③MoCA各分项得分中,脑出血组在视空间与执行能力、注意力、语言、延迟回忆4个方面显著低于对照组（P〈0.05）.结论认知功能障碍是脑出血患者的常见并发症,其中视空间执行能力、注意力、语言及延迟回忆领域受损尤为明显.MoCA对脑出血后认知损害患者的早期筛查较MMSE敏感性、信度更高.

关键词：脑出血认知功能障碍简易精神状态量表蒙特利尔认知评估量表

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医院门诊抗菌药物临床应用调查与分析

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徐州医学院学报 2012年第5期32卷 341-343页

作者：张文龙吕冬梅杨宜华刘阳杨蔚徐州医学院药学院江苏徐州221004 徐州医学院附属医院药剂科江苏徐州221002 徐州医学院药学院药剂学教研室江苏徐州221004

目的了解徐州医学院附属医院门诊抗菌药物临床应用情况,为抗菌药物的合理应用和宏观管理提供依据.方法随机抽取徐州医学院附属医院2010年1～12月门诊处方10 135张,对其中抗菌药物的处方数、应用抗菌药物的种类及数量、药物利用情况等... 详细信息

目的了解徐州医学院附属医院门诊抗菌药物临床应用情况,为抗菌药物的合理应用和宏观管理提供依据.方法随机抽取徐州医学院附属医院2010年1～12月门诊处方10 135张,对其中抗菌药物的处方数、应用抗菌药物的种类及数量、药物利用情况等进行归纳分析.结果使用抗菌药处方1 680张,占总处方量的16.58%;口服给药占所有给药途径的54.95%;抗菌药物的种类中大环内酯类占28.64%,头孢菌素类占28.01%;单一用药处方占78.34%,三联及以上用药占1.01%;几种常见药物的药物利用指数（DUI）≤1.结论该院门诊抗菌药物的使用基本合理,但仍然存在问题,需进一步完善,以促进临床合理用药.

关键词：抗菌药物门诊处方用药分析合理用药

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加巴喷丁对异氟烷镇痛和遗忘作用的影响

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徐州医学院学报 2012年第4期32卷 243-246页

作者：马涛张一肖宋致静田艳艳严涛邵翠杰王丹徐州医学院麻醉药理学教研室江苏徐州221002 徐州医学院麻醉学院2007级徐州医学院麻醉学重点实验室

目的观察加巴喷丁（gabapemin。GBP）对异氟烷（isoflurane，Iso）镇痛和遗忘作用的影响。方法160只小鼠按分层随机区组设计分为镇痛组（热板法和甩尾法）和学习记忆组（避暗实验和跳台实验）2组，每种实验方法组又分为4个亚组：生理盐... 详细信息

目的观察加巴喷丁（gabapemin。GBP）对异氟烷（isoflurane，Iso）镇痛和遗忘作用的影响。方法160只小鼠按分层随机区组设计分为镇痛组（热板法和甩尾法）和学习记忆组（避暗实验和跳台实验）2组，每种实验方法组又分为4个亚组：生理盐水组（Ns组，生理盐水灌胃，2h后腹腔注射生理盐水）、GBP组（G组，GBP25mg·kg“灌胃，2h后腹腔注射生理盐水）、ISO组（I组，生理盐水灌胃，2h后腹腔注射异氟烷）、GBP＋ISO组（GI组，GBP25mg·kg^-1。灌胃，2h后腹腔注射异氟烷）组，每组10只。热板法和甩尾法观察各组小鼠痛阈值差异，避暗实验和跳台实验观察各组小鼠潜伏期和错误次数差异。结果在热板实验和甩尾实验中，与I组相比，GI组热板痛阈（painthresholdinhot—platetest，HPPT）或甩尾潜伏期（tail—flicklatency，TFL）延长（P〈0．05或P〈0．01）；在避暗实验和跳台实验中，GBP＋ISO组较NS组潜伏期缩短、错误次数增加（P〈0．05或P〈0．01），但较I组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论加巴喷丁可增强异氟烷的镇痛作用，但25mg·kg。加巴喷丁灌胃对异氟烷遗忘作用无明显影响。

关键词：加巴喷丁七氟烷镇痛热板法甩尾法学习记忆遗忘小鼠

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