检索结果-内蒙古大学图书馆

中国动物检疫 2010年第10期27卷 56-62页

作者：兰明建吴晗李岩张林国苏亮孔庆兵艾尔肯.开日木孙佩元四川省畜牧局四川成都610041 农业部兽医局北京100125 农业部外经中心北京100123 吉林延边州牧业管理局吉林延边133000 重庆市动物疾病控中心重庆401147 内蒙古农牧业厅内蒙古呼和浩特010011 新疆项目焉耆县畜牧局新疆焉耆841100 中加动物健康推广服务项目北京项目办北京100026 江苏省农业科学院兽医研究所.农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室.国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

1概要2009年7月18日至8月1日，作为中加动物健康项目的重要活动之一，受加拿大方面邀请，来自重庆、四川、内蒙古、吉林和新疆及农业部相关部门等8人参加了加拿大兽医公共卫生高级考察研讨班。现将考察情况及几点体会汇报如下。

1概要 2009年7月18日至8月1日，作为中加动物健康项目的重要活动之一，受加拿大方面邀请，来自重庆、四川、内蒙古、吉林和新疆及农业部相关部门等8人参加了加拿大兽医公共卫生高级考察研讨班。现将考察情况及几点体会汇报如下。

关键词：兽医公共卫生公共卫生体系加拿大动物健康内蒙古研讨班农业部人参

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猪链球菌2型次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)重组蛋白的酶活性和免疫原性检测

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农业生物技术学报 2009年第6期17卷 943-947页

作者：张雪寒何孔旺周俊明倪艳秀俞正玉吕立新江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

通过PCR方法从猪链球菌2型(Streptococcus suis)05ZYH33分离株基因组中扩增出次黄嘌呤核苷酸脱氢酶基因(in-osine5-monophosphate dehydrogenase,impdh),长度1064bp。PCR产物和pET28a载体分别经过EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,连接,成功地构建了重组表达质粒pET28a-impdh,并转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,经过1mmol/LIPTG诱导获得表达,蛋白大小35kD。表达蛋白具有良好的抗原性和酶活性。蛋白经过亲和层析纯化后,在37℃,pH7.0~9.0表现出较强酶活性,NADHA340介于0.662~0.816之间。

关键词：猪链球菌次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH) 克隆酶活性

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家禽支原体的防控现状及研究新进展

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中国家禽 2009年第11期31卷 5-10页

作者：邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

支原体在我国被列为二类传染病,是进出口畜产品中必检的疫病之一。禽支原体在世界范围内流行,给我国的家禽养殖业造成了极大的危害。本文就我国家禽支原体感染的现状和防控中存在的问题、研究现状以及防控措施等方面进行概述。

关键词：家禽支原体流行现状防控措施

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抗猪肺炎支原体IgA间接ELISA检测方法的建立

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畜牧兽医学报 2009年第10期40卷 1569-1574页

作者：逯晓敏冯志新刘茂军吴叙苏甘源张映邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 山西农业大学动物科技学院太谷030801

为了更准确地对猪肺炎支原体感染及免疫状况进行检测,作者拟建立抗猪肺炎支原体IgA间接ELISA检测方法。在比较了猪肺炎支原体全菌抗原和粘附因子P97R1原核表达蛋白后,选择后者作为包被抗原;以羊抗猪IgA为二抗,兔抗猪IgG-HRP作为酶标三抗... 详细信息

为了更准确地对猪肺炎支原体感染及免疫状况进行检测,作者拟建立抗猪肺炎支原体IgA间接ELISA检测方法。在比较了猪肺炎支原体全菌抗原和粘附因子P97R1原核表达蛋白后,选择后者作为包被抗原;以羊抗猪IgA为二抗,兔抗猪IgG-HRP作为酶标三抗,并分别对包被抗原的浓度、样品的孵育时间、二抗与三抗的最佳稀释度和作用时间以及显色液的作用时间作了优化。最终建立了稳定而特异的抗猪肺炎支原体IgA的间接ELISA检测方法。批间与批内试验结果证明该方法具有很好的稳定性。初步应用表明,该方法可用于猪肺炎支原体感染或免疫状态的临床监测。

