检索结果-内蒙古大学图书馆

南方农业学报 2016年第8期47卷 1396-1400页

作者：杜改梅胡志华罗碧平吴结革张淼晏文梅刘茂军金陵科技学院动物科学与技术学院江苏金陵210038 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

【目的】研究生长素(Ghrelin)基因沉默对仔猪胃酸分泌的调节作用,为防治仔猪断奶后某些消化系统功能障碍或分泌异常研究提供新靶点,进而阐明Ghrelin对胃酸分泌的调节作用机制。【方法】采用脂质体将RNA干扰沉默的shGhrelin转染体外培养... 详细信息

【目的】研究生长素(Ghrelin)基因沉默对仔猪胃酸分泌的调节作用,为防治仔猪断奶后某些消化系统功能障碍或分泌异常研究提供新靶点,进而阐明Ghrelin对胃酸分泌的调节作用机制。【方法】采用脂质体将RNA干扰沉默的shGhrelin转染体外培养的猪胃黏膜上皮细胞,优化确立最佳转染条件,并通过荧光定量RT-PCR检测shGrelin转染对胃黏膜上皮细胞中Ghrelin基因mRNA表达及H+-K+-ATPase(质子泵)活性的影响。【结果】质粒(sh Ghrelin)与脂质体(Lipofectamine 2000)的最佳转染比例为1∶3,最佳转染时间24 h。与正常对照组相比,以shGhrelin转染胃黏膜上皮细胞后,其Ghrelin基因m RNA的表达显著降低(P<0.05,下同),H+-K+-ATPase活性也显著下降。【结论】采用RNA干扰技术能沉默胃黏膜上皮细胞Ghrelin基因表达和抑制H+-K+-ATPase活性,表明Ghrelin对胃酸分泌具有重要的调节作用。

关键词：生长素(Ghrelin) 胃黏膜上皮细胞胃酸分泌 RNA干扰

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东北及华北地区猪弓形体血清学调查

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中国预防兽医学报 2016年第2期38卷 124-127,141页

作者：华利忠魏德宝王佳熊祺琰冯志新刘茂军王丽邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 拜耳(四川)动物保健有限公司四川成都610000

为研究东北及华北地区猪弓形体感染情况,本研究于2015年4月~5月采集4个省20个猪场的491份血清样品进行猪弓形体血清抗体的检测。结果表明黑龙江、辽宁、河北及山西的弓形体阳性率分别为63.24%、52.55%、50.92%及45.45%,平均为50.51%。... 详细信息

为研究东北及华北地区猪弓形体感染情况,本研究于2015年4月~5月采集4个省20个猪场的491份血清样品进行猪弓形体血清抗体的检测。结果表明黑龙江、辽宁、河北及山西的弓形体阳性率分别为63.24%、52.55%、50.92%及45.45%,平均为50.51%。分胎次统计,4省3~5次经产母猪（S3-5）及6胎次及以上经产母猪（S6＋）的弓形体抗体阳性率相比后备猪群（G）,均极显著上升（p〈0.01）,华北两省的S3-5及S6＋组相比1~2胎次经产母猪（S1-2）组,阳性率也极显著上升（p〈0.01）,但东北两省差异不显著（p〉0.05）。抗体亲和力指数检测结果显示,4省高亲和力抗体样品数比例均在70%以上,平均为77.82%,低亲和力抗体平均为6.85%。除黑龙江外,S6＋的高亲和力指数的比例（92%~100%）相比G组以及S1-2组（40%~63.64%）,均极显著上升（p〈0.01）,但与S3-5（77.78%~88.24%）相比差异均不显著（p〉0.05）。该调查结果表明猪弓形体在我国东北和华北地区的猪场依然普遍存在,对猪场进行弓形体的防治非常必要。

关键词：猪弓形体血清学东北华北

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江苏羊群各型流感病毒抗体的血清学检测与分析

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中国兽医学报 2016年第11期36卷 1858-1863页

作者：王钟毓李文良毛立郝飞杨蕾蕾张纹纹姜平江杰元江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学学院江苏南京210095

为了解羊群是否存在流感病毒的感染,采用血凝抑制试验对江苏省7个县市不同羊场的2012—2014年323份羊血清中不同亚型(H1、H5、H7、H9)流感病毒抗体进行检测。结果显示,羊的H9亚型和H5亚型(Re-4株)抗体阳性率分别为95%和71.7%;H7亚型抗... 详细信息

