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羽扇豆醇对人肝癌细胞HepG2和SK-HEP-1侵袭、转移的影响及机制研究

中国中药杂志 2020年第24期45卷 6028-6035页

作者：刘博佳宁青钟荣玲夏智姜子瑜宋捷韦英杰南京中医药大学第三临床医学院江苏南京210028 江苏省中医药研究院国家中医药管理局中药释药系统重点研究室江苏南京210028

上皮-间质转化(EMT)广泛存在于胚胎发育中,与细胞的迁移、侵袭密切相关。肿瘤中EMT水平升高表现为上皮型钙黏附素(E-cadherin)被神经型钙黏附素(N-cadherin)取代,间质标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)表达上调等。... 详细信息

上皮-间质转化(EMT)广泛存在于胚胎发育中,与细胞的迁移、侵袭密切相关。肿瘤中EMT水平升高表现为上皮型钙黏附素(E-cadherin)被神经型钙黏附素(N-cadherin)取代,间质标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)表达上调等。据报道,羽扇豆醇可降低基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和N-cadherin蛋白表达抑制人肉骨瘤细胞转移,调控MMP-9 mRNA表达抑制Huh-7细胞侵袭。但羽扇豆醇在肝癌方面的研究较少,因此该文探讨羽扇豆醇对肝癌细胞体内外侵袭转移的作用及其可能机制。采用MTT法和Annexin V/PI双染法检测羽扇豆醇对HepG2细胞和SK-HEP-1细胞活力、凋亡的影响。Transwell法检测羽扇豆醇对细胞侵袭能力的影响。Western blot法检测迁移相关蛋白E-cadherin,N-cadherin,α-SMA,vimentin和MMP-9的表达水平。建立裸鼠皮下移植瘤模型以及H22肝癌细胞肺部转移模型,HE染色结合免疫组化法观察羽扇豆醇体内抗肿瘤生长和抑制肺转移的疗效。结果显示,羽扇豆醇(50,100μmol·L^(-1))显著抑制细胞活性,诱导细胞凋亡;羽扇豆醇(5,10,20μmol·L^(-1))可剂量依赖性地抑制HepG2细胞和SK-HEP-1细胞侵袭,同时诱导上皮-间质转化(EMT)标志蛋白E-cadherin表达,降低N-cadherin,α-SMA,vimentin和MMP-9蛋白表达。体内实验显示,羽扇豆醇抑制异种移植HepG2细胞荷瘤小鼠肿瘤的生长,上调肿瘤组织中E-cadherin蛋白表达,降低N-cadherin蛋白表达;同时减少肝癌H22细胞在小鼠肺部转移灶的形成。以上结果表明,羽扇豆醇抑制肝癌细胞侵袭转移的机制可能与其调控EMT过程相关。

关键词：肝癌细胞羽扇豆醇侵袭转移上皮-间质转化(EMT) HepG2细胞 SK-HEP-1细胞

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甘草黄酮类成分对Caco-2细胞P-糖蛋白功能和表达的影响

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中草药 2013年第19期44卷 2703-2709页

作者：彭燕谭晓斌贾晓斌江苏省中医药研究院国家中医药管理局中药释药系统重点实验室江苏南京210028 江苏大学药学院江苏镇江212003

目的研究甘草黄酮类成分对Caco-2细胞P-糖蛋白（P-gP）功能和表达的影响，探讨甘草解毒的作用机制。方法采用流式细胞仪检测经甘草黄酮类成分处理后Caco-2细胞对罗丹明123摄取量的影响，以评价***的外排功能；采用Westernblotting法检... 详细信息

目的研究甘草黄酮类成分对Caco-2细胞P-糖蛋白（P-gP）功能和表达的影响，探讨甘草解毒的作用机制。方法采用流式细胞仪检测经甘草黄酮类成分处理后Caco-2细胞对罗丹明123摄取量的影响，以评价***的外排功能；采用Westernblotting法检测甘草黄酮类成分对Caco-2细胞P—gp表达的影响。结果与对照组相比，甘草总黄酮5、10、50、100μg／mL作用Caco-2细胞1h后，使细胞内罗丹明123的荧光强度分别减少61．1％、56．3％、49．2％、45．4％；甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、芹糖基甘草苷、芹糖基异甘草苷在相同质量浓度，使细胞内罗丹明123的荧光强度减少了19．3％-37．9％。与对照组相比，甘草总黄酮10-400μg／mL给药后72h，使Caco-2细胞膜上P-gP的表达显著增加（P〈0．01）；甘草苷、异甘草苷、甘草素、芹糖基甘草苷5-400μmol／L，异甘草素、芹糖基异甘草苷10-400μmol／L对此也有显著作用（P〈0．01）。结论甘草黄酮类成分增强Caco-2细胞P—gp的功能，上调P-gP的表达，促进细胞内有毒物质的外排，减少有毒物质在肠道的吸收，这可能是甘草配伍其他中药的解毒机制之一。