关键词：猪肺炎支原体 IgA 间接ELISA

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兔支气管败血波氏杆菌菌毛粗提物3种抗体检测方法的建立及比较

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江苏农业科学 2009年第3期37卷 259-262页

作者：范志宇王欣王芳熊富强胡波张则斌徐为中江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

利用超声波处理结合TritonX-100溶解法制备粗提的菌毛抗原,建立了3种用于支气管败血波氏杆菌的抗体检测方法:琼脂免疫扩散试验(AGID)、玻片凝集试验(SAT)、间接血凝试验(IHA)。临床检测了458份兔血清样品,结果显示:HA试验的阳性检出率最... 详细信息

利用超声波处理结合TritonX-100溶解法制备粗提的菌毛抗原,建立了3种用于支气管败血波氏杆菌的抗体检测方法:琼脂免疫扩散试验(AGID)、玻片凝集试验(SAT)、间接血凝试验(IHA)。临床检测了458份兔血清样品,结果显示:HA试验的阳性检出率最高,为73.36%(336/458),AGID试验阳性63.54%(291/458),SAT试验阳性61.79%(283/458),三者平均阳性为57.20%(262/458);IHA与AGID的符合率为90.17%,IHA与SAT的符合率为86.68%,AGID与SAT的符合率为89.08%。表明IHA试验更为敏感,可用于支气管败血波氏杆菌的血清学监测。

关键词：兔支气管败血波氏杆菌琼脂免疫扩散试验玻片凝集试验间接血凝试验抗体检测

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鸡γ干扰素在酵母中的分泌表达

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浙江农业学报 2009年第5期21卷 450-454页

作者：魏雪涛李银刘宇卓张敬峰江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

根据GenBank已发表的鸡γ干扰素(ChIFN-γ)cDNA基因序列设计一对引物,以ConA刺激8 h后的鸡全血淋巴细胞提取的总RNA为模板,通过RT-PCR方法克隆出ChIFN-γ基因,将其连接到pMD18-T载体上获得阳性重组质粒。测序结果表明,该ChIFN-γ与GenB... 详细信息

根据GenBank已发表的鸡γ干扰素(ChIFN-γ)cDNA基因序列设计一对引物,以ConA刺激8 h后的鸡全血淋巴细胞提取的总RNA为模板,通过RT-PCR方法克隆出ChIFN-γ基因,将其连接到pMD18-T载体上获得阳性重组质粒。测序结果表明,该ChIFN-γ与GenBank上发表的ChIFN-γ序列的同源性可达99.6%,其含有1个495 bp的开放性阅读框架,编码164个氨基酸。通过Kpn I和Not I两个酶切位点将该基因插入酵母表达载体(pPICZa-A),并将该重组酵母ChIFN-γ载体线性化,通过电转化使ChIFN-γ基因整合到酵母(X-33)基因组上,经甲醇诱导后,成功表达出ChIFN-γ。利用Western-blotting分析测定表达的ChIFN-γ蛋白的活性。结果表明,本试验得到的重组酵母ChIFN-γ是具有反应原性的蛋白。

关键词：鸡γ干扰素克隆分泌表达

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鹅细小病毒LH株的分离鉴定

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江苏农业学报 2009年第5期25卷 1091-1094页

作者：刘宇卓李银魏雪涛张敬峰江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

采用鹅胚接种方法从南京六合具典型鹅细小病毒病病变的死亡雏鹅体内分离到1株鹅细小病毒(LH株)。在电镜下观察到该病毒液具细小病毒样粒子;8日龄健康易感雏鹅人工感染后100%发病、死亡,且具有典型鹅细小病毒病临床症状和剖检特征。在琼... 详细信息

采用鹅胚接种方法从南京六合具典型鹅细小病毒病病变的死亡雏鹅体内分离到1株鹅细小病毒(LH株)。在电镜下观察到该病毒液具细小病毒样粒子;8日龄健康易感雏鹅人工感染后100%发病、死亡,且具有典型鹅细小病毒病临床症状和剖检特征。在琼脂扩散试验中,用感染鹅胚液制备的待检沉淀抗原,能与鹅细小病毒阳性血清发生特异性反应。应用针对GPVVP3特异性引物对LH毒液进行PCR检测,扩增出的片段为1.6 kb,与目的条带大小相符。序列分析发现,扩增产物与已发表的GPV的VP3片段相比较,同源性达99%以上,表明所分离到的LH株是一株鹅细小病毒。

