检索结果-内蒙古大学图书馆

江苏农业学报 2016年第6期32卷 1367-1371页

作者：范志宇魏后军仇汝龙胡波宋艳华陈萌萌徐为中王辉薛家宾王芳江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

针对山东省某兔场发生以仔兔脾脏肿大、母兔流产为特征的传染病,本研究对发病濒死兔进行细菌分离,利用16S rRNA基因扩增技术、特异性PCR技术和生化试验对致病细菌进行鉴定,并进行了药敏试验和自制疫苗效力试验。分离菌株16S rRNA基因序... 详细信息

针对山东省某兔场发生以仔兔脾脏肿大、母兔流产为特征的传染病,本研究对发病濒死兔进行细菌分离,利用16S rRNA基因扩增技术、特异性PCR技术和生化试验对致病细菌进行鉴定,并进行了药敏试验和自制疫苗效力试验。分离菌株16S rRNA基因序列与肠炎沙门氏菌相似度大于99.0%,培养特性和生化特性符合肠炎沙门氏菌特性。分离菌株特异性PCR产物序列与肠炎沙门氏菌sef A基因的同源性为99.3%~100.0%,因此将其命名为Salmonella SD/2016。动物回归试验成功复制出该病并分离到目的细菌。自制疫苗安全性良好,对断奶幼兔能提供免疫保护。

关键词：兔肠炎沙门氏菌 16S rRNA基因扩增技术特异性PCR

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兔出血症病毒感染机体后炎性因子的检测分析

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江苏农业科学 2016年第2期44卷 238-241页

作者：仇汝龙范志宇王芳胡波宋艳华魏后军刘星徐为中薛家宾江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

兔出血症病毒(RHDV)感染成年兔可以诱导兔体内产生强烈的炎性反应,是病毒感染后急性死亡的重要原因之一。为揭示病毒感染机体后体内重要炎性因子的表达情况,采用荧光定量PCR方法检测RHDV感染后6、12、24、30、36 h兔外周血、肝脏和脾脏... 详细信息

兔出血症病毒(RHDV)感染成年兔可以诱导兔体内产生强烈的炎性反应,是病毒感染后急性死亡的重要原因之一。为揭示病毒感染机体后体内重要炎性因子的表达情况,采用荧光定量PCR方法检测RHDV感染后6、12、24、30、36 h兔外周血、肝脏和脾脏内病毒增殖情况以及IL-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ炎性因子的表达情况。结果表明,兔出血症病毒拷贝数在外周血、肝脏和脾脏内随着感染时间的变化呈快速上升的趋势。外周血、肝脏和脾脏在病毒感染中,促炎性因子IL-6和TNF-α表达水平都明显上调。肝脏促炎性因子IL-6在30 h左右达到最大值,而在外周血和脾脏中则持续上调。抑炎因子IL-10随着炎性因子的上调也随之上升,但其表达水平只有较低程度的上调。IFN-γ相对表达水平在肝脏和脾脏有短暂的上调,在外周血中则持续下调。

关键词：兔出血症病毒炎性因子荧光定量PCR 外周血脾脏肝脏

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断奶前后小鼠胃GOAT基因表达及其与胃酸分泌、胃泌素和生长抑素的关系

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江苏农业学报 2016年第3期32卷 626-630页

作者：杜改梅吴结革胡志华罗碧平张玉红韩正强刘茂军金陵科技学院动物科学与技术学院江苏南京210038 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

为阐明小鼠断奶前后胃组织中生长素(Ghrelin)和Ghrelin酰基转移酶(GOAT)基因表达和蛋白质分泌与胃功能发育之间的关系,选取新生BALB/c小鼠10窝,分别于14、21、28、35、42、49和56日龄时随机选取10只小鼠(每窝1只)处死,采集胃黏膜组织样... 详细信息

