检索结果-内蒙古大学图书馆

江苏农业科学 2015年第11期43卷 272-275页

作者：范志宇魏后军胡波宋艳华王芳薛家宾江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

本研究旨在对实验室制备的兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗的安全性和效力进行全面系统的研究。实验室制备了5批次兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗,按照现行《中国兽药典》附录对疫苗进行了性状、无菌检验、甲醛残留量、安全及效力... 详细信息

本研究旨在对实验室制备的兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗的安全性和效力进行全面系统的研究。实验室制备了5批次兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗,按照现行《中国兽药典》附录对疫苗进行了性状、无菌检验、甲醛残留量、安全及效力试验。结果显示,5批次疫苗无菌检验、甲醛残留量均合格;疫苗对肉兔、獭兔、毛兔3个品种家兔均安全,接种疫苗后30、60 d,剖检注射部位未见炎症反应,疫苗吸收良好,并且疫苗对怀孕母兔、未断奶仔兔、断奶幼兔也安全;对肉兔各项生产性能也没有影响,说明该疫苗具有较好的安全性。疫苗免疫21 d后,易感家兔和母兔均能抵抗兔出血症强毒攻击,说明该疫苗免疫原性良好。

关键词：兔出血症病毒杆状病毒灭活疫苗安全性试验效力试验

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肉兔阶段性使用抗球虫药物的可行性研究

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畜牧与兽医 2015年第10期47卷 121-123页

作者：魏后军范志宇薛家宾王芳胡波宋艳华胡春晖江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 江苏省金陵种兔场江苏南京211103

对妊娠期前3周母兔及56-80日龄幼兔不给球虫药进行了可行性研究。在相同的饲养管理条件下,试验组妊娠期前3周母兔及56-80日龄幼兔饲喂不加药的饲料,其余时间饲喂含地克珠利1 mg/kg的饲料;同时设对照组,饲喂添加地克珠利1 mg/kg的饲料,... 详细信息

对妊娠期前3周母兔及56-80日龄幼兔不给球虫药进行了可行性研究。在相同的饲养管理条件下,试验组妊娠期前3周母兔及56-80日龄幼兔饲喂不加药的饲料,其余时间饲喂含地克珠利1 mg/kg的饲料;同时设对照组,饲喂添加地克珠利1 mg/kg的饲料,比较不同时期试验兔死亡情况、球虫卵囊数及增重情况。结果显示：试验组及对照组均未发生球虫病,增重与对照组差异不显著（P〉0.05）。研究表明,妊娠期前3周母兔及56-80日龄幼兔不给抗球虫药是可行的,能降低成本,减少兔肉药物残留,提高经济效益。

关键词：肉兔兔球虫病地克珠利

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6日龄雏鸡混合感染坦布苏病毒和多杀性巴氏杆菌的病原学研究

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江西农业学报 2015年第4期27卷 81-84页

作者：刘宇卓宋子梁李银黄欣梅赵冬敏韩凯凯杨婧江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

对一例疑似坦布苏病毒和多杀性巴氏杆菌混合感染的6日龄鸡进行病原的分离鉴定。用套氏RT-PCR方法和常规细菌分离鉴定方法进行病毒、细菌的分离、鉴定,并对其病原的主要生物学特性进行了研究。结果表明:病毒经鉴定为坦布苏病毒,与鹅源坦... 详细信息

对一例疑似坦布苏病毒和多杀性巴氏杆菌混合感染的6日龄鸡进行病原的分离鉴定。用套氏RT-PCR方法和常规细菌分离鉴定方法进行病毒、细菌的分离、鉴定,并对其病原的主要生物学特性进行了研究。结果表明:病毒经鉴定为坦布苏病毒,与鹅源坦布苏病毒JS804株核苷酸同源性达99%;分离到的细菌为多杀性巴氏杆菌。细菌对鸡的回归试验显示,0.1mL的菌液可致20周龄SPF鸡死亡;对6周龄Balb/c小鼠的致病性试验结果表明,含约10 CFU的毒液即可在24h内致其4/4死亡。

关键词：雏鸡坦布苏病毒多杀性巴氏杆菌

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兔源多杀性巴氏杆菌C_(51-17)株ompA基因表达与免疫原性鉴定

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安徽农业科学 2015年第35期43卷 227-228,237页

作者：徐为中王芳胡波范志宇魏后军宋艳华薛家宾仇汝龙刘星江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

[目的]研究兔源多杀性巴氏杆菌C_(51-17)株omp A基因表达与蛋白免疫原性鉴定。[方法]根据Gen Bank公布的多杀性巴氏杆菌序列AE004439设计引物,经PCR扩增出兔源多杀性巴氏杆菌外膜蛋白omp A基因,开放阅读框包含1 062 bp碱基,插入到p GEX-... 详细信息

