检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2002年第4期33卷 377-383页

作者：潘志明焦新安刘文博高崧倪振亚张扬刘学贤张如宽刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

采用WHO推荐的Kirby Bauer法对我国部分地区 196 2～ 1999年间 34 6株鸡白痢沙门氏菌进行了药物敏感性测定。结果表明 ,在近 40年时间里 ,鸡白痢沙门氏菌对氨苄青霉素、壮观霉素、复方磺胺、磺胺异恶唑、甲氧苄胺嘧啶、羧苄青霉素、四... 详细信息

采用WHO推荐的Kirby Bauer法对我国部分地区 196 2～ 1999年间 34 6株鸡白痢沙门氏菌进行了药物敏感性测定。结果表明 ,在近 40年时间里 ,鸡白痢沙门氏菌对氨苄青霉素、壮观霉素、复方磺胺、磺胺异恶唑、甲氧苄胺嘧啶、羧苄青霉素、四环素、链霉素、青霉素的耐药率显著增强 (P <0 0 1)。菌株的多重耐药率明显增加。 6 0年代以二耐菌株为主 (37 0 % ) ,70年代以四耐、五耐菌株居多 (6 0 5 % ) ,80年代五耐、六耐、七耐菌株占大多数(80 2 % ) ,90年代仅七耐以上菌株就达 83 7%。不同年代菌株显示出不尽相同的耐药谱 ,且呈现出不断增宽的趋势。通过流行病学调查发现 ,6 0年代至 90年代 ,鸡白痢沙门氏菌对青霉素、链霉素、磺胺类药物、四环素、卡那霉素、氯霉素、庆大霉素等药物的耐药性大多呈现出显著增强的变化趋势 ,这充分说明细菌耐药性的形成和发展与抗菌药物长期反复使用有着极为密切的关系。研究对于指导临诊合理用药及控制疾病流行具有重要的现实意义。

关键词：鸡白痢沙门氏菌耐药性变化趋势监测流行病学调查抗菌药物

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PRRSV间接免疫荧光检测法的建立和应用

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中国兽医科技 2005年第4期35卷 256-260页

作者：彭长凌高崧刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

以猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) ATCC VR 2332 株人工单独感染3 头3 周龄仔猪,并用PRRSV ATCC VR 2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染2 头3 周龄仔猪,每日检查试验猪体温、采食情况及临床表现,并用HerdChek IDEXX 试剂盒测其血清抗... 详细信息

以猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) ATCC VR 2332 株人工单独感染3 头3 周龄仔猪,并用PRRSV ATCC VR 2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染2 头3 周龄仔猪,每日检查试验猪体温、采食情况及临床表现,并用HerdChek IDEXX 试剂盒测其血清抗体。PRRSV+PCV2联合感染猪分别在感染后1、3周剖杀,PRRSV单独感染猪和健康对照猪分别在感染后1、2和3周剖杀,对全部试验猪的肺组织进行灌洗处理以获得肺泡巨噬细胞(PAM),用PAM进行抹片,同时用肺组织直接进行触片做间接免疫荧光(IIF)检测。结果表明,用所获得的3 株单克隆抗体均检测到人工感染猪肺组织中的PRRSV抗原。另外,用IIF检测7 头临床疑似PRRS病猪的PAM抹片,其中沭阳县的2头猪呈现阳性反应;对这2头猪的肺组织进行病毒分离,在盲传到第4代时Marc 145细胞上产生明显的细胞病变,进一步证实用所获得的3株单克隆抗体检测临床样品的结果准确而可靠,且获得的3株单克隆抗体均可通过IIF用于检测猪肺组织中的PRRSV抗原。

关键词： PRRSV 荧光检测法猪生殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒2型单克隆抗体应用肺泡巨噬细胞间接免疫荧光联合感染肺组织 ATCC 检查试验临床表现采食情况血清抗体人工感染阳性反应病毒分离细胞病变临床样品抗体检测

