检索结果-内蒙古大学图书馆

农业网络信息 2016年第7期 46-50页

作者：陆蓉胡肄农黄小国谭业平陆昌华江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 江苏金脉数字空间技术股份有限公司南京210004 常州市康乐农牧有限公司江苏常州213149

为构建现代化养猪场三维模型和可视化软件系统,本研究利用三维视图设计方法获得猪舍建筑及设施的模型参数,根据参数生成育肥猪舍、妊娠猪舍、产房、母猪舍和空气过滤型公猪舍等三维模型;采用三维可视化、视景仿真、数字动画技术,实现包... 详细信息

为构建现代化养猪场三维模型和可视化软件系统,本研究利用三维视图设计方法获得猪舍建筑及设施的模型参数,根据参数生成育肥猪舍、妊娠猪舍、产房、母猪舍和空气过滤型公猪舍等三维模型;采用三维可视化、视景仿真、数字动画技术,实现包括养殖区域、环保设施和文化公园等场景的现代化猪场虚拟现实创意图,从而可在互联网平台上再现养猪场环境与设施装备场景,并为猪场生产管理和监测预警物联网系统的设计与实现提供技术支持。

关键词：现代化养猪场 UI设计三维建模虚拟现实技术

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兔出血症病毒“新毒株”的流行与控制

兔出血症病毒“新毒株”的流行与控制

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第六届(2016)中国兔业发展大会

作者：王芳陈萌萌宋艳华范志宇胡波魏后军仇汝龙徐为中薛家宾江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京 210014

兔出血症病毒(RHDV)可引起兔病毒性出血症(RHD).RHD是一种急烈性、高度致死性兔传染病,给家兔养殖业造成巨大经济损失.2010年,研究人员在法国兔场发现一种新型兔出血症病毒RHDV2.与经典RHDV不同,该毒株能够感染幼龄家兔,甚至跨物种感染... 详细信息

兔出血症病毒(RHDV)可引起兔病毒性出血症(RHD).RHD是一种急烈性、高度致死性兔传染病,给家兔养殖业造成巨大经济损失.2010年,研究人员在法国兔场发现一种新型兔出血症病毒RHDV2.与经典RHDV不同,该毒株能够感染幼龄家兔,甚至跨物种感染野兔,并突破经典RHDV疫苗的免疫防线,迅速在世界范围内流行.目前中国还未有RHDV2的报道,但随时面临发生该疫情的风险.本文综述RHDV2的病原学、流行病学特征、临床症状、诊断和防控等方面的研究进展,旨在提高对RHDV2的认识,加强对RHDV2的监测,提前做好防控措施.

关键词：兔出血症病毒毒株流行病学特征临床表现病理诊断疾病防控

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山羊副流感病毒3型(CPIV3)发现鉴定、灭活疫苗及相关研究

山羊副流感病毒3型(CPIV3)发现鉴定、灭活疫苗及相关研究

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第十三届(2016)中国羊业发展大会

作者：江杰元李文良毛立郝飞李基棕杨蕾蕾周天赐邓加武张纹纹孙银华程素平王秋生黄加春江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 江苏省海安县畜牧兽医站江苏海安226600 江苏省南通点石生物科技有限公司江苏南通226600

本文对山羊副流感病毒3型(CPIV3)发现鉴定、灭活疫苗及相关研究进行了综述，文章指出山羊副流感病毒3型(Caprine parainfluenza virus type3，CPIV3)，为副粘病毒科呼吸道病毒属成员，与牛副流感病毒3型(BPIV3)、人副流感病毒3型(HPIV3... 详细信息

本文对山羊副流感病毒3型(CPIV3)发现鉴定、灭活疫苗及相关研究进行了综述，文章指出山羊副流感病毒3型(Caprine parainfluenza virus type3，CPIV3)，为副粘病毒科呼吸道病毒属成员，与牛副流感病毒3型(BPIV3)、人副流感病毒3型(HPIV3)同一病毒属，病原学检测方法血凝和血凝抑制试验，病毒中和试验，阻断ELISA方法等是检测该病毒的常见方法，探究了灭活疫苗对于该病毒的影响，免疫后14d即可检测到HI抗体和中和抗体(NAs)，HI抗体和NAs滴度分别为25.2和23.6;二次免疫后抗体滴度迅速升高，HI抗体和NAs分别达到212.2和29.4;其余两组抗体均为阴性。攻毒后，CC组抗体迅速产生，在21dpc达到28.2和24.8，说明攻毒成功。

