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中国技术经济论坛2012暨浙江省社会科学界首届学术年会

作者：陆昌华胡肄农谭业平臧一天江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

针对近年来国内外发生的一系列食品安全事件,为有效保障动物产品的供给与公共卫生安全,以稳步提升中国动物卫生安全水平为目标.本文从动物卫生风险分析与风险管理决策的基本步骤与方法进行阐述,指出风险管理决策评估的难点.以猪场疫病... 详细信息

针对近年来国内外发生的一系列食品安全事件,为有效保障动物产品的供给与公共卫生安全,以稳步提升中国动物卫生安全水平为目标.本文从动物卫生风险分析与风险管理决策的基本步骤与方法进行阐述,指出风险管理决策评估的难点.以猪场疫病传入的暴露评估模型为实例,阐述经济学在动物疫病损失及控制措施评估中的应用,指出经济学评估是以流行病学为基础,针对不同疫病和动物种类的特性和规律,分析不同层面的经济影响,需进一步进行动物疫病风险与经济学评估相结合的探讨.与此同时,针对中国现行风险管理机制的不足,展望未来,提出根据动物卫生风险管理机制的核心，分别对兽医管理体制、动物疫病防控体系及动物食品安全控制体系的现状及各自存在的一系列问题通过收集文献及专家访谈进行研究剖析与陈述，以确立现今动物卫生风险管理机制在运行过程中出现的问题。研究发现，动物卫生风险管理机制在具体形式上主要存在三个最突出的问题，即管理模式、法律法规、人才队伍。总之，不论是从动物卫生风险管理机制本身所具有的原则及程序角度，还是从动物卫生风险管理机制的核心目标及概念角度，实行动物及其产品风险的统一管理模式是解决动物卫生风险管理机制中各问题的必须途径，若要实现动物卫生及其产品安全，必须由单一部门针对动物及其产品卫生的各环节，在定期的风险评估后，进行动物卫生风险管理，解决各政府部门独立不协调及企业里“多妈与多爸”林立问题，从而提高动物卫生和食品安全预警能力和防控水平，促进动物及其产品的国际贸易，形成我国有效的动物卫生风险管理机制。

关键词：食品安全动物卫生风险管理资源配置经济学评估

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食品安全防控的初探

食品安全防控的初探

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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会

作者：陆昌华胡肄农谭业平臧一天江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

国内外关于食品安全的研究表明,食品安全是一个综合概念。人们对食品安全的认识是一个逐渐发展的过程,它直接关系着人类的健康和发展。针对影响食品安全的众多因素及风险防控不力现状,作者综述前人食品安全风险防控管理模式及方式的研究... 详细信息

国内外关于食品安全的研究表明,食品安全是一个综合概念。人们对食品安全的认识是一个逐渐发展的过程,它直接关系着人类的健康和发展。针对影响食品安全的众多因素及风险防控不力现状,作者综述前人食品安全风险防控管理模式及方式的研究,剖析食品生产、加工、流通、销售和消费等环节存在的问题,进行动物疫病防控和食品安全监管问题的探讨。指出随着经济全球化的发展,众多动物及动物产品的跨国流动,势必使动物及其产品的输入国,面临更多其他国家动物疫病传入的风险实情:提出建立健全基于动物卫生风险评估的"评估、决策、执行"有机结合的兽医管理决策和运行机制的重要性;提出只有加强动物卫生风险管理的现代化,采用严格的生物安全隔离措施,才能有效地提高重大动物疫病防控能力和动物产品安全监管的科学化水平。最后本文建议:借鉴发达国家经验,在合适的条件下,改变中国食品安全多家监管为统一监管的体制,建立适合国情的食品安全风险防控体制。

关键词：食品安全动物疫病监管预防控制

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浅淡对畜禽及其产品质量安全风险分析的应用

浅淡对畜禽及其产品质量安全风险分析的应用

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中国畜牧兽医学会信息技术分会2012年学术研讨会

作者：陆昌华胡肄农谭业平臧一天江苏省农业科学院兽医研究所、农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室、国家兽用生物制品工程技术研究中心

