检索结果-内蒙古大学图书馆

黏膜抗体在疫苗免疫效力评价中的前景

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生物技术通报 2012年第2期28卷 41-47页

作者：张亚冯志新张道华刘茂军白方方王海燕邵国青江苏省农业科学院兽医研究所、农业部兽用生物制品工程技术重点实验室、国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 南京农业大学南京210095

简单介绍目前疫苗效力检验的方法、黏膜抗体的功能及其在实验室疫苗效果效力评价中的应用,提出了黏膜抗体作为疫苗免疫效力试验的替代指标或免疫监测的主要抗体的建议。

关键词：黏膜抗体 sIgA 免疫效力免疫监测

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不同因素对猪肺炎支原体颜色变化单位测定的影响

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中国畜牧兽医文摘 2013年第6期29卷 125-125页

作者：韦艳娜江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

为摸清猪肺炎支原体的颜色变化单位（CCU）测定是否受试验相关因素的影响，通过不同培养体系、不同种类的容器、不同的稀释方法测定猪肺炎支原体的CCU，观察培养基的变色情况，最终通过测定各组猪肺炎支原体的CCU来分析不同因素对猪肺... 详细信息

为摸清猪肺炎支原体的颜色变化单位（CCU）测定是否受试验相关因素的影响，通过不同培养体系、不同种类的容器、不同的稀释方法测定猪肺炎支原体的CCU，观察培养基的变色情况，最终通过测定各组猪肺炎支原体的CCU来分析不同因素对猪肺炎支原体培养滴度的影响。结果显示，利用不同培养体系、不同容器及不同的稀释方法测定猪肺炎支原体的CCU，其结果差异均不显著（P〉0．05）。该研究可为今后支原体的CCUN定提供参考。

关键词：猪肺炎支原体颜色变化测定单位培养体系稀释方法 CCU 培养基

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牛源大肠杆菌O157:H7的分离及毒力基因鉴定

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中国兽医学报 2012年第8期32卷 1148-1153页

作者：叶青张雪寒何孔旺费荣梅赵攀登栾晓婷江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

从2个牛场采集新鲜粪便,增菌后,免疫磁珠富集,涂布筛选性培养基,挑取可疑菌落用rfbE/fliC二重PCR和血清学方法鉴定。设计毒力基因stx1、stx2、eae、hlyA和tccp相应引物,针对O157:H7对分离株进行PCR鉴定。口服攻毒链霉素处理的BALB/c小... 详细信息

从2个牛场采集新鲜粪便,增菌后,免疫磁珠富集,涂布筛选性培养基,挑取可疑菌落用rfbE/fliC二重PCR和血清学方法鉴定。设计毒力基因stx1、stx2、eae、hlyA和tccp相应引物,针对O157:H7对分离株进行PCR鉴定。口服攻毒链霉素处理的BALB/c小鼠明确分离株致病性。结果显示,成功分离到7株出血性大肠杆菌O157:H7,并且有1株迟缓性发酵山梨醇麦康凯培养基。毒力基因检测显示,其中6株毒力因子表型为stx1-stx2+eae+hlyA+tccp+,另有1株表现型为stx1+stx2+eae+hlyA+tccp+,各分离株tccp基因均为阳性,但携带的重复片段数量有差异。所采集样品中肠出血性大肠杆菌O157:H7的检出率高达12%。1×1010 CFU同剂量口服接种经PBS洗涤的5株O157:H7分离株全菌,小鼠存活率有差异分别为40%,50%,60%,20%,50%,各分离株在小鼠体内排菌时间也有差异分别为攻毒后7,9,13,13,15d。

关键词：牛肠出血性大肠杆菌O157:H7 毒力基因致病性

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猪肺炎支原体显色原位杂交研究方法的建立

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中国预防兽医学报 2012年第3期34卷 214-218页

作者：王占伟熊褀琰刘茂军冯志新白方方邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京天邦生物科技有限公司江苏南京210012

为建立猪肺炎支原体(Mhp)显色原位杂交(CISH)定位检测方法,本研究利用地高辛标记的Mhp P36核酸探针和DAB/H2O2显色系统,对人工Mhp感染组、自然感染组和健康对照组的实验猪肺组织样品和临床样品进行显色原位杂交检测。结果显示,设计的地... 详细信息

