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第3届全国人畜共患病学术研讨会

作者：陆昌华谭业平胡肄农臧一天江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

实行动物及动物产品可追溯管理是保障畜产品有效供给,维护公共卫生安全的重要措施。然而仅采取动物及动物产品标识技术与可追溯管理对肉食品出现问题进行溯源与召回,只是食品安全链条的末端,对于食品安全链条的前端——源头的预警和预防... 详细信息

实行动物及动物产品可追溯管理是保障畜产品有效供给,维护公共卫生安全的重要措施。然而仅采取动物及动物产品标识技术与可追溯管理对肉食品出现问题进行溯源与召回,只是食品安全链条的末端,对于食品安全链条的前端——源头的预警和预防,将更为重要。本文就如何进行动物及动物产品质量安全的风险分析,如何引进与消化吸收国外动物卫生预警防控技术与风险分析评估方法 ,构建科学、合理的运行机制等内容进行了阐述。同时,针对中国在动物卫生工作方面与世界主要发达国家存在的差距,提出应如何完善的对策。

关键词：动物动物产品动物卫生风险分析公共卫生

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H9亚型禽流感病毒静脉注射攻击鸭的试验研究

H9亚型禽流感病毒静脉注射攻击鸭的试验研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第一次全国鸭病防控高级研讨会

作者：刘宇卓李银张敬峰黄欣梅赵冬敏江苏省农业科学院兽医研究所·农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心，南京 210014

取H9亚型禽流感NJ05株及F株病毒液，静脉注射攻击易感鸭，并用SPF鸡胚分离攻毒后1-5天喉拭子，研究病毒在鸭体内的复制情况。研究结果表明：NJ05株攻毒后1-5天病毒分离阳性情况为0／10、0／10、8／10、6／10、0／10、F株为7／10、8／10... 详细信息

取H9亚型禽流感NJ05株及F株病毒液，静脉注射攻击易感鸭，并用SPF鸡胚分离攻毒后1-5天喉拭子，研究病毒在鸭体内的复制情况。研究结果表明：NJ05株攻毒后1-5天病毒分离阳性情况为0／10、0／10、8／10、6／10、0／10、F株为7／10、8／10、10／10、2／10、4／10。

关键词： H9亚型禽流感静脉注射易感鸭

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大肠杆菌0157:H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制

大肠杆菌0157:H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制

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2011年中国微生物学会学术年会暨中国微生物学会第十次全国会员代表大会

作者：夏兴霞王永山孟祥升张雪寒何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心，南京 210014

用*** O157：H7菌体免疫BALB/c鼠,，制备免疫脾细胞，与SP2/0骨髓瘤细胞融合，获得了16株分泌单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。其中，1D3、2E7和2H7三株为0157：H7特异单克隆抗体，Ig亚类分别为IgMK、IgG2bK和IgG2bK，腹水抗体ELISA效... 详细信息

用*** O157：H7菌体免疫BALB/c鼠,，制备免疫脾细胞，与SP2/0骨髓瘤细胞融合，获得了16株分泌单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。其中，1D3、2E7和2H7三株为0157：H7特异单克隆抗体，Ig亚类分别为IgMK、IgG2bK和IgG2bK，腹水抗体ELISA效价分别为103、105和106。用胶体金标记纯化的单克隆抗体2E7，制备金标抗体玻璃纤维素膜;将纯化的2H7和羊抗鼠IgG分别作为检测和对照捕捉抗体包被于硝酸纤维素膜(NC)上;组装成双抗夹心法0157：H7胶体金免疫层析检测试纸条。用该试纸条可特异检测0157：H7，敏感度为106cFU/ml，与相同单克隆抗体2H7和2E7建立的0157：H7夹心ELISA检测方法的敏感度相当，试纸条简便快速，在1-5min内可得出检测结果，便于0157：H7的临床快速诊断与现场检测样品的快速筛查。

关键词：大肠杆菌单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条

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犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因在昆虫细胞中的表达及其抗原性分析

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中国动物传染病学报 2011年第5期19卷 21-26页

作者：毕振威王永山范红结江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 南京农业大学动物医学院南京210095

将非典型犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)的核衣壳蛋白(nucleocapsid protein,N)基因克隆到杆状病毒表达系统供体质粒pFastBacHTA中,构建含N基因的重组供体质粒pFastBac-N,转化*** DH10Bac感受态细胞,经筛选获得含N基因的重组Bacmid DNA(rBacmid-N),脂质体法转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒vBacmid-N。用vBacmid-N感染昆虫细胞Sf9,免疫印迹(Western blot)分析,在62kDa处出现一条特异蛋白条带,与重组N蛋白的理论值相符合;间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescent assay,IFA)检测,vBacmid-N感染的昆虫细胞sf9出现特异绿色荧光。以纯化的重组N蛋白为抗原建立CDV抗体间接ELISA检测方法,犬CDV阳性血清A450大于0.40,而犬CDV阴性血清A450小于0.05,显示了良好的抗原特异性与稳定性。

