检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：黄欣梅李银赵冬敏刘宇卓杨婧韩凯凯江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

采用RT-PCR 方法扩增出了鹅坦布苏病毒的E 蛋白结构域Ⅲ,将其分别克隆至表达载体pET32a(+)和pET28a(+)中,构建了重组表达质粒pET32a-EⅢ和pET28a-EⅢ,转化入大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG进行诱导表达。

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猪肺炎支原体粘附因子在毕赤酵母中的表达及应用

猪肺炎支原体粘附因子在毕赤酵母中的表达及应用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：刘茂军邵国青冯志新祝永琴王海燕甘源王占伟白昀王丽刘冬霞江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

本试验选用Pichia pastoris系统来表达粘附因子P97R1，目的在于利用毕赤酵母表达系统的特点以及支原体基因组组成的固有特点来实现粘附因子P97R1的高效表达，这为猪肺炎支原体免疫检测与新型疫苗研究提供了重要条件。

关键词：猪肺炎支原体免疫检测粘附因子毕赤酵母基因表达

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猪肺炎支原体气溶胶富集检测技术的初步研究

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中国农学通报 2013年第5期29卷 42-47页

作者：华利忠武昱孜白方方冯志新刘茂军靳蒙蒙郑烨邵国青江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 南京农业大学动物医学院南京210014

为了建立一个简单易行的猪肺炎支原体气溶胶富集和检测技术,结合液体冲击式采样器和过滤式采样器的原理,自行设计一个气溶胶双重富集装置,并在密闭环境下采集人工制备的猪肺炎支原体气溶胶,荧光定量PCR检测以确定该装置的采集效率。再... 详细信息

为了建立一个简单易行的猪肺炎支原体气溶胶富集和检测技术,结合液体冲击式采样器和过滤式采样器的原理,自行设计一个气溶胶双重富集装置,并在密闭环境下采集人工制备的猪肺炎支原体气溶胶,荧光定量PCR检测以确定该装置的采集效率。再通过收集不同猪群中的气溶胶进行检测以确定该装置临床应用的可行性。首先,收集人工感染Mhp阴性仔猪后不同时间猪舍内的气溶胶;其次,收集1个猪支原体肺炎发病猪场和1个阳性未发病猪场的产房、保育舍和育肥舍共11个猪舍的气溶胶,荧光定量PCR或套式PCR检测所收集的气溶胶。结果显示:实验室模拟采样的采集效率达到(37.04±6.43)%,人工感染猪肺炎支原体后7天即在饲养房间的气溶胶中检到猪肺炎支原体;2个猪场共11个不同猪舍气溶胶中猪肺炎支原体检测结果均为阳性,检出率100%。成功建立了一个简单易行的猪场猪肺炎支原体气溶胶富集及检测技术。

关键词：猪肺炎支原体气溶胶微生物采样器检测

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猪肺炎支原体和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的致病性研究

猪肺炎支原体和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的致病性...

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2013国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会

作者：李彬杜露平何孔旺邵国青温立斌冯志新江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

引言/目的猪呼吸道疾病是影响我国养猪业发展的重要疾病之一,在猪呼吸道疾病综合症(PRDC)的多种病原中,猪肺炎支原体(Mhp)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)被认为是引起PRDC的主要元凶.研究报道,Mhp感染能明显加剧PRRSV引起的肺部炎症...

引言/目的猪呼吸道疾病是影响我国养猪业发展的重要疾病之一,在猪呼吸道疾病综合症(PRDC)的多种病原中,猪肺炎支原体(Mhp)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)被认为是引起PRDC的主要元凶.研究报道,Mhp感染能明显加剧PRRSV引起的肺部炎症,但是其作用机制并不清楚.本研究拟开展Mhp和高致病性PRRSV混合感染的致病性研究,为有效控制PRDC的发生与流行提供理论基础和科学依据.

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猪Hokovirus环介导等温扩增检测方法的建立及应用

猪Hokovirus环介导等温扩增检测方法的建立及应用

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：李彬杜露平孙冰倪艳秀温立斌张雪寒何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

本研究采用环介导等温扩增(LAMP)技术，建立检测猪Hokovirus(pHoV)病毒的一种新型、快速、简便、实用、灵敏的检测方法。选取PHoV VP1/2基因特异性保守片段设计LAMP引物，利用具有链置换活性的Bst DNA聚合酶在恒温条件下催化新链合成，... 详细信息

本研究采用环介导等温扩增(LAMP)技术，建立检测猪Hokovirus(pHoV)病毒的一种新型、快速、简便、实用、灵敏的检测方法。选取PHoV VP1/2基因特异性保守片段设计LAMP引物，利用具有链置换活性的Bst DNA聚合酶在恒温条件下催化新链合成，从而实验靶序列的高效、特异性扩增。对所建立的LAMP检测方法的敏感性研究显示LAMP对PHoV的最低检出量为10拷贝/反应，比普通PCR方法敏感10倍;且特异性、重复性较好。反应结束后通过加入SYBR GreenⅠ染料能够快速、简便地判定结果，并且不需要特殊的仪器设备，操作简便，非常适用于现场快速检测和疾病诊断。

关键词：猪病毒实验室检测环介导等温扩增技术

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中国大陆欧洲型PRRSVN蛋白的遗传变异分析

中国大陆欧洲型PRRSVN蛋白的遗传变异分析

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2013国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会

作者：李彬刘彦玲杜露平何孔旺温立斌江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

引言/目的猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为特征的传染病.PRRSV可以分为美洲型和欧洲型毒株.从1996年报道流行...