[目的]研究兔源多杀性巴氏杆菌C_(51-17)株omp A基因表达与蛋白免疫原性鉴定。[方法]根据Gen Bank公布的多杀性巴氏杆菌序列AE004439设计引物,经PCR扩增出兔源多杀性巴氏杆菌外膜蛋白omp A基因,开放阅读框包含1 062 bp碱基,插入到p GEX-6p-1质粒,构建成功重组表达载体p GEX-domp A,转入大肠杆菌BL21,经IPTG诱导高效表达出多杀性巴氏杆菌成熟重组外膜蛋白omp A。[结果]表达产物经SDS-PAGE分析,重组多杀性巴氏杆菌外膜蛋白omp A分子量在63 ku,Western blot分析显示,重组蛋白能与兔抗多杀性巴氏杆菌高免血清呈现免疫反应,表明表达的重组蛋白具有较好的免疫活性。[结论]获得的重组蛋白为家兔多杀性巴氏杆菌病诊断试剂盒和疫苗的进一步研究奠定基础。

关键词：兔多杀性巴氏杆菌 ompA 原核表达

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兔源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定

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安徽农业科学 2015年第33期43卷 108-109,145页

作者：徐为中王芳胡波范志宇魏后军宋艳华薛家宾仇汝龙刘星江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

从送检病死兔肺和肝中分离培养出5株细菌,经过细菌培养、染色镜检、生化试验、PCR鉴定和动物致病性试验对其进行鉴定。鉴定结果表明,分离到的菌株为荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌,对小鼠有较强的致病性。药敏试验结果表明,分离菌株对环丙... 详细信息

从送检病死兔肺和肝中分离培养出5株细菌,经过细菌培养、染色镜检、生化试验、PCR鉴定和动物致病性试验对其进行鉴定。鉴定结果表明,分离到的菌株为荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌,对小鼠有较强的致病性。药敏试验结果表明,分离菌株对环丙沙星、氧氟沙星、氟苯尼考、恩诺沙星和磺胺六甲氧嘧啶等药物敏感。

关键词：兔多杀性巴氏杆菌荚膜血清A型分离鉴定

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坦布苏病毒对鸭的致病性和传播特性研究

坦布苏病毒对鸭的致病性和传播特性研究

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：刘青涛李银赵冬敏刘宇卓黄欣梅杨婧韩凯凯安凤娇江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

2010年春季,在我国东部省份主要养鸭地区的鸭群中暴发了由坦布苏病毒（Tembusu Virus,TMUV）引起的疫情,主要表现为种鸭、蛋鸭采食量和产蛋率迅速下降,肉鸭拉稀、神经症状和死亡,此次疫情一直持续到2010年冬季。此后,在江苏、山东、河... 详细信息

2010年春季,在我国东部省份主要养鸭地区的鸭群中暴发了由坦布苏病毒（Tembusu Virus,TMUV）引起的疫情,主要表现为种鸭、蛋鸭采食量和产蛋率迅速下降,肉鸭拉稀、神经症状和死亡,此次疫情一直持续到2010年冬季。此后,在江苏、山东、河南等地多次出现鸭坦布苏病毒病的流行,目前该病仍在不断发生,给我国养鸭业造成了巨大经济损失。据不完全统计,鸭坦布苏病毒病仅2010年造成的经济损失就达数十亿元。但是TMUV对鸭的致病机理和传播特性仍不清楚。为此,我们以21日龄樱桃谷鸭为动物模型,对TMUV（JS804株）的致病性和传播特性进行了研究。结果显示,通过滴鼻途经攻毒(10ELD/只),病毒JS804可以引起鸭的发病;攻毒后第3天攻毒鸭均表现出采食下降,拉绿色水样粪便和精神不振等症状;随着时间的推移,有些攻毒鸭还表现出步态不稳和鼻液增多等症状;而在攻毒后第9天发病鸭逐渐恢复正常,但是偶尔还会出现拉绿色稀粪的症状。此外,体重称量的结果显示,JS804攻毒组鸭的体重增长明显慢于对照组。增殖能力和炎性细胞因子的荧光定量RT-PCR测定结果显示,病毒JS804可以在鸭的心、肝、脾、肺、肾、脑内进行增殖,并且在心、脾、肺内的增殖能力要高于其它脏器;另外,对口腔拭子和泄殖腔拭子的测定结果显示,在攻毒后的第1天攻毒鸭就可以通过其口腔和泄殖腔向外排毒,并且至少可以持续1个月;而细胞因子的测定结果显示,在攻毒后的第3天和第5天病毒JS804可以引起鸭肺、脾、脑内的促炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-8的过度应答;此外,病毒JS804在鸭肺、脑内同时也诱发了抑炎性细胞因子IL-10的过度应答,而脾内的IL-10仅仅在攻毒后第3天出现了上调表达,在攻毒后第5天又恢复至正常水平。鉴于TMUV在鸭群中的快速传播特性,我们对病毒JS804的传播途径也进行了研究。结果显示,病毒JS804可以在鸭之间进行直接触传播,这与先前的研究结果一致;此外,除了直接接触传播外病毒JS804还可以在鸭之间进行有效的粪-口传播和空气传播。因此,虽然基因系统进化树的分析结果将TMUV归属于蚊媒传播黄病毒,蚊媒传播也被认为是TMUV的一个主要传播途径,但是我们不应该忽视其它传播途径特别是粪-口途径和空气传播途径在该病毒传播过程中的作用,因为这可能与该病毒的快速传播和秋冬季节的流行有关。

