检索结果-内蒙古大学图书馆

江苏农业学报 2010年第3期26卷 627-630页

作者：薛秋艳徐剑宏祭芳史建荣南京农业大学植物保护学院植物病理学系农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室江苏南京210095 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所农业部食品质量安全监控重点开放实验室江苏省食品质量安全重点实验室江苏南京210014

为建立简单、快速、同时测定玉米中伏马菌素的超高效液相色谱三重四极杆质谱确证方法,利用液相色谱-电喷雾串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定FB1,采用固相萃取富集,以含有0.1%甲酸的甲醇/水(75+25)为流动相,流速0.4 ml/min,以多反应监测(MRM)... 详细信息

为建立简单、快速、同时测定玉米中伏马菌素的超高效液相色谱三重四极杆质谱确证方法,利用液相色谱-电喷雾串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定FB1,采用固相萃取富集,以含有0.1%甲酸的甲醇/水(75+25)为流动相,流速0.4 ml/min,以多反应监测(MRM)方式进行检测,利用ESI/MS/MS对FB1质谱解析,分别选择特征离子峰m/z334和m/z352作为准确定性的依据。结果表明,在最佳色谱条件下,碰撞能量50 eV,传输区电压100 V时,FB1的保留时间为1.0 min,检出限为75 pg,平均回收率为80.5%,相对标准偏差≤7.47%。以上数据表明该方法具有预处理简单、检测速度快、灵敏度高的优点,可用于玉米样品中伏马菌毒素的确认和准确定量检测,并满足对伏马菌毒素的最低检出要求。

关键词：液相色谱-电喷雾串联质谱玉米伏马毒素多离子反应监测

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宽噬菌谱肠炎沙门氏菌噬菌体的生物学特性

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江苏农业学报 2011年第5期27卷 1117-1121页

作者：包红朵张辉王冉江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所江苏省畜禽产品安全性研究重点实验室江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地农业部食品安全监控重点开放实验室江苏南京210014

以肠炎沙门氏菌为宿主菌,对从鸡场粪尿污水中分离到的肠炎沙门氏菌噬菌体PSA-6a进行生物学特性鉴定。利用双层平板法分离裂解性噬菌体,并采用噬菌斑形态观察、透射电镜分析、噬菌谱测定、最佳感染复数和一步生长曲线等试验对分离到的噬... 详细信息

以肠炎沙门氏菌为宿主菌,对从鸡场粪尿污水中分离到的肠炎沙门氏菌噬菌体PSA-6a进行生物学特性鉴定。利用双层平板法分离裂解性噬菌体,并采用噬菌斑形态观察、透射电镜分析、噬菌谱测定、最佳感染复数和一步生长曲线等试验对分离到的噬菌体进行生物学特性鉴定。结果表明该噬菌体在宿主菌ATCC 13076平板上形成的噬菌斑为透亮的空斑,直径为0.5～1.0 mm,边缘清晰,无晕环;它具有宽噬菌谱的特性,不仅可强裂解宿主菌ATCC 13076,还可裂解其他4株沙门氏菌和1株大肠杆菌K88;透射电镜观察显示此噬菌体头部呈圆形,直径约81 nm,有一长尾,尾长约200 nm;一步生长曲线显示PSA-6a潜伏期为60 min,爆发期为50 min,裂解量为22;最佳感染复数为1。

关键词：肠炎沙门氏菌噬菌体噬菌谱一步生长曲线

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Cry2Aa毒素结合十二肽的筛选与鉴定

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江苏农业学报 2015年第4期31卷 929-941页

作者：武爱华张霄刘媛赵扬赵岩岩张存政谢雅晶刘贤金江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/农业部食品质量安全监控重点开放实验室江苏南京210014 南京农业大学植物保护学院江苏南京210095

利用Cry-2Aa毒素蛋白对噬菌体展示随机十二肽库进行4轮筛选，并从第4轮筛选产物中随机挑选20个单克隆，进行单克隆ELISA、PCR扩增、DNA电泳及测序，鉴定这些克隆与Cry2Aa毒素的结合活性。结果显示，这20个克隆均能与c巧也Aa毒素发生特... 详细信息

