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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：欧阳伟朱向东王永山王永强潘群兴毕振威王笑梅江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

为研究microRNA(gga-miR-21)对传染性法氏囊病病毒(IBDV)复制的影响,本研究利用PCR方法从鸡的肝细胞基因组中扩增细胞pri-gga-miR-21,克隆于慢病毒表达质粒pL-EGFP中构建重组质粒pL-miR-21。将pL-miR-21和3个包装质粒pLP1、pLP2和pLP/VSVG共转染293FT细胞,制备含gga-miR-21基因的重组慢病毒VL+miR-21。用VL+miR-21感染DF-1细胞,经杀稻瘟菌素筛选获得了过表达gga-miR-21的细胞株DF-miR-21,用定量RT-PCR(qRT-PCR)检测表明,gga-miR-21的表达量比正常DF-1细胞提高60%。将IBDV接种于DF-miR-21细胞,在96h后,其病毒滴度(104.75TCID50/0.1mL)显著低于正常DF-1细胞的病毒滴度(108.75TCID50/0.1mL)。用生物信息学方法和双荧光素酶报告系统分析验证,在IBDV基因组VP1基因中存在gga-miR-21的结合靶点。将IBDV感染的DF-miR-21细胞,用western blot分析,VP1蛋白的表达量比正常DF-1细胞显著降低;用qRT-PCR分析,VP1mRNA水平与正常DF-1细胞没有明显差异。本实验结果表明:细胞gga-miR-21可抑制IBDV的复制,其分子作用机理是在VP1基因翻译水平上实现的。

关键词：传染性法氏囊病病毒(IBDV) miRNA gga-miR-21 慢病毒表达系统病毒复制

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鸡群中鸡毒支原体和大肠杆菌混合感染的病例

鸡群中鸡毒支原体和大肠杆菌混合感染的病例

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第三届全国禽病分子生物技术青年学术论坛

作者：赵冬敏李银刘宇卓张敬峰黄欣梅江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京 210014

应用细菌学方法无菌取肝脏和关节肿疱液接种鲜血琼脂培养基进行细菌分离，挑取鲜血琼脂培养基上均一生长的菌落划线接种麦康凯斜面用于细菌鉴定，将分离的大肠杆菌涂布鲜血琼脂培养基进行药敏试验。

关键词：

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江苏部分地区羊群边界病的流行病学调查

江苏部分地区羊群边界病的流行病学调查

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：李文良江杰元毛立赵永前孙银华王清益丁永龙杨建泉王秋生缪忠明江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 海安县畜牧兽医站江苏海安226600 如东县畜牧兽医站江苏如东226400

2012年初,从安徽某羊场发生腹泻的山羊病料中检测分离到边界病病毒(Border disease virus,BDV),证明BDV在我国羊群中存在。为了进一步了解BDV在江苏羊群的流行情况,本研究收集江苏部分地区发生腹泻或健康羊群的血清和组织样品,采用RT-PC... 详细信息

2012年初,从安徽某羊场发生腹泻的山羊病料中检测分离到边界病病毒(Border disease virus,BDV),证明BDV在我国羊群中存在。为了进一步了解BDV在江苏羊群的流行情况,本研究收集江苏部分地区发生腹泻或健康羊群的血清和组织样品,采用RT-PCR方法进行检测,并对阳性样品进行病毒的分离鉴定,测定分离毒株5'-UTR基因片段,与其他已报道的毒株进行同源性比较并绘制进化树。结果表明有27.5％(33/120)样品呈阳性,不同羊场BDV阳性率为0-67％,共分离到4株不同的BDV毒株,它们与其他BDV毒株的同源性为75.7％-90.6％。进化分析表明这些毒株与BDV3型关系最近。采用ELISA试剂盒对血清样品BDV抗体进行检测发现不同羊场抗体阳性率存在较大差异(0-100％),还有抗体阴性持续感染个体的存在。以上结果为进一步探索BDV在我国羊群中的流行情况奠定了基础。

关键词：羊边界病病毒流行病学调查分离鉴定抗体检测

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猪肺炎支原体主要抗原蛋白的研究进展

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中国农学通报 2013年第2期29卷 16-22页

作者：张悦刘茂军邵国青江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放试验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 南京农业大学动物医学院南京210095

猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是引起猪支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae of Swine,MPS)的病原,给养猪业造成巨大的经济损失。由于对具有良好免疫原性的Mhp特异性蛋白缺少深入研究,使得Mhp在致病机制、血清学检测方法和... 详细信息

猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是引起猪支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae of Swine,MPS)的病原,给养猪业造成巨大的经济损失。由于对具有良好免疫原性的Mhp特异性蛋白缺少深入研究,使得Mhp在致病机制、血清学检测方法和新型疫苗的研究发展上受到一定限制,从而影响了对MPS的控制。本研究综合Mhp主要粘附因子、膜蛋白及细胞质蛋白等主要抗原蛋白的研究进展,为该病原致病机理研究、建立特异性诊断方法和推动基因工程疫苗发展提供一定的理论基础,对MPS的正确诊断、检测、免疫预防和控制也有重要意义。

关键词：猪肺炎支原体特异性抗原蛋白特异性诊断方法疫苗

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PCV2、P1和TTV混合感染的流行病学调查

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福建农业学报 2013年第9期28卷 864-868页

作者：王小敏何孔旺王东田周忠涛茅爱华俞正玉汪伟倪艳秀温立斌江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 山东省蓬莱市村里集镇畜牧兽医工作站山东蓬莱265604 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

【目的】研究2012年我国部分地区猪圆环病毒2型(PCV2)、类猪圆环病毒P1和猪输血传播病毒(TTV)混合感染的情况。【方法】采用PCR方法对采集自我国江苏、安徽和浙江3省的108份组织和血清样品进行PCV2、P1和TTV检测。【结果】PCV2感染率为6... 详细信息

【目的】研究2012年我国部分地区猪圆环病毒2型(PCV2)、类猪圆环病毒P1和猪输血传播病毒(TTV)混合感染的情况。【方法】采用PCR方法对采集自我国江苏、安徽和浙江3省的108份组织和血清样品进行PCV2、P1和TTV检测。【结果】PCV2感染率为64.81%,P1感染率为12.96%,TTV1感染率为33.33%,TTV2感染率为51.85%,其中8份样品表现为PCV2和P1的混合感染,42份样品表现为PCV2和TTV的混合感染,4份样品表现为PCV2、P1和TTV的混合感染,分别占样品总数的7.41%、38.89%和3.7%。【结论】猪群中PCV2和TTV的感染比较普遍,P1的感染率较低,PCV2和TTV的混合感染率较高,混合感染种类复杂,加重了疫病防控的难度。

关键词：猪圆环病毒2型类猪圆环病毒因子P1 猪输血传播病毒

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降低生猪养殖风险提高社会经济效益——用动物卫生经济学思路浅析养猪风险

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技术经济与管理研究 2013年第4期 17-21页

作者：陆昌华江苏省农业科学院兽医研究所江苏南京210014 农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210014 国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

实现畜产品从养殖到餐桌的全程质量监控已成为当前畜牧兽医工作者面临的重大课题。本文采用动物卫生经济学思路、对养猪业风险加大的主要表现、生猪产销体系风险加大的根本原因、猪场经济效益、"养、贩、宰"之间利润分割进行... 详细信息

实现畜产品从养殖到餐桌的全程质量监控已成为当前畜牧兽医工作者面临的重大课题。本文采用动物卫生经济学思路、对养猪业风险加大的主要表现、生猪产销体系风险加大的根本原因、猪场经济效益、"养、贩、宰"之间利润分割进行剖析,并指出农户散养和小规模专业户养殖是中国当前生猪主要养殖模式,该模式的市场波动性大,难以创造品牌产品参与市场竞争,从而导致中国生猪产业的发展缓慢。而现代化养猪业发展是一项系统工程,任何一个薄弱因素都可能成为风险。应尽快建立市场信息平台,切实加强动物疫病防控体系建设,健全市场监测预警机制。并建议养猪生产应实现饲养场-屠宰加工厂-销售或出口贸易的全程质量安全可追溯管理。由国家颁布一个规程,要求进入超市或出口的动物必须佩戴耳标;同时,附有电子文档追溯信息的记录,否则动物卫生监督机构不得出具检疫合格证明。