关键词：坦布苏病毒测定结果鸭坦布苏病毒病传播特性

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兔多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌复合PCR方法的建立及临床应用

兔多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌复合PCR方法的建立及临床...

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中国畜牧兽医学会养兔学分会成立大会暨第一届学术交流大会

作者：范志宇魏后军胡波宋艳华王芳薛家宾徐为中苏国清江苏省农业科学院兽医研究所·农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心

本研究旨在建立检测家兔多杀性巴氏杆菌（Pm）和支气管败血波氏杆菌（Bb）的复合PCR方法。本实验室已经建立了支气管败血波氏杆菌PCR检测方法,特异性引物为P1:5'-TGAACAATGGCGTGAAAGC-3',P2:5'-TCGATAGTAGGACGGGAGGAT-3... 详细信息

本研究旨在建立检测家兔多杀性巴氏杆菌（Pm）和支气管败血波氏杆菌（Bb）的复合PCR方法。本实验室已经建立了支气管败血波氏杆菌PCR检测方法,特异性引物为P1:5'-TGAACAATGGCGTGAAAGC-3',P2:5'-TCGATAGTAGGACGGGAGGAT-3',预期扩增的DNA产物片段大小为425 bp。根据GenBank中多杀性巴氏杆菌ATP合成酶（atpB）基因的保守序列,设计一对特异性引物,P1:5'-TTCTGTTCGCTTCATCCT-3',P2:5'-CTGTTCTGTTCGCTTCATC-3',预期扩增的DNA产物片段大小为1141 bp,成功建立巴氏杆菌PCR检测方法。将两种PCR方法进行合并,对PCR反应中的Mg浓度、Taq酶浓度、DNA模板量、退火温度等进行筛选优化。反应体系:Taq DNA聚合酶0.5μL,10×PCR buffer 2.5μL,25mM MgCl2.5μL,2.5mM dNTPs2.0μL,P3、P4各1.0μL,DNA模板4.0μL,ddHO11.5μL。反应条件:94℃预热5 min;94℃变性30 s,53.9℃退火30 s,72℃复性80 s,30个循环;72℃延伸10min。经反应条件的优化,成功建立Pm、Bb复合PCR诊断方法。将Pm和Bb的DNA模板做10倍梯度稀释,连续稀释8个梯度,每个梯度取8μL模板加入复合PCR反应体系(单个反应体系含有支气管败血波氏杆菌和多杀性巴氏杆菌分别为4×10～5×10CFU)进行敏感性试验。结果显示,该方法检出的最小Pm和Bb菌数分别为40CFU和4CFU。对兔源产气荚膜梭菌、大肠杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、猪鼻支原体、链球菌的检测结果均为阴性,说明该方法具有良好的特异性。用建立的方法对2012年度至2014上半年在江苏、浙江、安徽及广东四省采集的临床鼻拭子样本共712份进行检测。结果显示,Pm阳性率为25.56%,Bb阳性率为34.55%,双阳性率为13.20%;各年度、各地区、不同品种的鼻拭子样品均能检测到支气管败血波氏杆菌和多杀性巴氏杆菌。肉兔品种的阳性率显著低于獭兔和毛兔,可能由于獭兔和毛兔比肉兔的饲养周期长有关;对南京市某兔场不同月份呼吸道鼻拭子样本检测。结果显示,在天气状况较好的4、10、11月（春秋季）和天气较热的6、7月（夏季）,Bb阳性率分别为31.21%和25.61%,Pm阳性率分别为21.47%和22.56%,Pm的检出率没有明显变化。而Bb检出率有明显差别,春秋季明显高于夏季。不同场次的临床样品检测显示,Bb的阳性率均明显高于Pm,有的阳性率甚至达到50%,可能是由于多杀性巴氏杆菌有疫苗可以用于免疫,而波氏杆菌暂时没有疫苗提供。综上结果显示,该复合PCR方法能快速、敏感地从家兔鼻拭子样品中检出Pm和Bb,为临床疾病检测和流行病学调查提供技术保障。

