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猪病防控的经济学评估

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猪业科学 2022年第9期39卷 24-29页

作者：陆昌华谭业平胡肄农江苏省农业科学院兽医研究所农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

随着生猪产业的迅猛发展,我国已成为世界第一猪肉生产大国。与此同时,疫病发生传播机制、病原生态学,生物安全程序评估等制订科学的动物卫生管理决策,以及重大疫病防控净化技术的集成,维护公共卫生与畜产品安全,已成为当前亟待解决的问题。

关键词：畜产品安全猪肉生产重大疫病生猪产业猪病防控病原生态学公共卫生防控净化

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自制ISCOMATRIX与CpG联合的HCA587蛋白疫苗的制备及其免疫效应评估

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南昌大学学报（医学版） 2023年第5期63卷 1-7,F0003页

作者：谭媛芳陈惠媛焦薇范秋颖邵国青熊祺琰陈娟娟南昌大学第二附属医院检验科江西省检验医学重点实验室南昌330006 江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

目的确定自制免疫刺激复合物(ISCOMATRIX)作为HCA587蛋白疫苗佐剂的有效剂量,并探讨其与CpG联合作为HCA587蛋白疫苗佐剂的免疫效力和肿瘤治疗效果。方法应用透析法将Quil A、胆固醇和磷脂制备成ISCOMATRIX,经磷钨酸负染并采用透射电子... 详细信息

目的确定自制免疫刺激复合物(ISCOMATRIX)作为HCA587蛋白疫苗佐剂的有效剂量,并探讨其与CpG联合作为HCA587蛋白疫苗佐剂的免疫效力和肿瘤治疗效果。方法应用透析法将Quil A、胆固醇和磷脂制备成ISCOMATRIX,经磷钨酸负染并采用透射电子显微镜观察自制ISCOMATRIX的结构。建立小鼠免疫模型,将联合CpG的HCA587蛋白疫苗与不同剂量的自制ISCOMATRIX佐剂混合,经尾根部皮下免疫小鼠;采用酶联免疫斑点试验(ELISpot)检测产生IFN-γ的脾细胞频数,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清HCA587特异性抗体水平。在小鼠右侧胁腹部皮下接种B16-HCA587肿瘤细胞建立荷瘤小鼠模型,按照处理方式不同将小鼠分为HCA587蛋白疫苗治疗组(接种100μL包含CpG与最佳剂量的自制ISCOMATRIX的HCA587蛋白疫苗)与PBS对照组(注射100μL的无菌PBS),使用游标卡尺测量肿瘤大小。结果自制ISCOMATRIX佐剂呈典型的蜂窝状结构,直径20~30 nm,大小均一。12、36μg(QuilA浓度分别为0.012%、0.036%)的自制ISCOMATRIX组小鼠脾细胞分泌IFN-γ的频数与商品化ISCOMATRIX阳性对照组比较,差异无统计学意义(均P>0.05),且显著高于CpG+36μg ISCOM对照组与PBS组(均P<0.0001);5μg与18μg自制ISCOMATRIX组小鼠分泌IFN-γ的脾细胞频数,高于CpG+36μg ISCOM对照组与PBS组(均P<0.0001),但低于商品化ISCOM组(P=0.004)。12、18与36μg自制ISCOMATRIX组的血清HCA587抗体水平与商品化ISCOM阳性对照组比较,差异无统计学意义(均P>0.05);与PBS组相比,12μg自制ISCOMATRIX组1×10^(4)倍稀释血清的抗体滴度显著升高(P=0.0062)。与PBS对照组相比,HCA587蛋白疫苗治疗组肿瘤生长速度减缓,且第35天测量时肿瘤大小显著较小(P=0.0181)。结论以12μg自制ISCOMATRIX作为佐剂联合CpG制备的HCA587蛋白疫苗能诱导有效的免疫应答,并抑制荷瘤小鼠的肿瘤的生长,具有一定的肿瘤治疗作用。

关键词：免疫刺激复合物(ISCOMATRIX) 自行制备 CpG HCA587蛋白疫苗免疫效应

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鸭坦布苏病毒病-H9亚型禽流感二联灭活疫苗免疫佐剂筛选

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动物医学进展 2021年第5期42卷 26-29页

作者：田宇杰嵇辛勤章丽娇刘青涛韩凯凯杨婧刘宇卓赵冬敏刘娜王梦瑶李银贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 贵州省农业科学院畜牧兽医研究所贵州贵阳550025

