检索结果-内蒙古大学图书馆

江苏农业学报 2011年第4期27卷 842-847页

作者：钟友明张华陈健石志琦合肥工业大学生物与食品工程学院安徽合肥230009 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所江苏南京210014 农业部食用农产品安全监控重点开放实验室江苏南京210014 江苏省食品质量安全重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地江苏南京210014

研究了微囊藻毒素(MC-LR)对青菜幼苗的胁迫效应。通过回归方程计算得出,浓度为4.23 mg/L的MC-LR处理5 d使青菜幼苗生长减少50%。通过特异性荧光探针DCFH-DA和DAF-2DA实时监测青菜幼苗体内活性氧(ROS)和一氧化氮(NO)含量,发现MC-LR处理... 详细信息

研究了微囊藻毒素(MC-LR)对青菜幼苗的胁迫效应。通过回归方程计算得出,浓度为4.23 mg/L的MC-LR处理5 d使青菜幼苗生长减少50%。通过特异性荧光探针DCFH-DA和DAF-2DA实时监测青菜幼苗体内活性氧(ROS)和一氧化氮(NO)含量,发现MC-LR处理能够诱导ROS和NO的产生。抑制剂研究结果表明,MC-LR胁迫下,NO主要通过硝酸还原酶(NR)途径产生。采用NR抑制剂结合MC-LR共同处理,能够显著缓解MC-LR单独处理引起的ROS含量上升和抗氧化酶基因(Cu/Zn-SOD、CAT、APX)的转录水平升高。这些结果表明,微囊藻毒素MC-LR通过NO引起青菜幼苗的氧化胁迫反应。

关键词：微囊藻毒素青菜一氧化氮氧化胁迫硝酸还原酶

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SELEX技术筛选毒死蜱单链DNA适体

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江苏农业学报 2012年第1期28卷 198-203页

作者：雷兆静张存政刘媛王丽胡秋辉刘贤进南京农业大学食品科技学院江苏南京210095 江苏省农业科学院食品质量安全检测研究所农业部食品安全监控重点开放实验室江苏南京210014

试验旨在利用SELEX技术体外筛选毒死蜱的特异性适体。体外合成全长为91 nt的ssDNA文库,以链亲和素修饰的凝胶为载体、毒死蜱为靶分子进行SELEX(配体指数增强系统进化技术)筛选。利用荧光标记法测定适体的筛选效率、亲和力和特异性,通过M... 详细信息

试验旨在利用SELEX技术体外筛选毒死蜱的特异性适体。体外合成全长为91 nt的ssDNA文库,以链亲和素修饰的凝胶为载体、毒死蜱为靶分子进行SELEX(配体指数增强系统进化技术)筛选。利用荧光标记法测定适体的筛选效率、亲和力和特异性,通过MFOLD分析软件对亲和力较高的适体进行二级结构预测和结合位点分析。结果表明,经过15轮筛选后,DNA文库的筛选效率达到44.00%;最终获得9条ssDNA适体,其中适体N23对毒死蜱具有最高的亲和力,其结合活性显著高于N23与水胺硫磷、丙溴磷、氧化乐果的结合活性;二级结构表明茎环结构可能是毒死蜱与适体相互作用的结构基础。

关键词：适体 SELEX 荧光毒死蜱

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基于双抗夹心的Cry1B毒素蛋白质TRFIA检测方法的建立与评价

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江苏农业学报 2013年第1期29卷 184-188页

作者：徐重新陈莎莎张霄刘媛张存政黄鹰刘贤进南京师范大学生命科学学院、江苏省微生物与功能基因组学重点实验室江苏南京210023 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所农业部食品质量安全监控重点开放实验室江苏南京210014

为了建立检测Cry1B毒素蛋白质的双抗夹心时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)方法,利用稀土元素Eu3+作为示踪剂,以可溶性表达的抗Cry1B毒素蛋白质单链抗体(scFv)作为捕获抗体,以免疫兔血清获得的抗Cry1B毒素蛋白质多克隆抗体为检测抗体,建立检... 详细信息