关键词：兔支气管败血波氏杆菌多杀性巴氏杆菌复合PCR

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嵌合双串联OVA T细胞表位的RHDV VP60蛋白免疫特性研究

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安徽农业科学 2015年第32期43卷 89-92页

作者：宋艳华张燕胡波范志宇魏后军刘星黄兵薛家宾徐为中王芳江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 山东省农业科学院家禽研究所山东济南250023

为研究RHDV VP60作为载体容纳外源片段以及递呈外源T细胞表位的能力,将双串联卵清蛋白T细胞表位插入N端、C端以及替代N端氨基酸的方式获得3种嵌合蛋白,进行免疫试验。3种嵌合蛋白分别命名为DN1、DN2和DC,将蛋白进行浓缩、纯化及定量,利... 详细信息

为研究RHDV VP60作为载体容纳外源片段以及递呈外源T细胞表位的能力,将双串联卵清蛋白T细胞表位插入N端、C端以及替代N端氨基酸的方式获得3种嵌合蛋白,进行免疫试验。3种嵌合蛋白分别命名为DN1、DN2和DC,将蛋白进行浓缩、纯化及定量,利用透射电镜观察VLPs的形成,发现均可形成形态大小与VP60相似的VLPs。将3种嵌合蛋白分别腹腔注射C57BL/6雌性小鼠,利用间接ELISA检测首免后0、4和6周小鼠血清样品中VP60特异性抗体,结果表明嵌合蛋白组与VP60组均能够诱导产生较高水平的抗VP60特异性抗体,2组间无显著差异。首免后6周,利用合成的OVA多肽刺激脾淋巴细胞,ELISPOT检测特异性IFN-γ的分泌水平,结果表明3种嵌合蛋白均能诱导特异性IFN-γ的分泌。该研究扩展了VP60作为载体可携带的外源片段的耐受性及有效递呈T细胞表位的能力,为VP60-VLPs展示系统的研究提供了理论依据。

关键词： RHDV 衣壳蛋白 OVA T细胞表位嵌合蛋白免疫原性研究

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猪气喘病的防制

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猪业观察 2015年第1期 95-99页

作者：刘茂军邵国青周勇岐冯志新王海燕甘源江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开发实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京天邦生物科技有限公司江苏南京210014

猪气喘病（猪支原体肺炎MPS,猪地方性肺炎EPS,过去曾称病毒性肺炎或PPLO）是一种直接接触、慢性呼吸道传染病。该病的病原为猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp）,主要表现咳嗽、气喘及肺部肉样或肝样病变。猪气喘病在世界范... 详细信息

猪气喘病（猪支原体肺炎MPS,猪地方性肺炎EPS,过去曾称病毒性肺炎或PPLO）是一种直接接触、慢性呼吸道传染病。该病的病原为猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp）,主要表现咳嗽、气喘及肺部肉样或肝样病变。猪气喘病在世界范围内广泛流行,发病率高、难根除,造成日增重及饲料效率降低。

关键词：猪气喘病慢性呼吸道传染病防制猪支原体肺炎猪肺炎支原体地方性肺炎病毒性肺炎直接接触

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动物卫生监督管理评估模型的构建

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江苏农业学报 2014年第2期30卷 370-375页

作者：臧一天谭业平胡肄农陆昌华江苏省农业科学院兽医研究所、农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室、国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 中国农业大学水利与土木工程学院北京100083

为了建立反映动物卫生监督管理工作效果的模型,本文通过实际调研及德尔菲专家调查法,并结合层次分析法及模糊综合评判法,构建动物卫生监督管理评估模型,利用文献定量收集及五级评定法确定模型中各指标评判值,将评判值代入所建模型,对动... 详细信息

为了建立反映动物卫生监督管理工作效果的模型,本文通过实际调研及德尔菲专家调查法,并结合层次分析法及模糊综合评判法,构建动物卫生监督管理评估模型,利用文献定量收集及五级评定法确定模型中各指标评判值,将评判值代入所建模型,对动物卫生监督管理的效果进行模拟评估。结果显示,监督运行费用投资比例、饲养环节和监督人员专业比例分别位于总排序第1、第2和第3,动物卫生监督管理多部门管理模式存在问题。该模型可用于评估动物卫生监督管理效果。

关键词：动物卫生监督管理评估模型

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