关键词：羊呼吸道疾病山羊副流感病毒3型病毒检测灭活疫苗

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一株H3N2亚型犬流感病毒的分离与进化分析

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中国动物传染病学报 2015年第2期23卷 32-40页

作者：王晓丽毕振威王永山潘群兴欧阳伟夏兴霞诸玉梅董晨红江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

2012年从南京市某宠物医院采集的20份犬鼻拭子中分离到1株犬流感病毒（Canine influenza virus,CIV）,命名为A/Canine/Nanjing/11/2012（H3N2）.该病毒分离株的血凝素（hemagglutinin,HA）效价为28,鸡胚半数感染量（median embryoinfective dose,EID50）和最小致死量平均死亡时间（mean death time,MDT）分别为10-7.60/0.1 mL和69.6h/10-4.血凝素（HA）基因、神经氨酸酶（neuraminidase,NA）基因和核蛋白（necleoprotein,NP）基因的系统发育进化树均显示该分离株CIV位于禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）亚群中,并与H3N2亚型CIV辽宁分离株和黑龙江分离株位于同一分支上,具有最近的亲缘关系（HA基因的同源性为99.5％～99.6％,NA基因的同源性为99.0％～99.2％,NP基因的同源性为99.1％～99.3％）.氨基酸序列分析显示,该病毒分离株与其他犬流感病毒分离株的HA、NA和NP氨基酸序列存在个别位点的突变.

关键词：犬流感病毒 H3N2亚型分离变异系统发育进化树

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猪肺炎支原体对猪气管上皮细胞的黏附作用

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中国兽医学报 2015年第3期35卷 388-393页

作者：车巧林余姗姗刘茂军甘源孔猛邵国青江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

采用气管结扎、链霉蛋白酶灌注冷消化法分离猪气管上皮细胞,并以对数生长期的猪肺炎支原体(Mhp)感染猪气管上皮细胞,通过间接免疫荧光技术定性定量研究不同滴度的猪肺炎支原体对猪气管上皮细胞的黏附及相同滴度的猪肺炎支原体随时间变... 详细信息

采用气管结扎、链霉蛋白酶灌注冷消化法分离猪气管上皮细胞,并以对数生长期的猪肺炎支原体(Mhp)感染猪气管上皮细胞,通过间接免疫荧光技术定性定量研究不同滴度的猪肺炎支原体对猪气管上皮细胞的黏附及相同滴度的猪肺炎支原体随时间变化对猪气管上皮细胞的黏附。结果表明,分离的猪气管上皮细胞存活率为95%以上,广谱角蛋白染色阳性;Mhp野毒株XLW-1与猪气管上皮细胞37℃作用30min就能看到少量的支原体黏附,作用4h以上时黏附更明显,并且,二者作用1、2、4、6、10h,XLW-1对猪气管上皮细胞的黏附与阴性对照相比差异极显著(P<0.01);1×107、2.5×106 CCU/mL的XLW-1与猪气管上皮细胞37℃作用6h,能看到支原体黏附于细胞表面,并且与阴性对照相比差异极显著(P<0.01),而其他低滴度的XLW-1则看不到黏附。

关键词：猪肺炎支原体猪气管上皮细胞黏附

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鲜奶中肠出血性大肠杆菌O157∶H7的定量PCR检测

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江苏农业学报 2015年第5期31卷 1173-1178页

作者：俞正玉张碧成张强汪伟何孔旺倪艳秀温立斌李彬周萍张雪寒江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