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华东地区部分猪源大肠杆菌K 88黏附素的生物学特性

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中国兽医学报 2005年第5期25卷 474-477页

作者：陈祥高崧王雷李文杰曹传闺焦新安刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

近年来,从华东地区患腹泻仔猪中分离到一些表达K 88菌毛的大肠杆菌,这些菌株只与K 88 a因子单抗反应,而不与b、c、d因子单抗反应。通过K 88常规血清交叉吸收试验、SDS-PAGE、W estern印迹,表明这些菌株不仅与K 88ac参考菌株C 83907制备... 详细信息

近年来,从华东地区患腹泻仔猪中分离到一些表达K 88菌毛的大肠杆菌,这些菌株只与K 88 a因子单抗反应,而不与b、c、d因子单抗反应。通过K 88常规血清交叉吸收试验、SDS-PAGE、W estern印迹,表明这些菌株不仅与K 88ac参考菌株C 83907制备的c因子血清反应,而且与以分离株SEC 586制备且经K 88ab、K 88ac、K 88ad参考菌株吸收后的血清也反应。对分离株SEC 586、SEC 464的K 88主要亚单位结构基因faeG的克隆、测序,发现该基因由846对核苷酸组成,编码菌毛主要亚单位的262个氨基酸及21个氨基酸的信号肽,比国外报道的K 88ac F aeG亚单位(263个氨基酸)少了1个氨基酸,比K 88ab、K 88ad(265个氨基酸)少了3个氨基酸。SEC 586、SEC 464菌株的F aeG亚单位氨基酸序列的同源性为97.7%,它们与K 88ac的同源性为94.7%和96.2%;与K 88ab的同源性为90.1%和91.2%;与K 88ad的同源性为87.0%和88.6%。结果表明,新分离的K 88ac大肠杆菌黏附素主要亚单位已发生了部分变异。

关键词：大肠杆菌 K88黏附素单克隆抗体 faeG

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表达新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒的遗传稳定性

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中国预防兽医学报 2006年第4期28卷 405-407页

作者：张体银孙蕾刘武杰刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

本实验为了评价表达新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒(rFPV282E4-SF,rFPVLp-SF)的遗传稳定性,将其在鸡胚成纤维细胞连续培养20代。通过蓝斑来鉴定重组鸡痘病毒纯度,结果所有蚀斑100%变蓝。通过对第0、10和20代F基因扩增并进行序列测定,所有... 详细信息

本实验为了评价表达新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒(rFPV282E4-SF,rFPVLp-SF)的遗传稳定性,将其在鸡胚成纤维细胞连续培养20代。通过蓝斑来鉴定重组鸡痘病毒纯度,结果所有蚀斑100%变蓝。通过对第0、10和20代F基因扩增并进行序列测定,所有碱基和氨基酸序列均和原始转移载体序列完全一致,没有发生任何改变。随后又通过间接免疫荧光证实rFPV282E4-FS和rFPVLP-FS各个代次F基因的特异表达。所有结果均显示了上述重组鸡痘病毒具有良好的遗传稳定性,满足兽医生物制品的遗传稳定性要求。

关键词：新城疫病毒 F基因重组鸡痘病毒遗传稳定性

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鹅源新城疫病毒ZJ1株全基因组的序列测定

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病毒学报 2003年第4期19卷 348-354页

作者：黄勇万洪全刘红旗吴艳涛刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

依据GenBank上公布的新城疫病毒(NDV)的基因序列,自行设计了9对引物,运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获取覆盖NDV鹅源毒株ZJ1株全基因组的部分重叠片段。病毒RNA的5′及3′端的序列由cDNA末端快速扩增技术(RACE)获取。整个病毒基因组... 详细信息

依据GenBank上公布的新城疫病毒(NDV)的基因序列,自行设计了9对引物,运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获取覆盖NDV鹅源毒株ZJ1株全基因组的部分重叠片段。病毒RNA的5′及3′端的序列由cDNA末端快速扩增技术(RACE)获取。整个病毒基因组序列由15192个碱基组成,比GenBank上公布的其它4个NDV毒株BeaudetteC、B1、Lasota及Clone-30的全基因组序列长6个核苷酸。这6个核苷酸位于核衣壳蛋白(NP)基因内,相对于NDV毒株Lasota株全基因序列的1647nt～1648nt位。其它10个NDV毒株中的9个毒株也被验证具有此特征,且它们分属于3个不同的基因型。