近年来疯牛病、禽流感、二噁英、苏丹红和三聚氰胺等一系列动物卫生安全事件频繁发生,极大威胁公共卫生安全,对人类文明产生了重大冲击,唤醒了全球对食品安全问题的关注。本文阐述了动物卫生风险分析在国内外应用概况,介绍了发达国家重... 详细信息

近年来疯牛病、禽流感、二噁英、苏丹红和三聚氰胺等一系列动物卫生安全事件频繁发生,极大威胁公共卫生安全,对人类文明产生了重大冲击,唤醒了全球对食品安全问题的关注。本文阐述了动物卫生风险分析在国内外应用概况,介绍了发达国家重视畜禽及其产品安全体系在畜牧兽医行业与肉食品安全领域,取得的良好效果,实现了畜禽及其产品质量安全的控制。同时,针对中国畜禽及其产品风险分析工作起步较晚,动物卫生风险分析的理论和技术体系缺乏,风险分析的技术方法和通用模型建立仍处于探索阶段的实情。提出在风险分析中,充分利用网络信息处理资源,实现快速、准确传递,建立稳定、规范的风险监测和预警制度。以此为基础,来指导监管工作,有效预防和控制动物疫病、保障动物性食品安全和降低养殖业对环境的污染。

关键词：动物卫生风险分析畜禽产品质量安全

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用动物卫生风险分析思路浅析畜禽养殖业的环境污染风险

用动物卫生风险分析思路浅析畜禽养殖业的环境污染风险

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生态环境与畜牧业可持续发展学术研讨会暨中国畜牧兽医学会2012年学术年会和第七届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会会议

作者：陆昌华胡肄农江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

中国的畜禽养殖业经过持续多年的快速发展,取得了令人瞩目的成绩。畜禽养殖业的发展在大大提高人们生活水平的同时,也给环境保护带来巨大压力。近年来,随着畜禽养殖业的经营方式和饲养规模发生的重大变化,畜禽养殖业日益朝着规模化方向... 详细信息

中国的畜禽养殖业经过持续多年的快速发展,取得了令人瞩目的成绩。畜禽养殖业的发展在大大提高人们生活水平的同时,也给环境保护带来巨大压力。近年来,随着畜禽养殖业的经营方式和饲养规模发生的重大变化,畜禽养殖业日益朝着规模化方向发展。规模化的畜禽养殖场产生的粪便污水量大而集中,未经处理即直接予以排放,养殖场周围没有相应的土地对畜禽粪便进行消化,传统的有机肥被大量的化肥代替,畜禽粪便还田利用率低。种植业与养殖业相分离,使得畜禽粪便由农业的"宝"变为环境的"废",致使环境污染问题日益严重,严重影响了畜牧业持续健康发展,极大威胁公共卫生安全,对人类文明产生了重大冲击,唤醒了全球对食品安全问题的关注。自世界贸易组织(WTO)和实施卫生和植物卫生措施(SPS协议)签署之后,风险分析已成为动物卫生管理领域的重要决策工具。WTO和世界动物卫生组织(OIE)力促各成员国应用风险分析技术。预防和控制重大动物疫病、提高动物源性食品安全水平、降低养殖业对环境的污染等,已成为全球亟待解决的动物卫生管理领域的热点问题。针对中国不同畜禽生产模式的环境污染问题,如何有效控制,采用什么途径与方法来评价环境污染的风险?本文借鉴国外经验,侧重用动物卫生风险分析思路浅析畜禽养殖业的环境污染风险。它包括危害识别、风险评估、风险管理和风险交流4个方面,构成科学的框架。动物卫生风险分析是研究动物卫生安全风险的产生与发展,对畜牧业生产和公共卫生的危害,以及人类如何有效控制风险的一门新型科学。其目的是有效预防和控制动物疫病、保障动物性食品安全和降低养殖业对环境的污染。同时简要介绍了国外畜牧业发达国家对环境风险的评价方法。提出亟需加强畜禽养殖对环境污染的风险评估研究。指出动物卫生风险分析与环境风险评价存在学科交叉互补优势,将其应用于畜禽养殖对生态环境污染的风险评估关键技术及应用研究,前景广阔,将为打造生态高效现代畜牧业提供科技支撑。