关键词：甘草黄酮类成分 Caco-2细胞 P-糖蛋白甘草苷异甘草苷甘草素异甘草素芹糖基甘草苷芹糖基异甘草苷

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淫羊藿苷元自微乳在Caco-2细胞模型的肠吸收特性初步研究

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中草药 2012年第3期43卷 476-481页

作者：王晋艳陈彦张振海贾东升贾晓斌江苏省中医药研究院中药新型给药系统重点实验室国家中医药管理局中药释药系统重点研究室江苏南京210028 江苏大学药学院江苏镇江212013

目的制备淫羊藿苷元自微乳,考察其理化性质及体外肠吸收特性。方法在考察淫羊藿苷元理化性质的基础上,以油酸乙酯为油相,聚山梨酯80为乳化剂,丙三醇为助乳化剂制备淫羊藿苷元自微乳,采用透射电镜及激光粒度分析仪测定其稀释后所得微乳... 详细信息

目的制备淫羊藿苷元自微乳,考察其理化性质及体外肠吸收特性。方法在考察淫羊藿苷元理化性质的基础上,以油酸乙酯为油相,聚山梨酯80为乳化剂,丙三醇为助乳化剂制备淫羊藿苷元自微乳,采用透射电镜及激光粒度分析仪测定其稀释后所得微乳的形态、粒径分布和Zeta电位,并采用Caco-2细胞模型初步分析其肠吸收特性。结果所制备的淫羊藿苷元自微乳稀释后,微乳平均粒径为55.6 nm,Zeta电位为30.8 mV,在Caco-2细胞模型上的表观渗透系数(Papp)为(3.52±0.3)×10 6cm/s。结论淫羊藿苷元自微乳制剂稳定,体外研究显示自微乳系统能够促进淫羊藿苷元在肠道的吸收。

关键词：淫羊藿苷元自微乳肠吸收 Caco-2细胞表观渗透系数

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基于“组分构成”理论的中药质量控制新思路

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中国中药杂志 2012年第6期37卷 865-870页

作者：刘丹贾晓斌郁丹红江苏大学药学院江苏镇江212013 江苏省中医药研究院中药新型给药系统重点实验室国家中医药管理局中药释药系统重点研究室江苏南京210028

建立合理准确乃至符合中医基础理论可量化的中药质量评价体系是现代中药国际化发展道路上的一大关键问题。作者基于对中药组分作用整体性的认识,提出将"组分构成"理论的思想植入到中药多维结构质量控制体系中,强调中药是基于... 详细信息

建立合理准确乃至符合中医基础理论可量化的中药质量评价体系是现代中药国际化发展道路上的一大关键问题。作者基于对中药组分作用整体性的认识,提出将"组分构成"理论的思想植入到中药多维结构质量控制体系中,强调中药是基于组分间及组分内部各成分间特定的微观结构关系而发挥多靶点、多途径药效作用的。目前《中国药典》主要依靠控制中药单一/多个指标性成分含量来把关中药质量。事实上,只针对中药指标性成分的控制完全脱离了中药效用的整体性特征,根本无法从中药本质上来控制其质量。其次,《中国药典》对少部分中药各有效总组分量的控制,也仅是宏观结构上的量化,不足以体现中药内在微观结构的整体性和系统性。换言之,就是都无法体现中药的"组分构成"(即中药本质)。因此作者提出在中药质量控制方面,应明确量化中药组分间及组分内部各成分的配比结构关系、设定中药组分间及成分间比例最优可控范围窗的新思想,并认为在中药物质基础研究的过程中就应该深入到中药多组分及多成分微观量比结构的研究,为今后建立更为合理的中药质量控制体系打下基础。

关键词：中药多维结构质量控制体系组分构成量化配比结构量效关系可控范围窗

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基于化学成分转化-肠吸收屏障网络耦联作用的中药炮制机制研究体系的构建

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中国中药杂志 2014年第3期39卷 370-377页

作者：孙娥徐凤娟张振海韦英杰谭晓斌成旭东贾晓斌江苏省中医药研究院国家中医药管理局中药释药系统重点研究室江苏南京210028 江苏大学药学院江苏镇江212013 南京中医药大学江苏南京210046

该文基于课题组多年来对炙淫羊藿炮制机制的研究实践,集成多学科的理论和技术,初步构建了基于化学成分转化-肠吸收屏障网络耦联作用的中药炮制机制研究体系,形成了"化学成分变化-生物转化-体内外代谢-肠吸收转运-药动学结合药效学... 详细信息