为建立鲜奶中肠出血性大肠杆菌(Enterohaemorrhagic ***,EHEC)O157∶H7的特异性检测方法,以EHEC O157∶H7独有的遗传标志性基因Z0372为靶序列设计引物和探针,以梯度稀释的含有Z0372基因的重组质粒作为标准品进行Taqman荧光定量PCR反应,... 详细信息

为建立鲜奶中肠出血性大肠杆菌(Enterohaemorrhagic ***,EHEC)O157∶H7的特异性检测方法,以EHEC O157∶H7独有的遗传标志性基因Z0372为靶序列设计引物和探针,以梯度稀释的含有Z0372基因的重组质粒作为标准品进行Taqman荧光定量PCR反应,分析该方法的敏感性、特异性,并检测鲜奶样品以验证Taqman荧光定量PCR实用性和可靠性。结果表明,建立的定量PCR方法在1μl 1×101拷贝至1μl 1×106拷贝之间具有良好的线性关系,相关系数达到0.996,扩增效率112%。该方法的检测灵敏度为1μl 70拷贝,敏感性较高,而且特异性良好,与其他血清型大肠杆菌、沙门氏杆菌和志贺氏菌等易混淆菌株核酸之间没有交叉反应。批间和批内检测的变异系数(RSD)低于2%,表明该方法重复性良好。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157∶H7 荧光定量PCR 鲜奶

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华东地区H9N2亚型禽流感病毒HA基因的遗传演化分析

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江苏农业学报 2015年第2期31卷 382-388页

作者：黄欣梅李银刘宇卓赵冬敏杨婧韩凯凯江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

为了解华东地区H9N2亚型禽流感病毒（AIV）的遗传特点和流行规律,利用RT-PCR方法扩增华东地区2008～2013年分离的17株H9N2亚型AIV血凝素（HA）基因片段,进行序列测定和遗传进化分析,并对HA蛋白质的裂解位点、受体结合位点和潜在的糖基... 详细信息

为了解华东地区H9N2亚型禽流感病毒（AIV）的遗传特点和流行规律,利用RT-PCR方法扩增华东地区2008～2013年分离的17株H9N2亚型AIV血凝素（HA）基因片段,进行序列测定和遗传进化分析,并对HA蛋白质的裂解位点、受体结合位点和潜在的糖基化位点进行分析。结果显示,17株H9N2亚型AIV HA基因核苷酸和推导的氨基酸同源性分别为84.6%～99.3%和86.0%～99.5%,均属于欧亚分支。其中15株鸡源病毒属于Y280-like亚系,2株鸭源病毒属于G1-like亚系。HA裂解位点都是非连续碱性氨基酸,属于低致病力毒株。HA受体结合位点149、150、191、198和234位氨基酸存在变异,尤其是234位氨基酸有14株毒株变为L,表现出人流感病毒受体结合特性。有2株毒株在145位氨基酸出现新的糖基化位点,5个毒株在218位氨基酸缺失1个糖基化位点,13个毒株在313位氨基酸增加了一个新的糖基化位点。研究结果表明华东地区近年来H9N2亚型AIV存在一定的变异,应加强对该类病毒的分子流行病学监测。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒 HA基因进化分析

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鹅坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅲ的原核表达及抗原性分析

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南方农业学报 2015年第1期46卷 150-154页

作者：黄欣梅赵冬敏刘宇卓杨婧韩凯凯李银江苏省农业科学院兽医研究所/国家兽用生物制品工程技术研究中心/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室南京210014

【目的】获得鹅坦布苏病毒(GTMUV)E蛋白结构域III的原核表达重组蛋白并明确其免疫原性,为进一步研究其生物学功能及研制亚单位疫苗奠定基础。【方法】根据Gen Bank中GTMUV JS804株E蛋白结构域III的同源基因序列设计1对引物,在其两端加入... 详细信息