为筛选出理想的鸭TMUV-AIV(H9亚型)二联灭活疫苗免疫佐剂,将灭活的坦布苏病毒液和禽流感病毒(H9亚型)尿囊液分别与白油佐剂、卡波姆佐剂、铝胶佐剂、蜂胶佐剂制成抗原含量相同的TMUV-AIV二联灭活疫苗。应用阻断ELISA方法和血凝抑制方法... 详细信息

为筛选出理想的鸭TMUV-AIV(H9亚型)二联灭活疫苗免疫佐剂,将灭活的坦布苏病毒液和禽流感病毒(H9亚型)尿囊液分别与白油佐剂、卡波姆佐剂、铝胶佐剂、蜂胶佐剂制成抗原含量相同的TMUV-AIV二联灭活疫苗。应用阻断ELISA方法和血凝抑制方法测定免疫鸭血清中坦布苏病毒和禽流感病毒抗体,比较不同佐剂疫苗对试验鸭的免疫效力。结果表明,以白油作为佐剂的灭活疫苗组免疫效果最好,抗体产生快、抗体水平优于其他各组,免疫2周后60%(6/10)血清样品HI抗体可达1∶8以上,80%血清样品呈TMUV抗体阳性,是制备鸭TMUV-AIV(H9亚型)二联灭活疫苗的理想佐剂。

关键词：坦布苏病毒禽流感病毒(H9亚型) 佐剂筛选灭活疫苗

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家兔肠炎沙门氏菌病流行病学调查及防控

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中国动物传染病学报 2019年第2期27卷 42-47页

作者：郭帅范志宇王芳朱伟峰仇汝龙魏后军胡波宋艳华陈萌萌徐为中江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

2017年2月,山东省某兔场出现以母兔流产、死亡,仔兔脾脏肿大、死亡为主要临床特征的传染病。初步诊断为沙门氏菌病,实验室确诊为肠炎沙门氏菌感染。针对此疫情,我们筛选出一套快速、准确的兔肠炎沙门氏菌检测法。利用此方法对该兔场的... 详细信息

2017年2月,山东省某兔场出现以母兔流产、死亡,仔兔脾脏肿大、死亡为主要临床特征的传染病。初步诊断为沙门氏菌病,实验室确诊为肠炎沙门氏菌感染。针对此疫情,我们筛选出一套快速、准确的兔肠炎沙门氏菌检测法。利用此方法对该兔场的两个兔舍、分兔场和周边兔场样品进行肠炎沙门氏菌检测,并对不同兔场肠炎沙门氏菌分离株进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)鉴定和药敏试验。最后进行了自家灭活苗的一次免疫和两次免疫免疫效果的比较试验。结果显示:不同兔场的粪便沙门氏菌检出率为30.30%～73.33%;各场分离菌株为同一序列型,都是ST.11;不同兔场分离菌株的耐药谱明显不同,最多可耐8种药物,最少的也耐2种药物,对头孢噻肟、丁胺卡那和氟苯尼考的敏感性最高;自家苗不同次数免疫均起到了良好的保护作用,但两次免疫效果优于一次免疫。本研究为家兔沙门氏菌病的流行病学调查和防控提供了经验和参考数据。

关键词：兔肠炎沙门氏菌流行病学防控

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兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗临床免疫效力试验

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中国兽医杂志 2019年第7期55卷 30-33,I0003,I0004页

作者：范志宇王芳胡波魏后军薛家宾姜平南京农业大学动物医学院江苏南京210095 江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

为了评估兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗在临床使用中的保护效力,试验选择3批次中试产品,分别在6家临床试验兔场对不同品种、不同日龄家兔进行免疫效力评价。结果显示,6家临床试验兔场试验期间均没有发生兔出血症;免疫持续期攻毒试... 详细信息

为了评估兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗在临床使用中的保护效力,试验选择3批次中试产品,分别在6家临床试验兔场对不同品种、不同日龄家兔进行免疫效力评价。结果显示,6家临床试验兔场试验期间均没有发生兔出血症;免疫持续期攻毒试验结果显示,疫苗对肉兔、獭兔、毛兔免疫期均可以达到7个月。结果表明,兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗(BAC-VP60株)临床效力检验合格,免疫期为7个月。

关键词：兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗效力检验免疫期

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新型鹅星状病毒AHQJ18株的分离鉴定

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江苏农业学报 2019年第5期35卷 1262-1264页