为了建立检测Cry1B毒素蛋白质的双抗夹心时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)方法,利用稀土元素Eu3+作为示踪剂,以可溶性表达的抗Cry1B毒素蛋白质单链抗体(scFv)作为捕获抗体,以免疫兔血清获得的抗Cry1B毒素蛋白质多克隆抗体为检测抗体,建立检测Cry1B抗原的TRFIA技术,并对其进行方法学的综合评价。通过正交试验,获得的最佳单链抗体(Capture antibody)、多克隆抗体(Detection antibody)、Eu3+标记的二抗(Tracer antibody)浓度分别是2.500μg/ml、2.000μg/ml、1.000μg/ml。标准检测曲线灵敏度为0.170 ng/ml,线性测量范围为1.000～800.000 ng/ml。抗原类似物间无交叉反应。Cry1B毒蛋白质在大米中添加回收的批内变异系数为3.8%～6.6%、平均回收率为80.5%～84.8%,批间变异系数为2.2%～8.5%、平均回收率为84.1%～88.4%。表明本试验建立的双抗夹心Cry1B-TRFIA检测范围宽,特异性强,重复性和稳定性好。

关键词：苏云金芽孢杆菌时间分辨免疫分析单链抗体多克隆抗体

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赤霉病菌拮抗菌Bacillus subtilis AF0907抗菌物质研究

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中国生物防治学报 2015年第3期31卷 378-385页

作者：胡晓丹王建伟李孝敬祭芳史建荣徐剑宏南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室/省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室/江苏省转基因安全评价公共服务中心南京210014 江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心南京210014

菌株AF0907是从土壤中分离到的1株对小麦赤霉病菌具有显著拮抗作用的枯草芽孢杆菌,该菌株不仅对小麦赤霉病菌具有很好的拮抗活性,对其他多种植物病原菌都具有很好的拮抗效果。为了明确菌株AF0907对赤霉病菌的抑菌机理,本研究首先使用平... 详细信息

菌株AF0907是从土壤中分离到的1株对小麦赤霉病菌具有显著拮抗作用的枯草芽孢杆菌,该菌株不仅对小麦赤霉病菌具有很好的拮抗活性,对其他多种植物病原菌都具有很好的拮抗效果。为了明确菌株AF0907对赤霉病菌的抑菌机理,本研究首先使用平板对持法对拮抗物质进行定位,结果表明该菌分泌的拮抗物质主要位于细胞上清液中。采用不同饱和度的硫酸铵沉淀细胞上清液,确定了60%的硫酸铵饱和度是沉淀该拮抗物质的最佳条件;分别研究了温度、p H值、蛋白酶K、氯仿对该拮抗物质活性的影响,结果表明该拮抗物质在低温下比较稳定,在60℃以上的高温下,活性迅速降低;在酸性或碱性条件下不稳定;该拮抗物质分别加入蛋白酶K和氯仿作用后拮抗活性分别下降了60.68%、80.07%,因此,初步判断该拮抗物质为蛋白质。利用DEAE-52离子交换柱层析法分离纯化了该拮抗蛋白并进行了SDS-PAGE电泳,结果显示该拮抗蛋白的分子量为48 k Da;利用PPSQ-31A蛋白自动测序仪测定拮抗蛋白N-末端15个氨基酸序列为:His-Glu-Phe-Pro-Thr-Tyr-Lys-His-Met-Tyr-Gln-Val-Met-His-Leu。

关键词：小麦赤霉病菌枯草芽孢杆菌拮抗菌拮抗蛋白

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玉米赤霉烯酮降解菌Bacillus amyloliquefaciens MQ01突变体文库的构建

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江苏农业学报 2017年第2期33卷 -页

作者：朱子薇潘丽婷周义东王燕霞史建荣洪青徐剑宏南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室--省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全风险评估实验室(南京)/江苏省转基因安全评价公共服务中心/江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心江苏南京210014

