检索结果-内蒙古大学图书馆

江苏农业科学 2017年第14期45卷 140-142页

作者：郭海燕程国虎李拥军张昊秦康乐扬州大学动物科学与技术学院/江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

长江三角洲白山羊是国内外唯一以生产优质笔料毛为特征的肉、皮、毛兼用型山羊品种,其所生产的优质笔料毛是制作高档毛笔的独特原料,由于其独特的产毛性能,又有笔料毛山羊之称。利用冷冻切片技术来比较生产优质笔料毛型个体与非优质笔... 详细信息

长江三角洲白山羊是国内外唯一以生产优质笔料毛为特征的肉、皮、毛兼用型山羊品种,其所生产的优质笔料毛是制作高档毛笔的独特原料,由于其独特的产毛性能,又有笔料毛山羊之称。利用冷冻切片技术来比较生产优质笔料毛型个体与非优质笔料毛型个体颈脊部及背部皮肤毛囊的结构,旨在寻找2种性状毛囊结构的区别。结果表明,优质笔料毛型个体与非优质笔料毛型个体颈脊部及背部皮肤毛囊结构无差异,但2种笔料毛型个体颈脊部初级毛囊密度显著低于优质型个体背部初级毛囊密度。

关键词：长江三角洲白山羊冷冻切片技术笔料毛毛囊结构毛囊密度

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ESR基因多态性与湖羊产羔性能的关系

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江苏农业科学 2017年第13期45卷 126-128页

作者：郭海燕金银李拥军张昊程国虎扬州大学动物科学与技术学院/江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

利用PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术及基因测序技术对湖羊进行了ESR基因的多态性检测及其与湖羊产羔数的统计分析。测序结果表明,等位基因G与C相比发生了1处碱基突变(G363C)。ESR基因在湖羊中存在多态性(CC、CG和GG);湖羊中C等位基... 详细信息

利用PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术及基因测序技术对湖羊进行了ESR基因的多态性检测及其与湖羊产羔数的统计分析。测序结果表明,等位基因G与C相比发生了1处碱基突变(G363C)。ESR基因在湖羊中存在多态性(CC、CG和GG);湖羊中C等位基因的频率为0.743,G等位基因的频率为0.257。CC、CG、GG基因型频率分别为0.564、0.357、0.079。湖羊CG、GG、CC基因型的平均产羔数分别为1.98、1.80、1.96只。数据分析结果表明,ESR基因的多态性对湖羊产羔数的影响差异不显著(P≥0.05)。

关键词：湖羊 ESR基因产羔数

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京海黄鸡G蛋白偶联受体1基因生物信息学及组织表达分析

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中国畜牧兽医 2017年第8期44卷 2215-2225页

作者：袁曼曼张涛张向前李婷婷凌娇娇吴鹏飞王金玉施会强扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009 江苏京海集团南通226103

试验旨在研究参与激素调节并调控卵巢功能的可能基因,挑选候选基因G蛋白偶联受体1(G protein-coupled receptor 1),深入研究其是否参与激素调节。根据转录组测序获得的京海黄鸡GPR1基因的CDS序列设计一对引物,利用实时荧光定量RT-PCR方... 详细信息