作者：章丽娇黄欣梅刘飞刘青涛韩凯凯赵冬敏杨婧刘宇卓李银江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 山东鲁抗舍里乐药业有限公司山东济宁272000

星状病毒于1975年在肠炎患儿的粪便样品中被首次发现[1],随着时间的推移和检测技术的不断进步,星状病毒的种类、宿主及流行范围相继扩大。目前,星状病毒在全世界不同地区不同种类哺乳动物中的感染非常普遍,并且还能感染各种禽类[2]。星... 详细信息

星状病毒于1975年在肠炎患儿的粪便样品中被首次发现[1],随着时间的推移和检测技术的不断进步,星状病毒的种类、宿主及流行范围相继扩大。目前,星状病毒在全世界不同地区不同种类哺乳动物中的感染非常普遍,并且还能感染各种禽类[2]。星状病毒主要引起感染哺乳动物的肠道疾病,对于感染的禽类,除肠道炎症外,还可引发鸡肾脏疾病,雏鸭的病毒性肝炎等[3-5]。星状病毒为无囊膜的单股正链RNA病毒,基因组变异较大,全长约6.1~7.9 kb,包括5′UTR,3个开放性阅读框(ORF1a、ORF1b和ORF2),3′UTR及多聚腺苷酸(PolyA)尾,不同种星状病毒之间存在基因重组现象。星状病毒基因组的高度变异使其对环境和宿主具有很强的适应能力,甚至可跨种传播,是威胁人类健康和动物养殖业的重要传染病原之一。

关键词：痛风新型鹅星状病毒分离鉴定

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检测兔出血症病毒抗体胶体金试纸条的研制及初步应用

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畜牧兽医学报 2018年第3期49卷 614-619页

作者：魏后军范志宇王芳宋艳华胡波仇汝龙陈萌萌徐为中薛家宾江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

利用免疫层析技术建立快速检测兔出血症病毒(RHDV)抗体的方法,将胶体金标记重组RHDV VP60蛋白,抗VP60单抗A3C和金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)分别包被质控线(C线)和检测线(T线),通过检测强阳性、阳性、弱阳性、阴性血清优化试纸条制备条件,... 详细信息

利用免疫层析技术建立快速检测兔出血症病毒(RHDV)抗体的方法,将胶体金标记重组RHDV VP60蛋白,抗VP60单抗A3C和金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)分别包被质控线(C线)和检测线(T线),通过检测强阳性、阳性、弱阳性、阴性血清优化试纸条制备条件,并验证其性能及与血凝抑制试验的符合率。结果显示,试纸条检测阳性血清时T线、C线颜色深度相同,强阳性血清T线比C线颜色深,弱阳性血清T线比C线颜色浅,阴性血清T线不显色、C线显色,检测强阳性、阳性、弱阳性、阴性血清与血凝抑制试验的符合率分别为93.75%、88.75%、91.25%、95.00%,总的符合率为91.54%;该试纸条具有较好的特异性、敏感性、重复性和稳定性,为兔病毒性出血症流行病学调查和抗体水平监测提供了有力的检测工具。

关键词：兔病毒性出血症兔出血症病毒 VP60 胶体金试纸条抗体

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血清4型禽腺病毒六邻体蛋白的原核表达及鉴定

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华北农学报 2018年第5期33卷 106-110页

作者：刘娜刘青涛李银杨婧李祥瑞江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

通过原核表达的方法得到血清4型禽腺病毒的主要结构蛋白六邻体蛋白;根据GenBank中血清4型禽腺病毒六邻体蛋白的基因序列,设计一对特异性引物,利用普通PCR方法扩增得到hexon基因的全长序列。将PCR扩增得到的血清4型禽腺病毒六邻体基因片... 详细信息