构建玉米赤霉烯酮降解菌Bacillus amyloliquefaciens MQ01突变体文库,以期获得丢失玉米赤霉烯酮降解功能的突变子,克隆玉米赤霉烯酮降解酶基因,阐明MQ01降解玉米赤霉烯酮的分子机制。将携带转座子TnYLB-1的穿梭载体pMarA电转化至玉米赤... 详细信息

构建玉米赤霉烯酮降解菌Bacillus amyloliquefaciens MQ01突变体文库,以期获得丢失玉米赤霉烯酮降解功能的突变子,克隆玉米赤霉烯酮降解酶基因,阐明MQ01降解玉米赤霉烯酮的分子机制。将携带转座子TnYLB-1的穿梭载体pMarA电转化至玉米赤霉烯酮降解菌Bacillus amyloliquefaciens MQ01中,50℃高温条件下,把穿梭载体pMarA上转座子TnYLB-1随机插入到菌株MQ01基因组中,获得转座子插入突变的阳性克隆,构建MQ01菌株的突变体文库,随机挑选突变子采用PCR和Southern杂交方法进行验证。本研究成功获得了3 000多个TnYLB-1转座子插入突变的阳性克隆,构建了*** MQ01的突变子文库,结果显示TnYLB-1转座子以单拷贝的形式随机插入到*** MQ01的基因组DNA中,从而可以从转座子突变文库中筛选丢失玉米赤霉烯酮降解功能的转座突变子,从菌株MQ01中克隆玉米赤霉烯酮降解酶基因。

关键词：玉米赤霉烯酮 BacillusamyloliquefaciensMQ01 转座子突变突变体文库

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N-苯基-2-萘胺对青菜种子萌发及幼苗生理参数变化的影响

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华北农学报 2012年第1期27卷 140-144页

作者：薛延丰冯慧芳石志琦刘海琴严少华郑建初江苏省农业科学院食品质量安全检测研究所江苏南京210014 江苏省食品质量安全重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地江苏南京210014 农业部食品安全监控重点开放实验室江苏南京210014 南京师范大学生命科学学院江苏南京210097 江苏省农业科学院农业资源与环境研究所江苏南京210014

以青菜为材料,研究了不同浓度N-苯基-2-萘胺对青菜种子进行浸种后对种子发芽、生长、叶绿素含量及抗氧化酶活性的影响。结果表明,N-苯基-2-萘胺浸种可以提高种子的发芽势和发芽率,但与对照相比差异不显著;发芽指数和活力指数的变化趋势... 详细信息

以青菜为材料,研究了不同浓度N-苯基-2-萘胺对青菜种子进行浸种后对种子发芽、生长、叶绿素含量及抗氧化酶活性的影响。结果表明,N-苯基-2-萘胺浸种可以提高种子的发芽势和发芽率,但与对照相比差异不显著;发芽指数和活力指数的变化趋势与发芽势和发芽率的变化趋势相似,在低浓度N-苯基-2萘胺处理下,发芽指数和活力指数增加,但与对照相比差异不显著;当N-苯基-2萘胺浓度小于1 mg/L时,随着N-苯基-2萘胺浓度的增加,青菜的株高不同程度增加,在0.50 mg/L处理下,株高增加最多,显著大于对照;根长和鲜质量的变化趋势相似,随着N-苯基-2-萘胺使用量的增加呈现先增加而后降低。在低浓度N-苯基-2-萘胺处理下,青菜体内的叶绿素含量和抗氧化酶活性与对照相比显著增加,当使用高浓度N-苯基-2-萘胺处理后,叶绿素含量与抗氧化酶活性和对照相比显著降低。

关键词： N-苯基-2-萘胺青菜发芽抗氧化酶

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水葫芦沼液浸种对苗期青菜品质影响初探

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草业科学 2011年第4期28卷 687-692页

作者：薛延丰冯慧芳石志琦严少华江苏省农业科学院食品质量安全检测研究所江苏南京210094 江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地江苏南京210094 农业部食品安全监控重点开放实验室江苏南京210094 南京师范大学生命科学学院江苏南京210097 江苏省农业科学院农业资源与环境研究所江苏南京210014