为阐明小鼠断奶前后胃组织中生长素(Ghrelin)和Ghrelin酰基转移酶(GOAT)基因表达和蛋白质分泌与胃功能发育之间的关系,选取新生BALB/c小鼠10窝,分别于14、21、28、35、42、49和56日龄时随机选取10只小鼠(每窝1只)处死,采集胃黏膜组织样和血液,定量分析基因表达、蛋白质水平和H^+-K^+-ATPase活性。结果表明,胃GOAT mRNA表达和蛋白质水平均受到断奶的影响,并首次发现断奶时胃GOAT基因表达和蛋白质水平显著下降,GOAT mRNA表达与胃H^+-K^+-ATPase活性成显著正相关。胃黏膜组织中生长抑素(SS)和胃泌素(Gastrin)基因mRNA表达在21、28和35日龄较低,随后逐渐增加,45日龄时显著升高(P<0.05)。断奶前后胃可能通过自身调节GOAT水平来适应饮食的变化,表明GOAT可能参与对胃功能发育,生长抑素可能对GOAT有抑制作用。

关键词：生长素 GOAT 胃功能断奶前后小鼠

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兔出血症病毒经典毒株和变异毒株的RT-PCR鉴定

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江苏农业学报 2016年第5期32卷 1117-1121页

作者：宋艳华魏后军范志宇左园园胡波仇汝龙陈萌萌李明勇薛家宾徐为中王芳江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 山东青岛康大欧洲兔业育种有限公司山东青岛266400

本研究旨在建立鉴别兔出血症病毒经典毒株(RHDV)和变异毒株(RHDV2)的RT-PCR检测方法。根据Gen Bank中经典RHDV和RHDV2的VP60基因序列,设计2对分别结合两种基因的特异性引物。利用2对引物,以人工合成RHDV2的VP60基因构建的p MD19-T-VP60-... 详细信息

本研究旨在建立鉴别兔出血症病毒经典毒株(RHDV)和变异毒株(RHDV2)的RT-PCR检测方法。根据Gen Bank中经典RHDV和RHDV2的VP60基因序列,设计2对分别结合两种基因的特异性引物。利用2对引物,以人工合成RHDV2的VP60基因构建的p MD19-T-VP60-2和p MD19-T-VP60为模板,进行RT-PCR体系退火温度的优化,优化后的退火温度为58.2℃。对优化后的RT-PCR体系进行RHDV和RHDV2的敏感性试验、特异性试验,并用于检测RHDV人工感染样品和疑似临床样品,结果显示,该方法具有良好的特异性和敏感性,经典RHDV和RHDV2的检测限度分别为95拷贝和76拷贝的靶基因片段,且对支气管败血波氏杆菌、多杀性巴氏杆菌、产气荚膜梭菌、大肠杆菌等病原以及重组质粒p MD19-T-EBHSV的检测结果均为阴性。RHDV人工感染的组织样品检出率为100%,15份临床样品中3份为经典RHDV阳性,其他均为经典RHDV及RHDV2阴性。该方法的建立能够实现快速、特异及敏感地检测RHDV和RHDV2,为监测RHDV变异株的流行情况提供技术支撑。

关键词：兔出血症病毒经典毒株(RHDV) 兔出血症病毒变异毒株(RHDV2) RT-PCR鉴定

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不同佐剂制备的鸡坦布苏病毒灭活疫苗免疫效果比较

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江西农业学报 2016年第10期28卷 60-63页

作者：刘宇卓李嘉萍李银黄欣梅赵冬敏韩凯凯杨婧刘青涛毕可然江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

以不同材料为佐剂制备坦布苏病毒灭活疫苗,用ELISA方法检测免疫鸡不同时间抗体产生的情况,以选择最佳制苗佐剂。取40只1月龄SPF鸡,随机分成8组,以不同的佐剂组合制备疫苗,免疫7个组(包括白油组、白油+IL-2组、铝胶组、铝胶+IL-2组、蜂... 详细信息

以不同材料为佐剂制备坦布苏病毒灭活疫苗,用ELISA方法检测免疫鸡不同时间抗体产生的情况,以选择最佳制苗佐剂。取40只1月龄SPF鸡,随机分成8组,以不同的佐剂组合制备疫苗,免疫7个组(包括白油组、白油+IL-2组、铝胶组、铝胶+IL-2组、蜂胶组、蜂胶+IL-2组、IL-2组),另设不免疫对照1个组,分别于免疫前及免疫后1周、2周、3周和4周采血,用已建立的ELISA方法检测血清中的ELISA抗体,比较不同佐剂灭活疫苗的免疫效果。结果表明:以白油+IL-2作为佐剂组的灭活疫苗效果最好,产生的抗体水平优于其他各组,免疫后3周ELISA抗体可达到1∶800以上,是较理想的制备坦布苏病毒灭活疫苗的佐剂。

