检索结果-内蒙古大学图书馆

中国动物传染病学报 2017年第1期25卷 1-6页

作者：王晓丽毕振威王永山潘群兴欧阳伟夏兴霞诸玉梅江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

将分离的H3N2亚型犬流感病毒(Canine influenza virus,CIV)A/Canine/Nanjing/11/2012(H3N2)株的核蛋白(NP)基因克隆至原核表达载体p ET28a(+)中,构建重组表达质粒p ET-NP,然后转化大肠杆菌*** Rosetta(DE)感受态细胞,经IPTG诱导后,采用SDS-PAGE和Western blot进行分析。结果显示,大肠杆菌表达的重组NP蛋白的分子量约为61 k Da,与预期相符,并能与犬CIV阳性血清发生特异性反应。将表达的重组NP蛋白进行纯化后,免疫大白兔制备抗NP蛋白多克隆抗体血清,Western blot检测该血清可与CIV的NP蛋白发生特异性反应,间接ELISA检测该多克隆抗体血清的效价达1:30 000,显示了较高的抗体效价。本研究为CIV快速检测方法的建立和流行病学调查奠定了科学依据。

关键词：犬流感病毒 H3N2亚型核蛋白原核表达多克隆抗体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一株H3N2亚型犬流感病毒的分离与进化分析

引用

中国动物传染病学报 2015年第2期23卷 32-40页

作者：王晓丽毕振威王永山潘群兴欧阳伟夏兴霞诸玉梅董晨红江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

2012年从南京市某宠物医院采集的20份犬鼻拭子中分离到1株犬流感病毒（Canine influenza virus,CIV）,命名为A/Canine/Nanjing/11/2012（H3N2）.该病毒分离株的血凝素（hemagglutinin,HA）效价为28,鸡胚半数感染量（median embryoinfective dose,EID50）和最小致死量平均死亡时间（mean death time,MDT）分别为10-7.60/0.1 mL和69.6h/10-4.血凝素（HA）基因、神经氨酸酶（neuraminidase,NA）基因和核蛋白（necleoprotein,NP）基因的系统发育进化树均显示该分离株CIV位于禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）亚群中,并与H3N2亚型CIV辽宁分离株和黑龙江分离株位于同一分支上,具有最近的亲缘关系（HA基因的同源性为99.5％～99.6％,NA基因的同源性为99.0％～99.2％,NP基因的同源性为99.1％～99.3％）.氨基酸序列分析显示,该病毒分离株与其他犬流感病毒分离株的HA、NA和NP氨基酸序列存在个别位点的突变.

关键词：犬流感病毒 H3N2亚型分离变异系统发育进化树

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

我国动物疫病风险分析体系建设与发展

引用

中国农业科技导报 2016年第5期18卷 8-16页

作者：陆昌华何孔旺胡肄农谭业平郁达威江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

近年来畜牧业发达国家应用动物卫生风险分析技术在动物疫病防控、动物产品安全控制以及促进动物及动物产品国际贸易方面取得显著成效。为此,借鉴国外先进经验,加强我国动物卫生风险分析体系建设实为必要。概述了动物卫生风险分析在欧盟... 详细信息

近年来畜牧业发达国家应用动物卫生风险分析技术在动物疫病防控、动物产品安全控制以及促进动物及动物产品国际贸易方面取得显著成效。为此,借鉴国外先进经验,加强我国动物卫生风险分析体系建设实为必要。概述了动物卫生风险分析在欧盟、美国、日本、加拿大等发达国家的应用进展以及国内在预防动物疫病传播、维护动物产品及公共卫生安全等方面的管理体制和运行机制,剖析了我国动物卫生风险分析应用现状,提出在引种风险评估、风险信息采集、屠宰风险管理、法律法规体系等方面存在的问题,并从完善我国动物卫生风险分析制度、提升风险管理能力、完善风险交流机制、提升技术能力以及建立外来疫病和突发疫情快速报告与评估系统和疫情大数据处理分析平台等方面,提出加强和完善我国动物卫生风险分析体系建设的建议。

关键词：动物疫病风险分析风险管理风险预警

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

疫病及兽药残留事件暴发的经济损失评估模型构建

引用

江苏农业学报 2014年第1期30卷 212-218页

作者：陆昌华吴孜忞胡肄农谭业平江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

针对当前重大动物疫病暴发和兽药残留事件的频繁发生,将兽医流行病学与经济学相结合,探讨畜产品质量安全事件的经济损失评估模型的构建。本研究分析了①因质量问题造成畜产品出口损失估算,包括短期损失和长期损失的影响;②由兽药残留事... 详细信息

