检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：夏兴霞刘洁王永山诸玉梅欧阳伟何孔旺张雪寒江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院

将***157:H7(EHEC-O157:H7)用甲醛灭活超声破碎,免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞;与SP/20骨髓瘤细胞融合后,获得七株分泌抗***157:H7单克隆抗体(mAbs)的杂交瘤细胞株,分别命名为2E7、B8、E7、D3、H7、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2bκ、IgG2a... 详细信息

将***157:H7(EHEC-O157:H7)用甲醛灭活超声破碎,免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞;与SP/20骨髓瘤细胞融合后,获得七株分泌抗***157:H7单克隆抗体(mAbs)的杂交瘤细胞株,分别命名为2E7、B8、E7、D3、H7、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2bκ、IgG2aκ、IgG1κ、IgMκ、IgMκ、IgMκ和IgG2aκ。用间接ELISA检测,E7和F1细胞培养上清液的效价为1.6×103,腹水效价均为1×1011;C3、2E7、B8、D3和H7细胞培养上清液的效价为1×101～2×102,腹水效价均为4×102～2.5×106。相加ELISA结果显示,D3和H7mAbs对应相同的抗原表位,而其它五株对应不同的抗原表位。用间接ELISA分析特异性,2E7、H7和D3为抗EHEC-O157:H7特异性单克隆抗体,其它四株mAbs与某些其他血清型的大肠杆菌有交叉反应。Western blotting表明,C3、E7和F1三株mAbs在蛋白分子量28kD处有特异性条带,2E7、D3和H7三株mAbs在蛋白分子量35kD处有特异性条带,而mAbsB8则未显示蛋白带。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 单克隆抗体(mAb) 生物制剂人兽共患病

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分泌抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

分泌抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会

作者：夏兴霞刘洁王永山诸玉梅欧阳伟张雪寒何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院

将*** O157:H7用甲醛灭活超声破碎,免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP/20骨髓瘤细胞融合,建立了7株分泌抗*** O157:H7单克隆抗体(mAbs)的杂交瘤细胞株,分别命名为F5、B8、E7、G9、G11、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2aκ、IgG2aκ、IgG1κ、Ig... 详细信息

将*** O157:H7用甲醛灭活超声破碎,免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP/20骨髓瘤细胞融合,建立了7株分泌抗*** O157:H7单克隆抗体(mAbs)的杂交瘤细胞株,分别命名为F5、B8、E7、G9、G11、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2aκ、IgG2aκ、IgG1κ、IgMκ、IgMλ、IgMκ和IgG2aκ。用间接ELISA检测,E7和F1细胞培养上清液的效价为1.6×103,腹水效价均为1×1011;C3、F5、B8、G9和G11细胞培养上清液的效价为1×101～2×102,腹水效价均为1×103。相加ELISA结果显示,F1、G9和G1 1三株mAbs对应相同的抗原表位,而其它4株对应不同的抗原表位。用间接ELISA分析特异性,7株mAbs与某些其他血清型的大肠杆菌有交叉反应。在Western blotting试验中,C3、E7和F1三株mAbs在蛋白分子量28kD处有特异性条带,而其它四株mAbs则未显示蛋白带。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7(EHEC-O157:H7) 单克隆抗体(mAb) 生物制剂人兽共患病

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RFID电子射频耳标在种猪场的对比试验

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江苏农业学报 2010年第2期26卷 446-448页

作者：白红武白云峰胡肄农陆昌华王冉赵国华冯国兴薛渊崔娥吕海云江苏省农业科学院农业资源与环境研究所江苏南京210014 江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 江苏省农业科学院食品质量安全检测研究所江苏南京210014 上海盛锐软件技术有限公司上海201203 江苏省农业科技实业总公司江苏南京210014 上海生物电子标识有限公司上海200231 南京高通科技发展有限公司江苏南京210002