利用Cry-2Aa毒素蛋白对噬菌体展示随机十二肽库进行4轮筛选，并从第4轮筛选产物中随机挑选20个单克隆，进行单克隆ELISA、PCR扩增、DNA电泳及测序，鉴定这些克隆与Cry2Aa毒素的结合活性。结果显示，这20个克隆均能与c巧也Aa毒素发生特异性结合，并推导出8条不同的序列。挑取阳性值最高的克隆GT（氨基酸序列为GTPWHHHRHLIV）建立了基于十二肽的Cry-2Aa毒蛋白的间接竞争ELISA检测方法。该方法的抑制中浓度（IC50）为1｜1390μg／ml，最低检测限IC10为O．0211μg／ml，线性检测范围为0．0478～22.691Oμg／ml（Y=23．09lgx＋48．692，R^2=0．9963）。噬菌体展示肽库筛选方法为快速、准确地检测Cry2Aa毒蛋白提供了新的途径。

关键词： Cry2Aa毒素噬菌体展示肽库:ELISA

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4种有机磷农药DNA适体的筛选及结构分析

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南京农业大学学报 2013年第6期36卷 117-122页

作者：王丽刘贤金张存政刘媛屠康南京农业大学食品科技学院江苏南京210095 安徽科技学院食品药品学院安徽凤阳233100 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/农业部食品质量安全监控重点开放实验室江苏南京210014

利用SELEX技术从一个固定的随机ssDNA库中同时筛选甲拌磷、丙溴磷、水胺硫磷、氧化乐果4种有机磷农药的DNA适体。随着筛选轮数的增加,4种有机磷农药从固定的随机库中洗脱的ssDNA逐渐富集,经过12轮的筛选,筛选效率达到40.8%。对第12轮洗... 详细信息

利用SELEX技术从一个固定的随机ssDNA库中同时筛选甲拌磷、丙溴磷、水胺硫磷、氧化乐果4种有机磷农药的DNA适体。随着筛选轮数的增加,4种有机磷农药从固定的随机库中洗脱的ssDNA逐渐富集,经过12轮的筛选,筛选效率达到40.8%。对第12轮洗脱的ssDNA进行克隆、测序,挑选的15个阳性克隆均测序成功,由于部分克隆具有完全一致的序列,最终筛选到5条ssDNA序列。一级结构序列分析表明5条ssDNA具有一定的同源性,二级结构预测表明5条ssDNA的二级结构主要以茎环结构为主,表明茎环结构可能是适体结合4种有机磷农药的基础。

关键词：有机磷农药 DNA适体指数富集的配体系统进化(SELEX) 筛选结构分析

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裂解性福氏志贺氏菌噬菌体SF-A2的生物学特性及其在巴氏杀菌牛奶中的灭菌效果

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食品科学 2010年第23期31卷 214-218页

作者：张辉王冉包红朵江苏省农业科学院农业部食品安全监控重点开放实验室江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地江苏省畜禽产品安全性研究重点实验室江苏南京210014

分离裂解性福氏志贺氏菌(Shigellaflexneri)噬菌体,鉴定其生物学特性,研究其在巴氏杀菌牛奶的灭菌效果。以福氏志贺氏菌为宿主菌,从污水中分离获得特异性针对福氏志贺氏菌的具有高裂解活性的噬菌体,命名为SF-A2。运用PEG/NaCl法纯化SF-... 详细信息

分离裂解性福氏志贺氏菌(Shigellaflexneri)噬菌体,鉴定其生物学特性,研究其在巴氏杀菌牛奶的灭菌效果。以福氏志贺氏菌为宿主菌,从污水中分离获得特异性针对福氏志贺氏菌的具有高裂解活性的噬菌体,命名为SF-A2。运用PEG/NaCl法纯化SF-A2,经负染后电镜观察,该噬菌体为肌尾科噬菌体。生物学特性分析表明:该噬菌体特异性针对福氏志贺氏菌,且对温度及pH值具有良好的耐受能力。将SF-A2以高感染复数(103)用于即食性食品(牛奶)中的福氏志贺氏菌的生物防控实验。结果表明:SF-A2能够有效灭菌,在加入48h后,福氏志贺氏菌降低了3lg(CFU/mL);作用至72h,能够完全将福氏志贺氏菌灭活。从而表明,裂解性福氏志贺氏菌噬菌体SF-A2具有良好的杀菌能力,能够在食品中防控福氏志贺氏菌的污染,也为防治由福氏志贺氏菌引起的腹泻性疾病提供生物源性治疗源。

关键词：裂解性福氏志贺氏菌噬菌体生物防控

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植物源杀菌剂1%蛇床子素水乳剂在黄瓜和土壤中的残留动态

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江苏农业学报 2010年第6期26卷 1386-1390页