试验旨在研究参与激素调节并调控卵巢功能的可能基因,挑选候选基因G蛋白偶联受体1(G protein-coupled receptor 1),深入研究其是否参与激素调节。根据转录组测序获得的京海黄鸡GPR1基因的CDS序列设计一对引物,利用实时荧光定量RT-PCR方法,检测GPR1基因在高、低产京海黄鸡卵巢组织中的表达情况,并与生物信息学进行关联,使用多种生物软件和在线工具对目的序列进行生物信息学分析,分析GPR1基因与其他物种的同源性、蛋白质的理化性质、蛋白质序列的跨膜区、亚细胞定位、亲水性、潜在的磷酸化位点、保守结构域及该基因所编码蛋白质的二、三级结构。结果显示,京海黄鸡与GenBank中原鸡、人、牛、野猪、黑猩猩、家兔、马、绵羊、藏羚羊、大鼠、小鼠、斑马鱼的同源性分别为100.0%、69.0%、69.1%、69.3%、68.9%、69.6%、69.2%、68.8%、68.9%、67.5%、69.0%和50.3%;氨基酸分析发现GPR1蛋白为疏水性蛋白,分子质量为40.41ku,理论等电点为6.91,为7次跨膜蛋白;亚细胞定位显示,该蛋白属于非分泌蛋白;预测该蛋白含有25个潜在的磷酸化位点,1糖基化位点;二级结构以无规则卷曲为主,三级结构为7次跨膜螺旋结构;组织表达分析显示,GPR1基因在低产组的表达情况极显著高于高产组(P<0.01)。本试验结果将有利于GPR1基因功能的进一步分析,为研究该基因对京海黄鸡产蛋性状的调控机理提供理论依据。

关键词：京海黄鸡 G蛋白偶联受体1 生物信息学分析蛋白组织表达

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基于RNA-Seq技术的京海黄鸡卵巢组织转录本预测及新基因挖掘

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中国畜牧兽医 2017年第2期44卷 497-504页

作者：董新龙张向前韩昆鹏凌姣姣张跟喜王金玉王永娟扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009 江苏京海集团南通226103

鸡及许多物种的全基因组测序及相关基因图谱都已宣告完成,但由于注释方法的局限性,还存在许多遗漏的新基因及对现有基因的误差注释。RNA-Seq技术是基于第2代测序技术的转录组学研究方法,该研究利用高通量测序技术对8只(高产组4只、低产... 详细信息

鸡及许多物种的全基因组测序及相关基因图谱都已宣告完成,但由于注释方法的局限性,还存在许多遗漏的新基因及对现有基因的误差注释。RNA-Seq技术是基于第2代测序技术的转录组学研究方法,该研究利用高通量测序技术对8只(高产组4只、低产组4只)300日龄体重一致、饲养条件相同、产蛋数存在差异的京海黄鸡的卵巢组织所有RNA反转录而成的cDNA文库进行测序,通过分析RNA-Seq获得的京海黄鸡卵巢组织转录组数据,共发现4 431个新转录本,并将所有新转录本与GO、NR、Swiss-Prot、KEGG数据库进行比对和分析,发现了很多潜在的新基因并进行功能注释,为鸡基因组的进一步完善及功能基因的挖掘提供了数据基础。

关键词：转录组测序京海黄鸡新转录本新基因功能注释

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猪miR-192对DLG5和ALCAM基因的靶向作用关系验证

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农业生物技术学报 2017年第9期25卷 1451-1459页

作者：孙丽吴森吴嘉韵赵呈祥吴圣龙包文斌扬州大学动物科学与技术学院/江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室

在生理病理过程中,micro RNAs(miRNAs)通过作用于相应靶基因发挥着重要的作用。通过高通量测序结合荧光定量实验验证,本课题组前期初步确定miR-192靶向调控Discs大同源物(discs large homolog 5,DLG5)和活化白细胞黏附分子(activated le... 详细信息