关键词：鹅细小病毒分离鉴定

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猪肺炎支原体黏附因子P97R1区单抗制备

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江苏农业学报 2009年第6期25卷 1438-1441页

作者：冯志新刘茂军王海燕甘源吴叙苏邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

猪肺炎支原体（Mycoplasmahyopneumoniae，Mhp）与呼吸道黏膜纤毛的特异性吸附是引起猪支原体肺炎（Mycoplasmapneumoniaeofswilqe，MPS）的先决条件.Minmn等研究表明，97蛋白R1区直接参与支原体与呼吸道纤毛的黏附，同时P97的主要抗原... 详细信息

猪肺炎支原体（Mycoplasmahyopneumoniae，Mhp）与呼吸道黏膜纤毛的特异性吸附是引起猪支原体肺炎（Mycoplasmapneumoniaeofswilqe，MPS）的先决条件.Minmn等研究表明，97蛋白R1区直接参与支原体与呼吸道纤毛的黏附，同时P97的主要抗原决定簇也位于该区域。P97R1区在猪8市炎支原体的检测诊断与致病机理研究方面具有重要意义。本研究以纯化的猪肺炎支原体全菌蛋白作为免疫原，以大肠杆菌表达的P97R1融合蛋白作为筛选抗原制备锗肺炎支原体P97R1区的特异性单抗，为Mhp的诊断检测及致病机制研究提供基础。

关键词：猪肺炎支原体 P97R1区单克隆抗体

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RAPD法分析猪肺炎支原体DNA多态性

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江苏农业学报 2009年第5期25卷 1058-1062页

作者：邵国青刘茂军甘源冯志新王海燕江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

应用RAPD技术，用7条随机引物对7株猪肺炎支原体和2株猪鼻支原体基因组DNA进行了多态性分析，结果表明，7条引物共产生244个扩增片段，其中有92个是多态性片段。相似系数分析结果显示，国际标准株J株和国内分离株之间相似性系数为0．139... 详细信息

应用RAPD技术，用7条随机引物对7株猪肺炎支原体和2株猪鼻支原体基因组DNA进行了多态性分析，结果表明，7条引物共产生244个扩增片段，其中有92个是多态性片段。相似系数分析结果显示，国际标准株J株和国内分离株之间相似性系数为0．139～0．333，猪肺炎支原体和猪鼻支原体之间相似性系数为0．203～0．400。

关键词：猪肺炎支原体 RAPD DNA多态性

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两株猪圆环病毒2型病毒的分离鉴定及其序列分析

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江苏农业学报 2009年第5期25卷 1063-1067页

作者：郭容利何孔旺钟书霖温立斌潘群兴江苏省农业科学院兽医研究所农业动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

利用PK15细胞从猪断奶后多系统衰竭综合征（PMWS）临床发病与死亡猪中分离到2株病毒；分别命名为Haian（登录号为FJ712216）和Xuancheng（登录号为FJ712215）。利用间接免疫荧光（IFA）和聚合酶链式反应（PCR）对其进行鉴定，并对其全... 详细信息

利用PK15细胞从猪断奶后多系统衰竭综合征（PMWS）临床发病与死亡猪中分离到2株病毒；分别命名为Haian（登录号为FJ712216）和Xuancheng（登录号为FJ712215）。利用间接免疫荧光（IFA）和聚合酶链式反应（PCR）对其进行鉴定，并对其全基因组序列进行了测定和分析。结果表明，分离株感染细胞后病毒抗原主要分布在细胞核中，2分离株的基因组全长为1767nt，与世界上其他地区的PCV2分离株密切相关，核苷酸序列同源性达93．7％-97．7％，属于毒力较强的Genotype1。

关键词：猪圆环病毒2型分离鉴定序列分析

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