检索结果-内蒙古大学图书馆

江苏农业学报 2017年第2期33卷 -页

作者：赵冬敏刘宇卓黄欣梅韩凯凯杨婧刘青涛毕可然李银江苏省农业科学院兽医研究所/国家兽用生物制品工程技术研究中心/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室江苏南京210014

为了探讨原核表达的坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白对于坦布苏病毒感染的免疫保护作用,利用IPTG诱导重组大肠杆菌表达坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白,Anti-FLAG M2 Affinity Gel纯化后进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。经SDS-PAGE和We... 详细信息

为了探讨原核表达的坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白对于坦布苏病毒感染的免疫保护作用,利用IPTG诱导重组大肠杆菌表达坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白,Anti-FLAG M2 Affinity Gel纯化后进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。经SDS-PAGE和Western blot鉴定,纯化后坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白仅有单一目的条带。免疫组小鼠血清ELISA效价均达4.67±0.11(lg10)。攻毒保护试验结果表明,免疫组小鼠体质量在攻毒9 d后高于对照组,荧光定量RT-PCR检测结果显示,攻毒后免疫组小鼠脑、肝脏、脾脏组织中坦布苏病毒核酸含量均低于对照组。表明使用原核表达的坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白免疫可诱导产生高水平抗体,并提供良好的免疫保护力,为开发有效的坦布苏病毒亚单位疫苗提供依据。

关键词：坦布苏病毒 E蛋白结构域I/II 免疫保护

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母猪心脏外胸自动测温替代手工直肠测温方法研究

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中国医疗设备 2018年第A02期33卷 95-97页

作者：王丰郁达威胡肄农俞正玉涂枫郝飞何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室江苏南京210014 江苏省农业科学院动物免疫工程研究所国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 江苏省农业科学院畜牧研究所江苏南京210014

本研究目的是探讨母猪可佩戴的心脏外胸自动测温方式替代直肠测温方法的可行性。本研究利用稻盛弘2无线体温发射器,对经产母猪进行体温连续远程监测,实验在普通养殖环境下进行,动物无线体温发射器每两分钟自动发射记录一次母猪外胸心脏... 详细信息

本研究目的是探讨母猪可佩戴的心脏外胸自动测温方式替代直肠测温方法的可行性。本研究利用稻盛弘2无线体温发射器,对经产母猪进行体温连续远程监测,实验在普通养殖环境下进行,动物无线体温发射器每两分钟自动发射记录一次母猪外胸心脏的体温数据,连续8天测定14头经产母猪,每天早中晚固定时间进行手工直肠测温记录,将手工测量数据与自动采集数据进行比较。结果显示,经产母猪心脏外胸测温范围为37.5℃～39.8℃,与直肠体温范围重合,且两种方式下差异小于0.5℃的数据量为70.91%,表明母猪心脏外胸自动测温方法可替代传统的直肠手工测温方法。

关键词：母猪可佩戴测温设备

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智能化畜禽养殖场人工智能技术的应用与展望

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天津农业科学 2018年第7期24卷 34-40页

作者：陆蓉胡肄农黄小国谭业平陆昌华江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京市测绘勘查研究院江苏南京210004 常州市康乐农牧有限公司江苏常州213149

回顾国内外学者应用人工智能领域中的专家系统、机器学习、神经网络和模式识别等技术,在畜牧生产管理、动物疾病监测、屠宰机器人、机器视觉与虚拟现实、可穿戴设备、肉品生产销售预测、及畜禽产品交易平台等方面取得的诸多研究成果。... 详细信息

回顾国内外学者应用人工智能领域中的专家系统、机器学习、神经网络和模式识别等技术,在畜牧生产管理、动物疾病监测、屠宰机器人、机器视觉与虚拟现实、可穿戴设备、肉品生产销售预测、及畜禽产品交易平台等方面取得的诸多研究成果。借鉴畜牧业发达国家经验,展望我国智能化畜禽养殖场的人工智能技术应用的产业需求、发展前景,提出技术研究和产业应用建议:提高养殖设施和工艺水平,打好畜牧业工业化基础;加强养殖过程中数据采集和信息处理能力,打好畜牧业信息化基础;集成创新养殖场智能感知控制系统、畜禽健康监测系统、养殖机器人、畜产品收割加工机器人、自动化粪污处理系统等高端技术产品,实现智慧畜牧跨越发展目标。