世界动物疫情在最近10多年来不断暴发,给人民身体健康带来严重危害,影响全球畜牧业发展.为此,各国政府迅速制定政策,加强动物的管理,其中动物识别与跟踪是重大措施之一.例如,英国政府规定对牛、猪、羊、马等饲养动物均必须采取跟踪与识... 详细信息

世界动物疫情在最近10多年来不断暴发,给人民身体健康带来严重危害,影响全球畜牧业发展.为此,各国政府迅速制定政策,加强动物的管理,其中动物识别与跟踪是重大措施之一.例如,英国政府规定对牛、猪、羊、马等饲养动物均必须采取跟踪与识别手段[1-2];澳大利亚的"国家牲畜认证系统"(NLIS),规定澳大利亚境内所有牛均使用全国统一编码、统一外形、内置感应芯片的耳标,存储在耳标芯片中的号码是不可改变的,可以扫描记录并存储到全国牛NLIS数据库中[3].中国政府从2002年开始逐步实行动物免疫标

关键词： RFID 电子耳标种猪

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猪肺炎支原体p97黏附蛋白基因抗原表位片段的克隆与序列分析

猪肺炎支原体p97黏附蛋白基因抗原表位片段的克隆与序列分析

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：刘茂军甘源孔猛刘冬霞王丽刘冬阳邵国青冯志新熊琪琰王海燕王占伟白昀吴叙苏孙佩元江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京天邦生物科技有限公司江苏南京 210014

根据Genbank中猪肺炎支原体J株模式株(ATCC 25934或NCTC10110)与168株P97基因序列进行同源性比较，设计一对特异性引物，通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出猪肺炎支原体168株特异性蛋白P97基因序列的R1R2区序列，克隆入T载体，并进行测序... 详细信息

根据Genbank中猪肺炎支原体J株模式株(ATCC 25934或NCTC10110)与168株P97基因序列进行同源性比较，设计一对特异性引物，通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出猪肺炎支原体168株特异性蛋白P97基因序列的R1R2区序列，克隆入T载体，并进行测序，将测序结果与NCBI上公布的序列进行比较，找出变异规律，这为MHP的毒力研究提供新的思路，也为MHP病的诊断提供依据。

关键词：猪肺炎支原体 P97基因基因克隆序列分析

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猪肺炎支原体定量PCR检测方法的建立

猪肺炎支原体定量PCR检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：王建波邵国青冯志新刘茂军王海燕白昀王占伟甘源刘冬阳刘冬霞江苏省农业科学院兽医研究所·农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心·南京天邦生物科技有限公司江苏南京 210014 山西农业大学动物科技学院山西太谷 03080 江苏省农业科学院兽医研究所·农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心·南京天邦生物科技有限公司江苏南京 210014

以GenBank公布的MhpP36基因序列，设计合成一对特异性引物。通过对萤光定量PCR扩增曲线、标准曲线、熔解曲线的分析，建立了以P36基因序列作为靶序列的MhpSYBR GREEN实时荧光定量PCR检测方法。该方法准确、快速，灵敏.无污染，具有良好... 详细信息

以GenBank公布的MhpP36基因序列，设计合成一对特异性引物。通过对萤光定量PCR扩增曲线、标准曲线、熔解曲线的分析，建立了以P36基因序列作为靶序列的MhpSYBR GREEN实时荧光定量PCR检测方法。该方法准确、快速，灵敏.无污染，具有良好的特异性.重复性，可用于Mhp培养物和组织样品的快速定量检测.

关键词：猪肺炎支原体 PCR检测 P36基因序列

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传染性法氏囊病病毒VP2与C3d串联基因重组表达质粒的构建及其免疫功能分析

传染性法氏囊病病毒VP2与C3d串联基因重组表达质粒的构建及其免疫...

