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范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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文献类型

156 篇 期刊文献
107 篇 会议

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263 篇 电子文献
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日期分布

学科分类号

237 篇 农学
- 202 篇 兽医学
- 17 篇 作物学
- 14 篇 畜牧学
- 3 篇 农业资源与环境
- 2 篇 植物保护
- 1 篇 园艺学
- 1 篇 水产
21 篇 工学
- 17 篇 生物工程
- 2 篇 农业工程
- 1 篇 仪器科学与技术
- 1 篇 控制科学与工程
- 1 篇 计算机科学与技术...
- 1 篇 环境科学与工程（可...
19 篇 理学
- 18 篇 生物学
- 1 篇 生态学
16 篇 医学
- 12 篇 基础医学(可授医学...
- 3 篇 药学(可授医学、理...
- 2 篇 临床医学
- 1 篇 公共卫生与预防医...
- 1 篇 医学技术（可授医学...
10 篇 管理学
- 6 篇 农林经济管理
- 2 篇 管理科学与工程(可...
- 2 篇 工商管理
2 篇 经济学
- 2 篇 应用经济学
1 篇 艺术学
- 1 篇 设计学（可授艺术学...

主题

26 篇 猪肺炎支原体
18 篇 原核表达
14 篇 传染性法氏囊病病...
13 篇 间接elisa
12 篇 单克隆抗体
9 篇 兔
9 篇 免疫原性
9 篇 支气管败血波氏杆...
8 篇 肠出血性大肠杆菌...
8 篇 动物卫生
8 篇 动物疫病
8 篇 克隆
8 篇 病毒样颗粒
8 篇 胶体金
8 篇 vp2基因
8 篇 动物
8 篇 表达
7 篇 兔出血症病毒
7 篇 人兽共患病
7 篇 pcr

机构

94 篇 江苏省农业科学院...
62 篇 南京农业大学
53 篇 江苏省农业科学院...
52 篇 江苏省农业科学院...
20 篇 南京天邦生物科技...
12 篇 南京军区军事医学...
11 篇 中国农业大学
10 篇 江苏省农业科学院...
9 篇 江苏省农业科学院...
8 篇 山西农业大学
7 篇 扬州大学
7 篇 江苏省农业科学院...
6 篇 江苏省农业科学院...
5 篇 江苏省农业科学院...
5 篇 江苏省农业科学院...
5 篇 江苏省农业科学院...
5 篇 南京军区南京总医...
4 篇 金陵科技学院
4 篇 江苏省农业科学院...
4 篇 农业部动物疫病诊...

作者

64 篇 何孔旺
62 篇 邵国青
53 篇 刘茂军
49 篇 王永山
45 篇 冯志新
40 篇 范志宇
40 篇 王芳
39 篇 张雪寒
39 篇 李银
39 篇 胡波
36 篇 甘源
36 篇 欧阳伟
34 篇 刘宇卓
33 篇 陆昌华
33 篇 胡肄农
31 篇 温立斌
29 篇 周俊明
28 篇 魏后军
28 篇 王海燕
28 篇 徐为中

语言

263 篇 中文

检索条件"机构=江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心，南京 210014"

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大肠杆菌O157:H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制

大肠杆菌O157:H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制

引用

第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：刘洁夏兴霞王永山张雪寒费荣梅何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院

用颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG,制备金标探针,喷涂于玻璃纤维膜上;将大肠杆菌O157:H7抗原和抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体F1分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,组装成鼠血清O157:H7抗体胶体金免疫层析检测试纸... 详细信息

用颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG,制备金标探针,喷涂于玻璃纤维膜上;将大肠杆菌O157:H7抗原和抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体F1分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,组装成鼠血清O157:H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条。实验结果:该试纸条仅与O157:H7阳性鼠血清发生特异性反应;用该试纸条与常规间接ELISA平行比较检测O157:H7免疫鼠血清,抗体效价分别为10～6和10～5,两者的敏感度相当。该试纸条操作简便,10min可出结果,适用于调查与追溯鼠O157:H7感染状况时的现场检测。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 胶体金免疫层析试纸条鼠

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动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ.分泌抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ.分泌抗大肠杆菌O...