关键词：人工智能专家系统神经网络模式识别机器视觉

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铁离子限制下猪胸膜肺炎放线杆菌外膜囊泡的制备及其抗原性分析

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江苏农业学报 2017年第1期33卷 119-123页

作者：周俊明何孔旺倪艳秀祝昊丹温立斌俞正玉茅爱华吕立新江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

为评估猪胸膜肺炎放线杆菌外膜囊泡对小鼠免疫系统的刺激水平,以铁离子限制下体外培养猪胸膜肺炎放线杆菌shope菌株,经离心、0.22μm过滤处理后获取无细胞培养上清,继而超速离心制备细菌释放的外膜囊泡(Outer membrane vesicles,OMV),以... 详细信息

为评估猪胸膜肺炎放线杆菌外膜囊泡对小鼠免疫系统的刺激水平,以铁离子限制下体外培养猪胸膜肺炎放线杆菌shope菌株,经离心、0.22μm过滤处理后获取无细胞培养上清,继而超速离心制备细菌释放的外膜囊泡(Outer membrane vesicles,OMV),以OMV作为亚单位疫苗2次鼻腔免疫小鼠。结果表明,通过透射电镜观察可见大部分OMV直径在50 nm至100 nm之间,OMV免疫小鼠长期增质量与PBS免疫组无显著差异,同时OMV不仅能够刺激小鼠血清产生高水平的IgG,而且在小鼠肺脏中产生高水平的IgA。可见,OMV是一种高效免疫刺激物,能有效地刺激小鼠肺脏黏膜产生免疫反应。

关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌外膜囊泡 IgA 黏膜免疫

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坦布苏病毒囊膜蛋白诱导的小鼠免疫应答

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华北农学报 2017年第2期32卷 50-54页

作者：赵冬敏黄欣梅韩凯凯刘宇卓杨婧刘青涛毕可然李银江苏省农业科学院兽医研究所国家兽用生物制品工程技术研究中心农业部兽用生物制品工程技术重点实验室江苏南京210014

为了研究坦布苏病毒囊膜蛋白(E蛋白)的免疫原性,利用大肠杆菌表达系统高效表达坦布苏病毒囊膜蛋白(E蛋白)并对其诱导小鼠免疫应答进行了研究。结果表明,E蛋白免疫BALB/c小鼠后,免疫组小鼠血清中抗体效价均可达1∶51 200以上;同时,E蛋白... 详细信息

为了研究坦布苏病毒囊膜蛋白(E蛋白)的免疫原性,利用大肠杆菌表达系统高效表达坦布苏病毒囊膜蛋白(E蛋白)并对其诱导小鼠免疫应答进行了研究。结果表明,E蛋白免疫BALB/c小鼠后,免疫组小鼠血清中抗体效价均可达1∶51 200以上;同时,E蛋白可显著诱导血清中细胞因子IL-2、TNF-α和IFN-γ的表达,免疫组小鼠血清中IL-2、TNF-α的含量均极显著高于对照组(P<0.01),IFN-γ含量则显著高于对照组(P<0.05);此外,与对照组相比,E蛋白还可极显著刺激小鼠脾脏淋巴细胞的增殖,上述结果表明,E蛋白免疫后,小鼠机体可产生显著的体液免疫和细胞免疫反应。攻毒保护性试验结果显示,攻毒后,经荧光定量RT-PCR检测,E蛋白免疫组小鼠脑、肝脏、脾脏、卵巢、肾脏中坦布苏病毒载量均显著低于对照组,表明免疫E蛋白可有效抑制坦布苏病毒在小鼠各个组织中的增殖。结果表明,大肠杆菌表达的坦布苏病毒E蛋白可作为坦布苏病毒亚单位疫苗的候选抗原,为进一步预防和控制坦布苏病毒病奠定理论基础。

