检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2012年第12期34卷 959-962页

作者：刘茂军杜海霞杜改梅车巧林张悦熊祺琰白方方王海燕冯志新邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 金陵科技学院动物科学与技术学院江苏南京210038

为了解猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)P159蛋白的黏附活性,本实验利用PCR从Mhp NJ株扩增P159基因片段(3'端),克隆于pET-28a(+)进行表达,并用表达的截短蛋白进行黏附试验。结果表明,PCR扩增的目的基因片段约为450 bp;SD... 详细信息

为了解猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)P159蛋白的黏附活性,本实验利用PCR从Mhp NJ株扩增P159基因片段(3'端),克隆于pET-28a(+)进行表达,并用表达的截短蛋白进行黏附试验。结果表明,PCR扩增的目的基因片段约为450 bp;SDS-PAGE检测重组蛋白分子量为46 ku;western blot检测表明该重组蛋白能够与Mhp阳性血清发生特异性反应,表明该蛋白具有良好的免疫反应原性;表达的截短蛋白与Mhp的黏附试验结果表明,该重组蛋白可以粘附于猪肺上皮细胞(SJPL)表面,并部分抑制Mhp对SJPL的粘附作用。本研究结果为Mhp致病机制的进一步研究奠定了基础。

关键词：猪肺炎支原体 P159截短蛋白黏附活性

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猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白部分片段的原核表达及其抗体间接ELISA检测方法的建立

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江苏农业学报 2012年第1期28卷 80-85页

作者：周俊明何孔旺倪艳秀俞正玉茅爱华吕立新温立斌张雪寒郭容利李彬王小敏江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

为了建立猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白(MRP)抗体间接ELISA检测方法,该研究首先克隆了MRP编码基因的部分片段,构建了重组表达质粒pET28a-mrp,并将该质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,获得了58 000的重组蛋白,经Ni柱纯化后,免疫印迹显示... 详细信息

为了建立猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白(MRP)抗体间接ELISA检测方法,该研究首先克隆了MRP编码基因的部分片段,构建了重组表达质粒pET28a-mrp,并将该质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,获得了58 000的重组蛋白,经Ni柱纯化后,免疫印迹显示MRP重组蛋白能够被猪链球菌2型抗体特异性识别。以纯化的MRP重组蛋白作为包被抗原,建立了猪链球菌2型MRP抗体检测间接ELISA方法。该ELISA方法的包被抗原浓度为10μg/ml,待检血清1∶50稀释,检测临床48份未免疫猪链球菌2型疫苗健康猪的血清。当效价(S/P)≥0.22时,判定待检血清样品为阳性;当S/P<0.22时,判定待检血清样品为阴性。运用建立的方法能特异性识别猪链球菌2型抗体,人工感染猪的MRP抗体于攻毒后14～28 d出现峰值,同时提示临床健康猪群的免疫功能存在个体差异。

关键词：猪链球菌2型 MRP 原核表达间接ELISA

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兔出血症病毒胶体金免疫层析试纸条诊断方法的建立及初步应用

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畜牧兽医学报 2012年第11期43卷 1795-1801页

作者：蔡少平王芳贾华敏张海彬李超美范志宇胡波熊富强魏后军江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 南京农业大学动物医学院南京210095 镇江新区兽医卫生监督所镇江212132 南京出入境检验检疫局南京210001

为了建立一种快速、简便的兔出血症病毒(RHDV)的检测方法,用胶体金标记纯化的RHDV多克隆抗体,以杆状病毒表达系统表达的重组RHDV VP60蛋白为免疫原制备RHDV的单克隆抗体(McAb,简称单抗)A3C,将RHDV McAb和羊抗兔IgG抗体包被在硝酸纤维素... 详细信息

为了建立一种快速、简便的兔出血症病毒(RHDV)的检测方法,用胶体金标记纯化的RHDV多克隆抗体,以杆状病毒表达系统表达的重组RHDV VP60蛋白为免疫原制备RHDV的单克隆抗体(McAb,简称单抗)A3C,将RHDV McAb和羊抗兔IgG抗体包被在硝酸纤维素膜上,分别作为检测线和质控线,经条件优化研制成RHDV免疫胶体金试纸条。该试纸条可以检出红细胞凝集试验(HA)效价为1∶10的RHDV悬液,即HA检测为阴性的样品,该试纸条检测为阳性,其敏感性高于HA;特异性试验结果显示,该试纸条不与家兔其他常见病菌发生交叉反应。应用该试纸条对127份疑似兔出血症家兔肝脏样品进行初步检测,同时用HA做平行试验,阳性符合率为100%。因此,该试纸条是一种快速、灵敏、特异的兔出血症病毒检测方法,为兔出血症的现场诊断提供了有效的方法,显示出很好的临床应用前景。

