检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2001年第3期21卷 246-248页

作者：李军林继煌陆承平何孔旺倪艳秀还红华钱永清江苏省农业科学院农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 上海农业科学院畜牧兽医研究所上海201106

根据猪传染性胃肠炎病毒 ( TGEV)纤突蛋白 S基因的 5′端核酸序列设计了 1对引物。该对引物扩增的目的片段长度为 886bp。在优化 RT-PCR反应条件的基础上 ,建立了检测 TGEV的 RT-PCR方法。用此RT-PCR方法检测 56份猪腹泻粪样 ,同时用夹... 详细信息

根据猪传染性胃肠炎病毒 ( TGEV)纤突蛋白 S基因的 5′端核酸序列设计了 1对引物。该对引物扩增的目的片段长度为 886bp。在优化 RT-PCR反应条件的基础上 ,建立了检测 TGEV的 RT-PCR方法。用此RT-PCR方法检测 56份猪腹泻粪样 ,同时用夹心 ELISA法作对照。结果显示 ,RT-PCR法检测的 2 0份阳性粪样 ,用夹心 ELISA法检测有 1 4份呈阳性 ,两者的符合率为 89%。 RT-PCR法比夹心 ELISA法敏感性更高 ,可用于

关键词：传染性胃肠炎病毒 RT-PCR 猪诊断方法

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猪肺炎支原体P97基因抗原决定簇R1区的克隆与表达

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江苏农业学报 2005年第3期21卷 207-211页

作者：刘茂军邵国青张映聂向庭江苏省农业科学院兽医研究所农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室江苏南京210014 山西农业大学动物科技学院山西太谷030801

通过引物定点突变PCR法,扩增了猪肺炎支原体(Mhp)168株黏附因子P97基因抗原决定簇R1区基因片段,并将该基因片段插入表达载体pET-32 a(+)中构建重组质粒,再将该重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)。DNA序列分析结果表明所构建的重组质粒含有... 详细信息

通过引物定点突变PCR法,扩增了猪肺炎支原体(Mhp)168株黏附因子P97基因抗原决定簇R1区基因片段,并将该基因片段插入表达载体pET-32 a(+)中构建重组质粒,再将该重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)。DNA序列分析结果表明所构建的重组质粒含有正确的目的基因。经0.1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)37℃诱导4 h,重组质粒表达的目的蛋白量可达到总蛋白的23%。W estern b lotting和ELISA试验结果证明所表达的重组蛋白具有猪肺炎支原体抗原性。

关键词：猪肺炎支原体 P97基因克隆表达

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猪流行性腹泻与猪传染性胃肠炎二联油乳剂灭活疫苗的田间免疫试验

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中国兽医杂志 2002年第6期38卷 29-30页

作者：还红华何孔旺倪艳秀林继煌华国浩梁晓辉江苏省农业科学院兽医研究所农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室江苏南京210014 江苏省昆山市兽医站江苏昆山215300 南京金象集团江苏南京211135

猪流行性腹泻(PED)和猪传染性胃肠炎(TGE)是猪常见的两种急性、烈性、病毒性腹泻.PED和TGE在我国流行十分广泛,冬春季节年复一年地在猪群中发生,给养猪业造成重大的经济损失.由于猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)在病... 详细信息

猪流行性腹泻(PED)和猪传染性胃肠炎(TGE)是猪常见的两种急性、烈性、病毒性腹泻.PED和TGE在我国流行十分广泛,冬春季节年复一年地在猪群中发生,给养猪业造成重大的经济损失.由于猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)在病原学、流行病学、临床症状及病理变化等方面都十分相似,只有依靠实验室诊断技术才能区别.而在流行季节,猪群中PED和TGE可以单独发生,亦可混合感染,混合感染率可达30%.因而在腹泻症流行的地区需同时免疫接种PED和TGE疫苗才能有效控制病毒性腹泻的发生与流行.为此我们进行了PED和TGE二联油乳剂灭活疫苗的研究,并进行了免疫试验,现将疫苗的田间试验结果报告如下.

关键词：猪流行性腹泻传染性胃肠炎二联油乳剂灭活疫苗田间免疫试验

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检测PCV_2、PPV、PRV疫苗株与野毒株的多重PCR方法

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中国病毒学 2005年第6期20卷 603-606页

作者：潘群兴陈德何孔旺黄克和南京农业大学动物医学院江苏南京210095 江苏省农业科学院兽医研究所农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室江苏南京210014

本文建立了一种同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、细小病毒(PPV)、及伪狂犬病毒(PRV)疫苗株与野毒株的多重PCR方法。根据GenBank上发表的PCV2、PPV和PRV gB、gE基因序列,针对各自保守区各设计一对特异性引物,用这四对引物对同一样品中的P... 详细信息

