检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医学会2013年学术年会

作者：倪博白方方韦艳娜刘茂军冯志新熊祺琰邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mh.p)是猪气喘病的主要病原体,是一种接触性慢性呼吸道传染病,主要影响育肥猪,饲料利用率下降,易引起猪呼吸道疾病综合征,造成巨大的经济损失,目前未见有效控制或消除该病方法的有关报道,其致病... 详细信息

猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mh.p)是猪气喘病的主要病原体,是一种接触性慢性呼吸道传染病,主要影响育肥猪,饲料利用率下降,易引起猪呼吸道疾病综合征,造成巨大的经济损失,目前未见有效控制或消除该病方法的有关报道,其致病机制也尚未明确。近几年,越来越多的研究指出支原体的脂蛋白在其致病机制中发挥了重要的作用。脂膜蛋白(1ipid associated membrane proteins,LAMPs)是支原体胞膜的主要成分,在与宿主互作中发挥重要的作用,是支原体致病机制的重要组成部分。本研究通过比较不同毒力Mh.p脂膜蛋白对猪肺泡上皮细胞抑制作用,探讨其与毒力可能存在的相关性,为支原体致病机制研究提供参考,为猪气喘病防治提供基础。使用Trion-X114从Mh.p培养物中提取LAMPs,采用MTT法检测LAMPs对细胞生长的抑制率,观察其对细胞生长状况的影响,并使用Griess试剂对细胞培养物中NO的浓度变化进行了测定。4株Mh.p的脂膜蛋白均对SJPL细胞有抑制作用,其抑制作用的强度与Mh.p的毒力强弱基本相符,即NJ株与168株的抑制作用较强,而168致弱株及J株对SJPL细胞的抑制作用较弱,其中NJ株的IC50最低为0.13mg/mL而J株的IC50最高为0.56mg/mL,并且LAMPs可以诱导细胞产生NO。猪肺炎支原体LAMPs对猪肺泡上皮细胞的抑制作用与支原体的毒力相关,强毒株LAMPs的抑制作用较大,而弱毒株的抑制作用较小。关于LAMPs在支原体毒力、致病性及其作用机制等未知问题,还需进一步研究将有助于阐明支原体的致机制,为猪肺炎支原体感染的防治提供基础。

关键词：猪肺炎支原体 LAMPs 细胞抑制 NO

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猪肺炎支原体净化控制研究

猪肺炎支原体净化控制研究

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：邵国青冯志新熊祺琰华利忠江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

猪支原体肺炎(猪气喘病)是由猪肺炎支原体引起的一种严重危害全球养猪业的传染病之一。西欧和北美通过完全减群后重扩群、检测后清阳性群、不完全减群、程序性用药、药物早期隔离断奶技术、封群、疫苗免疫等彻底净化病原的方式,取得了... 详细信息

猪支原体肺炎(猪气喘病)是由猪肺炎支原体引起的一种严重危害全球养猪业的传染病之一。西欧和北美通过完全减群后重扩群、检测后清阳性群、不完全减群、程序性用药、药物早期隔离断奶技术、封群、疫苗免疫等彻底净化病原的方式,取得了一定的防治效果。然国内猪气喘病的净化还未成熟,为防控和净化国内猪气喘病,本研究通过种猪选育,加强管理,疫苗免疫和程序性药物控制的方法以及猪肺炎支原体净化检测技术的建立,形成猪气喘病净化配套体系,为国内猪气喘病的防控与净

关键词：猪肺炎支原体猪支原体肺炎活疫苗猪气喘病控制研究

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巢式PCR检测猪鼻支原体方法的建立及应用

巢式PCR检测猪鼻支原体方法的建立及应用

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：白方方武昱孜靳蒙蒙刘茂军冯志新熊祺琰邵国青江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心

应用巢式聚合酶链式反应(Nested PCR)建立了一种检测猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)的方法,试验中以酚-氯仿法制备模板DNA,根据猪鼻支原体P37序列高度保守区设计2对引物,建立Nested PCR诊断方法。在特异性检测试验中,设计的引物不能... 详细信息

应用巢式聚合酶链式反应(Nested PCR)建立了一种检测猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)的方法,试验中以酚-氯仿法制备模板DNA,根据猪鼻支原体P37序列高度保守区设计2对引物,建立Nested PCR诊断方法。在特异性检测试验中,设计的引物不能扩增出猪絮状支原体、猪滑液支原体、猪肺炎支原体、鸡毒支原体、胸膜肺炎放线杆菌、猪瘟病毒、猪流感病毒、猪圆环病毒及猪呼吸与繁殖综合症病毒等病原体;敏感性试验表明,第一次PCR和第二次PCR的敏感度分别为3.01mg/L和3.01×10-4mg/L。对41份临床样品肺组织的检测中,普通PCR和巢式PCR的检出率分别为29.3%(12/41)和82.9%(34/41)。结果表明巢式PCR方法明显优于常规PCR方法,具有较高的敏感性和实用性,为猪鼻支原体的检测提供了一种新型、可靠的诊断技术。