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：夏兴霞刘洁王永山诸玉梅欧阳伟何孔旺张雪寒江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院

将***157:H7(EHEC-O157:H7)用甲醛灭活超声破碎,免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞;与SP/20骨髓瘤细胞融合后,获得七株分泌抗***157:H7单克隆抗体(mAbs)的杂交瘤细胞株,分别命名为2E7、B8、E7、D3、H7、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2bκ、IgG2a... 详细信息

将***157:H7(EHEC-O157:H7)用甲醛灭活超声破碎,免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞;与SP/20骨髓瘤细胞融合后,获得七株分泌抗***157:H7单克隆抗体(mAbs)的杂交瘤细胞株,分别命名为2E7、B8、E7、D3、H7、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2bκ、IgG2aκ、IgG1κ、IgMκ、IgMκ、IgMκ和IgG2aκ。用间接ELISA检测,E7和F1细胞培养上清液的效价为1.6×103,腹水效价均为1×1011;C3、2E7、B8、D3和H7细胞培养上清液的效价为1×101～2×102,腹水效价均为4×102～2.5×106。相加ELISA结果显示,D3和H7mAbs对应相同的抗原表位,而其它五株对应不同的抗原表位。用间接ELISA分析特异性,2E7、H7和D3为抗EHEC-O157:H7特异性单克隆抗体,其它四株mAbs与某些其他血清型的大肠杆菌有交叉反应。Western blotting表明,C3、E7和F1三株mAbs在蛋白分子量28kD处有特异性条带,2E7、D3和H7三株mAbs在蛋白分子量35kD处有特异性条带,而mAbsB8则未显示蛋白带。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 单克隆抗体(mAb) 生物制剂人兽共患病

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猪肺炎支原体原位杂交检测方法的建立

猪肺炎支原体原位杂交检测方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：路璐冯志新刘茂军吴叙苏甘源刘冬阳刘冬霞邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京天邦生物科技有限公司南京农业大学

猪肺炎支原体(***,Mhp)引起的猪支原体肺炎或称猪喘气病对猪的危害很大,是目前国内外造成养猪业重大经济损失的疾病之一。猪肺炎支原体主要通过膜蛋白吸附于猪呼吸道上皮细胞表面的纤毛顶端,影响纤毛的运动,使纤毛的顶端折断脱落,纤毛... 详细信息

猪肺炎支原体(***,Mhp)引起的猪支原体肺炎或称猪喘气病对猪的危害很大,是目前国内外造成养猪业重大经济损失的疾病之一。猪肺炎支原体主要通过膜蛋白吸附于猪呼吸道上皮细胞表面的纤毛顶端,影响纤毛的运动,使纤毛的顶端折断脱落,纤毛功能丧失,猪出现喘气症状。原位杂交是应用标记探针与组织细胞中的待测核酸杂交,再应用标记物相关的检测系统,在核酸原有的位置将其显示出来。优势在于可以定位特异核酸的表达部位。本实验采用非放射性地高

关键词：猪肺炎支原体组织原位杂交原位杂交检测

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传染性法氏囊病病毒AH1株vp2基因在昆虫细胞中的表达与应用

传染性法氏囊病病毒AH1株vp2基因在昆虫细胞中的表达与应用

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：欧阳伟王永山周宇张海彬唐雨德江苏省农业科学院兽医研究所／农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室／国家兽用生物制品工程技术研究中心南京 210014 南京农业大学动物医学院南京 210095 江苏省农业科学院兽医研究所／农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室／国家兽用生物制品工程技术研究中心南京 210014 南京农业大学动物医学院南京 210095 南京军区军事医学研究所南京 210002