关键词：动物卫生风险分析畜禽养殖业环境污染

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动物及动物产品质量安全风险预警的初探

动物及动物产品质量安全风险预警的初探

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2012第五届中国北京国际食品安全高峰论坛

作者：陆昌华胡肄农谭业平臧一天江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京 210014

本文在阐述国内外动物及食用性动物产品安全监控与预警研究的同时。针对动物及动物产品安全涉及到多方面、多环节和多层次的问题，确定影响动物及动物产品安全的主要因素，指出动物疫病预警研究是公共卫生应急及城市预警应急系统的重要... 详细信息

本文在阐述国内外动物及食用性动物产品安全监控与预警研究的同时。针对动物及动物产品安全涉及到多方面、多环节和多层次的问题，确定影响动物及动物产品安全的主要因素，指出动物疫病预警研究是公共卫生应急及城市预警应急系统的重要组成部分。风险预警是风险分析的重要内容，风险分析是WTO等协定的构成部分，是检验检疲决策的主要技术支持，是技术性贸易措施的重要内容之一。风险分析可保持检验检疫的正当技术壁垒作用。充分发挥检验检疫的保护功能，能强化检验检疫贸易的促进作用。针对重大动物疫病严重影响中国畜禽生产的产业发展。由于动物疫病控制不及时，造成重大经济损失。同时，也影响中国畜禽(生猪、牛、禽)活体和胴体的出口。为此。本文提出如何构建动物及食用性动物产品质量安全风险预JIN警框架，形成风险评估及预警决策的模型的方法;以及采用基于GIS的数字化监控系统，将流行病学数据库、地理图形、非空间应用模型和空间应用模型有机地结合。实现图形和数据资源共享。系统可及时跟踪疾病的蔓延，通过动物疫病流行病学图形分析，可提出适宜的防治措施。达到重大动物疫病的预警预报目的。借鉴国外成功经验，提出适合国情的风险预警框架体系研究内容，并指出在进行动物卫生评估和动物产品安全性评价时，如何提高GIS系统与风险分析在预誓体系中的应用。最终为开展风险评估工作提供更多的素材，不仅能促进中国畜牧业的健康持续发展，也能满足国家制定相关政策的需求。

关键词：动物产品动物疫病疫情监测风险预警

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大肠杆菌O157:H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制

大肠杆菌O157:H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：夏兴霞王永山孟祥升朱国强张雪寒何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心扬州大学兽医学院

用*** O157:H7菌体免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。其中,ID3、2E7和2H7三株为O157:H7特异单克隆抗体,Ig亚类分别为IgMκ、IgG2bκ和IgG2bκ,腹水抗体ELISA效价分别为... 详细信息

用*** O157:H7菌体免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。其中,ID3、2E7和2H7三株为O157:H7特异单克隆抗体,Ig亚类分别为IgMκ、IgG2bκ和IgG2bκ,腹水抗体ELISA效价分别为103、105和106。用纯化的单克隆抗体2E7标记胶体金,制备金标抗体玻璃纤维素膜;将纯化的2H7和羊抗鼠IgG分别作为检测和对照捕捉抗体包被于硝酸纤维素膜(NC)上;组装成双抗夹心法O157:H7胶体金免疫层析检测试纸条。用该试纸条可特异检测O157:H7,敏感度为106CFU/ml,与相同单克隆抗体2H7和2E7建立的O157:H7夹心ELISA检测方法的敏感度相当,试纸条简便快速,在1～5 min内可得出检测结果,便于O157:H7的临床快速诊断与现场检测样品的快速筛查。

