检索结果-内蒙古大学图书馆

江苏农业学报 2016年第5期32卷 1117-1121页

作者：宋艳华魏后军范志宇左园园胡波仇汝龙陈萌萌李明勇薛家宾徐为中王芳江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 山东青岛康大欧洲兔业育种有限公司山东青岛266400

本研究旨在建立鉴别兔出血症病毒经典毒株(RHDV)和变异毒株(RHDV2)的RT-PCR检测方法。根据Gen Bank中经典RHDV和RHDV2的VP60基因序列,设计2对分别结合两种基因的特异性引物。利用2对引物,以人工合成RHDV2的VP60基因构建的p MD19-T-VP60-... 详细信息

本研究旨在建立鉴别兔出血症病毒经典毒株(RHDV)和变异毒株(RHDV2)的RT-PCR检测方法。根据Gen Bank中经典RHDV和RHDV2的VP60基因序列,设计2对分别结合两种基因的特异性引物。利用2对引物,以人工合成RHDV2的VP60基因构建的p MD19-T-VP60-2和p MD19-T-VP60为模板,进行RT-PCR体系退火温度的优化,优化后的退火温度为58.2℃。对优化后的RT-PCR体系进行RHDV和RHDV2的敏感性试验、特异性试验,并用于检测RHDV人工感染样品和疑似临床样品,结果显示,该方法具有良好的特异性和敏感性,经典RHDV和RHDV2的检测限度分别为95拷贝和76拷贝的靶基因片段,且对支气管败血波氏杆菌、多杀性巴氏杆菌、产气荚膜梭菌、大肠杆菌等病原以及重组质粒p MD19-T-EBHSV的检测结果均为阴性。RHDV人工感染的组织样品检出率为100%,15份临床样品中3份为经典RHDV阳性,其他均为经典RHDV及RHDV2阴性。该方法的建立能够实现快速、特异及敏感地检测RHDV和RHDV2,为监测RHDV变异株的流行情况提供技术支撑。

关键词：兔出血症病毒经典毒株(RHDV) 兔出血症病毒变异毒株(RHDV2) RT-PCR鉴定

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动物及动物产品质量安全的风险评估与风险预警

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食品安全质量检测学报 2012年第1期3卷 45-52页

作者：陆昌华胡肄农谭业平臧一天江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

本文针对动物及动物产品安全涉及到的多方面、多环节和多层次的问题,确定影响动物及动物产品安全的主要因素,指出动物疫病预警研究是公共卫生应急及城市预警应急系统的重要组成部分。本文提出如何构建动物及动物性食品质量安全风险预警... 详细信息

本文针对动物及动物产品安全涉及到的多方面、多环节和多层次的问题,确定影响动物及动物产品安全的主要因素,指出动物疫病预警研究是公共卫生应急及城市预警应急系统的重要组成部分。本文提出如何构建动物及动物性食品质量安全风险预警框架、形成风险评估及预警决策的模型的方法,提出采用基于地理信息系统(Geographic Information System,GIS)的数字化监控系统,将流行病学数据库、地理图形、非空间应用模型和空间应用模型有机地结合,实现图形和数据资源共享。系统可及时跟踪疾病的蔓延,通过动物疫病流行病学图形分析,可提出适宜的防治措施,达到重大动物疫病的预警预报目的。借鉴国外成功经验,提出适合国情的风险预警框架体系研究内容,并指出在进行动物卫生评估和动物产品安全性评价时,如何提高GIS系统与风险分析在预警体系中的应用。最终为开展风险评估工作提供更多的素材,不仅能促进中国畜牧业的健康持续发展,也能满足国家制定相关政策的需求。

关键词：食品安全动物疫病风险评估风险预警

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传染性法氏囊病病毒抗原表位与乙型肝炎病毒核心抗原嵌合基因的构建及其表达产物分析

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中国预防兽医学报 2010年第11期32卷 879-883页

作者：刘小娟王永山欧阳伟张海彬王忠灿唐雨德江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 南京军区军事医学研究所江苏南京210002

为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位基因5epis的免疫效力,本研究应用重叠延伸PCR技术,在乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因的231位～232位核苷酸(77位～78位氨基酸残基)之间插入BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点,构建基于HBcAg修饰基因(mHBc)... 详细信息