关键词：犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因昆虫细胞真核表达杆状病毒

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H9亚型禽流感、传染性喉气管炎及水禽黄病毒病流行动态与防控

H9亚型禽流感、传染性喉气管炎及水禽黄病毒病流行动态与防控

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第五届南京农业大学畜牧兽医学术年会----家禽高效养殖与重大疫病防控研讨会

作者：李银江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京 210014

从2008年11月份开始,该病几乎每年冬天均会发生,但2010—2011年度的这次最为严重,表现为反复发生。主要表现为支气管有黄白色干酪样栓子堵塞,发病鸡呼吸困难,窒息死亡。该病主要发生日龄较小的鸡,一般在12～29日龄,平均25日龄,发病率100... 详细信息

从2008年11月份开始,该病几乎每年冬天均会发生,但2010—2011年度的这次最为严重,表现为反复发生。主要表现为支气管有黄白色干酪样栓子堵塞,发病鸡呼吸困难,窒息死亡。该病主要发生日龄较小的鸡,一般在12～29日龄,平均25日龄,发病率100％,死亡高峰为发病后的3-10 d,死亡率一般在15％～40％之间,最高80．59％,平均21．73％。

关键词： H9亚型禽流感传染性喉气管炎水禽黄病毒病流行动态临床防控

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用信息化数据管理思路浅析标准化示范猪场建设的产加销流程

用信息化数据管理思路浅析标准化示范猪场建设的产加销流程

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中国畜牧兽医学会信息技术分会2011年学术研讨会

作者：陆昌华胡肄农江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京 210014

改革开放30多年来，随着中国畜牧业生产力方式的转变，集约化、规模化和专业化饲养水平的不断提高，特别是加入WTO后，面对国际市场经济一体化进程，要求中国畜牧信息化数据管理体系早日与国际接轨，为未来中国畜产品开拓广阔的国际市... 详细信息

改革开放30多年来，随着中国畜牧业生产力方式的转变，集约化、规模化和专业化饲养水平的不断提高，特别是加入WTO后，面对国际市场经济一体化进程，要求中国畜牧信息化数据管理体系早日与国际接轨，为未来中国畜产品开拓广阔的国际市场。然而近几年中国年畜产品增加值占居世界的80％，但畜产品出口仅占生产总量的1％。究其原因，关键是中国的生猪生产规模化、产业化水平较低，缺乏完善健全的养猪业支持体系，市场信息体系不健全与人才缺失等诸多因素，常引起养猪业跌入低谷，发生剧烈波动，产销体系风险加大，难以平稳地发展。因此，只有加大资本投入，采用信息化数据管理技术，多使用现代化、自动化的设施设备，克服人为因素，尽量减少人的参与，才能实现标准化示范猪场科学管理的目的。

关键词：猪场饲养管理产销流程信息化管理标准化猪场

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鸭鹅脑炎—卵巢炎综合征病毒的研究

鸭鹅脑炎—卵巢炎综合征病毒的研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第一次全国鸭病防控高级研讨会

作者：李银黄欣梅赵冬敏钮慧敏刘宇卓张敬峰江苏省农业科学院兽医研究所，农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室，国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏南京 210014

为弄清2010年4月以来采食量锐减、表现神经症状和产蛋率、孵化率大幅降低发病鸭、鹅的发病原因，研究致病病原的生物学特性。本研究对发病鸭、鹅的临床症状、病理变化、发病日龄和死亡率进行了调查。从采集的发病鸭、鹅病料中进行病原... 详细信息

为弄清2010年4月以来采食量锐减、表现神经症状和产蛋率、孵化率大幅降低发病鸭、鹅的发病原因，研究致病病原的生物学特性。本研究对发病鸭、鹅的临床症状、病理变化、发病日龄和死亡率进行了调查。从采集的发病鸭、鹅病料中进行病原分离，采用DNase—SISPA方法对病原进行鉴定，测定病原的基因序列，对分离到的病原进行部分生物学特性的研究。调查发现，2010年4月开始，中国东部、南部各省(市、区)水禽相继发生了一种新的疫病，发病动物包括种鸭、蛋鸭、肉鸭和种鹅、肉鹅。该病临床主要表现为采食量及产蛋率大幅下降甚至绝食、停产，部分出现腿瘫、摇头等神经症状，死亡率为5％-55％。死亡禽和胚体肌肉和卵泡出血，与病鸭、病鹅接触的鸡未见发病。采用敏感鸭胚从发病肉鹅、种鹅、肉鸭和种鸭均分离到病毒，采用DNase—SISPA方法，按照RNA病毒途径得到肉鹅分离株JS804的S1、S2和S3三个基冈相关片段，S1和S3与坦布苏病毒E基因的同源性分别为96％和93％，S2与坦布苏病毒NS5基因同源性为88％。设计1对特异性引物，扩增出JS804毒株E基因985bp片段，登录号为JF302663;在此基础上，参考Bagaza病毒和Rocio病毒的全基因组序列，设计了10对重叠引物扩增出JS804毒株全基因组序列，登录号为JF895923，基因组全长10，916个核苷酸，只包含一个10，278bp的阅读框，编码3425个氨基酸。构建了JS804毒株E基因的原核表达质粒，表达的融合蛋白大小在70KD左右。诱导后5～6h表达量最高。JS804毒株对2日龄和8日龄樱桃谷鸭的致死率分别为4／9和3／6，病毒粒子大小为45—55nm，病毒感染乳鼠脑组织抗原的血凝价为2(5)，病毒可以在鸭胚、鹅胚和SPF鸡胚上繁殖，病毒在Vero细胞的毒价为10(5.884)TCID(50)，建立了病原的RT—PCR和间接免疫荧光检测方法。