作者：陈浩胡梁斌王春梅徐庆宣黄晓艳石志琦范永坚江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地农业部食品安全监控重点开放实验室江苏南京210014 河南科技学院食品学院河南新乡453003

采用田间试验方法,探讨蛇床子素在黄瓜和土壤中的消解动态和最终残留。样品经甲醇和丙酮提取,石油醚液-液分配,固相萃取小柱净化后,进行高效液相色谱分析。仪器最小检出量（LOD）为0.2 ng,在黄瓜和土壤中的最低检出质量分数（LOQ）均为0... 详细信息

采用田间试验方法,探讨蛇床子素在黄瓜和土壤中的消解动态和最终残留。样品经甲醇和丙酮提取,石油醚液-液分配,固相萃取小柱净化后,进行高效液相色谱分析。仪器最小检出量（LOD）为0.2 ng,在黄瓜和土壤中的最低检出质量分数（LOQ）均为0.02 mg/kg。蛇床子素在黄瓜中的平均回收率为88.80%-93.61%,变异系数为1.94%-4.92%;在土壤中的平均回收率为90.74%-94.55%,变异系数为3.20%-6.45%。田间试验结果显示,蛇床子素消解较快,在南京和山东两地黄瓜中降解半衰期分别为0.76 d和0.87 d,土壤中降解半衰期分别为1.12 d和1.15 d。在黄瓜上使用1%蛇床子素水乳剂,按照推荐剂量的1.5倍4 500 g/hm2和推荐剂量3 000 g/hm2喷雾5-6次,距最后一次施药1 d,黄瓜中的残留量为0.11-0.43 mg/kg,土壤中的残留量为0.31-0.77 mg/kg,均小于1.00 mg/kg。以上数据表明,蛇床子素在黄瓜和土壤中属低残留、易降解农药。

关键词：植物源杀菌剂蛇床子素残留动态黄瓜土壤

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一种对mcr-1阳性大肠杆菌具有裂解作用的噬菌体生物学特性

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江苏农业学报 2018年第2期34卷 452-458页

作者：钟希娜何涛葛展霞王冉江苏省农业科学院农业部食品质量安全监控重点开放实验室/江苏省禽产品安全性研究重点实验室江苏南京210014 南京农业大学动物科技学院江苏南京210095

本研究以携带多黏菌素耐药基因mcr-1的大肠杆菌SQ-P-E32为宿主菌,分析其对应的裂解性噬菌体的生物学特性。利用双层平板法,从江苏宿迁某猪场污水中分离对该菌具有裂解性的噬菌体,通过透射电镜和基因组酶切分析对噬菌体进行鉴定并命名为v... 详细信息

本研究以携带多黏菌素耐药基因mcr-1的大肠杆菌SQ-P-E32为宿主菌,分析其对应的裂解性噬菌体的生物学特性。利用双层平板法,从江苏宿迁某猪场污水中分离对该菌具有裂解性的噬菌体,通过透射电镜和基因组酶切分析对噬菌体进行鉴定并命名为v B-Eco P-32,同时测定了该噬菌体的最佳感染复数、一步生长曲线、酸碱和温度耐受性、杀菌效力和裂解谱。结果表明,该噬菌体为短尾噬菌体科,其噬菌斑呈透明的圆形,外周无晕环;该噬菌体的最佳感染复数为100;潜伏期约为5 min,爆发期为55 min,裂解量为32;可耐受温度范围为30~60℃;当pH值为5~10时其效价稳定;当MOI=100.00时,其对大肠杆菌SQ-P-E32的裂解效果最好;v B-Eco P-32裂解谱较广,对猪源大肠杆菌(包括mcr-1阳性菌株)具有较好的杀灭作用。表明,噬菌体v B-Eco P-32在控制mcr-1阳性大肠杆菌感染方面具有较好的应用前景。

关键词： mcr-1阳性大肠杆菌噬菌体生物学特性

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饲料中玉米赤霉烯酮的提纯与测定

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江苏农业学报 2011年第3期27卷 663-667页

作者：王宏杰徐剑宏祭芳丁衬衬董飞史建荣南京农业大学植物保护学院植物病理学系农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室江苏南京210095 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所农业部食品质量安全监控重点开放实验室江苏省食品质量安全重点实验室——省部共建国家重点实验室培育基地江苏南京210014