为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位基因5epis的免疫效力,本研究应用重叠延伸PCR技术,在乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因的231位～232位核苷酸(77位～78位氨基酸残基)之间插入BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点,构建基于HBcAg修饰基因(mHBc)的抗原表位嵌合体基因分子载体pET-mHBc。将编码IBDV多表位基因5epis定向插入到pET-mHBc的mHBc基因中,获得嵌合体基因mHBc-5epis表达重组质粒pET-mHBc-5epis,并在大肠杆菌中表达。经SDS-PAGE分析,重组嵌合体蛋白的分子量约29 ku,表达量约占菌体总蛋白的47.6%;Western blot结果表明,重组嵌合体蛋白可与IBDV抗体反应形成1条特异性蛋白带;重组嵌合体蛋白呈病毒样颗粒(VLP),直径约100 nm～120 nm;用IBDV抗体夹心ELISA检测,抗原效价达到1∶200。本实验成功构建了5epis与HBcAg嵌合体基因,并在大肠杆菌中高效表达,具有IBDV抗原反应性的重组病毒样颗粒嵌合体蛋白,为研究其表位型基因工程疫苗提供了新途径。

关键词：传染性法氏囊病病毒抗原表位乙肝病毒核心抗原(HBcAg) 嵌合体

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PCR-SSCP技术在微生物检测中的应用

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生物技术通报 2011年第2期27卷 70-74页

作者：顾真庆冯志新王占伟刘茂军王海燕白昀邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 南京农业大学动物医学院南京210095 南京天邦生物科技有限公司南京211102

聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)是一种能够检测DNA突变的分子生物学分析技术,具有快速、简便、灵敏与适于大样本筛选的特点,近年来被广泛应用于生命科学领域的研究。对PCR-SSCP技术在微生物检测研究领域的应用和发展作简要的... 详细信息

聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)是一种能够检测DNA突变的分子生物学分析技术,具有快速、简便、灵敏与适于大样本筛选的特点,近年来被广泛应用于生命科学领域的研究。对PCR-SSCP技术在微生物检测研究领域的应用和发展作简要的介绍。

关键词： PCR-SSCP 微生物检测

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兔支气管败血波氏杆菌双夹心ELISA检测方法的建立

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江苏农业学报 2010年第1期26卷 120-125页

作者：熊富强王芳恽时锋林焱范志宇胡波赵宁江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病免疫与诊断重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京军区南京总医院比较医学科江苏南京210002 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

为建立特异性好、敏感性高、稳定可靠的兔支气管败血波氏杆菌(Bb)双夹心ELISA检测方法,制备了兔抗Bb免疫血清和小鼠抗Bb腹水单抗(Bb McAb),并将它们提纯。用方阵法筛选最佳反应浓度,用特异性试验、敏感性试验和重复性试验对该方法进行鉴... 详细信息

为建立特异性好、敏感性高、稳定可靠的兔支气管败血波氏杆菌(Bb)双夹心ELISA检测方法,制备了兔抗Bb免疫血清和小鼠抗Bb腹水单抗(Bb McAb),并将它们提纯。用方阵法筛选最佳反应浓度,用特异性试验、敏感性试验和重复性试验对该方法进行鉴定,并与PCR检测方法比较。结果表明,兔抗Bb IgG的最佳稀释度为1∶6 400,浓度为2.5 mg/L;单抗的最佳稀释度为1∶800,浓度为5.0 mg/L。特异性试验和重复性试验结果表明,该方法特异性强、重复性好,与兔常见病菌大肠埃希氏菌、多杀性巴氏杆菌和产气荚膜梭菌均不发生反应,同时与PCR检测方法的符合率为100%。

关键词：支气管败血波氏杆菌免疫血清单克隆抗体双夹心ELISA

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兔场突发兔出血症诊治报告

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中国养兔 2011年第8期 11-12,16页

作者：徐鹏范志宇王芳胡波薛家宾魏后军江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病免疫与诊断重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

兔出血症,俗称兔瘟,是由兔出血症病毒引起的以急性、高度传染性、大面积死亡为特征的家兔烈性传染病。目前,该病可由兔出血症疫苗得到很好防控,但由于免疫程序不当、主观因素导致免疫失败等原因,该病呈零星散发态势,给发病兔场造成严重... 详细信息

兔出血症,俗称兔瘟,是由兔出血症病毒引起的以急性、高度传染性、大面积死亡为特征的家兔烈性传染病。目前,该病可由兔出血症疫苗得到很好防控,但由于免疫程序不当、主观因素导致免疫失败等原因,该病呈零星散发态势,给发病兔场造成严重损失。2010年4月底,江苏溧阳市某兔场发生兔子连续死亡情况,与专家联系,初步判断为疑似兔出血症病例,后经诊断为兔出血症,立即进行兔出血症疫苗紧急免疫,从而避免该兔场发生大规模爆发和死亡。

关键词：兔出血症兔场高度传染性兔瘟免疫程序免疫失败紧急免疫烈性传染病兔病毒性出血症健康兔

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应用高分辨熔点曲线分析区分类猪圆环病毒因子P1和猪圆环病毒2型