将近期引起IBD免疫预防失败的传染性法氏囊病病毒(IBDV)vp2基因，定向克隆入杆状病毒表达系统的供体质粒pFastBacHTA中，构建重组供体质粒pFastBacHTA-vP2，转化Escherichia coli DH10Bac感受态，筛选重组杆状病毒表达质粒pBac-VP2。用p... 详细信息

将近期引起IBD免疫预防失败的传染性法氏囊病病毒(IBDV)vp2基因，定向克隆入杆状病毒表达系统的供体质粒pFastBacHTA中，构建重组供体质粒pFastBacHTA-vP2，转化Escherichia coli DH10Bac感受态，筛选重组杆状病毒表达质粒pBac-VP2。用pBac-VP2转染sf9昆虫细胞，获得重组杆状病毒vBac-VP2。对重组杆状病毒vBac-VP2感染的Sf9细胞，用间接免疫荧光试验(IFA)检测，具有特异性荧光;用IBDV抗体夹心ELISA检测，呈阳性反应，抗原效价达到1.6×103;用Western blotting分析，在53kDa处出现一条特异蛋白条带;电镜观察，重组Vp2蛋白能够自组装成病毒样颗粒，在感染细胞中发现了“包涵体样”结构。用HisTrapHP亲和层析柱纯化的重组Vp2蛋白作为包被抗原，建立的IBDV抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性。用重组杆状病毒感染的Sf9昆虫细胞裂解物，免疫2周龄SPF鸡，一次免疫14d后，ELISA检测抗体效价为8×102，中和抗体效价为1106，攻毒实验的存活率为30％;二次免疫14 d后，ELISA抗体效价为3.2×103，中和抗体效价为2536，存活率为100％.在实验观察7 d内，重组Vp2蛋白免疫保护鸡未显任何临床症状和病理变化，法氏囊/体重比高于对照组(P<0.05)。本实验制备的病毒样颗粒重组Vp2蛋白在研制新型IBD基因工程疫苗和检测试剂方面显示出了应用前景。

关键词：传染性法氏囊病病毒 Vp2基因病毒样颗粒包涵体样结构间接ELISA 免疫实验

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动物卫生风险管理机制构建及管理资源合理配置的初探

动物卫生风险管理机制构建及管理资源合理配置的初探

引用

中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会

作者：陆昌华黄胜海吴孜忞胡肄农白云峰白红武江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏省家禽科学研究所江苏省农业科学院资源与环境研究所

在动物卫生管理中,风险决策和不确定性无疑是很重要的,它取决于决策的制订和措施的执行。通过为什么要构建动物卫生风险管理机制,建成怎样的管理机制,该管理机制又应如何建成的阐述;提出动物卫生管理决策的基本步骤,动物卫生管理资源的... 详细信息

在动物卫生管理中,风险决策和不确定性无疑是很重要的,它取决于决策的制订和措施的执行。通过为什么要构建动物卫生风险管理机制,建成怎样的管理机制,该管理机制又应如何建成的阐述;提出动物卫生管理决策的基本步骤,动物卫生管理资源的合理配置与经济学评价;通过相关资源的合理利用和调配,以及它对动物卫生管理机制形成的影响、畜禽疫病防治投资成本效果分析、动物卫生管理技术经济指标体系评价,进一步提出动物卫生管理过程中资源合理配置的数据模型,提高动物卫生和食品安全预警能力和防控水平,促进动物及其产品的国际贸易。为建立中国有效的动物卫生风险管理及风险预警机制,提高重大动物疫病防控和动物源性食品安全管理决策水平提供科学依据。

关键词：动物卫生风险管理食品安全管理机制管理资源

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猪肺炎支原体定量PCR检测方法的建立

猪肺炎支原体定量PCR检测方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：王建波冯志新刘茂军王海燕白昀王占伟甘源刘冬阳刘冬霞邵国青江苏省农业科学院兽医研究所·农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心南京天邦生物科技有限公司山西农业大学动物科技学院