关键词：动物卫生卫生经济生猪市场信息技术

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猪链球菌病疫苗研究进展

猪链球菌病疫苗研究进展

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第七届南京农业大学畜牧兽医学术年会

作者：何孔旺周俊明江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

本文详细介绍了国内外在猪链球菌病疫苗研制方面所取得的进展，主要包括全菌灭活疫苗、活疫苗和基因工程疫苗。

关键词：猪链球菌病基因疫苗血清型分离鉴定

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兔出血症病毒VP60蛋白T细胞表位优势区的筛选

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江苏农业科学 2013年第4期41卷 186-188页

作者：金明兰侯继波郑其升鲁会军任静强刘春霞南文龙胡乐鹏金宁一吉林建筑工程学院水污染控制与资源化利用重点实验室吉林长春130118 江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所吉林长春130062

应用戊二醛醛化的人的"O"型红细胞纯化兔出血症病毒(RHDV),对非免兔进行3次免疫后,经分段表达的重组杆状病毒、纯化的病毒、Con A分别刺激后进行细胞增殖检测、IL-2、IL-4、IFN-γ检测。WST检测结果表明,3号重组杆状病毒刺激... 详细信息

应用戊二醛醛化的人的"O"型红细胞纯化兔出血症病毒(RHDV),对非免兔进行3次免疫后,经分段表达的重组杆状病毒、纯化的病毒、Con A分别刺激后进行细胞增殖检测、IL-2、IL-4、IFN-γ检测。WST检测结果表明,3号重组杆状病毒刺激的值最高,所有重组杆状病毒与空白对照组差异显著;IL-2和IFN-γ检测结果表明,3号重组杆状病毒刺激的值最高,其次为2号、4号,而1号、5号重组杆状病毒刺激指数较低,但均高于对照组;IL-4检测结果表明,2号、3号、4号重组杆状病毒刺激的值低于对照组,1号、5号重组杆状病毒刺激组略低于对照组。研究结果表明,重组病毒3号区域为RHDV VP60 T细胞表位的优势区,从而为后期的试验奠定了基础。

关键词：兔出血症病毒 VP60蛋白 T细胞表位优势区筛选 IFN—γ IL-2 IL-4

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大肠杆菌O157∶H7菌毛hcpA基因产物的小鼠免疫保护试验(英文)

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中国人兽共患病学报 2012年第11期28卷 1065-1070,1101页

作者：张雪寒何孔旺叶青倪艳秀温立斌李彬周俊明王小敏江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

最近鉴定的大肠杆菌O157∶H7Ⅳ型菌毛(HCP)与细菌粘附、定植和致病有着密切关系。本文研究表明,PCR扩增出15个大肠杆菌O157∶H7分离株HcpA基因,透射电镜观察到HCP表达于菌体表面。同时,构建BL21(pET32-hc-pA)重组菌,成功表达重组蛋白His... 详细信息

最近鉴定的大肠杆菌O157∶H7Ⅳ型菌毛(HCP)与细菌粘附、定植和致病有着密切关系。本文研究表明,PCR扩增出15个大肠杆菌O157∶H7分离株HcpA基因,透射电镜观察到HCP表达于菌体表面。同时,构建BL21(pET32-hc-pA)重组菌,成功表达重组蛋白His-HcpA。His-HcpA免疫家兔制备高滴度(1∶12800)多克隆抗体,Western blot显示能够与HCP菌毛蛋白反应。Balb/c小鼠分别在0周和第3周皮下接种His-HcpA,和对照组小鼠相比,获得70%存活率,并且排菌量降低,排菌时间缩短。本研究表明,His-HcpA具有良好的免疫原性,是大肠杆菌O157∶H7重要的毒力因子。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157∶H7 Ⅳ型菌毛表达排菌

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母猪精细养殖管理物联网平台的建立

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物联网技术 2013年第3期3卷 65-68页

作者：胡肄农张启迪黄小国江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 青岛农业大学山东青岛266109 常州市康乐农牧有限公司江苏常州213149

借鉴畜牧业发达国家的经验,将传统养殖设施和技术与物联网技术结合,同时集成养殖设施监控、母猪生理参数监测的无线传感网系统、电子标签与阅读器等动物标识系统、移动终端技术以及基于SaaS的云平台架构技术,建立了一种基于物联网的母... 详细信息

借鉴畜牧业发达国家的经验,将传统养殖设施和技术与物联网技术结合,同时集成养殖设施监控、母猪生理参数监测的无线传感网系统、电子标签与阅读器等动物标识系统、移动终端技术以及基于SaaS的云平台架构技术,建立了一种基于物联网的母猪精细饲养管理平台,也就是"网上猪场"平台。

关键词：母猪精细养殖物联网管理平台

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