以青菜(Brassica rapa)为材料,研究不同剂量水葫芦(Eichhornia crassipes)沼液对青菜生物量、根系活力、蛋白质含量、亚硝酸盐、可溶性糖及Vc含量的影响。结果表明,沼液浸种可以显著提高青菜根系活力(P0.05),但在蒸馏水与沼液比例为1∶... 详细信息

以青菜(Brassica rapa)为材料,研究不同剂量水葫芦(Eichhornia crassipes)沼液对青菜生物量、根系活力、蛋白质含量、亚硝酸盐、可溶性糖及Vc含量的影响。结果表明,沼液浸种可以显著提高青菜根系活力(P<0.05),进而促进生物量增加,鲜质量、干质量和根系活力的变化趋势相似。随着沼液处理剂量的增加,鲜质量、干质量和根系活力的增加幅度也随之增大,当使用全沼液进行处理后各参数虽然有所降低,但与对照相比仍然显著增加;使用沼液浸种后,青菜品质得到显著改善,其体内蛋白质含量、可溶性糖和抗坏血酸含量随着沼液处理剂量的增加显著增加,其中以蒸馏水与沼液比例为1∶2的处理效果最好,在全沼液处理下这些指标均有所降低,但与对照相比显著增加;亚硝酸盐含量在蒸馏水与沼液比例为1∶1的处理和全沼液处理下与对照差异均不显著(P>0.05),但在蒸馏水与沼液比例为1∶1.5和蒸馏水的处理与沼液比例为1∶2的处理下,青菜体内亚硝酸盐含量与对照相比均显著降低。这说明,适宜剂量的沼液浸种可以有效改善作物的品质。

关键词：水葫芦沼液青菜品质浸种

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嘧霉胺对斑马鱼的急性毒性和生物富集性研究

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江苏农业科学 2012年第3期40卷 277-278页

作者：苗海生余向阳王鸣华刘贤进南京农业大学植物保护学院江苏南京210095 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/农业部食品安全监控重点开放实验室江苏南京210014

采用半静态法测定嘧霉胺对斑马鱼的急性毒性和生物富集系数。以N,N-二甲基甲酰胺为助剂,配制不同浓度的嘧霉胺溶液,测得嘧霉胺对斑马鱼的LC50为24.9 mg/L,属于低等毒性。在生物富集性试验中,分别设嘧霉胺浓度为0.25、2.50 mg/L,持续暴... 详细信息

采用半静态法测定嘧霉胺对斑马鱼的急性毒性和生物富集系数。以N,N-二甲基甲酰胺为助剂,配制不同浓度的嘧霉胺溶液,测得嘧霉胺对斑马鱼的LC50为24.9 mg/L,属于低等毒性。在生物富集性试验中,分别设嘧霉胺浓度为0.25、2.50 mg/L,持续暴露时间为8 d,测得生物富集系数(BCF8d)分别为10.49、7.93,属于低富集性农药。

关键词：嘧霉胺斑马鱼急性毒性生物富集

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稻米中毒死蜱和氟虫腈的残留规律及其暴露风险

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中国农业科学 2010年第1期43卷 151-163页

作者：张存政张心明田子华何丹军刘贤金江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/农业部食品安全监控重点开放实验室太仓市农产品质量监督检验测试中心农业部农产品质量安全监督检验测试中心(南京) 南京出入境检验检疫局

【目的】从农田到餐桌全程研究毒死蜱、氟虫腈在稻米生产及食用加工过程中的残留消解规律,阐明不同用药量、用药次数与稻米中农药残留的关系,并以理论(MRL)与实际残留数据,结合食用前加工过程的去除消解动态研究,分别计算入口前的残留值... 详细信息