在生理病理过程中,micro RNAs(miRNAs)通过作用于相应靶基因发挥着重要的作用。通过高通量测序结合荧光定量实验验证,本课题组前期初步确定miR-192靶向调控Discs大同源物(discs large homolog 5,DLG5)和活化白细胞黏附分子(activated leukocyte cell adhesion molecule,ALCAM)基因在断奶仔猪抗大肠杆菌(Escherichia coli)感染过程中发挥了重要的作用。本研究采用双荧光素酶报告系统和Western blot方法,验证DLG5和ALCAM基因是否受到miR-192的特异性调控。构建含有靶基因位点的荧光素酶报告基因重组载体,与PRL-TK和miRNA-192模拟物mimics、inhibitor或阴性对照共转染293细胞,24 h后收集细胞检测荧光素酶活性和靶基因蛋白表达变化。同时检测3种大肠杆菌感染肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IPEC-J2)后靶基因的表达变化。本研究成功获得荧光素酶报告基因重组载体,荧光结果显示,miRNA-192 mimics显著抑制2个报告重组载体的荧光素酶活性(P<0.05),而miRNA-192inhibitor则显著促进2个报告重组载体的荧光素酶活性(P<0.05)。同时,miRNA-192模拟物处理组靶基因DLG5和ALCAM蛋白水平极显著低于阴性对照组,再次验证了上述结果。3种大肠杆菌感染后,2个靶基因的表达均显著或极显著上升。由结果可知,猪miR-192对DLG5和ALCAM基因具有靶向抑制作用,且DLG5和ALCAM基因的表达确实与大肠杆菌感染有关。本研究结果为miR-192及其靶基因在断奶仔猪抵抗F18大肠杆菌感染过程中的功能和调控机制相关研究提供了一定的实验基础和理论依据,进一步为猪抗大肠杆菌病有效遗传标记的筛选提供了科学依据。

关键词：猪 miRNA-192 活化白细胞黏附分子基因(ALCAM) Discs大同源物基因(DLG5) 腹泻

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猪FUT2基因沉默对其所在通路基因表达及小肠上皮细胞***18黏附能力的影响

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畜牧兽医学报 2017年第11期48卷 2034-2045页

作者：孙丽宗秋芳吴森吴嘉韵吴圣龙包文斌扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009 扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室扬州225009

旨在细胞水平上进一步探讨FUT2基因的功能及其在猪小肠上皮细胞受到F18大肠杆菌(Escherichia coli,***)侵染时的调控机制,为提高仔猪对F18大肠杆菌病抵抗力的分子选育提供理论基础。运用Real-time PCR方法检测分析FUT2基因在大肠杆菌F1... 详细信息

旨在细胞水平上进一步探讨FUT2基因的功能及其在猪小肠上皮细胞受到F18大肠杆菌(Escherichia coli,***)侵染时的调控机制,为提高仔猪对F18大肠杆菌病抵抗力的分子选育提供理论基础。运用Real-time PCR方法检测分析FUT2基因在大肠杆菌F18ab、F18ac感染和脂多糖(LPS)诱导小肠上皮细胞前后的mRNA表达差异,并采用Western blotting方法检测大肠杆菌F18ab、F18ac感染小肠上皮细胞前后FUT2的蛋白表达差异;同时设计并构建猪FUT2基因慢病毒干扰载体,筛选并获得FUT2基因稳定沉默的小肠上皮细胞系,检测FUT2基因沉默对其所在球系列鞘糖脂生物合成通路其他关键基因(FUT1、ST3GAL1、HEXA、HEXB、B3GALNT1、NAGA)表达以及小肠上皮细胞*** F18黏附能力的影响。结果表明,在F18大肠杆菌感染和LPS诱导小肠上皮细胞后,FUT2基因的mRNA相对表达水平均极显著升高(P<0.01),同时大肠杆菌感染后小肠上皮细胞的FUT2蛋白表达上升。此外,本研究成功构建FUT2基因慢病毒干扰载体,并获得FUT2基因稳定沉默的小肠上皮细胞系;FUT2基因沉默后,其所在的球系列鞘糖脂生物合成通路其他关键基因的表达都存在不同程度的下降,其中FUT1基因表达水平显著下调(P<0.05),ST3GAL1、HEXA和HEXB基因表达水平极显著下调(P<0.01),而B3GALNT1和NAGA基因表达水平未发生显著变化,同时FUT2基因沉默后F18大肠杆菌对小肠上皮细胞的黏附能力显著降低。结果显示,FUT2基因低表达可能不利于仔猪大肠杆菌受体的形成,以增强猪小肠上皮细胞抵抗*** F18感染的能力,本试验结果同时为球系列鞘糖脂生物合成通路在仔猪抗大肠杆菌感染过程中的作用机制研究提供一定的理论基础和依据。