关键词：猪鼻支原体巢式PCR 检测

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通用引物检测志贺毒素和紧密素多个基因亚型

通用引物检测志贺毒素和紧密素多个基因亚型

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：张雪寒叶青汪伟倪艳秀温立斌李彬王小敏周俊明何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

【目的】志贺毒素和紧密素是大肠杆菌致病群最主要的毒力因子之一,本文旨在是建立能够同时检测志贺毒素和紧密素多个基因变型的二重PCR快速检测技术,更好的适应临床和实验室等的检测需求。【方法】以志贺毒素2(Shiga toxin 2,stx2)和紧... 详细信息

【目的】志贺毒素和紧密素是大肠杆菌致病群最主要的毒力因子之一,本文旨在是建立能够同时检测志贺毒素和紧密素多个基因变型的二重PCR快速检测技术,更好的适应临床和实验室等的检测需求。【方法】以志贺毒素2(Shiga toxin 2,stx2)和紧密素(Intimin)多个基因亚型为靶序列,设计多套引物,筛选比较,建立二重PCR,分析敏感性、特异性,并检测模拟阳性污染样品。【结果】二重PCR扩增片段分别为388bp和609bp,对纯培养物最低检测限0.1-1CFU/mL,增菌样品最低检测限1-10CFU/g,特异性检测eae、stx2和多个亚型。【结论】Stx2-Intimin二重PCR技术灵敏、特异、通用和高效。

关键词：大肠杆菌致病群志贺毒素紧密素变异型 PCR

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以免疫刺激复合物基质为佐剂的猪支原体肺炎活疫苗肌肉注射免疫效果评价

以免疫刺激复合物基质为佐剂的猪支原体肺炎活疫苗肌肉注射免疫效...

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：熊祺琰王占伟甘源冯志新刘茂军邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

试验旨在探讨免疫刺激复合物基质(ISCOM-matrix)作为猪支原体肺炎168株活疫苗佐剂使用的可行性,并考察配合疫苗肌肉注射时的免疫效力和攻毒保护效力。方法:制备ISCOM-matrix,检验其对活疫苗的毒性,并于体外刺激淋巴细胞观察增殖应答情... 详细信息

试验旨在探讨免疫刺激复合物基质(ISCOM-matrix)作为猪支原体肺炎168株活疫苗佐剂使用的可行性,并考察配合疫苗肌肉注射时的免疫效力和攻毒保护效力。方法:制备ISCOM-matrix,检验其对活疫苗的毒性,并于体外刺激淋巴细胞观察增殖应答情况。而后将添加ISCOM-matrix佐剂的猪支原体肺炎活疫苗肌肉注射免疫动物,检测血清抗体水平及及淋巴细胞增殖应答水平,于免疫后8周攻毒,评价攻毒保护效力。结果表明,所制备的ISCOM-matrix不影响活疫苗的活力,并且在体外可直接或协同刀豆蛋白刺激淋巴细胞产生明显的增殖反应,最低起效浓度低至0.01ng/ml;当作为佐剂与活疫苗配合肌肉注射免疫时,可以显著诱导动物对疫苗抗原的细胞免疫应答,体液免疫应答亦有一定程度增强,但组内差异较大。用肺炎支原体强毒攻毒后25天剖检,免疫组病变明显较攻毒对照组减轻,显示出较好的攻毒保护效果。

关键词：免疫刺激复合物基质猪支原体肺炎活疫苗肌肉注射

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猪肺炎支原体粘附因子在毕赤酵母中的表达及应用

猪肺炎支原体粘附因子在毕赤酵母中的表达及应用

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：刘茂军冯志新祝永琴王海燕甘源王占伟白昀王丽刘冬霞邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是猪支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae of swine,MPS)的主要病原。该病又称猪气喘病或猪地方流行性肺炎(Enzootic pneumoniae of pigs,EPP),是一种经呼吸道感染、多呈慢性经过的传染病。该病可以使猪的饲料转化率降低10%,生长速度也降低,而且它与胸膜肺炎放线杆菌、肺炎巴氏杆菌等混合感染时,情况更为严重,该病一旦暴发,给养殖业造成巨大经济损失。

关键词：猪肺炎支原体阴性血清猪鼻支原体副猪嗜血杆菌毕赤酵母粘附因子

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动物产品质量安全全程溯源体系建设与展望

动物产品质量安全全程溯源体系建设与展望

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第二届中国食品与农产品质量安全检测技术国际论坛暨展览会

作者：陆昌华胡肄农江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

如何实现动物及动物产品标识与可追溯管理是有效解决动物及其产品安全问题的重要措施。本文借鉴发达国家溯源系统经验,介绍中国可追溯系统试点研究的简况。并对农业部推行的"动物标识及疫病可追溯体系"和商务部推行的"... 详细信息