引言/目的猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为特征的传染病.PRRSV可以分为美洲型和欧洲型毒株.从1996年报道流行到2006年出现高致病性PRRSV,我国PRRSV一直以美洲型毒株为主,且流行的范围日益扩大.近几年来,欧洲型PRRSV在我国被检测到,为我国PRRS的防控带来了更大的困难.目前,我国发现了的多株欧洲型的PRRSV毒株,但是其遗传演化及变异规律尚不清楚.因此,本研究收集了GenBank中登录的中国大陆欧洲型PRRSV分离株N蛋白的序列进行遗传变异分析.旨在揭示欧洲型PRRSV在我国的遗传演化及变异规律,为进一步防控PRRS在我国的流行提供科学依据.

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BDV E2蛋白的原核表达及鉴定

BDV E2蛋白的原核表达及鉴定

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：毛立刘霞李文良杨蕾蕾张纹纹江杰元江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

羊边界病病毒(Border disease virus,BDV)是导致绵羊和山羊繁殖障碍的重要病原,于2013年在国内首次报道发现,E2蛋白作为该病毒的主要抗原性蛋白,在抗体检测中可作为抗原,对该病毒进行抗体检测。本研究比对多种BDV E2基因,合成引物,以BDV... 详细信息

羊边界病病毒(Border disease virus,BDV)是导致绵羊和山羊繁殖障碍的重要病原,于2013年在国内首次报道发现,E2蛋白作为该病毒的主要抗原性蛋白,在抗体检测中可作为抗原,对该病毒进行抗体检测。本研究比对多种BDV E2基因,合成引物,以BDV JSLS12-01株RNA作为模板,用RT-PCR方法扩增BDV E2基因,克隆到原核表达载体pET-28a(+),转化大肠杆菌BL21构建重组表达菌,经SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白,证实该重组蛋白成功表达。该蛋白的表达为建立BDV的检测方法具有重要意义,将在此基础上,进一步研制检测方法,以及时快速的检测BDV.

关键词：羊边界病病毒蛋白鉴定原核表达基因检测

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禽坦布苏病毒套式RT-PCR检测方法的建立

禽坦布苏病毒套式RT-PCR检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第三届全国禽病分子生物技术青年学术论坛

作者：黄欣梅李银赵冬敏刘宇卓韩凯凯江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

禽坦布苏病毒病是新发的可引起家禽产蛋和采食量下降及死亡的一种疫病。本研究旨在建立一种快速诊断方法用于临床诊断及流行病学调查。根据GenBank发表的鹅坦布苏病毒JS804株全基因序列，设计了2对特异性引物，建立了禽坦布苏病毒套式RT...

禽坦布苏病毒病是新发的可引起家禽产蛋和采食量下降及死亡的一种疫病。本研究旨在建立一种快速诊断方法用于临床诊断及流行病学调查。根据GenBank发表的鹅坦布苏病毒JS804株全基因序列，设计了2对特异性引物，建立了禽坦布苏病毒套式RT-PCR检测方法。

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猪肺炎支原体净化控制研究

猪肺炎支原体净化控制研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：邵国青冯志新熊祺琰华利忠江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

为防控和净化国内猪气喘病,本研究通过种猪选育,加强管理,疫苗免疫和程序性药物控制的方法以及猪肺炎支原体净化检测技术的建立,形成猪气喘病净化配套体系,为国内猪气喘病的防控与净化提供理论依据和实践经验。

关键词：猪气喘病肺炎支原体净化技术疫病防控

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鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因密码子优化及其在大肠杆菌中的表达

鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因密码子优化及其在大肠杆菌中的表达

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第三届全国禽病分子生物技术青年学术论坛

作者：潘群兴朱向东欧阳伟王晓丽夏兴霞毕振威诸玉梅董晨红王永山江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

根据大肠杆菌密码子使用频率,我们首先对IBD强毒分离株VP2基因进行改造并合成,命名为mVP2,然后选用含温度诱导型启动子PR PL的原核表达载体pBV220和融合表达型原核表达载体pET-32a,构建含密码子优化型IBDV VP2基因的原核表达质粒pET32- ...

根据大肠杆菌密码子使用频率,我们首先对IBD强毒分离株VP2基因进行改造并合成,命名为mVP2,然后选用含温度诱导型启动子PR PL的原核表达载体pBV220和融合表达型原核表达载体pET-32a,构建含密码子优化型IBDV VP2基因的原核表达质粒pET32- VP2和pBV220-VP2,收集诱导菌体。

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