为建立猪肺炎支原体(Mhp)显色原位杂交(CISH)定位检测方法,本研究利用地高辛标记的Mhp P36核酸探针和DAB/H2O2显色系统,对人工Mhp感染组、自然感染组和健康对照组的实验猪肺组织样品和临床样品进行显色原位杂交检测。结果显示,设计的地高辛标记探针针对Mhp具有特异性,而与其他的猪病原菌无交叉反应;检测结果可以通过显微镜观测到Mhp定位在支气管/细支气管黏膜表面。人工感染组、自然感染组和健康对照组的CISH结果与PCR检测结果一致,临床样品的CISH检测结果低于PCR检测结果。本研究建立的Mhp显色原位杂交法是一种集直观和敏感为一体的检测方法,可以用于Mhp的定位检测和致病机理研究。

关键词：猪肺炎支原体显色原位杂交斑点杂交检测定位

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PCR技术检测猪肺炎支原体的研究进展

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生物技术通报 2012年第5期28卷 54-60页

作者：张旭白方方武昱孜刘茂军冯志新熊祺琰张映邵国青江苏省农业科学院兽医研究所、农业部兽用生物制品工程技术重点实验室、国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 山西农业大学动物科技学院太谷030801

猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)是引起猪支原体肺炎的重要病原,该病常引起继发感染和混合感染,严重威胁养猪业发展,造成巨大的经济损失。利用PCR技术对猪支原体肺炎早期正确诊断具有非常重要的意义。从猪肺炎支原体的特异性靶... 详细信息

猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)是引起猪支原体肺炎的重要病原,该病常引起继发感染和混合感染,严重威胁养猪业发展,造成巨大的经济损失。利用PCR技术对猪支原体肺炎早期正确诊断具有非常重要的意义。从猪肺炎支原体的特异性靶基因、临床样品采集方法与样品DNA处理方法、关键技术因素及普通PCR技术、多重PCR技术、套式PCR技术、荧光定量PCR技术、芯片检测和环介导等温扩增技术等在猪肺炎支原体检测中的研究进展、主要优缺点及应用进行综述。

关键词：猪支原体肺炎猪肺炎支原体 PCR检测临床样品采集

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猪圆环病毒2型和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的流行病学调查

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华北农学报 2012年第B12期27卷 390-394页

作者：王小敏何孔旺张文文周忠涛茅爱华俞正玉温立斌倪艳秀张雪寒郭容利吕立新李彬周俊明江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

研究2009-2010年我国部分地区猪圆环病毒2型(PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)混合感染的情况。采用PCR和RT-PCR方法对采集自我国安徽、江苏、山东、浙江等7省的227份组织和血清样品进行PCV2和PRRSV检测。PCV2a感染率为15.9%,PCV2... 详细信息

研究2009-2010年我国部分地区猪圆环病毒2型(PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)混合感染的情况。采用PCR和RT-PCR方法对采集自我国安徽、江苏、山东、浙江等7省的227份组织和血清样品进行PCV2和PRRSV检测。PCV2a感染率为15.9%,PCV2b感染率为44.5%,PRRSV感染率为45.8%,其中17份样品表现为PCV2a和PRRSV的混合感染,50份样品表现为PCV2b和PRRSV的混合感染,10份样品表现为PCV2a,PCV2b和PRRSV的混合感染,分别占样品总数的7.5%,22.0%和4.4%。猪群中PCV2和PRRSV的感染比较普遍,混合感染率也较高,加重了疫病防控的难度。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒2型共感染

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猪肺炎支原体P97 TaqMan-BHQ荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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中国兽医科学 2012年第12期42卷 1268-1272页

作者：武昱孜靳蒙蒙白方方张旭华利忠雷治海邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210014

根据猪肺炎支原体(Mhp)P97基因的保守序列设计合成了引物和TaqMan-BHQ探针,建立了快速检测Mhp的TaqMan-BHQ荧光定量PCR方法。结果显示,该方法特异性良好,与其他病原不发生交叉反应;最低检测限可达10copies/μL,敏感性高;不同梯度定量模... 详细信息

根据猪肺炎支原体(Mhp)P97基因的保守序列设计合成了引物和TaqMan-BHQ探针,建立了快速检测Mhp的TaqMan-BHQ荧光定量PCR方法。结果显示,该方法特异性良好,与其他病原不发生交叉反应;最低检测限可达10copies/μL,敏感性高;不同梯度定量模板的拷贝数的对数值与Ct值之间的线性关系表达式为Ct=-3.426×lg(conc)+43.343,有良好的线性关系,标准曲线的相关系数为0.997,扩增效率为95.85%,重复性良好。对江苏省某猪场的48份猪肺组织进行荧光定量PCR检测,结果有43份肺组织呈现阳性,阳性检出率为89.58%,比巢式PCR的敏感性高。表明,该检测方法能用于Mhp的快速检测,可对猪支原体肺炎的早期诊断和流行病学调查提供新的技术手段。