【目的】从农田到餐桌全程研究毒死蜱、氟虫腈在稻米生产及食用加工过程中的残留消解规律,阐明不同用药量、用药次数与稻米中农药残留的关系,并以理论(MRL)与实际残留数据,结合食用前加工过程的去除消解动态研究,分别计算入口前的残留值,进行理论和准确暴露评估,分析大米的食用安全性,并以健康风险评估结果为理论依据,从食用安全的角度对实际生产的用药模式进行调整,并重新界定最适的安全间隔期。【方法】田间试验参照农药残留登记准则(NY/T788-2004)进行,采用气相色谱法分析农药残留在稻米曝晒、贮存、淘洗、蒸煮过程中的消解规律,采用饮食曝露模型——参考剂量百分比(POR)、暴露边缘(MOE)对不同年龄、性别人群进行急、慢性健康风险评估。【结果】(1)稻米中的农药残留及食用风险与田间用药剂量及次数正相关,随着施药剂量、次数的增多,残留量增大,对人健康风险上升。(2)食用加工过程中残留消解研究表明,经曝晒、贮藏、淘洗、蒸煮后两种药剂的降解率分别为91.6%和96.16%,其中蒸煮过程对药剂的降解作用最明显。(3)对以稻米为主食的不同年龄、性别人群的暴露评估表明,稻米中毒死蜱对人健康风险远高于氟虫腈;慢性健康风险分析表明,对所有调查人群毒死蜱为高风险率,氟虫腈为低风险率;急性健康风险分析表明,毒死蜱对儿童具有高风险,尤其是对农村人群中的男性风险较高,氟虫腈对所调查人群均为低风险率;不同年龄与性别组成的人群面临的风险不同,14岁前男孩面临的风险大于女孩,农村地区儿童所面临的健康风险高于城市儿童;14岁至成年之后的女性面临的风险高于男性,农村人群面临的健康风险高于城市人群。(4)研究发现安全收获间隔期的合理界定是降低健康风险的关键点,当安全间隔期延长至14d时,田间试验中所有处理剂量稻米的食用健康风险均降至可接受范围。【结论】稻米的食用安全性不乐观,大米中残留的毒死蜱对人群的健康风险较大,田间应减量使用,建议单次使用剂量不超过推荐剂量两倍,安全间隔期不少于14d,连续施用的间隔期不少于7d;基于氟虫腈的环境生态毒性,建议其在稻米中残留限量引用codex标准0.01mg·kg-1。

关键词：稻米风险评估农药残留毒死蜱氟虫腈

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食用酱油中曲霉的检测方法

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江苏农业学报 2010年第4期26卷 848-852页

作者：王建伟刘昌来周艳红祭芳徐剑宏史建荣南京农业大学植物保护学院植物病理学系农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室江苏南京210095 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所农业部食品安全监控重点实验室江苏省食品安全重点实验室江苏南京210014

为了快速检测酱油中黄曲霉毒素和赭曲霉毒素产生菌的污染,利用现代分子技术并结合曲霉菌的一些菌落与孢子特征差异,建立了曲霉菌快速检测方法。结果表明,使用黑曲霉钙调蛋白基因所设计的黑曲霉特异性引物,能够将黑曲霉与其他曲霉分离,... 详细信息

为了快速检测酱油中黄曲霉毒素和赭曲霉毒素产生菌的污染,利用现代分子技术并结合曲霉菌的一些菌落与孢子特征差异,建立了曲霉菌快速检测方法。结果表明,使用黑曲霉钙调蛋白基因所设计的黑曲霉特异性引物,能够将黑曲霉与其他曲霉分离,黑曲霉中可以扩增出钙调蛋白基因特异性片段,而在米曲霉和黄曲霉中不能扩增到该基因片段。利用aflR等多个已知基因设计特异性引物,扩增结果表明,米曲霉和黄曲霉的菌株并无特异性条带差异。但是,黄曲霉与米曲霉的菌落特征及孢子特征差异显著。由此建立的以PCR检测结合菌株培养特征区分多种曲霉的方法,可以用于检测酱油中黄曲霉毒素和赭曲霉毒素产生菌的污染。

关键词：酱油曲霉钙调蛋白基因 aflR基因 PCR 菌落特征

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