关键词：大肠杆菌O157:H7 单克隆抗体(mAb) 胶体金免疫层析试纸条人兽共患病

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Genetic Variation of the ORF5 Gene of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus in East China during 2008-2010

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Agricultural Science & Technology 2012年第6期13卷 1234-1239,1276页

作者：王小敏何孔旺张文文陈蔚茅爱华俞正玉温立斌倪艳秀张雪寒吕立新郭容利周俊明李彬江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

[Objective] A total of 260 swine samples of dead or sick pigs collected from 7 provinces （municipalities） Jiangsu, Anhui, Shanghai, Shandong, Zhejiang, Fujian and Jiangxi of China during 2008-2010 were detected for porcine reproductive and respiratory syndrome virus （PRRSV）. And the ORF5 genes of some isolates were amplified and sequenced for understanding the molecule epidemiology and the genetic evolution of PRRSV in East China. [Method] Using RT-PCR method, PRRSV was detected by RT-PCR from samples. The complete ORF5 genes of 36 PRRSV positive samples was amplified, sequenced and analyzed with other 15 strains available on GenBank. [Result] PRRSV was detected in 118/260 of the clinical samples, with a positive rate was 45.4%. Sequence analysis showed that the 36 isolates of this study belonged to the North American-type PRRSV strains and were closely related to the highly pathogenic PRRSV （HP-PRRSV） with 94.6%-100% amino acid sequence identities. The sequence analysis combined with the phylogenetic analysis indicated that all these North American-type PRRSV strains in East China were further divided into five subgenotypes, subgenotype Ⅲ showed closer identity with HPPRRSV; almost all subgenotypes were found to be variable in the primary neutralizing epitope; subgenotypes Ⅲ and IV had more glycosylation sites than others. Although these 36 isolates were collected from different provinces in East China, there were no obvious relations between the distribution of PRRSV and the region. [Conclusion] The PRRSV infection was widespread and HP-PRRSV was the popular strain in East China during 2008-2010. However some different genetic characteristics appeared in the genomes, the genetic evolution was relatively stable. There exists a cross-cutting phenomenon on the genetic relationship of PRRSV isolates obtained from different provinces. Subgenotypes IV and V only appeared in some provinces, but the distribution of PRRSV did not show apparent geographical characteristics.

关键词： Porcine reproductive and respiratory syndrome （PRRS） East China ORF5 gene Genetic variation

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家兔支气管败血波氏杆菌重组百日咳杆菌粘附素(PRN)蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立

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中国比较医学杂志 2012年第2期22卷 28-32页

作者：胡佳佳恽时锋王芳范志宇胡波江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病免疫与诊断重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京军区南京总医院比较医学科江苏南京210002

目的表达支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)PRN蛋白,并以此建立检测Bb抗体的间接ELISA方法。方法参照GenBank公布的猪源支气管败血波氏杆菌prn基因序列(AY376325)设计了一对特异性引物,PCR扩增出相应的核苷酸片段。将PC... 详细信息

目的表达支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)PRN蛋白,并以此建立检测Bb抗体的间接ELISA方法。方法参照GenBank公布的猪源支气管败血波氏杆菌prn基因序列(AY376325)设计了一对特异性引物,PCR扩增出相应的核苷酸片段。将PCR扩增产物连接至原核表达载体pGEX-4T-1中,以*** BL21(DE3)为表达菌株进行诱导表达,以纯化重组蛋白PRN作为诊断抗原,通过探索最佳抗原包被量和抗体血清稀释倍数等,建立检测支气管败血波氏杆菌抗体的间接ELISA方法。结果成功克隆了prn全基因序列,并在***21(DE3)中获得高效表达,经SDS-PAGE、Western blot分析显示重组蛋白PRN具有良好的抗原性。应用重组蛋白PRN为抗原建立了检测Bb血清抗体的间接ELISA诊断方法。试验确定重组蛋白PRN抗原的包被浓度为500ng/mL,最适血清稀释度为1∶40。结论建立的ELISA检测方法,不仅为Bb抗体检测提供了实用的血清学检测手段,也为进一步开发Bb检测试剂盒奠定了基础。