关键词：鸭鹅脑炎—卵巢炎综合征致病病原生物学特性

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鸭传染性浆膜炎疫情预测预报初探

鸭传染性浆膜炎疫情预测预报初探

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第一次全国鸭病防控高级研讨会

作者：陆昌华李银胡肄农江苏省农业科学院兽医研究所，农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室，国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏南京 210014

20世纪40年代(德)费菜泰姆首先提出了预测技术理论，随着计算机的推广应用，60年代预测理论及其应用得到了迅速发展，并逐渐成为一门自成体系的学科。在我国动物疫病预测方法研究起步较晚，80年代以后才得到较快的发展。近年来，为了积... 详细信息

20世纪40年代(德)费菜泰姆首先提出了预测技术理论，随着计算机的推广应用，60年代预测理论及其应用得到了迅速发展，并逐渐成为一门自成体系的学科。在我国动物疫病预测方法研究起步较晚，80年代以后才得到较快的发展。近年来，为了积极应对突发疫病的发生，各级动物防疫部门加大预警预测体系的研究，本文以鸭传染性浆膜炎为案例，采用直接预测法和德尔菲法进行了该病疫情预测预报的探索。以期存疫情发生早期能够及时发现，提出警示，并采取快速应对措施，减少疫情对社会和经济造成负面影响。

关键词：鸭传染性浆膜炎动物疫情预测技术

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规模猪场PRRS风险因素分析

规模猪场PRRS风险因素分析

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中国畜牧兽医学会2011学术年会

作者：谭业平胡肄农臧一天陆昌华江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京 210014

本文根据PRRS流行病学特性和传染病发生与流行的三个必备环节“传染源-传播途径-易感动物”，结合规模化猪场生产管理实际，采用风险列举法对PRRSV侵入猪场和场内传播流行的风险因素进行了全面系统的分析。确立了规模化猪场PRRS主要风... 详细信息

本文根据PRRS流行病学特性和传染病发生与流行的三个必备环节“传染源-传播途径-易感动物”，结合规模化猪场生产管理实际，采用风险列举法对PRRSV侵入猪场和场内传播流行的风险因素进行了全面系统的分析。确立了规模化猪场PRRS主要风险因子，为进一步开展规模猪场PRRS风险评估研究，制订科学有效的PRRS风险管理措施以降低或消除PRRS风险奠定了良好基础。

关键词：规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征风险评估生产管理

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家兔支气管败血波氏杆菌重组蛋白DNT1的原核表达及其间接ELISA方法的建立

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中国比较医学杂志 2011年第4期21卷 47-51页

作者：赵宁恽时锋王芳范志宇胡波刘涛江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病免疫与诊断重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京军区南京总医院比较医学科江苏南京210002

目的表达支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)DNT蛋白,并以此建立检测Bb抗体的间接ELISA方法。方法参照GenBank公布的猪源支气管败血波氏杆菌dnt基因序列(AB020025)针对其N-端设计了一对特异性引物,PCR扩增出相应的核苷... 详细信息

目的表达支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)DNT蛋白,并以此建立检测Bb抗体的间接ELISA方法。方法参照GenBank公布的猪源支气管败血波氏杆菌dnt基因序列(AB020025)针对其N-端设计了一对特异性引物,PCR扩增出相应的核苷酸片段。将PCR扩增产物连接至原核表达载体pET-28a(+)载体中,以*** BL21(DE3)为表达菌株进行诱导表达,以纯化重组蛋白DNT1作为诊断抗原,通过探索最佳抗原包被量和抗体血清稀释倍数,建立检测支气管败血波氏杆菌重组蛋白DNT1抗体的ELISA方法。结果成功克隆了dntN-端的基因序列,并在*** BL21(DE3)中获得高效表达,经SDS-PAGE、Western blot分析显示重组蛋白DNT1具有良好的抗原性。应用重组蛋白DNT1为抗原建立了检测Bb血清抗体的间接ELISA诊断方法。试验确定重组蛋白DNT1抗原的包被浓度为6.25μg/mL,最适血清稀释度为1∶100。结论建立的ELISA检测方法,不仅为Bb抗体检测提供了一种比较实用的血清学检测手段,也为进一步开发Bb检测试剂盒奠定了基础。

关键词：兔支气管败血波氏杆菌坏死毒素(DNT) 原核表达间接ELISA

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