针对当前重大动物疫病暴发和兽药残留事件的频繁发生,将兽医流行病学与经济学相结合,探讨畜产品质量安全事件的经济损失评估模型的构建。本研究分析了①因质量问题造成畜产品出口损失估算,包括短期损失和长期损失的影响;②由兽药残留事件引起出口受阻的损失评估模型;③重大疫情暴发的损失评估模型;④总体损失概念模型;⑤疫病对资源和消费者的影响。建立了疫病及兽药残留事件暴发的经济损失评估模型。

关键词：畜产品质量安全动物疫病兽药残留经济评估模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪肺炎支原体对猪气管上皮细胞的黏附作用

引用

中国兽医学报 2015年第3期35卷 388-393页

作者：车巧林余姗姗刘茂军甘源孔猛邵国青江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

采用气管结扎、链霉蛋白酶灌注冷消化法分离猪气管上皮细胞,并以对数生长期的猪肺炎支原体(Mhp)感染猪气管上皮细胞,通过间接免疫荧光技术定性定量研究不同滴度的猪肺炎支原体对猪气管上皮细胞的黏附及相同滴度的猪肺炎支原体随时间变... 详细信息

采用气管结扎、链霉蛋白酶灌注冷消化法分离猪气管上皮细胞,并以对数生长期的猪肺炎支原体(Mhp)感染猪气管上皮细胞,通过间接免疫荧光技术定性定量研究不同滴度的猪肺炎支原体对猪气管上皮细胞的黏附及相同滴度的猪肺炎支原体随时间变化对猪气管上皮细胞的黏附。结果表明,分离的猪气管上皮细胞存活率为95%以上,广谱角蛋白染色阳性;Mhp野毒株XLW-1与猪气管上皮细胞37℃作用30min就能看到少量的支原体黏附,作用4h以上时黏附更明显,并且,二者作用1、2、4、6、10h,XLW-1对猪气管上皮细胞的黏附与阴性对照相比差异极显著(P<0.01);1×107、2.5×106 CCU/mL的XLW-1与猪气管上皮细胞37℃作用6h,能看到支原体黏附于细胞表面,并且与阴性对照相比差异极显著(P<0.01),而其他低滴度的XLW-1则看不到黏附。

关键词：猪肺炎支原体猪气管上皮细胞黏附

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪链球菌丝氨酸/苏氨酸激酶基因缺失株的构建及其致病性

引用

江苏农业学报 2014年第6期30卷 1360-1368页

作者：祝昊丹倪艳秀周俊明俞正玉茅爱华吕立新何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

为了研究丝氨酸/苏氨酸磷激酶(STK)在猪链球菌致病过程中的作用,利用大肠杆菌-猪链球菌穿梭质粒p SET4s构建STK基因缺失株△stk。结果显示,stk基因缺失后,缺失株△stk易形成长链状结构;缺失株的半致死剂量(LD50)较亲本株高7倍,对CD1小... 详细信息

为了研究丝氨酸/苏氨酸磷激酶(STK)在猪链球菌致病过程中的作用,利用大肠杆菌-猪链球菌穿梭质粒p SET4s构建STK基因缺失株△stk。结果显示,stk基因缺失后,缺失株△stk易形成长链状结构;缺失株的半致死剂量(LD50)较亲本株高7倍,对CD1小鼠的致病能力降低;体内定植试验结果表明缺失株△stk在小鼠体内各器官的定植能力显著降低。这些数据表明STK与猪链球菌2型(SS2)的致病性相关。

关键词：猪链球菌2型丝氨酸/苏氨酸激酶毒力

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪传染性胃肠炎病毒分离株JS2012全基因组序列分析

引用

江苏农业学报 2016年第6期32卷 1351-1358页

作者：郭容利李彬范宝超温立斌茅爱华周萍何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

设计32对PCR引物分片段扩增猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）江苏分离株JS2012全基因组,扩增产物克隆到p MD19-T载体并测序。用DNAstar软件将JS2012全基因组序列与Gen Bank中其他13株TGEV株和猪呼吸道冠状病毒（PRCV-ISU-1）序列进行比对以... 详细信息

设计32对PCR引物分片段扩增猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）江苏分离株JS2012全基因组,扩增产物克隆到p MD19-T载体并测序。用DNAstar软件将JS2012全基因组序列与Gen Bank中其他13株TGEV株和猪呼吸道冠状病毒（PRCV-ISU-1）序列进行比对以及同源性分析,并绘制基因进化树。JS2012基因组序列全长28 542 bp,不包括poly A。基因组的排列为TGEV典型的基因排列序：5＇-ORF1a-ORF1b-S-3a-3b-E-M-N-7-3＇。TGEV JS2012株的ORF3基因和Miller组病毒一样有2个大片段的缺失。JS2012的S基因和Miller M6以及Virulent Purdue 2个强毒株有同样的序列特征。除Virulent Purdue外,其余Purdue株在1 123~1 128 bp处均有6 bp的缺失,JS2012与所有Miller株及Virulent Purdue一样,此处没有缺失。JS2012与其他TGEV毒株之间的碱基序列同源性为98.6%-99.9%,与Miller M6的碱基序列同源性最高,亲缘关系最近,同属于Miller组,与Purdue组相对较远。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) 全基因组序列分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鲜奶中肠出血性大肠杆菌O157∶H7的定量PCR检测