关键词：佐剂坦布苏病毒灭活疫苗免疫效果

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兔出血症病毒“新毒株”的流行与控制

兔出血症病毒“新毒株”的流行与控制

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第六届(2016)中国兔业发展大会

作者：王芳陈萌萌宋艳华范志宇胡波魏后军仇汝龙徐为中薛家宾江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京 210014

兔出血症病毒(RHDV)可引起兔病毒性出血症(RHD).RHD是一种急烈性、高度致死性兔传染病,给家兔养殖业造成巨大经济损失.2010年,研究人员在法国兔场发现一种新型兔出血症病毒RHDV2.与经典RHDV不同,该毒株能够感染幼龄家兔,甚至跨物种感染... 详细信息

兔出血症病毒(RHDV)可引起兔病毒性出血症(RHD).RHD是一种急烈性、高度致死性兔传染病,给家兔养殖业造成巨大经济损失.2010年,研究人员在法国兔场发现一种新型兔出血症病毒RHDV2.与经典RHDV不同,该毒株能够感染幼龄家兔,甚至跨物种感染野兔,并突破经典RHDV疫苗的免疫防线,迅速在世界范围内流行.目前中国还未有RHDV2的报道,但随时面临发生该疫情的风险.本文综述RHDV2的病原学、流行病学特征、临床症状、诊断和防控等方面的研究进展,旨在提高对RHDV2的认识,加强对RHDV2的监测,提前做好防控措施.

关键词：兔出血症病毒毒株流行病学特征临床表现病理诊断疾病防控

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快速鉴别兔出血症病毒经典毒株和变异毒株RT-PCR方法的建立

快速鉴别兔出血症病毒经典毒株和变异毒株RT-PCR方法的建立

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第六届(2016)中国兔业发展大会

作者：宋艳华魏后军范志宇左园园胡波仇汝龙陈萌萌李明勇薛家宾徐为中王芳江苏省农业科学院兽医研究所·农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心南京 210014 山东青岛康大欧洲兔业育种有限公司青岛 266400

本研究旨在建立鉴别兔出血症病毒经典毒株和变异毒株的RT-PCR检测方法,根据GenBank中经典RHDV和RHDV2的VP60基因序列,设计两对分别结合两种基因的特异性引物.利用两对引物,以人工合成RHDV2VP60基因构建的pMD19-T-VP60-2和本实验室保存... 详细信息

本研究旨在建立鉴别兔出血症病毒经典毒株和变异毒株的RT-PCR检测方法,根据GenBank中经典RHDV和RHDV2的VP60基因序列,设计两对分别结合两种基因的特异性引物.利用两对引物,以人工合成RHDV2VP60基因构建的pMD19-T-VP60-2和本实验室保存含经典RHDVVP60基因的pMD19-T-VP60为模板,进行反应条件的优化、敏感性试验、特异性试验以及RHDV人工感染样品和疑似临床样品的检测.结果显示,该方法具有良好的特异性和敏感性;经典RHDV和RHDV2的检测限度分别为95和76个拷贝的靶基因片段,且支气管败血波氏杆菌、多杀性巴氏杆菌、产气荚膜梭菌、大肠杆菌等病原以及重组质粒pMD19-T-EBHSV的检测结果均为阴性;RHDV人工感染的组织样品检出率为100％;检测临床样品15份,其中3份为经典RHDV阳性,其他样品均为经典RHDV及RHDV2阴性.该方法的建立能够实现快速、特异及敏感地检测RHDV和RHDV2,为监测RHDV变异株的流行情况提供技术支撑.