如何实现动物及动物产品标识与可追溯管理是有效解决动物及其产品安全问题的重要措施。本文借鉴发达国家溯源系统经验,介绍中国可追溯系统试点研究的简况。并对农业部推行的"动物标识及疫病可追溯体系"和商务部推行的"肉类蔬菜流通追溯体系",从管理体制与技术方案进行剖析。指出两个部委推行的可追溯体系,均覆盖完整追溯过程的一部分,从严格意义上讲,仅达到半程可追溯或局部可追溯。其关键是两大溯源体系未实现有效对接与相互补充,难以制约动物源性食品质量安全风险。为此,针对该问题作者提出相应对策:在管理层面,提出"国家动物产品质量安全全程溯源体系",应纳入一个部门——食品药品质量安全部,具体执法管理!在技术层面,指出符合国际标准并完全实现国产的低成本动物电子标识,使全程溯源管理成为可能。其解决方案:一是开展全程溯源体系的数据规范和数据接口研究:二是数据采集、数据传输、数据存储和数据处理技术的升级研究。与此同时,中国溯源体系发展的未来,除探索性进行生物溯源技术的研究外;还可采用云计算基础架构,与物联网平台相结合,在构建全国统一食品安全/溯源软件平台的同时,建有面向行业内各种不同类型的企业用户的管理软件系统。

关键词：动物动物产品标识可追溯质量安全

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BDV E2蛋白的原核表达及鉴定

BDV E2蛋白的原核表达及鉴定

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：毛立刘霞李文良杨蕾蕾张纹纹江杰元江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

羊边界病病毒(Border disease virus,BDV)是导致绵羊和山羊繁殖障碍的重要病原,于2013年在国内首次报道发现,E2蛋白作为该病毒的主要抗原性蛋白,在抗体检测中可作为抗原,对该病毒进行抗体检测。本研究比对多种BDV E2基因,合成引物,以BDV... 详细信息

羊边界病病毒(Border disease virus,BDV)是导致绵羊和山羊繁殖障碍的重要病原,于2013年在国内首次报道发现,E2蛋白作为该病毒的主要抗原性蛋白,在抗体检测中可作为抗原,对该病毒进行抗体检测。本研究比对多种BDV E2基因,合成引物,以BDV JSLS12-01株RNA作为模板,用RT-PCR方法扩增BDVE2基因,克隆到原核表达载体pET-28a(+),转化大肠杆菌BL21构建重组表达菌,经SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白,证实该重组蛋白成功表达。该蛋白的表达为建立BDV的检测方法具有重要意义,将在此基础上,进一步研制检测方法,以及时快速的检测BDV。

关键词：边界病病毒 E2蛋白鉴定

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猪鼻拭子样品采集及制备方法的标准化

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中国农学通报 2013年第5期29卷 17-20页

作者：冯志新张亚华利忠甘源韦艳娜邵国青江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 南京农业大学南京210095

为了黏膜样本采集所用材料及方法标准,并增强所检测样本数据的可比性与稳定性。以猪鼻拭子样品为研究对象,结合猪鼻腔的解剖结构以及所采集样品的特殊性,对猪鼻拭子的采集与处理方法进行探讨并标准化。结果表明:通过标化的方法对所采集... 详细信息

为了黏膜样本采集所用材料及方法标准,并增强所检测样本数据的可比性与稳定性。以猪鼻拭子样品为研究对象,结合猪鼻腔的解剖结构以及所采集样品的特殊性,对猪鼻拭子的采集与处理方法进行探讨并标准化。结果表明:通过标化的方法对所采集的116份猪鼻拭子样本进行总蛋白浓度测定,发现所有鼻拭子样本的总蛋白均值为(6.92±0.41)mg/mL,变异系数为32.58%;对其中7头猪在不同时间采集鼻拭子测定总蛋白,结果同一头猪的检测数据变异系数除1头为13.95%外,其余均>10%。表明标化的猪鼻拭子采集及制备方法使检测结果具备较好的稳定性与科学性。

关键词：鼻拭子样品采集标准化

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鹅新型坦布苏病毒囊膜蛋白的二级机构与及其B细胞表位预测

鹅新型坦布苏病毒囊膜蛋白的二级机构与及其B细胞表位预测

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第三届全国禽病分子生物技术青年学术论坛

作者：韩凯凯李银黄欣梅赵冬敏刘宇卓谢星星游园江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京 210014

本研究以鹅坦布苏病毒(goose Tembusu virus,GTMUV)囊膜蛋白(Envelope,E)基因序列为基础,采用Garnier_Robson 方法、Chou_Farplus 方法和Karplus_Schulz 方法预测了其结构蛋白的二级结构。用Kyte_Doolittle 方法对结构蛋白的亲水性进行了分析,用Emini 方法预测了结构蛋白的表面可能性,以Jameson_Wolf 方法预测了蛋白的抗原指数,最后综合评价了鹅坦布苏病毒囊膜蛋白的B 细胞抗原表位。

关键词：

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