该文基于课题组多年来对炙淫羊藿炮制机制的研究实践,集成多学科的理论和技术,初步构建了基于化学成分转化-肠吸收屏障网络耦联作用的中药炮制机制研究体系,形成了"化学成分变化-生物转化-体内外代谢-肠吸收转运-药动学结合药效学-药效机制"的创新研究模式,并结合淫羊藿以及其他中药炮制机制研究的具体实例,对该研究体系的学术思想、研究方法与关键技术进行详细探讨,将有利于系统、深入地挖掘中药炮制的现代科学内涵,丰富中药炮制理论。

关键词：中药炮制机制研究体系化学成分转化肠吸收屏障网络

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潜在肝毒性中药的成分研究进展

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中国中药杂志 2016年第17期41卷 3209-3217页

作者：吴豪钟荣玲夏智黄厚才仲青香封亮宋捷贾晓斌江苏省中医药研究院国家中医药管理局中药释药系统重点研究室江苏南京210028 安徽中医药大学药学院安徽合肥230038 江苏省中医药研究院实验动物中心江苏南京210028

近年来,中药在科研中所占的比例及其临床上的使用量逐渐增高。其研究价值也越来越大,然而中药在使用过程中随之而来的毒副作用也引起人们越来越多的关注。随着中药毒性研究逐渐深入,一些传统性的无毒中药也被发现有潜在的毒性。除了中... 详细信息

近年来,中药在科研中所占的比例及其临床上的使用量逐渐增高。其研究价值也越来越大,然而中药在使用过程中随之而来的毒副作用也引起人们越来越多的关注。随着中药毒性研究逐渐深入,一些传统性的无毒中药也被发现有潜在的毒性。除了中草药的本身对肝脏有损伤作用之外。还包括以下原因:1中药在生长、加工、炮制、运输等环节上受到污染或变质也会引起对机体的副作用;2临床上应该以中医理论为指导合理用药,应当遵循对症用药,配伍得当的原则;3患者体质皆不相同,除了少部分品种中药是固有型肝毒性中药外,大部分中药的潜在肝毒性具有特异质型的特征。肝脏在药物代谢中发挥重要的作用,容易受到药物的损伤作用,因此中药潜在肝毒性及其毒性成分研究成为中药研究的基本领域之一。该文在查阅肝毒性文献的基础上,归纳了肝毒性的临床分型,靶细胞损伤发病机制,并且系统的对中药潜在肝毒性成分及其毒性机制进行了一定的总结。以期为中药肝毒性研究提供思路,为中药临床安全用药提供保障。

关键词：中药潜在肝毒性临床分型化学成分

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β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ的工艺研究

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中国药房 2011年第43期22卷 4059-4061页

作者：张振海陈玲玲贾晓斌贺俊杰金鑫江苏省中医药研究院国家中医药管理局中药释药系统重点研究室南京市210028

目的:研究用β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ的工艺。方法:采用β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ,以转化率为指标,通过单因素试验考察温度、pH值、酶与底物质量比、底物浓度和反应时间对转化率的影响。结果:酶解反应的优... 详细信息

目的:研究用β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ的工艺。方法:采用β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ,以转化率为指标,通过单因素试验考察温度、pH值、酶与底物质量比、底物浓度和反应时间对转化率的影响。结果:酶解反应的优化条件为温度50℃、pH=5.0的枸橼酸-枸橼酸三钠缓冲液、酶与底物质量比1:2、底物浓度1mg·mL-1、反应时间90min。结论:β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ,转化率高,工艺简单、可靠,反应条件温和。

关键词：淫羊藿苷宝藿苷Ⅰ β-葡萄糖苷酶生物转化

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药材品种与受热时间对淫羊藿饮片中主要黄酮类成分的影响规律研究

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中药材 2012年第9期35卷 1402-1407页

作者：孙娥陈玲玲贾晓斌钱浅崔莉江苏省中医药研究院/国家中医药管理局中药释药系统重点研究室江苏南京210028 南京中医药大学江苏南京210046 江苏大学药学院江苏镇江212013

目的:研究药材品种与受热时间两因素对淫羊藿饮片中主要黄酮类成分含量的影响规律。方法:设定温度为170℃,不同品种共39批淫羊藿饮片加热炮制0 min、5 min、10 min,高效液相色谱仪测定其主要黄酮类成分朝藿定A、B、C、淫羊藿苷及宝藿苷... 详细信息