本文建立了一种同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、细小病毒(PPV)、及伪狂犬病毒(PRV)疫苗株与野毒株的多重PCR方法。根据GenBank上发表的PCV2、PPV和PRV gB、gE基因序列,针对各自保守区各设计一对特异性引物,用这四对引物对同一样品中的PCV2、PPV和PRV gB、gE进行检测,结果可同时扩增出269bp(PCV2)、 581bp(PPV)、372bP(PRV gB)及147bp(PRV gE)四条特异性片段。对JEV、PRRSRV、大肠杆菌和双蒸水的PCR 扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该多重PCR能检出10pg PCV2、PPV和PRV gB、gE检测敏感度分别为 106.2、103.8、10-5.8 TCID50的模板。该方法的建立对临床上进行这三种疾病的鉴别诊断和混合感染的检测具有重要意义。

关键词：多重聚合酶链式反应伪狂犬病毒(PRV) 细小病毒(PPV) 猪圆环病毒2型(PCV2)

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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌转铁结合蛋白2基因克隆、序列分析及表达

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌转铁结合蛋白2基因克隆、序列分析及表达

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家畜传染病学会第六次人畜共患病学术交流会

作者：王芳何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室

随着养猪规模化程度的不断提高,猪传染性胸膜肺炎已成为规模化猪场的主要传染病之一,严重危害养猪业的健康发展。猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,App)引起的一种高度接触性呼吸道疾病,Pattison... 详细信息

随着养猪规模化程度的不断提高,猪传染性胸膜肺炎已成为规模化猪场的主要传染病之一,严重危害养猪业的健康发展。猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,App)引起的一种高度接触性呼吸道疾病,Pattison等1957年首次报道。在历史上曾被称为猪接触性传染性胸膜炎(porcine contagious pleuropeumonia)、猪嗜血杆菌胸膜肺炎,副猪嗜血杆菌病等。猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的血清型很多,各型之间及同一血清型的

关键词：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌序列分析铁结合蛋白重组菌大肠杆菌双酶切外膜蛋白毒力因子基因克隆

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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌转铁结合蛋白2基因克隆、序列分析及表达

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌转铁结合蛋白2基因克隆、序列分析及表达

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第六次人畜共患病学术交流会

作者：王芳何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所·农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室(南京)

本研究通过分子生物技术从5型App中扩增了Tbp2基因,并克隆到大肠杆菌中,经诱导大肠杆菌高效表达了这种毒力因子,为将来研制备猪传染性胸膜肺炎新型疫苗奠定基础.

关键词：基因克隆序列分析毒力因子猪传染性胸膜肺炎疫苗

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脂肪细胞膜抗血清对猪胴体品质和肉品质的影响

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江苏农业学报 2007年第6期23卷 583-587页

作者：杜改梅刘茂军王俊东金陵科技学院动物科学与技术学院江苏南京210048 江苏省农业科学院兽医研究所农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室江苏南京210014 山西农业大学山西省生态畜牧与环境兽医学重点实验室山西太谷030801

将36头5周龄的断奶上海大白猪随机分成6组。对照组C1和C2、皮下免疫试验组S1和S2、腹腔免疫试验组A1和A2,每组6头猪。试验周期为11周和17周。试验组A1和A2腹腔注射5.0 ml/kg BW山羊抗猪脂肪细胞膜抗血清,试验组S1和S2皮下注射5.0 ml/kg... 详细信息

将36头5周龄的断奶上海大白猪随机分成6组。对照组C1和C2、皮下免疫试验组S1和S2、腹腔免疫试验组A1和A2,每组6头猪。试验周期为11周和17周。试验组A1和A2腹腔注射5.0 ml/kg BW山羊抗猪脂肪细胞膜抗血清,试验组S1和S2皮下注射5.0 ml/kg BW山羊抗猪脂肪细胞膜抗血清,对照组C1和C2以相同剂量注射正常山羊血清。11周末和17周末屠宰结果显示:①各试验组猪板油重和背膘厚都显著低于对照组(P<0.05);11周末,与对照组相比,试验组S1和A1中猪眼肌面积均显著升高;17周末,腹腔免疫组猪眼肌面积显著高于对照组(P<0.05)。②11周末,腹腔免疫组猪半腱肌和里脊、皮下免疫组猪背最长肌和里脊中脂肪含量均明显低于对照组(P<0.05);17周末,与对照组相比,腹腔免疫组猪半腱肌中脂肪含量显著下降(P<0.05)。③11周末,腹腔免疫组猪背最长肌和里脊中蛋白质含量显著高于对照组(P<0.05);17周末,各试验组背最长肌和里脊中蛋白质含量与腹腔免疫组半腱肌中蛋白质含量均显著高于对照组(P<0.05)。表明,山羊抗猪脂肪细胞膜被动免疫具有较好改善猪胴体品质和肉品质的作用。