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江苏农业学报 2010年第2期26卷 315-319页

作者：温立斌何孔旺杨汉春郭容利钟书霖周俊明李成仁陈梦海江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 中国农业大学动物医学院北京100094 扬州大学生物科学与技术学院江苏扬州225009

为评价高分辨熔点曲线分析在快速鉴别类猪圆环病毒因子P1和猪圆环病毒2型中的应用。在Cor-bett Rotor-Gene 6000定量PCR仪上,利用EvaGreen荧光染料对靶核苷酸序列进行扩增,建立HRM分析P1和PCV2的工作流程。在优化各种条件基础上,利用HR... 详细信息

为评价高分辨熔点曲线分析在快速鉴别类猪圆环病毒因子P1和猪圆环病毒2型中的应用。在Cor-bett Rotor-Gene 6000定量PCR仪上,利用EvaGreen荧光染料对靶核苷酸序列进行扩增,建立HRM分析P1和PCV2的工作流程。在优化各种条件基础上,利用HRM分析可区分相差1个碱基的靶序列。因此,HRM分析可为P1和PCV2的分子诊断提供一种新的技术手段。

关键词：高分辨熔点曲线类猪圆环病毒因子P1 猪圆环病毒2型鉴别

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深化拓展“动物标识与动物产品质量安全全程溯源体系建设”的建议

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猪业科学 2012年第9期29卷 44-47页

作者：陆昌华胡肄农江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

本文针对中国动物产品质量安全监管现状进行分析,以及面对当前农业部开展的"动物标识及疫病可追溯体系"和商务部推行的"肉类蔬菜流通追溯体系"。两个部委推行的可追溯体系,严格意义上讲,仅达到半程可追溯或局部可... 详细信息

本文针对中国动物产品质量安全监管现状进行分析,以及面对当前农业部开展的"动物标识及疫病可追溯体系"和商务部推行的"肉类蔬菜流通追溯体系"。两个部委推行的可追溯体系,严格意义上讲,仅达到半程可追溯或局部可追溯。同时指出存在制约溯源系统的焦点:因体制原因无法实现有效对接,不仅造成资源浪费,更大问题是根本达不到防范或降低动物源性食品质量安全风险。为此,如何将两大系统进行适时对接——构筑"动物产品质量安全全程溯源体系"实为必要!并针对动物标识及疫病可追溯体系在技术层面,从动物标识与识读环节、数据录入与传输环节及数据存储与管理环节,围绕核心的动物标识和数据中心,分析存在的问题,提出改进措施。指出实现动物繁育、养殖、运输、屠宰、肉制品批发、深加工零售的全程监控应用的难点,以及未来全程溯源体系建设的发展前景。

关键词：动物动物产品标识质量安全溯源体系

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我国家兔危害严重疫病流行现状调查

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中国养兔 2011年第2期 27-30页

作者：徐为中薛家宾王芳范志宇胡波徐鹏魏后军江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

2008～2010年期间,在我国华东、西南、东北、华南、华北、华中主要家兔养殖地区,调查兔场118个,存栏兔累计约126.56万只,对危害家兔生产严重的兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病、支气管败血波氏杆菌病、产气荚膜梭菌病、球虫病、皮肤... 详细信息

2008～2010年期间,在我国华东、西南、东北、华南、华北、华中主要家兔养殖地区,调查兔场118个,存栏兔累计约126.56万只,对危害家兔生产严重的兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌病、支气管败血波氏杆菌病、产气荚膜梭菌病、球虫病、皮肤螨虫病、皮肤真菌病等疾病流行现状进行了调查。结果表明:兔病毒性出血症、支气管败血波氏杆菌病、产气荚膜梭菌病、得到了较好的控制,球虫病还存在一定的发病率,多杀性巴氏杆菌病和皮肤真菌病的发病率较高。

关键词：家兔疫病调查

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动物标识及动物产品可追溯体系的建设与展望

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猪业科学 2012年第12期29卷 112-115页

作者：陆昌华胡肄农江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

如何实现动物及其产品的全程质量监控是当前的一个重大课题。而实行动物及动物产品标识与可追溯管理是有效解决动物卫生与动物产品安全问题的重要措施。借鉴发达国家溯源系统经验,介绍了中国进行可追溯系统试点研究的进展,指出实现动物... 详细信息

如何实现动物及其产品的全程质量监控是当前的一个重大课题。而实行动物及动物产品标识与可追溯管理是有效解决动物卫生与动物产品安全问题的重要措施。借鉴发达国家溯源系统经验,介绍了中国进行可追溯系统试点研究的进展,指出实现动物繁育、养殖、运输、屠宰、肉制品批发、深加工零售的全程监控应用的难点,提出适合中国国情的可追溯管理,以及展望未来可追溯体系的发展前景。

关键词：动物动物产品标识可追溯

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