关键词：兔出血症病毒 VP60蛋白单克隆抗体胶体金免疫层析试验红细胞凝集试验

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瑞士减群法在猪肺炎支原体净化中的应用研究进展

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中国农学通报 2012年第14期28卷 73-78页

作者：华利忠冯志新刘茂军孔猛甘源邵国青江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

猪支原体肺炎(猪气喘病)是由猪肺炎支原体引起的一种严重危害全球养猪业生产的传染病之一,可以感染任何日龄和任何品种的猪只,且一旦侵入就难以清除。很多发达国家,特别是西欧和北美,均通过彻底净化病原的方式来控制该病的爆发。然而每... 详细信息

猪支原体肺炎(猪气喘病)是由猪肺炎支原体引起的一种严重危害全球养猪业生产的传染病之一,可以感染任何日龄和任何品种的猪只,且一旦侵入就难以清除。很多发达国家,特别是西欧和北美,均通过彻底净化病原的方式来控制该病的爆发。然而每个猪场都有各自的特殊性,完全套用其他猪场的模式未必能成功。瑞士减群法因其成本低、操作简便、成功率高,灵活多用而被很多猪场活用,本研究就瑞士减群法在不同猪场成功的活用做一综述,为国内猪肺炎支原体净化提供临床经验和理论依据。

关键词：瑞士减群法猪肺炎支原体净化

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规模化猪场疫病传入风险分析模型的构建

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江苏农业学报 2012年第2期28卷 365-369页

作者：臧一天谭业平胡肄农陆昌华江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

疫病对猪场造成重大损失,是猪场发展的主要制约因素。为规范猪场管理,减少疫病,根据现今猪场疫病概况,以调查问卷及专家调查的方法确定疫病传入猪场的风险因素,再运用动物卫生风险分析技术模拟规模化猪场疫病传入的暴露模型,并构建风险... 详细信息

疫病对猪场造成重大损失,是猪场发展的主要制约因素。为规范猪场管理,减少疫病,根据现今猪场疫病概况,以调查问卷及专家调查的方法确定疫病传入猪场的风险因素,再运用动物卫生风险分析技术模拟规模化猪场疫病传入的暴露模型,并构建风险评估数学模型,最后采取实例验证该模型。结果表明,该模型在定量评估猪场疫病发生风险可能性大小上是可行的。

关键词：规模化猪场疫病控制动物卫生风险分析模型

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江苏省部分地区动物弓形虫病血清学调查

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江苏农业科学 2012年第2期40卷 171-173页

作者：孔猛白昀丁志勇刘茂军冯志新熊祺琰白方方车巧林王海燕王占伟韦艳娜邵国青江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

以间接血凝(IHA)试验方法对江苏省部分地区(徐州、连云港、盐城、宿迁、南通、泰州、扬州、南京、常州、宜兴、昆山)动物弓形虫病进行血清学调查。试验血清样品稀释度在1∶64时,致敏血球达到50%以上凝集的血清样品判为阳性。结果在所调... 详细信息

以间接血凝(IHA)试验方法对江苏省部分地区(徐州、连云港、盐城、宿迁、南通、泰州、扬州、南京、常州、宜兴、昆山)动物弓形虫病进行血清学调查。试验血清样品稀释度在1∶64时,致敏血球达到50%以上凝集的血清样品判为阳性。结果在所调查的1 100份血清样品(猪、牛、羊、猫、狗等动物)中弓形虫抗体呈阳性者为145份,占总调查血清数的13.2%,其中939份猪血清样品中阳性样品数120份,占总调查猪血清样品的12.8%,总体反映出江苏省内动物弓形虫病感染的概况。

关键词：弓形虫病血清学调查

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传染性法氏囊病病毒VP2与C3d串联基因重组表达质粒的构建及其免疫功能研究

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中国预防兽医学报 2012年第6期34卷 471-475页

作者：马金荣欧阳伟王永山吴晓悠朱向东张海彬范红结王忠灿唐雨德江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 南京军区军事医学研究所南京军区疾病预防控制中心江苏南京210002

为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因核酸疫苗的免疫效力,本研究根据已发表的鸡源补体C3d序列,设计并合成在5'端添加编码连接肽(Gly4Ser)2序列的C3d基因。用同尾酶BglⅡ和BamHⅠ构建含有3拷贝C3d与VP2基因融合的重组表达质粒pcDN... 详细信息