关键词：新城疫病毒基因组鹅源序列测定

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新城疫病毒人工感染鹅脾脏差异表达蛋白质组初步分析

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畜牧兽医学报 2012年第7期43卷 1088-1095页

作者：王郁杨开妍段志强吴双胡顺林王晓泉刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

脾脏是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染的重要靶器官,本试验旨在从分子水平上分析NDV与宿主之间的相互作用,探寻早期基因Ⅳ型强毒Herts/33和晚期基因Ⅶ型强毒JS5/05造成鹅脾脏病变差异的相关蛋白。30日龄非免疫鹅分别人工... 详细信息

脾脏是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染的重要靶器官,本试验旨在从分子水平上分析NDV与宿主之间的相互作用,探寻早期基因Ⅳ型强毒Herts/33和晚期基因Ⅶ型强毒JS5/05造成鹅脾脏病变差异的相关蛋白。30日龄非免疫鹅分别人工感染NDV强毒株Herts/33和JS5/05,并于感染后36、72、108h采集2个感染组和对照组的鹅脾脏,提取脾脏蛋白,以17cm、pH5～8的IPG胶条进行二维电泳,运用PDQuest 8.0.1软件对凝胶图谱进行差异蛋白分析。结果显示:与对照组相比,Herts/33感染组和JS5/05感染组脾脏组织分别有154个和148个蛋白出现了显著的差异表达,其中有86个蛋白点是不同感染组共有的差异点,包括52个感染后上调表达蛋白点,34个下调表达蛋白点;另外,有130个差异蛋白点为NDV感染鹅后不同毒株之间产生的差异表达,包括71个感染后上调表达蛋白点,59个下调表达蛋白点。基因Ⅳ型NDV强毒和基因Ⅶd亚型NDV强毒分别感染鹅后,能引起宿主脾脏组织蛋白表达谱发生不同的改变,这为进一步研究Ⅶd亚型NDV对水禽致病性增强的机制提供了重要线索。

关键词：鹅脾脏蛋白质组新城疫病毒

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在疫苗免疫选择压力下H_9N_2亚型禽流行性感冒病毒HA基因的遗传变异

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病毒学报 2002年第2期18卷 149-154页

作者：刘红旗黄勇程坚彭大新贾立军张如宽刘秀梵扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室扬州225009

为了解H9N2 亚型禽流行性感冒 (流感 )病毒在同亚型灭活疫苗的选择压力下的遗传变异情况 ,对某鸡场的感染鸡群进行连续 4年的跟踪监测 ,对使用疫苗前和持续使用疫苗后不同时段分离到的H9N2 亚型禽流感病毒的HA基因进行全序列分析。结果... 详细信息

为了解H9N2 亚型禽流行性感冒 (流感 )病毒在同亚型灭活疫苗的选择压力下的遗传变异情况 ,对某鸡场的感染鸡群进行连续 4年的跟踪监测 ,对使用疫苗前和持续使用疫苗后不同时段分离到的H9N2 亚型禽流感病毒的HA基因进行全序列分析。结果表明 ,在使用第一次分离的病毒株制备的疫苗后 8个月分离到的病毒株 ,其HA基因仅发生一个氨基酸的差异 ;但在继续使用该疫苗的第二个和第三个年头分离的病毒株 ,它们的HA基因则一直在发生较大的变化。这一发现对进一步研究禽流感病毒在不断使用疫苗的选择压力下发生变异的规律。

关键词：疫苗免疫选择压力 H9N2亚型禽流行性感冒病毒 HA基因遗传变异

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应用多重PCR快速诊断山羊猝死症的研究

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中国兽医科技 2002年第3期32卷 10-12页

作者：张小荣文其乙刘秀梵焦新安扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

对 2例突然死亡的山羊病料进行细菌分离培养 ,再应用多重PCR方法对可疑菌进行鉴定和基因分型 ,结合流行病学、临床症状、病理变化 ,诊断为由A型产气荚膜梭菌引起的山羊猝死症 ,通过毒素中和试验加以验证 ,两者结果相一致。