关键词：坦布苏病毒囊膜蛋白免疫应答亚单位疫苗

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表达IBDV AH1株VP2嵌合法氏囊素三肽基因的重组火鸡疱疹病毒的构建及免疫功能分析

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中国兽医科学 2017年第9期47卷 1073-1079页

作者：潘群兴毕振威王永山欧阳伟王晓丽孟凯夏兴霞诸玉梅江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

为研究传染性法氏囊病(IBD)重组火鸡疱疹病毒(HVT)的构建策略,以HVT FC126基因组非必需区UL44~UL45为插入位点,构建带有大肠杆菌黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸转移酶基因序列(gpt)标记的HVT转移载体质粒pUAB-gpt。然后构建表达IBDVAH1株VP2嵌合法... 详细信息

为研究传染性法氏囊病(IBD)重组火鸡疱疹病毒(HVT)的构建策略,以HVT FC126基因组非必需区UL44~UL45为插入位点,构建带有大肠杆菌黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸转移酶基因序列(gpt)标记的HVT转移载体质粒pUAB-gpt。然后构建表达IBDVAH1株VP2嵌合法氏囊素三肽(BS10)表达盒并克隆入pUAB-gpt,获得转移载体质粒pUAB-Pec-BS10-VP2-Egpt。将该转移载体与HVT DNA共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过间接免疫荧光试验(IFA)、IBDV抗体夹心ELISA检测、Western-blotting分析,结果显示,获得了表达VP2基因的重组HVT病毒rHVT-Pec-BS10-VP2。将该重组病毒免疫1日龄SPF鸡,免疫后第14天,鸡群可以检测到IBDV抗体。免疫后第21天,脾淋巴细胞增殖活性反应显著。证明IBD重组火鸡疱疹病毒构建成功。

关键词：传染性法氏囊病病毒 VP2基因法氏囊素三肽重组火鸡疱疹病毒

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H3N2亚型犬流感病毒NP蛋白的表达纯化及多克隆抗体制备

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中国动物传染病学报 2017年第1期25卷 1-6页

作者：王晓丽毕振威王永山潘群兴欧阳伟夏兴霞诸玉梅江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

将分离的H3N2亚型犬流感病毒(Canine influenza virus,CIV)A/Canine/Nanjing/11/2012(H3N2)株的核蛋白(NP)基因克隆至原核表达载体p ET28a(+)中,构建重组表达质粒p ET-NP,然后转化大肠杆菌*** Rosetta(DE)感受态细胞,经IPTG诱导后,采用SDS-PAGE和Western blot进行分析。结果显示,大肠杆菌表达的重组NP蛋白的分子量约为61 k Da,与预期相符,并能与犬CIV阳性血清发生特异性反应。将表达的重组NP蛋白进行纯化后,免疫大白兔制备抗NP蛋白多克隆抗体血清,Western blot检测该血清可与CIV的NP蛋白发生特异性反应,间接ELISA检测该多克隆抗体血清的效价达1:30 000,显示了较高的抗体效价。本研究为CIV快速检测方法的建立和流行病学调查奠定了科学依据。

关键词：犬流感病毒 H3N2亚型核蛋白原核表达多克隆抗体

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猪圆环病毒2型体外刺激猪髋动脉血管内皮细胞的炎症相关细胞因子mRNA转录分析

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江苏农业科学 2017年第21期45卷 32-34页

作者：汪伟胡屹屹何孔旺温立斌倪艳秀王小敏刘传敏江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

通过PCV2病毒感染猪髋动脉血管内皮细胞(PIEC)后炎症相关细胞因子mRNA转录水平变化,探讨PCV2感染诱导炎症产生的免疫机制。将PCV2病毒体外接种PIEC,感染不同时间后,收集样品,荧光定量PCR方法检测细胞因子IL-1β、IL-8及IL-18 mRNA转录... 详细信息

通过PCV2病毒感染猪髋动脉血管内皮细胞(PIEC)后炎症相关细胞因子mRNA转录水平变化,探讨PCV2感染诱导炎症产生的免疫机制。将PCV2病毒体外接种PIEC,感染不同时间后,收集样品,荧光定量PCR方法检测细胞因子IL-1β、IL-8及IL-18 mRNA转录水平的变化。结果显示,PCV2感染PIEC后,对促炎症细胞因子IL-1β、IL-18及趋化因子IL-8主要起上调表达作用。由此推测细胞因子在体内的综合效应会导致PCV2感染早期机体产生过度炎症反应,并趋化中性粒细胞,引发机体免疫抑制,影响机体特异性免疫应答的正常运转,为PCVD的发病创造条件。