关键词：兔支气管败血波氏杆菌百日咳杆菌粘附素(PRN) 原核表达间接ELISA

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非典型犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因序列分析及其在大肠杆菌中的表达

非典型犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因序列分析及其在大肠杆菌中的表达

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：毕振威王永山范红结王智群吴晓悠马金荣欧阳伟张海彬江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室／国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京 210014 南京农业大学动物医学院，江苏南京 210095 江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室／国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京 210014 南京农业大学动物医学院，江苏南京 210095

为分析当地非典型犬瘟热病毒(cDV)核衣壳蛋白(N)基因的序列特征及其表达产物的抗原性，根据已发表cDv的N基因序列设计引物，用RT-PcR方法从引起非典型症状的CDV细胞培养物中扩增N基因，进行克隆和序列分析，结果表明：该非典型CDV的N基... 详细信息

为分析当地非典型犬瘟热病毒(cDV)核衣壳蛋白(N)基因的序列特征及其表达产物的抗原性，根据已发表cDv的N基因序列设计引物，用RT-PcR方法从引起非典型症状的CDV细胞培养物中扩增N基因，进行克隆和序列分析，结果表明：该非典型CDV的N基因与已发表的12个CDV强毒株的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别在96．6％～99．2％和97．9％～99．4％之间，与已发表的4个CDV疫苗弱毒株的同源性分别在93．2％～93．6％和96．4％～97．5％之间;在N基因系统发育进化树上，非典型CDV与12个强毒株处在同一亚群，而且与9个中国分离毒株的亲缘关系近于3个国外毒株。N基因在大肠杆菌中表达的重组N蛋白的分子量为62 ku，主要以包涵体的形式存在;用western blot分析，重组N蛋白可与CDV阳性血清发生特异性反应;以纯化的重组N蛋白为抗原建立的CDV抗体间接EUSA检测方法具有良好的特异性。

关键词：非典型犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因序列分析原核表达大肠杆菌

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肠出血性大肠杆菌O157:H7△hly△stx△toxB基因缺失株的构建

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华北农学报 2011年第5期26卷 76-82页

作者：张雪寒何孔旺赵攀登栾晓婷叶青温立斌倪艳秀周俊明李彬王小敏郭容利俞正玉茅爱华吕立新江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014

肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli)O157:H7是食源感染的人兽共患病原菌。志贺毒素(Shiga toxin,Stx)、溶血素(haemolysin,Hly)和ToxB是O157:H7重要的毒力因子。选用自杀性质粒pMEG375,体外构建具有同源臂的重组自杀性质粒,借助于sm10宿主菌获得O157:H7杂交菌株,通过同源重组,依次获得O157:H7(△hly△stx△toxB)基因缺失株,△hly△stx△toxB接种HEp-2细胞和感染链霉素处理的Balb/c小鼠,明确缺失株粘附定植的能力。经PCR鉴定,hly、stx和toxB基因分别被壮观霉素(Spc+)、庆大霉素(Gm+)和卡那霉素(Kan+)基因表达盒所代替,Western blot鉴定结果显示,O157:H7(△hly△stx△toxB)检测不到相应的Stx、Hly和ToxB蛋白。O157:H7(△hly△stx△toxB)生长特性与亲本株无明显差异。对于HEp-2细胞的粘附能力明显降低。Balb/c小鼠排菌时间和排菌量明显减少和降低。本研究成功获得O157:H7(△hly△stx△toxB),并且明确Stx、Hly和ToxB的缺失导致了O157:H7对HEp-2细胞和Balb/c小鼠的粘附和定植能力降低。本研究旨在为研制EHEC O157:H7基因缺失疫苗奠定物质基础。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 hly stx toxB 缺失株小鼠粘附

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