关键词：猪脂肪细胞膜抗血清胴体品质肉品质

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猪肺炎支原体P46蛋白单克隆抗体制备

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江苏农业学报 2010年第2期26卷 320-324页

作者：冯志新迟灵芝刘茂军王海燕甘源吴叙苏邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 山东畜牧兽医职业学院山东潍坊261061

P46蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白,且与其他支原体无交叉反应,常作为猪肺炎支原体检测的靶蛋白。制备针对该蛋白的特异性单抗能为猪肺炎支原体的检测及机理研究提供有效的资源。本研究取猪肺炎支原体全菌抗原免疫小鼠,用大肠杆... 详细信息

P46蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白,且与其他支原体无交叉反应,常作为猪肺炎支原体检测的靶蛋白。制备针对该蛋白的特异性单抗能为猪肺炎支原体的检测及机理研究提供有效的资源。本研究取猪肺炎支原体全菌抗原免疫小鼠,用大肠杆菌表达的P46蛋白作为筛选抗原制备了2株特异性单克隆抗体1A4和3C11。结果显示,2株单抗ELISA效价最高可达1∶64 000。Western-blot结果表明,2株单抗均能与原核表达的P46蛋白及猪肺炎支原体全菌蛋白中46 000大小的蛋白发生特异性反应;2株杂交瘤细胞株经3个月冻存或连续传代3个月均能保持较高的滴度。本研究成功制备了2株针对猪肺炎支原体P46蛋白的特异、稳定且高滴度的单克隆抗体。

关键词：猪肺炎支原体 P46蛋白单克隆抗体

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鸭坦布苏病毒病-H9亚型禽流感二联灭活疫苗免疫佐剂筛选

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动物医学进展 2021年第5期42卷 26-29页

作者：田宇杰嵇辛勤章丽娇刘青涛韩凯凯杨婧刘宇卓赵冬敏刘娜王梦瑶李银贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 贵州省农业科学院畜牧兽医研究所贵州贵阳550025

为筛选出理想的鸭TMUV-AIV(H9亚型)二联灭活疫苗免疫佐剂,将灭活的坦布苏病毒液和禽流感病毒(H9亚型)尿囊液分别与白油佐剂、卡波姆佐剂、铝胶佐剂、蜂胶佐剂制成抗原含量相同的TMUV-AIV二联灭活疫苗。应用阻断ELISA方法和血凝抑制方法... 详细信息

为筛选出理想的鸭TMUV-AIV(H9亚型)二联灭活疫苗免疫佐剂,将灭活的坦布苏病毒液和禽流感病毒(H9亚型)尿囊液分别与白油佐剂、卡波姆佐剂、铝胶佐剂、蜂胶佐剂制成抗原含量相同的TMUV-AIV二联灭活疫苗。应用阻断ELISA方法和血凝抑制方法测定免疫鸭血清中坦布苏病毒和禽流感病毒抗体,比较不同佐剂疫苗对试验鸭的免疫效力。结果表明,以白油作为佐剂的灭活疫苗组免疫效果最好,抗体产生快、抗体水平优于其他各组,免疫2周后60%(6/10)血清样品HI抗体可达1∶8以上,80%血清样品呈TMUV抗体阳性,是制备鸭TMUV-AIV(H9亚型)二联灭活疫苗的理想佐剂。

关键词：坦布苏病毒禽流感病毒(H9亚型) 佐剂筛选灭活疫苗

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2型鸭疫里氏杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立与应用

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福建农业学报 2006年第2期21卷 131-134页

作者：程龙飞施少华傅光华李文杨彭春香黄瑜陈溥言福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013 南京农业大学农业部畜禽疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

以2型鸭疫里氏杆菌裂解物作为包被抗原,以辣根过氧化物酶标记的兔抗鸭IgG抗体为第二抗体,以TMB为显色剂,成功地建立了检测鸭血清中2型鸭疫里氏杆菌抗体的间接EL1SA方法。经检测表明该方法特异性强,敏感性比常规的试管凝集试验高320倍。... 详细信息

以2型鸭疫里氏杆菌裂解物作为包被抗原,以辣根过氧化物酶标记的兔抗鸭IgG抗体为第二抗体,以TMB为显色剂,成功地建立了检测鸭血清中2型鸭疫里氏杆菌抗体的间接EL1SA方法。经检测表明该方法特异性强,敏感性比常规的试管凝集试验高320倍。以该方法对免疫2型鸭疫里氏杆菌灭活油乳剂疫苗的试验鸭进行抗体水平的跟踪测定,发现试验鸭于免疫后7d开始产生抗体,28d达到最高峰,然后开始下降,于免疫后56d其抗体水平仍高于免疫后14d的水平。

关键词： 2型鸭疫里氏杆菌抗体检测间接酶联免疫吸附试验

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