引用

江苏农业学报 2015年第5期31卷 1173-1178页

作者：俞正玉张碧成张强汪伟何孔旺倪艳秀温立斌李彬周萍张雪寒江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

为建立鲜奶中肠出血性大肠杆菌(Enterohaemorrhagic ***,EHEC)O157∶H7的特异性检测方法,以EHEC O157∶H7独有的遗传标志性基因Z0372为靶序列设计引物和探针,以梯度稀释的含有Z0372基因的重组质粒作为标准品进行Taqman荧光定量PCR反应,... 详细信息

为建立鲜奶中肠出血性大肠杆菌(Enterohaemorrhagic ***,EHEC)O157∶H7的特异性检测方法,以EHEC O157∶H7独有的遗传标志性基因Z0372为靶序列设计引物和探针,以梯度稀释的含有Z0372基因的重组质粒作为标准品进行Taqman荧光定量PCR反应,分析该方法的敏感性、特异性,并检测鲜奶样品以验证Taqman荧光定量PCR实用性和可靠性。结果表明,建立的定量PCR方法在1μl 1×101拷贝至1μl 1×106拷贝之间具有良好的线性关系,相关系数达到0.996,扩增效率112%。该方法的检测灵敏度为1μl 70拷贝,敏感性较高,而且特异性良好,与其他血清型大肠杆菌、沙门氏杆菌和志贺氏菌等易混淆菌株核酸之间没有交叉反应。批间和批内检测的变异系数(RSD)低于2%,表明该方法重复性良好。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157∶H7 荧光定量PCR 鲜奶

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪链球菌2型丝氨酸/苏氨酸磷酸酶的鉴定和特性分析

引用

江苏农业学报 2014年第3期30卷 548-553页

利用PCR扩增猪链球菌2型强毒株SS2-1丝氨酸/苏氨酸磷酸酶(STP)的编码基因,克隆到表达载体pET-30a(+),在大肠杆菌BL21中进行原核表达,获得重组蛋白质rSsSTP。重组蛋白质经His蛋白质层析柱纯化后,利用pNPP分析rSsSTP的酶活性。结果显示rSs... 详细信息

利用PCR扩增猪链球菌2型强毒株SS2-1丝氨酸/苏氨酸磷酸酶(STP)的编码基因,克隆到表达载体pET-30a(+),在大肠杆菌BL21中进行原核表达,获得重组蛋白质rSsSTP。重组蛋白质经His蛋白质层析柱纯化后,利用pNPP分析rSsSTP的酶活性。结果显示rSsSTP为Mn2+依赖的磷酸酶,最适离子浓度为2 mmol/L,最佳反应温度为37℃,最佳pH值为8.0。

关键词：猪链球菌2型丝氨酸苏氨酸磷酸酶鉴定 Streptococcus suis type 2

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪支原体肺炎活疫苗佐剂体内外促进细胞免疫刺激能力的研究

引用

江苏农业学报 2012年第6期28卷 1354-1360页

作者：熊祺琰董璐冯志新刘茂军邵国青江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

为增强猪支原体肺炎活疫苗在肌肉注射免疫时的细胞免疫刺激能力,对7种猪支原体肺炎活疫苗可用佐剂的细胞免疫应答促进作用进行了体外及体内试验评价。7种佐剂中除皂角素外,其余6种对活疫苗活力皆无明显影响。用这6种佐剂体外刺激淋巴细... 详细信息

为增强猪支原体肺炎活疫苗在肌肉注射免疫时的细胞免疫刺激能力,对7种猪支原体肺炎活疫苗可用佐剂的细胞免疫应答促进作用进行了体外及体内试验评价。7种佐剂中除皂角素外,其余6种对活疫苗活力皆无明显影响。用这6种佐剂体外刺激淋巴细胞,发现左旋咪唑、免疫刺激复合物基质、黄芪多糖和胞壁酰二肽可以在体外单独刺激或协同刀豆蛋白刺激小鼠脾淋巴细胞及猪外周血淋巴细胞增殖,其中免疫刺激复合物基质仅需ng/ml级别浓度即可起效,而壳聚糖和卡波姆不能在体外刺激细胞增殖。选用其中5种佐剂与活疫苗配合肌肉注射免疫小鼠,发现左旋咪唑、免疫刺激复合物基质、黄芪多糖、卡波姆可以显著增加机体针对猪肺炎支原体抗原的细胞免疫应答。结果表明,利用适当佐剂可以实现猪支原体肺炎活疫苗在肌肉注射条件下对机体细胞免疫应答的有效刺激。

关键词：佐剂活疫苗猪支原体肺炎细胞免疫

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：