关键词：猪 FUT2基因 RNAi 大肠杆菌球系列鞘糖脂生物合成通路

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大肠杆菌刺激猪肠上皮细胞后Nramp1基因的表达变化分析

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中国畜牧杂志 2017年第6期53卷 40-43页

作者：戴超辉吴嘉韵孙丽吴圣龙包文斌扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 江苏省种猪繁育和健康养殖工程技术研究中心江苏扬州225009

猪天然抗性相关巨噬细胞蛋白基因1(Naturalresistance-associated Marophage Protein 1,Nramp1)作为影响抗病力的重要候选基因之一,在机体的免疫过程中发挥着重要的调控作用。为了在细胞水平上探讨Nramp1基因与引起仔猪腹泻的致病性大... 详细信息

猪天然抗性相关巨噬细胞蛋白基因1(Naturalresistance-associated Marophage Protein 1,Nramp1)作为影响抗病力的重要候选基因之一,在机体的免疫过程中发挥着重要的调控作用。为了在细胞水平上探讨Nramp1基因与引起仔猪腹泻的致病性大肠杆菌的关系及其在大肠杆菌感染过程中发挥的免疫调控作用,本研究利用F18ab、F18ac和K88ac等3种致病性大肠杆菌刺激体外培养的猪肠上皮细胞IPEC-J2,并利用实时荧光定量PCR检测3种菌体刺激IPEC-J2后Nramp1基因的表达变化情况。结果表明:F18ab、F18ac和K88ac 3种大肠杆菌刺激IPEC-J2后,Nramp1基因的表达均发生极显著(P<0.01)上调,差异倍数分别为10、8、11倍,且F18ab和K88ac 2种菌体刺激后Nramp1基因的表达上调程度均极显著高于F18ac。本研究结果提示,Nramp1基因的表达与大肠杆菌的侵染有很大的相关性,其在大肠杆菌侵袭猪肠道中发挥了重要的免疫调控作用。本研究在细胞水平分析探讨了Nramp1基因的表达与3种致病性大肠杆菌侵袭的关系,为Nramp1基因在大肠杆菌侵染机体的过程中发挥的免疫调控作用研究提供了参考依据。

关键词：猪大肠杆菌 Nramp1基因抗病育种

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产肠毒素性大肠杆菌侵染猪肠上皮细胞后DLG5基因的表达变化分析

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江苏农业科学 2017年第9期45卷 127-129页

作者：吴嘉韵吴森戴超辉吴圣龙包文斌扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 江苏省种猪繁育和健康养殖工程技术研究中心江苏扬州225009

为了揭示DLG5基因在机体抵抗大肠杆菌刺激过程中发挥的功能,本试验利用产肠毒素性大肠杆菌(F18ab、F18ac和K88ac)侵染猪肠上皮细胞系(IPEC-J2)模拟个体的致病过程,用实时荧光定量检测DLG5基因在感染前后的表达变化情况,在细胞水平上探讨... 详细信息

为了揭示DLG5基因在机体抵抗大肠杆菌刺激过程中发挥的功能,本试验利用产肠毒素性大肠杆菌(F18ab、F18ac和K88ac)侵染猪肠上皮细胞系(IPEC-J2)模拟个体的致病过程,用实时荧光定量检测DLG5基因在感染前后的表达变化情况,在细胞水平上探讨DLG5基因表达水平与产肠毒素性大肠杆菌抗性的关系。结果表明,3种大肠杆菌的菌清和菌体刺激IPEC-J2后,DLG5基因表达水平均发生显著或极显著上调;并且由F18ab和K88ac这2种菌体刺激后DLG5基因表达水平上调的程度要极显著高于F18ac菌体刺激后的表达水平。本研究结果提示,猪DLG5基因表达和大肠杆菌的抗性具有密切关系,可能与其在一定程度上能够促进肠道屏障的结构稳定和功能发挥有关。