为了解羊群是否存在流感病毒的感染,采用血凝抑制试验对江苏省7个县市不同羊场的2012—2014年323份羊血清中不同亚型(H1、H5、H7、H9)流感病毒抗体进行检测。结果显示,羊的H9亚型和H5亚型(Re-4株)抗体阳性率分别为95%和71.7%;H7亚型抗体阳性率为25.5%;甲型H1N1流感病毒抗体阳性率为14.7%;H5亚型(Re-5株和Re-6株)抗体阳性率均为0。结果表明,不同亚型流感病毒在羊群中均普遍存在,流行情况各有不同,应对其流行病学和公共卫生意义给予重视。

关键词：羊流感病毒血清流行病学血凝抑制试验

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江苏省及周边地区猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)分子流行病学调查

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江苏农业学报 2016年第2期32卷 390-398页

作者：曹东阳王小敏钱爱东何孔旺茅爱华吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

为了解中国江苏省及周边地区猪圆环病毒Ⅱ型（ PCV2）的分子流行病学以及毒株的遗传变异情况，本研究运用PCR技术对来源于不同地区、不同猪场且PCV2检测为阳性的样品进行全基因组序列的扩增和测序，共获得18株PCV2全基因序列，并对所得... 详细信息

为了解中国江苏省及周边地区猪圆环病毒Ⅱ型（ PCV2）的分子流行病学以及毒株的遗传变异情况，本研究运用PCR技术对来源于不同地区、不同猪场且PCV2检测为阳性的样品进行全基因组序列的扩增和测序，共获得18株PCV2全基因序列，并对所得到的毒株进行遗传变异分析。结果表明，18株毒株与国内外的参考毒株同源性为93．5％～99？7％，而ORF2核苷酸及其推导的氨基酸序列同源性分别为87．1％～99？9％和84．2％～99？6％，说明毒株存在一定程度的变异。系统进化树分析结果显示18株毒株中有5株PCV2a，7株PCV2b，6株PCV2d，其中20150429YC全长为1766 bp，与（HM038031．1 PCV2d等）参考毒株的同源性为100？0％，未发现PCV2c。同时，Cap蛋白的抗原表位和抗原性也发生了变化。说明，目前江苏省及周边地区猪群中PCV2感染较为普遍，PCV2的流行毒株以PCV2b基因型为主，PCV2d次之。

关键词：猪圆环病毒Ⅱ型分子流行病学遗传变异

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大肠杆菌O157∶H7独有基因z3276的表达及初步鉴定

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中国兽医学报 2016年第8期36卷 1354-1357页

作者：张碧成张雪寒何孔旺范红结南京农业大学动物医学院江苏南京210095 江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

经BLAST分析表明,开放阅读框z3276是大肠杆菌O157∶H7独有的遗传标志性基因,编码氨基酸与大肠杆菌Ⅰ型菌毛有较高的同源性,但z3276基因编码蛋白的生物学特性尚不明确。为了明确z3276基因编码蛋白的抗原性,进一步研究其在大肠杆菌O157∶H... 详细信息

经BLAST分析表明,开放阅读框z3276是大肠杆菌O157∶H7独有的遗传标志性基因,编码氨基酸与大肠杆菌Ⅰ型菌毛有较高的同源性,但z3276基因编码蛋白的生物学特性尚不明确。为了明确z3276基因编码蛋白的抗原性,进一步研究其在大肠杆菌O157∶H7致病过程中的作用。采用PCR方法扩增z3276基因,去除其信号肽序列,克隆到原核表达载体pColdⅠ,转化感受态细胞BL21获得阳性重组菌,IPTG诱导表达重组蛋白,以大肠杆菌O157∶H7全菌抗血清为一抗,Western blot方法检测重组z3276蛋白抗原性。结果显示,成功构建重组菌BL21(pColdⅠ-z3276),并获得高效表达;相对分子质量33 000,占菌体总蛋白30%以上,主要以包涵体形式存在于菌体沉淀中;且与兔源全菌多克隆抗血清发生特异性反应,条带明显。

关键词：大肠杆菌O157:H7 标签基因 z3276基因原核表达

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ETEC F4-F5融合基因表达及间接ELISA方法建立

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中国兽医学报 2016年第8期36卷 1312-1317页