以GenBank公布的MhpP36基因序列,设计合成一对特异性引物。通过对萤光定量PCR扩增曲线、标准曲线、熔解曲线的分析,建立了以P36基因序列作为靶序列的Mhp SYBRG REEN实时荧光定量PCR检测方法。该方法准确、快速、灵敏、无污染,具有良好... 详细信息

以GenBank公布的MhpP36基因序列,设计合成一对特异性引物。通过对萤光定量PCR扩增曲线、标准曲线、熔解曲线的分析,建立了以P36基因序列作为靶序列的Mhp SYBRG REEN实时荧光定量PCR检测方法。该方法准确、快速、灵敏、无污染,具有良好的特异性、重复性,可用于Mhp培养物和组织样品的快速定量检测。

关键词：猪肺炎支原体熔解曲线扩增曲线 PCR 特异性引物猪鼻支原体检测方法

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鸡传染性法氏囊病病毒JSNJ株的分离鉴定及其部分特性研究

鸡传染性法氏囊病病毒JSNJ株的分离鉴定及其部分特性研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：王占伟王丽白方方孔猛韦艳娜刘冬阳邵国青刘茂军冯志新熊琪琰王海燕白昀吴叙苏甘源刘冬霞江苏省农业科学院兽医研究所·农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心·南京天邦生物科技有限公司江苏南京 210014 南京天邦生物科技有限公司江苏南京 210012 江苏省农业科学院兽医研究所·农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心·南京天邦生物科技有限公司江苏南京 210014

从江苏南京疑似传染性法氏囊病病毒感染的鸡场采集病料，通过临床症状、病理剖检变化、人工感染、SPF鸡胚接种、琼脂扩散试验和PCR扩增鉴定等，证实了该鸡场发生了鸡传染性法氏囊病，且从病料中分离到了纯净的传染性法氏囊病病毒。同时... 详细信息

从江苏南京疑似传染性法氏囊病病毒感染的鸡场采集病料，通过临床症状、病理剖检变化、人工感染、SPF鸡胚接种、琼脂扩散试验和PCR扩增鉴定等，证实了该鸡场发生了鸡传染性法氏囊病，且从病料中分离到了纯净的传染性法氏囊病病毒。同时，证实该毒株的毒力较强，具有标准毒株的理化特性，免疫原性也比较好。

关键词：鸡传染性法氏囊病病毒分离鉴定敏感性试验免疫原性

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传染性法氏囊病病毒AH1株vp2基因在昆虫细胞中的表达与应用

传染性法氏囊病病毒AH1株vp2基因在昆虫细胞中的表达与应用

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：欧阳伟王永山周宇张海彬唐雨德江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院南京军区军事医学研究所

将引起传染性法氏囊病IBD免疫预防失败的IBD病毒(IBDV)vp2基因,定向克隆入杆状病毒表达系统的供体质粒pFastBacHTA中,构建重组供体质粒pFastBacHTA-VP2,转化Escherichia coli DH10Bac感受态,筛选重组杆状病毒表达质粒pBac-VP2。用pBac-... 详细信息

将引起传染性法氏囊病IBD免疫预防失败的IBD病毒(IBDV)vp2基因,定向克隆入杆状病毒表达系统的供体质粒pFastBacHTA中,构建重组供体质粒pFastBacHTA-VP2,转化Escherichia coli DH10Bac感受态,筛选重组杆状病毒表达质粒pBac-VP2。用pBac-VP2转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒vBac-VP2。对重组杆状病毒vBac-VP2感染的Sf9细胞,用间接免疫荧光试验(IFA)检测,具有特异性荧光;用IBDV抗体夹心ELISA检测,呈阳性反应,抗原效价达到1.6×10～3;用western blot分析,在53 ku处出现一条特异蛋白条带;电镜观察,重组Vp2蛋白能够自组装成病毒样颗粒,在感染细胞中发现了"包涵体样"结构。用HisTrap HP亲和层析柱纯化的重组Vp2蛋白作为包被抗原,建立的IBDV抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性。用重组杆状病毒感染的Sf9昆虫细胞裂解物,免疫2周龄SPF鸡,一次免疫14 d后,ELISA检测抗体效价为8×10～2,中和抗体效价为1106,攻毒实验的存活率为30%;二次免疫14 d后,ELISA抗体效价为3.2×10～3,中和抗体效价为2536,存活率为100%。在实验观察7 d内,重组Vp2蛋白免疫保护鸡未显任何临床症状和病理变化,法氏囊/体重比高于对照组(p<0.05)。本实验制备的病毒样颗粒重组Vp2蛋白在研制新型IBD基因工程疫苗和检测试剂方面显示出了应用前景。