目的:研究药材品种与受热时间两因素对淫羊藿饮片中主要黄酮类成分含量的影响规律。方法:设定温度为170℃,不同品种共39批淫羊藿饮片加热炮制0 min、5 min、10 min,高效液相色谱仪测定其主要黄酮类成分朝藿定A、B、C、淫羊藿苷及宝藿苷Ⅰ的含量,并采用方差分析研究药材品种与受热时间2因素对5种主要黄酮类成分含量变化的影响。结果:朝藿定A、B、C的含量受药材品种影响极显著(P<0.01),宝藿苷Ⅰ影响显著(P<0.05);朝藿定A、朝藿定B、淫羊藿苷和宝藿苷Ⅰ的含量受加热时间影响极显著(P<0.01);但5种黄酮类成分不受品种和受热时间互作效应的影响(P>0.05)。结论:药材品种与受热时间是影响淫羊藿黄酮类成分含量的2个重要因素,柔毛淫羊藿中朝藿定A、C含量丰富,淫羊藿中朝藿定B、宝藿苷Ⅰ的含量相对较高;受热后朝藿定A、B、C含量减少,淫羊藿苷和宝藿苷Ⅰ含量增加。本研究为淫羊藿的饮片品种鉴别、炮制工艺制定、炮制机理探索以及临床合理用药提供科学依据。

关键词：淫羊藿黄酮类成分药材品种受热时间方差分析

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基于阿拉伯半乳糖的白藜芦醇固体分散体制备及体外评价

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中国药学杂志 2021年第5期56卷 379-385页

作者：于翔羽仝萌李淑坤胡子奇黄一平汪晶陈斌南京中医药大学附属中西医结合医院南京210028 国家中医药管理局中药释药系统重点研究室江苏省中医药研究院南京210028 南京中医药大学南京210028

目的研究阿拉伯半乳糖(AG)作为一种新型多糖类载体在固体分散体制剂中的应用,选用难溶性的白藜芦醇(RES)为模型药物,制备白藜芦醇-阿拉伯半乳糖固体分散体(RES-AG SD)并进行评价。方法以AG为载体,采用溶剂法制备RES-AG SD,运用差示扫描... 详细信息

目的研究阿拉伯半乳糖(AG)作为一种新型多糖类载体在固体分散体制剂中的应用,选用难溶性的白藜芦醇(RES)为模型药物,制备白藜芦醇-阿拉伯半乳糖固体分散体(RES-AG SD)并进行评价。方法以AG为载体,采用溶剂法制备RES-AG SD,运用差示扫描量热法(DSC)、X射线粉末衍射法(XRPD)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)和电子扫描显微镜(SEM)分析方法对其微观结构进行表征和分析,选用浆法研究原料药及RES-AG SD在pH 1.2盐酸溶液及pH 6.8磷酸盐缓冲液中的溶出情况;并对其初步稳定性进行评价。结果SEM观察发现RES-AG SD呈细碎的不规则颗粒状,RES和AG的形貌特征已不见;DSC、XRPD和FTIR结果显示,RES晶型被破坏,晶体衍射峰基本消失,药物以无定形形态分散于载体AG中,药物与载体之间存在一定的相互作用;体外溶出实验表明,2 h时,RES在2种溶出介质中的累计溶出率皆高达90%以上,与原料药相比溶出度得到显著提高;30 d加速稳定性实验结果显示,RES-AG SD溶出度与0月相比未发生明显改变,表明其能够保持一定的稳定性。结论所制备的RES-AG SD能显著改善RES的溶出度,为RES的有效递送提供了新的制剂类型;AG作为一种新型药用功能性固体分散体载体,具有一定的实际应用价值。

关键词：阿拉伯半乳糖白藜芦醇固体分散体体外溶出

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纳米碳酸钙在馨月舒胶囊中应用的初步研究

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中药材 2012年第11期35卷 1846-1850页

作者：蒋艳荣张振海崔莉贺俊杰胡绍英贾晓斌南京中医药大学药学院江苏南京210046 江苏省中医药研究院国家中医药管理局中药释系统重点研究室江苏南京210028

目的:考察纳米碳酸钙在馨月舒胶囊中的应用特性。方法:研究不同用量的纳米碳酸钙或微粉硅胶分别对馨月舒喷雾干燥粉体流动性、松密度、吸湿性、阿魏酸体外溶出度、阿魏酸稳定性的影响。结果:纳米碳酸钙和微粉硅胶均能显著提高馨月舒喷... 详细信息

目的:考察纳米碳酸钙在馨月舒胶囊中的应用特性。方法:研究不同用量的纳米碳酸钙或微粉硅胶分别对馨月舒喷雾干燥粉体流动性、松密度、吸湿性、阿魏酸体外溶出度、阿魏酸稳定性的影响。结果:纳米碳酸钙和微粉硅胶均能显著提高馨月舒喷雾干燥粉体的流动性和松密度,对粉体的吸湿性、胶囊中阿魏酸的溶出度和稳定性无明显影响。结论:纳米碳酸钙提高中药喷雾干燥粉体流动性和松密度的作用值得进一步研究。

关键词：纳米碳酸钙粉体流动性吸湿性溶出度

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