作者：张强张雪寒何孔旺王春凤吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

表达产肠毒素性大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)黏附素F4和F5融合蛋白,建立间接ELISA方法,旨在监测猪场ETEC感染以及疫苗免疫情况。根据GenBank中登录F4和F5基因序列,分析保守区,优化密码子,合成F4-F5串联基因,克隆入... 详细信息

表达产肠毒素性大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)黏附素F4和F5融合蛋白,建立间接ELISA方法,旨在监测猪场ETEC感染以及疫苗免疫情况。根据GenBank中登录F4和F5基因序列,分析保守区,优化密码子,合成F4-F5串联基因,克隆入原核表达载体,表达重组蛋白His-F4-F5。以纯化的His-F4-F5蛋白作为检测抗原,建立检测ETEC抗体的间接EIISA方法。经酶切和DNA序列分析,成功构建重组菌BL21(pCold I-F4-F5),SDS-PAGE和Western blot分析,融合表达F4-F5相对分子质量为29 000,与ETEC高免血清发生特异性反应,条带单一。经优化筛选的间接ELISA最佳反应条件:抗原包被浓度6ng/孔,待检血清稀释比例1∶200,HRP-羊抗猪二抗的工作浓度1∶15 000,5%脱脂奶封闭l h,底物作用时间15min。本研究建立F4-F5间接ELISA方法具有特异性好、敏感性高、重复性好、稳定性强的特点,是猪场ETEC感染和疫苗免疫效果检测的有效工具,进而指导疫苗使用和新型疫苗研发。

关键词：产肠毒索性大肠杆菌 F4菌毛 F5菌毛间接酶联免疫吸附试验

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猪鼻支原体表面可变脂蛋白vlpA黏附宿主细胞功能研究

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畜牧兽医学报 2016年第9期47卷 1897-1904页

作者：张必雄熊祺琰王佳纪燕倪博韦艳娜冯志新刘茂军邵国青江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 山西农业大学动物科技学院太谷0308003 江苏省肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心南京210095

猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)可引起猪的多发性浆膜炎、关节炎、肺炎及中耳炎等多种慢性炎症,感染率极高,且与人类肿瘤的发生有关,对人类健康构成威胁。已有研究表明猪鼻支原体表面可变脂蛋白(vlp)家族参与支原体黏附宿主细胞的过... 详细信息

猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)可引起猪的多发性浆膜炎、关节炎、肺炎及中耳炎等多种慢性炎症,感染率极高,且与人类肿瘤的发生有关,对人类健康构成威胁。已有研究表明猪鼻支原体表面可变脂蛋白(vlp)家族参与支原体黏附宿主细胞的过程,本试验主要详细研究vlp家族成员之一vlpA的黏附细胞功能,特别是其Ⅲ区重复片段重复次数变化对其黏附能力的影响。根据GenBank中已公布的vlpA的基因序列,设计引物,从菌体DNA中扩增获得vlpA基因,或者人工合成Ⅲ区重复片段重复次数不等的一系列vlpA基因,均克隆至pET-32a(+)质粒中进行表达,获得目的蛋白质。同时利用固相合成法制备含两段Ⅲ区重复片段的多肽。利用间接免疫荧光试验和微孔板黏附试验检测所制备的各种重组vlpA蛋白和多肽的黏附功能。通过诱导表达和镍柱亲和层析纯化,成功获得纯度较高的各个目的蛋白质。利用间接免疫荧光试验证实vlpA可以黏附宿主细胞;利用微孔板黏附试验定量检测不含Ⅲ区的重组vlpA0蛋白及Ⅲ区重复片段多肽的黏附能力,结果发现vlpA0可黏附细胞,而Ⅲ区重复片段多肽无明显黏附能力;进一步利用微孔板黏附试验检测含Ⅲ区重复片段次数分别为3、6、9、12次的重组蛋白vlpA3、vlpA6、vlpA9、vlpA12的黏附能力,结果显示四种重组蛋白质均可黏附细胞,但黏附水平均低于不含Ⅲ区的重组vlpA0蛋白,且随着Ⅲ区重复片段重复次数的增加黏附能力下降。本研究结果提示vlpA为猪鼻支原体黏附因子之一,其Ⅱ区含有黏附位点,而整体分子的黏附能力随着Ⅲ区重复片段重复次数的增加明显减弱。本研究结果有助于进一步研究猪鼻支原体的黏附及致病机制。