关键词：传染性法氏囊病病毒 Vp2基因病毒样颗粒包涵体样结构间接ELISA 免疫实验

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IBDV抗原表位与VP2组合基因的分子构建及其在昆虫细胞中的表达

IBDV抗原表位与VP2组合基因的分子构建及其在昆虫细胞中的表达

引用

第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

作者：周宇王永山范红结欧阳伟唐雨德王忠灿江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京农业大学动物医学院南京军区军事医学研究所

运用PCR重叠延伸技术将传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位5e与VP2基因连接构建组合基因VP2-5e,将其插入到杆状病毒表达系统供体质粒pFastBacHT中,转化*** DH10Bac感受态细胞,经三抗性筛选获得重组杆状病毒表达质粒pBacHT-VP2-5e,用脂质体... 详细信息

运用PCR重叠延伸技术将传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位5e与VP2基因连接构建组合基因VP2-5e,将其插入到杆状病毒表达系统供体质粒pFastBacHT中,转化*** DH10Bac感受态细胞,经三抗性筛选获得重组杆状病毒表达质粒pBacHT-VP2-5e,用脂质体法转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒vBacHT-VP2-5e。对vBacHT-VP2-5e感染的Sf9细胞,以间接免疫荧光试验(IFA)检测,具有特异性荧光;电镜检查,重组VP2-5e蛋白能够自组装成病毒样颗粒(VLP);用免疫印迹分析(Western-blotting),在59kD处出现一条特异性蛋白条带。本实验为组合基因型重组IBD多价疫苗的研究奠定了基础。

关键词：传染性法氏囊病病毒 VP2基因抗原表位组合基因表达

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应用猪瘟抗原/血清ELISA测定猪瘟兔化弱毒疫苗中的病毒含量

应用猪瘟抗原/血清ELISA测定猪瘟兔化弱毒疫苗中的病毒含量

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：唐红慧冯志新张道华刘茂军邵国青甘源刘冬阳刘冬霞刘大伟王金虎周勇歧江苏省农业科学院兽医研究所·农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心南京天邦生物科技有限公司扬州大学兽医学院

简单、快速地测定猪瘟病毒的含量是猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)生产工艺中难以解决的技术之一。本试验通过应用猪瘟抗原/血清ELISA试剂盒(IDEXX HerdCheckCo.),对已知滴度的24份HCLV半成品细胞苗和21份成品疫苗进行抗原含量测定,结果24份HCL... 详细信息

简单、快速地测定猪瘟病毒的含量是猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)生产工艺中难以解决的技术之一。本试验通过应用猪瘟抗原/血清ELISA试剂盒(IDEXX HerdCheckCo.),对已知滴度的24份HCLV半成品细胞苗和21份成品疫苗进行抗原含量测定,结果24份HCLV半成品细胞苗95.83%与兔体定型热反应结果相符,检测敏感性可达20头份/瓶(或109个病毒拷贝数/瓶)。但该方法无法区分猪瘟病毒抗原与牛流行性腹泻病毒抗原。试验结果证明,IDEXX猪瘟抗原/血清ELISA试剂盒能够稳定、快速、简单地用于HCLV细胞苗的半成品与成品的病毒含量测定,为疫苗生产的质量控制提供了一种可靠和稳定的方法。

关键词： HCLV ELISA HCLV半成品细胞苗 HCLV成品疫苗

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