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十六次学术研讨会

作者：马金荣欧阳伟王永山吴晓悠朱向东张海彬范红结王忠灿唐雨德江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院南京农业大学动物医学院南京军区军事医学研究所南京军区疾病预防控制中心

为了提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因核酸疫苗的免疫效力,本实验在前期工作基础上,设计合成鸡补体C3d基因,利用同尾酶获得C3d的3拷贝串联体3C3d,与IBDV VP2基因串联,构建VP2-3C3d串联基因的重组真核表达质粒,在BHK21细胞中表达。... 详细信息

为了提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因核酸疫苗的免疫效力,本实验在前期工作基础上,设计合成鸡补体C3d基因,利用同尾酶获得C3d的3拷贝串联体3C3d,与IBDV VP2基因串联,构建VP2-3C3d串联基因的重组真核表达质粒,在BHK21细胞中表达。并进一步对动物进行基因免

关键词：传染性法氏囊病病毒 C3d VP2 重组表达质粒串联基因免疫功能

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兔支气管败血波氏杆菌菌毛粗提物三种抗体检测方法的建立及比较

兔支气管败血波氏杆菌菌毛粗提物三种抗体检测方法的建立及比较

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：范志宇王欣王芳熊富强胡波张则斌徐为中江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心苏州药明康德新药开发有限公司

利用超声波处理结合TritonX-100溶解法制备粗提的菌毛抗原,建立了三种用于支气管败血波氏杆菌的抗体检测方法:琼脂免疫扩散试验(AGID)、玻片凝集试验(SAT)、间接血凝试验(IHA).临床检测了458份兔血清样品,结果发现,IHA试验的阳性检出率... 详细信息

利用超声波处理结合TritonX-100溶解法制备粗提的菌毛抗原,建立了三种用于支气管败血波氏杆菌的抗体检测方法:琼脂免疫扩散试验(AGID)、玻片凝集试验(SAT)、间接血凝试验(IHA).临床检测了458份兔血清样品,结果发现,IHA试验的阳性检出率最高73.36%(336/458),AGID试验阳性63.54%(291/458)和SAT试验阳性61.79%(283/458),三者均阳性为57.20%(262/458);IHA与AGID的符合率为90.17%,IHA与SAT试验的符合率为86.68%,AGID与SAT的符合率为89.08%。可见IHA试验更为敏感,可用于支气管败血波氏杆菌的血清学监测.

关键词：支气管败血波氏杆菌琼脂免疫扩散试验玻片凝集试验间接血凝试验抗体检测

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类猪圆环病毒因子P1感染对外周血单个核细胞Toll样受体mRNA转录的影响

类猪圆环病毒因子P1感染对外周血单个核细胞Toll样受体mRNA转录的...

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第五届中国畜牧科技论坛

作者：温立斌何孔旺杨汉春郭容利钟书霖俞正玉茅爱华江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心中国农业大学动物医学院江苏省农业科学院兽医研究所

实时定量反转录多聚酶链反应方法检测健康对照组及类圆环病毒因子P1感染组的猪外周血单个核细胞中TLRsmRNA的表达。结果表明,病毒感染后3天,除TLR2和TLR10外,其余TLRs mRNA表达皆下调。此后不同时相感染组的TLRs mRNA表达水平基本都处... 详细信息

实时定量反转录多聚酶链反应方法检测健康对照组及类圆环病毒因子P1感染组的猪外周血单个核细胞中TLRsmRNA的表达。结果表明,病毒感染后3天,除TLR2和TLR10外,其余TLRs mRNA表达皆下调。此后不同时相感染组的TLRs mRNA表达水平基本都处于恢复、上调地位。具有明显变化的表现为感染后第24天和第40天,TLR2 mRNA的表达显著上调(P<0.05);此外,感染后第31天和第40天的TLR9 mRNA表达也呈现上调趋势(P<0.1)。结果提示,TLR 2和TLR9介导的炎性反应可能在P1识别及其致病机制中起重要作用。

关键词：类猪圆环病毒因子 Toll样受体外周血单个核细胞实时定量PCR

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gga-miR-9*对传染性法氏囊病病毒复制的影响

gga-miR-9*对传染性法氏囊病病毒复制的影响

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：欧阳伟王永山杜希宁刘华洁张海彬江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心南京师范大学生命科学学院