【目的】获得鹅坦布苏病毒(GTMUV)E蛋白结构域III的原核表达重组蛋白并明确其免疫原性,为进一步研究其生物学功能及研制亚单位疫苗奠定基础。【方法】根据Gen Bank中GTMUV JS804株E蛋白结构域III的同源基因序列设计1对引物,在其两端加入Flag标签序列和酶切位点,采用PCR扩增GTMUV的E蛋白结构域III基因(EIII),然后与p ET32a原核表达载体连接构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)后用IPTG诱导融合蛋白表达,并以Western blotting鉴定其免疫原性。【结果】PCR扩增获得携带Flag标签序列的EIII基因片段约430 bp,将其插入p ET32a载体可成功构建重组质粒p ET32a-EIII。阳性重组菌经IPTG诱导表达5 h即可得到融合蛋白,分子质量约33.0 k Da,主要以包涵体形式存在。Western blotting鉴定结果显示,融合蛋白与抗Flag标签单克隆抗体、小鼠抗坦布苏病毒多克隆抗体均可发生特异性反应,检测到预期的目的条带。【结论】GTMUV E蛋白结构域Ⅲ能在大肠杆菌中成功诱导表达,且获得的融合蛋白具有良好的免疫原性,可用于研制GTMUV诊断抗原和亚单位疫苗。

关键词：鹅坦布苏病毒 E蛋白结构域Ⅲ 原核表达免疫原性

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遗传标志性基因Z0372 PCR检测肠出血大肠杆菌O157:H7

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西南农业学报 2015年第1期28卷 409-413页

作者：张雪寒张碧成栾晓婷汪伟周俊明何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

肠出血性大肠杆菌（Enterohaemorrhagic ***,EHEC）O157：H7是重要的食源性病原菌,导致严重的人兽共患病。本文旨在建立以Z0372基因为靶基因的PCR检测技术,特异性检测EHEC O157：H7。以Z0372基因为靶序列,设计引物,建立Z0372-PCR,分析... 详细信息

肠出血性大肠杆菌（Enterohaemorrhagic ***,EHEC）O157：H7是重要的食源性病原菌,导致严重的人兽共患病。本文旨在建立以Z0372基因为靶基因的PCR检测技术,特异性检测EHEC O157：H7。以Z0372基因为靶序列,设计引物,建立Z0372-PCR,分析敏感性、特异性,并检测模拟阳性污染样品。结果表明,Z0372-PCR对纯培养物检测限103~104CFU/m L,模拟阳性污水样和肉样,增菌后检测限10~102CFU/m L（g）。非大肠杆菌O157和其他肠道病原全部为阴性扩增,只有肠出血性大肠杆菌O157：H7扩增出清晰而特异的条带。模拟阳性样品检测,条带特异,无任何杂带,测序与Gen Bank序列高度同源。因此,Z0372-PCR是特异性检测肠出血性大肠杆菌O157：H7的技术,操作简便,成本低廉,适合实验室肠道内容物、刮取物、污水和食品等的快速检测。

关键词：大肠杆菌O157:H7 Z0372 聚合酶链反应食品排泄物

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规模化猪场胸膜肺炎放线杆菌血清5型的分离与鉴定

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畜牧与兽医 2015年第7期47卷 91-93页

作者：俞正玉周俊明倪艳秀茅爱华祝昊丹吕立新李彬何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

江苏省镇江市某猪场猪出现呼吸困难,死猪肺脏有出血性纤维渗出性病变,从中分离出1株革兰阴性球杆菌,PCR鉴定该菌为胸膜肺炎放线杆菌血清5型。小鼠毒力试验显示其有较强的致病力。药敏试验显示该分离菌株对氟哌酸、头孢噻呋、庆大霉素等1... 详细信息

江苏省镇江市某猪场猪出现呼吸困难,死猪肺脏有出血性纤维渗出性病变,从中分离出1株革兰阴性球杆菌,PCR鉴定该菌为胸膜肺炎放线杆菌血清5型。小鼠毒力试验显示其有较强的致病力。药敏试验显示该分离菌株对氟哌酸、头孢噻呋、庆大霉素等11种药物敏感,对头孢曲松、万古霉素、卡那霉素、氯霉素和呋喃妥因为中介,而对洁霉素、大观霉素、链霉素、复方新诺明呈现耐药现象。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌血清5型 PCR 鉴定

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