通过原核表达的方法得到血清4型禽腺病毒的主要结构蛋白六邻体蛋白;根据GenBank中血清4型禽腺病毒六邻体蛋白的基因序列,设计一对特异性引物,利用普通PCR方法扩增得到hexon基因的全长序列。将PCR扩增得到的血清4型禽腺病毒六邻体基因片段,在其两端插入酶切位点后克隆至载体pMD18T中,经PCR鉴定和测序分析正确后,与原核表达载体pET-32 a进行连接,构建pET-32 a-hexon原核表达载体,并对其进行双酶切和测序鉴定。将构建成功的表达载体转化至BL21(DE3)中,用1 mmol/L的IPTG进行诱导表达,对得到的重组蛋白进行SDS-PAGE分析和Western Blot鉴定;经双酶切鉴定和测序鉴定,pET-32a-hexon原核表达载体构建成功,插入的六邻体蛋白基因片段大小为2 814 bp,在1 mmol/L浓度IPTG诱导3 h时重组蛋白表达量最高,且重组蛋白主要以包涵体形式存在于沉淀中。SDS-PAGE分析结果显示,融合蛋白分子量为118 ku。免疫印迹分析结果显示,融合蛋白可被抗FAdV-4的血清和HIS标签抗体特异性识别;成功表达了血清4型禽腺病毒的主要结构蛋白六邻体蛋白,且得到的重组蛋白具有良好的反应原性,可用于血清4型禽腺病毒的进一步研究中,为血清4型禽腺病毒病的预防和治疗奠定了良好的基础。

关键词：血清4型禽腺病毒六邻体蛋白原核表达

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新型鹅星状病毒AHQJ18株的分离鉴定

新型鹅星状病毒AHQJ18株的分离鉴定

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江苏省畜牧兽医学会首届“青年科技论坛”

作者：章丽娇黄欣梅刘飞刘青涛韩凯凯赵冬敏杨婧刘宇卓李银江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京 210014 山东鲁抗舍里乐药业有限公司山东济宁272000

新型鹅星状病毒是近期我国部分地区养鹅场新暴发的一种可引起雏鹅致死性痛风的新流行病原，给我国的商品鹅养殖业造成了严重的影响.2018 年7 月，安徽全椒某商品鹅场雏鹅出现精神沉郁、消瘦及四肢瘫痪等临床症状，严重的出现死亡，死亡... 详细信息

新型鹅星状病毒是近期我国部分地区养鹅场新暴发的一种可引起雏鹅致死性痛风的新流行病原，给我国的商品鹅养殖业造成了严重的影响.2018 年7 月，安徽全椒某商品鹅场雏鹅出现精神沉郁、消瘦及四肢瘫痪等临床症状，严重的出现死亡，死亡率5％-30％，剖检可见死亡雏鹅内脏表面、翅腿部关节和喙部出现明显的尿酸盐沉积.本研究通过采集患病鹅肝脏、肾脏等病变明显的组织样品，经鹅胚尿囊膜接种，分离到一株能引起鹅胚尿囊膜增厚和胚体肝脏坏死的病毒，经RT-PCR、序列比对及系统进化树分析，确定其为新型鹅星状病毒，命名为AAstV/Goose/CHN/2018/AHQJ(简称AHQJ18).该毒株的分离鉴定为雏鹅痛风流行病学的调查提供依据，同时也为其防控奠定了基础.

关键词：痛风新型鹅星状病毒分离鉴定

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H9N2亚型禽流感病毒对鸡的免疫抑制机制

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江苏农业学报 2018年第2期34卷 368-373页

作者：刘青涛李银刘娜杨婧韩凯凯刘宇卓赵冬敏黄欣梅田宇杰江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025

通过评价H9N2亚型禽流感病毒(AIVs)感染对于鸡新城疫和传染性支气管炎活疫苗免疫效力的影响,研究了H9N2 AIVs的免疫抑制机理。结果显示,H9N2 AIVs感染可降低鸡对鸡新城疫和传染性支气管炎活疫苗的抗体应答,但与对照组相比差异并不显著;... 详细信息

通过评价H9N2亚型禽流感病毒(AIVs)感染对于鸡新城疫和传染性支气管炎活疫苗免疫效力的影响,研究了H9N2 AIVs的免疫抑制机理。结果显示,H9N2 AIVs感染可降低鸡对鸡新城疫和传染性支气管炎活疫苗的抗体应答,但与对照组相比差异并不显著;而流式分析结果显示,与对照组相比H9N2 AIVs感染可显著降低鸡外周血中CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞的比率(P<0.05);抗原特异性的T淋巴细胞增殖试验结果显示,与对照组相比H9N2 AIVs感染鸡的外周血T淋巴细胞增殖活性显著下降(P<0.05);另外,H9N2 AIV感染还导致鸡血清中细胞因子IFN-γ和IL-4应答水平的下降,其中IFN-γ的应答水平与对照组相比差异显著(P<0.05)。说明H9N2 AIVs感染可抑制鸡的免疫应答,其中对细胞免疫应答的抑制更为明显。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒鸡免疫抑制

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