关键词：猪 DLG5基因产肠毒素性大肠杆菌抗病育种表达水平肠上皮细胞

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大肠杆菌侵染猪肠上皮细胞IPEC-J2后TAP1基因表达量的变化分析

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畜牧与兽医 2017年第8期49卷 53-56页

作者：吴森吴嘉韵戴超辉吴圣龙包文斌扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 江苏省种猪繁育和健康养殖工程技术研究中心江苏扬州225009

为了在细胞水平上探究抗原处理相关转运体1(TAP1)基因与仔猪大肠杆菌性腹泻间的关系以及在机体抗大肠杆菌侵染过程中是否发挥了作用,选用3种主要产肠毒素大肠杆菌(F18ab,F18ac和K88ac)刺激离体培养的猪肠上皮细胞(IPEC-J2),用实时荧光定... 详细信息

为了在细胞水平上探究抗原处理相关转运体1(TAP1)基因与仔猪大肠杆菌性腹泻间的关系以及在机体抗大肠杆菌侵染过程中是否发挥了作用,选用3种主要产肠毒素大肠杆菌(F18ab,F18ac和K88ac)刺激离体培养的猪肠上皮细胞(IPEC-J2),用实时荧光定量PCR检测3种大肠杆菌刺激后IPEC-J2细胞中TAP1基因表达量的变化。结果显示:IPEC-J2细胞经过3种大肠杆菌刺激后,TAP1基因在细胞中的表达量均显著高于对照组(P<0.05),差异倍数分别是对照组的1.7,1.8和1.5倍;3种不同的大肠杆菌刺激,TAP1基因在IPEC-J2细胞中的表达量不存在显著差异(P>0.05)。通过分析3种大肠杆菌侵染离体培养的猪肠上皮细胞后TAP1基因表达量的变化,在细胞水平上验证了TAP1基因的表达对仔猪抗细菌性腹泻具有一定的作用,为TAP1基因作为机体免疫调控的相关基因提供了一定的理论依据。

关键词：猪 TAP1基因大肠杆菌抗病育种

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BMPR-IB基因多态性与湖羊产羔性能的关系

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安徽农业科学 2017年第26期45卷 113-115页

作者：杨媛翁恺麒李拥军顾祝荣郭海燕扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

[目的]研究骨形态发生蛋白受体IB(Bone morphogenetic protein receptor IB,BMPR-IB)基因多态性与湖羊产羔性能的关系。[方法]采用PCR扩增、酶切和序列测定等方法对湖羊BMPR-IB基因型进行鉴定,并分析BMPR-IB基因型与湖羊产羔数的关系。... 详细信息

[目的]研究骨形态发生蛋白受体IB(Bone morphogenetic protein receptor IB,BMPR-IB)基因多态性与湖羊产羔性能的关系。[方法]采用PCR扩增、酶切和序列测定等方法对湖羊BMPR-IB基因型进行鉴定,并分析BMPR-IB基因型与湖羊产羔数的关系。[结果]共检测出3种基因型,并将其分别定义为AA、AG、GG。测序结果表明,等位基因A与G相比发生了1处碱基突变(A746G)。BMPR-IB基因在湖羊中存在多态性(AA、AG和GG);湖羊中A等位基因的频率为0.032,G等位基因的频率为0.968。AA、AG和GG基因型频率分别为0.006、0.053和0.941。AA、AG和GG基因型湖羊的平均产羔数分别为1.25、1.81和1.96。[结论]BMPR-IB基因可能是湖羊多胎性能的主效基因,可用于对湖羊产羔数的选择。

关键词：湖羊 BMPR-IB基因产羔数

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