关键词：多重PCR 产气英膜梭菌山羊猝死症诊断

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两株家鸭禽流感病毒H3N1亚型分离株的致病性及其表面糖蛋白基因序列分析

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中国兽医科学 2006年第8期36卷 621-624页

作者：薛峰彭宜顾敏徐利军张评浒刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

测定了2株禽流感病毒(AIV)Dk/YZ/231/02和Dk/YZ/3/04对SPF鸡和BALB/c小鼠的致病性；对其血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因的序列进行了测定,并与GenBank中收录的其他序列进行了比较。结果,此2株AIV对SPF鸡具有较低的致病性,而对BALB/... 详细信息

测定了2株禽流感病毒(AIV)Dk/YZ/231/02和Dk/YZ/3/04对SPF鸡和BALB/c小鼠的致病性；对其血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因的序列进行了测定,并与GenBank中收录的其他序列进行了比较。结果,此2株AIV对SPF鸡具有较低的致病性,而对BALB/c小鼠无致病性；Dk/YZ/231/02株的HA基因与Dk/Ukraine/1/63(H3N8)株的同源率最高,Dk/YZ/3/ 04株的HA基因与Petbird/HK/1559/99(H3N8)株的同源率最高；而Dk/YZ/231/02株的NA基因与Dk/Fujian/17/2001(H5N1)株的同源率最高,Dk/YZ/3/04株的NA基因与Gs/Guangdong/ 1/96(H5N1)株的同源率最高。进化分析结果表明,Dk/YZ/231/02和Dk/YZ/3/04株的NA基因均可能起源于水禽源H5N1亚型AIV,这可能是不同亚型AIV在水禽体内基因重组的结果。推导的氨基酸剪切位点序列均为PEKQTR,属于非高致病性AIV的特征序列。

关键词：禽流感病毒 HA基因 NA基因

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鸡痘病毒通用高效表达载体的构建及其初步应用

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中国兽医学报 2004年第5期24卷 429-432页

作者：孙蕾吴艳涛张体银陈素娟刘秀梵扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

利用分子克隆技术对本室构建的高效鸡痘病毒表达载体 p1 1 S进行改造 ,在其人工合成禽痘病毒 ( FPV)强启动子 Ps的下游引入含 7个单一酶切位点的多克隆位点 ( MCS) ,构建了便于外源基因插入的通用性更强的高效单表达载体 p N1 1 S。然后... 详细信息

利用分子克隆技术对本室构建的高效鸡痘病毒表达载体 p1 1 S进行改造 ,在其人工合成禽痘病毒 ( FPV)强启动子 Ps的下游引入含 7个单一酶切位点的多克隆位点 ( MCS) ,构建了便于外源基因插入的通用性更强的高效单表达载体 p N1 1 S。然后将 FPV早晚期启动子 PE/ L 及其启动的鹅源新城疫病毒 NDV ZJ1株的 F基因一并插入 p N1 1 S中 ,使PE/ L 与 Ps反向串联 ,从而构建出 1个含 NDV ZJ1株 F基因的重组 FPV高效双表达载体 p N1 1 SEF,其 MCS可以用于插入其他外源基因。在此基础上 ,将 NDV ZJ1株的 HN基因插入 p N1 1 SEF的 Ps启动子下游的 MCS中 ,构建了共表达 NDV ZJ1株 F和 HN基因的重组 FPV双表达载体 p N1 1 SEFHN。将 p H1 1 SEFHN质粒 DNA与 FPV2 82 E4株共转染 CEF,得到共表达 NDV ZJ1株和 HN基因的重组 FPV,间接免疫荧光实验初步证明外源基因得到了较好的表达。表明所构建的通用高效 FPV表达载体有利于高效基因工程活载体疫苗的研制。

关键词：鸡痘病毒表达载体新城疫病毒 F基因 HN基因疫苗

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