关键词：兔出血症经典毒株变异毒株鉴别诊断 RT-PCR检测

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兔多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌复合PCR方法的建立及临床应用

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江苏农业学报 2015年第2期31卷 376-381页

作者：范志宇魏后军胡波宋艳华王芳薛家宾徐为中苏国清江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

根据Gen Bank中多杀性巴氏杆菌ATP合成酶基因(atp B)的保守序列设计特异性引物,建立巴氏杆菌PCR检测方法,并与已建立的支气管败血波氏杆菌PCR检测方法进行合并,经反应条件的优化,成功建立多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌复合PCR诊... 详细信息

根据Gen Bank中多杀性巴氏杆菌ATP合成酶基因(atp B)的保守序列设计特异性引物,建立巴氏杆菌PCR检测方法,并与已建立的支气管败血波氏杆菌PCR检测方法进行合并,经反应条件的优化,成功建立多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌复合PCR诊断方法。该方法检出的最小多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌菌数分别为40 CFU和4 CFU;对兔源产气荚膜梭菌、大肠杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、猪鼻支原体、链球菌的检测结果均为阴性,说明该方法具有良好的特异性。用该方法对中国4个省份采集的临床鼻拭子样本共712份进行检测,结果显示,多杀性巴氏杆菌阳性率为25.56%,支气管败血波氏杆菌阳性率为34.55%,双阳性率为13.20%。该复合PCR方法能快速、敏感地从家兔鼻拭子样品中检出多杀性巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌,为临床疾病检测和流行病学调查提供了技术保障。

关键词：兔支气管败血波氏杆菌多杀性巴氏杆菌复合PCR

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动物疫病损失模型及治疗的经济评估模型构建

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家畜生态学报 2015年第6期36卷 5-10页

作者：陆昌华胡肄农谭业平臧一天朱学锋江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

借鉴国外在动物卫生经济学方面应用的成功经验,探讨养猪场疫病发生造成巨大经济损失问题。通过疫病对种猪生产性能和育肥猪生产能力的损害,从兽医角度与经济角度两个方面去考虑:剖析诸因素相互间的关系及对猪只的经济影响,构建适宜地数... 详细信息

借鉴国外在动物卫生经济学方面应用的成功经验,探讨养猪场疫病发生造成巨大经济损失问题。通过疫病对种猪生产性能和育肥猪生产能力的损害,从兽医角度与经济角度两个方面去考虑:剖析诸因素相互间的关系及对猪只的经济影响,构建适宜地数学模型,为不同疫病对猪只造成的不同经济损失进行计算。以决策树法建立治疗控制措施的经济评估模型,对患某一种疫病的猪只做出治疗与否的最优辅助决策。并以江苏某大型规模化猪场为案例,运用成本收益分析对猪场2010-2012年疫病防控投入与产出进行估算和衡量。提出防控资源配置优化的建议。

关键词：疫病猪场经济评估治疗模型

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一步法SYBR Green实时定量RT-PCR检测坦布苏病毒方法的建立

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江苏农业学报 2015年第4期31卷 829-833页

作者：刘青涛李银赵冬敏刘宇卓黄欣梅杨婧韩凯凯安凤娇江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

为建立快速检测坦布苏病毒（Tembusu virus，TMUV）的一步法SYBRGreen实时定量RT-PCR方法，本研究根据TMUVNS2A基因的保守序列，设计并合成了1对特异性引物，以体外转录的NS2A基因作为标准品，采用一步法实时定量RT-PCR方法检测TMUV。... 详细信息

为建立快速检测坦布苏病毒（Tembusu virus，TMUV）的一步法SYBRGreen实时定量RT-PCR方法，本研究根据TMUVNS2A基因的保守序列，设计并合成了1对特异性引物，以体外转录的NS2A基因作为标准品，采用一步法实时定量RT-PCR方法检测TMUV。结果显示该方法标准曲线的决定系数为0．997，具有良好的线性关系；灵敏度为1ul10拷贝，是常规RT-PCR方法的100倍；并且与其他病毒无交叉反应，批内和批间变异系数分别为0．11％～0．30％和0．88％～1．31％，具有良好的特异性和稳定性。该方法对于TMUV人工感染鸭泄殖腔棉拭子的检测阳性率为100％，而常规RT-PCR检测的阳性率只有71％。因此，本研究所建立的一步法实时定量RT-PCR方法灵敏度高、重复性、特异性好，可以用于TMUV的临床检测。

关键词：坦布苏病毒实时定量RT-PCR NS2A基因

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