玉米赤霉烯酮污染饲料对人、畜造成巨大威胁,因此,对饲料中玉米赤霉烯酮检测水平的提高已不容忽视。为玉米赤霉烯酮监控提供灵敏、可靠的分析方法和试验数据,对其提纯与高效液相色谱测定方法进行了研究,结果表明：样品纯化条件,以二氯... 详细信息

玉米赤霉烯酮污染饲料对人、畜造成巨大威胁,因此,对饲料中玉米赤霉烯酮检测水平的提高已不容忽视。为玉米赤霉烯酮监控提供灵敏、可靠的分析方法和试验数据,对其提纯与高效液相色谱测定方法进行了研究,结果表明：样品纯化条件,以二氯甲烷和NaCl溶液为提取剂,湿填硅胶柱为富集净化柱,用6 ml的甲醇溶液洗脱,采用HPLC进行测定;高效液相色谱检测条件,流动相为甲醇/水（80∶20,体积比）,流速为0.6 ml/min,紫外检测波长为236 nm,此时最低检出限为5μg/kg,在1.25~40.00μg/ml范围内,被测物浓度与测定的峰面积呈线性关系（r=0.999 1）;通过对检测方法日内、日间加标回收试验得到该检测方法回收率约为96.3%。该方法简便、快速、准确,可适用于饲料中玉米赤霉烯酮的提纯与测定。

关键词：玉米赤霉烯酮纯化检测高效液相色谱

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鸡蛋中三聚氰胺残留的检测

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江苏农业学报 2008年第6期24卷 936-939页

作者：魏瑞成黄思瑜侯翔包红朵陈明王冉江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所、农业部食品安全监控重点开放实验室江苏省畜禽产品安全性研究重点实验室江苏南京210014

为建立鸡蛋中三聚氰胺残留的简便高效液相色谱法，本试验采用NH2柱作为色谱分析柱，90％乙腈水溶液为流动相，鸡蛋样品经混合均匀后，用三氯乙酸-乙腈溶液提取，经阳离子交换固相萃取柱净化、富集后，在紫外检测器230nm处用高效液相色... 详细信息

为建立鸡蛋中三聚氰胺残留的简便高效液相色谱法，本试验采用NH2柱作为色谱分析柱，90％乙腈水溶液为流动相，鸡蛋样品经混合均匀后，用三氯乙酸-乙腈溶液提取，经阳离子交换固相萃取柱净化、富集后，在紫外检测器230nm处用高效液相色谱仪测定，保留时间在6～7min。标准曲线在0．1～5．0μg／ml浓度内呈线性相关，相关系数（r）为0．9999。在空白鸡蛋样品中添加0．2mg／kg、0．5mg／kg、2．0mg/kg和5．0mg／kg的三聚氰胺，回收率为78．96％～92．19％，相对标准偏差（RSD）为1．96％～6．60％。样品检测定量限为0．2mng／kg。

关键词：鸡蛋三聚氰胺残留高效液相色谱法

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丁香酚对烟草抗烟草花叶病毒的诱导作用初探

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农药学学报 2012年第1期14卷 24-29页

作者：苏杭王春梅陈浩石志琦南京农业大学植物保护学院南京210095 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所南京210014 农业部食用农产品安全监控重点开放实验室南京210014 江苏省食品质量安全重点实验室(省部共建国家重点实验室培育基地) 南京210014 扬州大学环境科学与工程学院江苏扬州225009

为探讨植物源化合物丁香酚对烟草抗烟草花叶病毒(TMV)的诱导作用,初步研究了丁香酚对接种TMV的烟草叶片中叶绿素和丙二醛(MDA)含量,防御酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和超氧化物岐化酶(SOD)活性,以及病程相关蛋白基因PR-1、P... 详细信息

为探讨植物源化合物丁香酚对烟草抗烟草花叶病毒(TMV)的诱导作用,初步研究了丁香酚对接种TMV的烟草叶片中叶绿素和丙二醛(MDA)含量,防御酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和超氧化物岐化酶(SOD)活性,以及病程相关蛋白基因PR-1、PR-3、PR-5表达的影响。结果表明:丁香酚处理可促进叶绿素的合成,减轻烟草体内MDA的积累,提高PAL、POD和SOD的活性,增强PR-1、PR-3、PR-5基因的表达。表明丁香酚可提高植物的诱导抗病性,进而减轻TMV对烟草的危害。

关键词：丁香酚烟草烟草花叶病毒诱导抗性

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