关键词：猪鼻支原体可变脂蛋白vlpA 细胞黏附重复次数

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鸡p53抑制传染性法氏囊病病毒复制及gga-miR-2127对其调控的分子机制

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中国预防兽医学报 2016年第10期38卷 759-766页

作者：欧阳伟王永山孟凯潘群兴王晓丽夏兴霞诸玉梅毕振威董晨红张海彬江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

传染性法氏囊病(IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的一种高度危害养鸡业的传染病。肿瘤抑制蛋白p53能够抑制多种病毒的复制,但对IBDV复制的影响仍然不清楚。本研究以IBDV为模式病毒,采用体外感染模式,在IBDV感染的DF-1细胞中,p53... 详细信息

传染性法氏囊病(IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的一种高度危害养鸡业的传染病。肿瘤抑制蛋白p53能够抑制多种病毒的复制,但对IBDV复制的影响仍然不清楚。本研究以IBDV为模式病毒,采用体外感染模式,在IBDV感染的DF-1细胞中,p53的表达水平和活性均显著升高。p53过表达可以抑制IBDV的复制,并激活鸡体抗病毒天然免疫基因(IPS-1、IRF3、PKR、OAS、Mx)的表达水平上调;抑制p53的表达则得到相反的结果;表明p53可以激活鸡体的抗病毒天然免疫反应发挥抗IBDV感染作用。利用生物信息学方法和双荧光素酶报告系统分析发现,gga-miR-2127可以作用于p53 mRNA的3'UTR;荧光定量RT-PCR和免疫印迹分析表明gga-miR-2127可以使p53的蛋白水平表达降低,但mRNA水平没有变化;gga-miR-2127过表达可以使鸡体的抗病毒天然免疫基因表达降低,IBDV复制水平升高。本研究表明:gga-miR-2127可以作用于p53 mRNA的3'UTR调控p53的表达从而影响其下游抗病毒天然免疫基因的表达来发挥抗IBDV感染的作用。

关键词：传染性法氏囊病病毒 p53 miRNA gga-miR-2127 天然免疫

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患兔流行性腹胀病家兔肠道菌群结构的ERIC-PCR指纹图谱分析

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安徽农业科学 2016年第1期44卷 83-85页

作者：胡波范志宇王芳魏后军宋艳华仇汝龙刘星徐为中薛家宾江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

[目的]建立患兔流行性腹胀病家兔肠道细菌的DNA指纹图谱,并分析其肠道菌群结构特征的整体差异。[方法]提取流行性腹胀病兔及健康兔肠道内容物细菌总DNA,应用肠杆菌基因间重复共有序列基因扩增技术(ERIC-PCR)建立肠道菌群的DNA指纹图谱,... 详细信息

[目的]建立患兔流行性腹胀病家兔肠道细菌的DNA指纹图谱,并分析其肠道菌群结构特征的整体差异。[方法]提取流行性腹胀病兔及健康兔肠道内容物细菌总DNA,应用肠杆菌基因间重复共有序列基因扩增技术(ERIC-PCR)建立肠道菌群的DNA指纹图谱,并分析其整体差异。[结果]病兔大肠样本DNA条带明显少于健康兔对照,而小肠样本在二者间无明显差异,说明病兔与健康兔大肠肠道菌群存在整体差异。病兔大肠样本DNA在约350 bp处出现1条主带,同时伴有若干较弱的带,而健康兔对照大肠样本DNA条带均无明显规律。病兔大肠肠道的微生物群落多样性指数为(2.03±0.49),健康兔大肠肠道的微生物群落多样性指数为(3.30±0.31),差异极显著(P<0.01)。[结论]兔流行性腹胀病发病兔大肠中肠道菌群结构多样性降低,可能存在单一或几种特定的肠道优势菌群。

关键词：兔流行性腹胀病 ERICPCR 肠道菌群多样性指数

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育肥猪附红细胞体病的诊治

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现代农业科技 2016年第3期 311-311,314页

作者：袁朗孙华伟张敬峰江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

对一起育肥猪附红细胞体病发病情况、临床症状、病理变化、实验室检测及诊断情况进行了介绍,并提出综合防治措施,以供参考。

关键词：猪附红细胞体病临床症状病理变化诊断综合防治

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