为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因核酸疫苗的免疫效力,本研究根据已发表的鸡源补体C3d序列,设计并合成在5'端添加编码连接肽(Gly4Ser)2序列的C3d基因。用同尾酶BglⅡ和BamHⅠ构建含有3拷贝C3d与VP2基因融合的重组表达质粒pcDNA-VP2-3C3d。用脂质体法转染BHK21细胞,48 h后,westernblot分析表明,表达的重组蛋白为162 ku;间接免疫荧光试验检测转染细胞中具有特异性荧光。用pcDNA-VP2-3C3d与前期构建的pcDNA-VP2分别免疫2周龄SPF鸡,二免14 d后,间接ELISA法检测IBDV抗体效价,pcDNA-VP2-3C3d组抗体水平显著高于pcDNA-VP2组;MTT法检测鸡脾淋巴细胞增殖活性,pcDNA-VP2-3C3d组免疫诱导的特异性淋巴细胞增殖活性显著高于pcDNA-VP2组(p<0.05)。本研究表明C3d可以增强VP2基因免疫诱导的IBDV特异性体液和细胞免疫应答。

关键词：传染性法氏囊病病毒 VP2基因鸡补体C3d 分子免疫佐剂基因免疫

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混合感染背景下猪呼吸道病的免疫与控制

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中国兽药杂志 2012年第B7期46卷 97-99,108页

作者：邵国青华利忠江苏省农业科学院兽医研究所.农业部兽用生物制品工程技术重点实验室.国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

混合感染已成为我国规模化猪场的普遍现象,猪呼吸道病和猪呼吸系统综合症(PRDC)为规模化养猪生产的主要难题。猪气喘病作为原发性关键疾病,该病的控制对于养猪业的发展至关重要。文章对混合感染背景及猪呼吸道病的发病特点、控制方法做... 详细信息

混合感染已成为我国规模化猪场的普遍现象,猪呼吸道病和猪呼吸系统综合症(PRDC)为规模化养猪生产的主要难题。猪气喘病作为原发性关键疾病,该病的控制对于养猪业的发展至关重要。文章对混合感染背景及猪呼吸道病的发病特点、控制方法做了简介,重点介绍疫苗、敏感药物及管理在猪呼吸道病的控制和净化中的作用,提出首先控制好继发性细菌感染是做好猪场PRDC预防和控制工作的重要手段。

关键词：猪气喘病 PRDC 混合感染免疫

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高渗溶液条件下猪肺炎支原体形态和活性变化的研究

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中国农学通报 2012年第20期28卷 93-97页

作者：王占伟刘茂军冯志新熊褀琰白方方邵国青江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

为研究高渗溶液对猪肺炎支原体（Mhp）形态、大小,以及活力的影响。Mhp经终浓度为1.8%NaCl的高渗溶液分别作用1、2、4、6、8min后,分别进行染色镜检、粒径分析仪测定粒径、CCU测定和PCR鉴定。结果表明：在高渗溶液作用不同时间后,从2mi... 详细信息

为研究高渗溶液对猪肺炎支原体（Mhp）形态、大小,以及活力的影响。Mhp经终浓度为1.8%NaCl的高渗溶液分别作用1、2、4、6、8min后,分别进行染色镜检、粒径分析仪测定粒径、CCU测定和PCR鉴定。结果表明：在高渗溶液作用不同时间后,从2min开始,Mhp皱缩变圆,且直径变小,菌体数量也快速变少至消失;测定的终CCU降低了一个梯度,且时间延长了1天;在作用不同时间后的样品中,PCR均能扩增出Mhp目的条带。经终浓度为1.8%NaCl作用1~6min,Mhp的形态大小发生了变化,且具有活性,这将为Mhp经肌肉注射进入血液循环研究和猪支原体肺炎活疫苗的新免疫途径研究提供参考数据。

关键词：猪肺炎支原体高渗溶液形态粒径活力

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猪肺炎支原体净化检测程序研究进展

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中国农学通报 2012年第35期28卷 33-37页

作者：华利忠冯志新武昱孜刘茂军邵国青江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

猪支原体肺炎(猪气喘病)是由猪肺炎支原体引起的一种严重危害全球养猪业生产的传染病之一。很多国家,特别是西欧各国和北美,均通过彻底净化病原的方式来控制该病的爆发。实行净化程序必须对净化后的猪群进行各项检测以确定净化成功与否... 详细信息

猪支原体肺炎(猪气喘病)是由猪肺炎支原体引起的一种严重危害全球养猪业生产的传染病之一。很多国家,特别是西欧各国和北美,均通过彻底净化病原的方式来控制该病的爆发。实行净化程序必须对净化后的猪群进行各项检测以确定净化成功与否。然而,每个猪场采用的检测方案都不一样,也没有形成一个统一的阴性群标准。本研究就国外猪肺炎支原体净化后阴性群的检测方法和不同检测方案做一综述,给国内猪场实施气喘病净化后检测方案的制定提供依据。

关键词：猪肺炎支原体阴性群净化检测方案

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