为研究gga-miR-9*对传染性法氏囊病病毒（IBDV）复制的影响,本研究用化学合成的方法合成gga-miR-9*的模拟物gga-miR-9*mimics,转染DF-1-细胞,接种IBDV,分别收集上清液和细胞,测定IBDV的滴度和IFN含量;进一步用生物信息学方法预测gga-miR... 详细信息

为研究gga-miR-9*对传染性法氏囊病病毒（IBDV）复制的影响,本研究用化学合成的方法合成gga-miR-9*的模拟物gga-miR-9*mimics,转染DF-1-细胞,接种IBDV,分别收集上清液和细胞,测定IBDV的滴度和IFN含量;进一步用生物信息学方法预测gga-miR-9*的靶基因,并用双荧光素酶报告系统、western blot、qRT-PCR和RNA干扰对其靶基因进行验证。结果显示,gga-miR-9*mimics能够促进IBDV的复制,抑制干扰素（IFN）的产生;gga-miR-9*可靶向降解IRF2 mRNA和抑制IRF2蛋白的翻译;IRF2被敲除的DF-1细胞,IBDV复制滴度(10TCID/0.1mL)高于miRNA阴性对照组(10TCID/0.1mL)。综上表明细胞gga-miR-9*促进IBDV复制的分子作用机理是在IRF2基因转录后水平上抑制细胞天然免疫功能而发生的。

关键词：传染性法氏囊病病毒(IBDV) miRNA gga-miR-9* siRNA

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传染性法氏囊病病毒对鸡法氏囊组织中干扰素和p53转录的影响

传染性法氏囊病病毒对鸡法氏囊组织中干扰素和p53转录的影响

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：欧阳伟王永山刘华洁杜希宁张海彬江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心南京师范大学生命科学学院

为了分析传染性法氏囊病病毒(HBDV)感染对鸡体抗病毒天然免疫的影响,用IBDV弱毒(B87)和强毒(QL/12)分别感染4周龄SPF鸡,每隔12h时(12～84h)取3只鸡的法氏囊组织作为一个pool,用荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测其感染前后干扰素(IFN)和p53的... 详细信息

为了分析传染性法氏囊病病毒(HBDV)感染对鸡体抗病毒天然免疫的影响,用IBDV弱毒(B87)和强毒(QL/12)分别感染4周龄SPF鸡,每隔12h时(12～84h)取3只鸡的法氏囊组织作为一个pool,用荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测其感染前后干扰素(IFN)和p53的mRNA水平,同时分析法氏囊组织的病理变化和病毒载量。结果显示:在QL/12组,IFN-α和IFN-βmRNA水平随着时间的增加逐渐升高,48h达到峰值,随后降低;IFN-γmRNA水平随着时间的增加逐渐升高,60h达到峰值,随后逐渐降低;p53 mRNA含量迅速升高,60h达到峰值,随后降低。在B87组,IFN-αmRNA水平先降低后升高(48h达到最低值),而IFN-βmRNA水平变化不规则,72h含量最高;IFN-γmRNA水平先逐渐升高后降低(72h达到峰值);p53mRNA含量变化较小,36h含量最高。QL/12组诱导法氏囊组织产生的IFN mRNA(IFN-α、IFN-β和IFN-γmRNA)以及p53 mRNA水平均显著高于B87组。病理组织学检查,QL/12组法氏囊淋巴滤泡呈不同程度的损伤,而B87组法氏囊组织未见明显的组织病变。qRT-PCR检测,QL/12组法氏囊组织中病毒含量48h达到峰(8.4×10～6copies/mg),而B87组法氏囊组织中病毒含量72h达到峰值(6.6×10～4copies/mg)。本研究结果表明IBDV感染严重干扰了鸡体IFN和p53介导的抗病毒天然免疫反应。

关键词：传染性法氏囊病病毒(IBDV) 干扰素 p53 天然免疫

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