关键词：猪肺炎支原体 P97基因荧光定量PCR TaqMan-BHQ探针

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断奶仔猪多系统衰竭综合征中多病原混合感染的流行病学调查

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华北农学报 2012年第5期27卷 203-206页

作者：李彬马俊杰赵静静何孔旺倪艳秀温立斌张雪寒周俊明江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

根据GenBank上发表的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus-2,PCV2)基因组序列、猪博卡病毒(Porcine bo-cavirus,PBoV)的VP1、VP2基因序列和TTV1、TTV2的UTR序列设计合成引物,建立了分别用于检测PCV2、PBoV及TTV1、TTV2的PCR方法。应用建立的PCR方法对送检的205份猪血液和组织样品进行PCV2、PBoV、TTV1和TTV2的检测,并对临床病料和健康猪群进行了比较,综合调查了PMWS猪群中多病原混合感染的情况。试验结果表明,PCV2、PBoV、TTV1、TTV2的阳性率分别为:56.59%,38.05%,26.83%,34.63%。其中,较高的混合感染为:PCV2与PBoV(15.61%)以及PCV2与TTV2(16.59%)。表明该地区PBoV和TTV2感染率升高,且混合感染种类复杂,从而为有效预防和控制这些疾病提供了理论依据。

关键词：断奶仔猪多系统衰竭综合征混合感染流行病学

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鸡传染性法氏囊病病毒抗血清的研制

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南方农业学报 2012年第12期43卷 2079-2082页

作者：王占伟邵国青刘茂军冯志新王丽高云飞周开华尹秀凤江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 南京天邦生物科技有限公司南京210012

【目的】确保鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗血清高效力的同时又彻底解决安全性和免疫应激问题,旨在研制出一种高效、安全的鸡传染性法氏囊病(IBD)预防和治疗制品。【方法】以SPF鸡为免疫动物,按照《兽用生物制品试验研究指导技术原则》... 详细信息

【目的】确保鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗血清高效力的同时又彻底解决安全性和免疫应激问题,旨在研制出一种高效、安全的鸡传染性法氏囊病(IBD)预防和治疗制品。【方法】以SPF鸡为免疫动物,按照《兽用生物制品试验研究指导技术原则》和《中华人民共和国兽药典》(2010年版)的要求研制IBDV抗血清,经脱毒处理后,对其半成品及成品进行检验。【结果】以IBDVNJ株免疫4周龄SPF鸡获得的抗血清,未脱毒处理前的血清效价≥1∶64,脱毒处理后的成品效价≥1∶32。半成品和成品的检验结果显示,经过脱毒处理后的IBDV抗血清制品呈橙黄色,无菌、无支原体、无外源病毒,对小白鼠、豚鼠和SPF鸡均安全,甲醛和硫柳汞残留量也未超过规定标准。【结论】研制的IBDV抗血清制品符合《中华人民共和国兽药典》的要求,完全可用于IBD的紧急预防和早期治疗,今后可作为一个正规产品上市以满足市场需要。

关键词：鸡传染性法氏囊病抗血清治疗 SPF鸡脱毒处理

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猪肺炎支原体DnaK蛋白质单抗的制备与鉴定

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江苏农业学报 2012年第6期28卷 1361-1366页

作者：缪芬芳王海燕白昀刘茂军冯志新熊祺琰白方方邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

为了获得针对猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)DnaK蛋白质的单克隆抗体,利用Mhp全菌抗原免疫小鼠,采用杂交瘤技术制备Mhp DnaK蛋白质的单抗。获得了3株可稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3A8、3E2及5D10。3株单... 详细信息

为了获得针对猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)DnaK蛋白质的单克隆抗体,利用Mhp全菌抗原免疫小鼠,采用杂交瘤技术制备Mhp DnaK蛋白质的单抗。获得了3株可稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3A8、3E2及5D10。3株单抗的Ig重链均为IgG1,轻链均为κ链。Western Blot分析结果显示,3A8与猪鼻支原体和Mhp均有反应,3E2和5D10只与Mhp反应,同时3E2和5D10能与Mhp 168株105代、J株、临床分离株XLW-1、XLW-2、XLW-3、XLW-4、AH、WX产生特异性反应。采用间接ELISA测得3株单抗腹水与DnaK重组蛋白质及Mhp 168全菌蛋白质反应效价均为1∶1 000 000。单抗3A8为针对Mhp和猪鼻支原体(Mycoplasmahyorhinitis,Mhr)共同抗原表位的单抗;3E2和5D10为猪肺炎支原体特异性抗体,且抗体效价高。

关键词：猪肺炎支原体 DnaK蛋白质单克隆抗体

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