关键词：猪圆环病毒2型猪髋动脉血管内皮细胞炎症相关细胞因子荧光定量PCR mRNA转录分析免疫机制促炎症细胞因子

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猪捷申病毒的分离鉴定及其VP1基因的序列分析

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中国兽医杂志 2017年第3期53卷 43-46页

作者：郭容利李彬温立斌范宝超何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

应用PK细胞,从临床症状上表现为腹泻的仔猪肠内容物中分离到一株病毒,对该病毒进行RT-PCR检测,证明该病毒为猪捷申病毒(PTV),命名为PTVJS2013。对该病毒进行细胞半数感染量(TCID50)测定,动物试验以及VP1蛋白基因序列测定,并与国内外16... 详细信息

应用PK细胞,从临床症状上表现为腹泻的仔猪肠内容物中分离到一株病毒,对该病毒进行RT-PCR检测,证明该病毒为猪捷申病毒(PTV),命名为PTVJS2013。对该病毒进行细胞半数感染量(TCID50)测定,动物试验以及VP1蛋白基因序列测定,并与国内外16株不同血清型PTV的VP1基因序列进行了同源性比较及系统进化树分析。结果表明,猪捷申病毒JS2013 VP1基因核苷酸与8型血清型PTV同源性达到99.6%。而与其他血清型的PTV VP1基因核苷酸的同源性仅在58.3%~74.7%之间;与国内分离的PTV-Jilin/2003/2(JN710381/PTV-8)和PTV-Fuyu/2009(HQ020378/PTV-8)亲缘关系最近,同属于PTV-8血清型一个分支。

关键词：猪捷申病毒分离与鉴定 VP1基因序列分析

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灰色关联分析在生猪代宰风险评估中的应用

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食品安全质量检测学报 2018年第17期9卷 4759-4765页

作者：赵宁陆昌华谭业平郁达威肖颖胡肄农江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 江苏雨润肉类产业集团有限公司南京211805 重庆市动物疫病预防控制中心重庆401121

目的应用灰色关联分析法对生猪代宰过程进行风险评估。方法以企业规模、车间面积、年屠宰量等为静态风险因素,布局设施、过程管理、人员资质、管理制度建立及运行等为动态风险因素,应用灰色系统理论中灰色关联分析方法对四川、重庆10个... 详细信息

目的应用灰色关联分析法对生猪代宰过程进行风险评估。方法以企业规模、车间面积、年屠宰量等为静态风险因素,布局设施、过程管理、人员资质、管理制度建立及运行等为动态风险因素,应用灰色系统理论中灰色关联分析方法对四川、重庆10个生猪代宰场进行风险评价,并与百分制评定法进行对比。结果采用2种方法对四川、重庆10个生猪代宰场风险评价,其中8号屠宰场百分制评定为79分,属于Ⅲ级(中等)范围;而采用灰色关联评判关联度为0.4241,关联序排名第5,关联度所在级别比百分制评定低一个等级,属于Ⅱ级(较低)范围。另对16个风险因素关联度大小排序结果显示:静态风险因素r_1(车间面积)和r_2(年屠宰量)为第1与第2名次;动态风险因素r_3~r_(16)中,r_7(进场)排在首位,与生猪屠宰需通过静养观察期,这一个关键因素相一致,其次是r_3(屠宰资质)和r_8(待宰)。对于r_(10)(肉品检验)、r_(14)(管理制度)和r11(无害化处理)等因素关联度次序亦符合屠宰场的生产实际。结论灰色关联评判法可提高风险防范能力和预警能力,有利于实现对不同风险等级的生猪屠宰企业进行分类管理,为监管部门基于风险分析的政策制定和监管创新提供支持。

关键词：灰色系统灰色关联分析生猪代宰风险评估肉品安全

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