检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧与兽医 2025年第3期57卷 66-73页

作者：徐超谢泉武佳妍王胜男万志敏邵红霞秦爱建叶建强李拓凡扬州大学兽医学院/禽类预防医学教育部重点实验室/江苏省动物预防医学重点实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

旨在为解决国内禽白血病净化周期长以及净化鸡群J亚群禽白血病病毒(ALV-J)感染频发等问题提供新型抗ALV-J策略。本研究利用前期构建好的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与血清4型禽腺病毒(FAdV-4)纤突蛋白Fiber-2融合的重组FAdV-4为载体,并使... 详细信息

旨在为解决国内禽白血病净化周期长以及净化鸡群J亚群禽白血病病毒(ALV-J)感染频发等问题提供新型抗ALV-J策略。本研究利用前期构建好的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与血清4型禽腺病毒(FAdV-4)纤突蛋白Fiber-2融合的重组FAdV-4为载体,并使用CRISPR/Cas9和Cre-LoxP技术构建表达ALV-J囊膜蛋白(Env)的重组FAdV-4,通过间接免疫荧光试验和Western blot验证重组病毒表达的Env蛋白,测定重组病毒在鸡肝癌细胞系(LMH)细胞中的增殖特性。结果:成功拯救了能表达ALV-J Env蛋白的重组病毒FAdV-4-ALV-J-env,该重组病毒在LMH细胞中的复制效率远低于野生型FAdV-4。本研究构建的重组病毒FAdV-4-ALV-J-env为ALV-J和FAdV-4感染的联防联控提供了二联候选疫苗株。

关键词： J亚群禽白血病病毒 Env蛋白血清4型禽腺病毒重组病毒

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羊种布鲁氏菌链霉素耐受基因筛选及鉴定

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微生物学通报 2025年第2期52卷 690-702页

作者：周师众袁雅琴宁文晴薛天骐杨晓雯丁家波中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(北方)北京100193 扬州大学兽医学院禽类预防医学教育部重点实验室江苏省动物预防医学重点实验室江苏扬州225009 山东农业大学动物医学院山东泰安271018

【背景】布鲁氏菌(Brucella spp.)是一种兼性胞内寄生菌,能够引起世界范围内的人兽共患流行病——布鲁氏菌病(以下简称布病)。链霉素是治疗布病的推荐药物,但我国已有链霉素耐受分离株(根据CLSI推荐的耐药折点)。【目的】筛选并鉴定羊... 详细信息

【背景】布鲁氏菌(Brucella spp.)是一种兼性胞内寄生菌,能够引起世界范围内的人兽共患流行病——布鲁氏菌病(以下简称布病)。链霉素是治疗布病的推荐药物,但我国已有链霉素耐受分离株(根据CLSI推荐的耐药折点)。【目的】筛选并鉴定羊种布鲁氏菌(Brucella melitensis)链霉素耐受的新基因。【方法】利用转录组筛选羊种布鲁氏菌链霉素耐受新基因,并利用同源重组、分子对接等技术预测并鉴定相关基因的功能。【结果】羊种布鲁氏菌(M5疫苗株)在含2×MIC浓度链霉素培养基上,12 h后通过耐受恢复增殖能力。转录组分析表明,细胞膜组成成分在低浓度链霉素耐受中发挥重要作用,核糖体通路相关基因表达量显著性增加[|log2FC|≥2.0,P<0.05],群体感应通路、Ⅳ型分泌系统相关基因表达量显著性降低(|log2FC|≥2.0,P<0.05)。利用同源重组技术缺失组成Ⅳ型分泌系统的元件,发现缺失virB3和virB5基因后,M5疫苗株链霉素MIC值增高,回补后与亲本株差异不显著。分子对接预测发现,VirB3和VirB5能够通过氢键与链霉素结合。【结论】链霉素主要影响羊种布鲁氏菌细胞膜组分涉及的相关通路。羊种布鲁氏菌通过降低Ⅳ型分泌系统组成元件virB3和virB5基因的表达耐受链霉素。本研究为布鲁氏菌耐药株研究提供了新思路,为布鲁氏菌新药研发提供了候选靶点。

关键词：羊种布鲁氏菌链霉素 Ⅳ型分泌系统 VirB操纵子

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海门山羊MSTN基因克隆、生物信息学分析及单碱基编辑的研究

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畜牧与兽医 2025年第5期57卷 24-30页

作者：夏潇潇王佳琳李玲佰伍加宋志贤岳恒曹少先袁玉国扬州大学兽医学院/扬州大学动物基因工程重点实验室江苏扬州225009 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 扬州大学医学院江苏扬州225009 江苏省农业科学院畜牧研究所/江苏省畜禽精准育种工程研究中心/农业农村部种养结合重点实验室江苏南京210014

为探明海门山羊不同组织中肌肉生长抑制素(MSTN)基因表达规律及其编码蛋白结构特点,通过克隆海门山羊MSTN基因CDS序列并分析其生物特点,运用实时荧光定量PCR技术分析MSTN基因在不同组织中的表达水平,在MSTN基因第2、3外显子上设计3个单... 详细信息

为探明海门山羊不同组织中肌肉生长抑制素(MSTN)基因表达规律及其编码蛋白结构特点,通过克隆海门山羊MSTN基因CDS序列并分析其生物特点,运用实时荧光定量PCR技术分析MSTN基因在不同组织中的表达水平,在MSTN基因第2、3外显子上设计3个单碱基编辑靶位点,将构建的sgRNA质粒分别与胞嘧啶碱基编辑器YE1-BE3-FNLS电转入培养的海门山羊胎儿成纤维细胞中,筛选48 h后提取细胞基因组DNA,对PCR扩增靶位点序列进行Sanger测序和TA克隆分析。结果:海门山羊MSTN基因的CDS序列编码375个氨基酸,具有高度保守性。海门山羊不同组织中MSTN基因表达水平存在差异,其中骨骼肌的表达量最高;3条sgRNA均可在MSTN基因外显子上进行单碱基编辑,编辑效率分别为25%、37%和29%。结论:研究结果为进一步利用单碱基基因编辑技术培育MSTN基因突变海门山羊新品系提供了新的依据。

关键词：海门山羊肌肉生长抑制素单碱基编辑

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半番鸭NMB基因克隆、生物信息学和组织表达分析

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中国畜牧兽医 2025年第4期52卷 1705-1715页

作者：张莹陈广振刘梅李红霞俞燕贾雪波李雯倩范建华马志禹江苏省家禽科学研究所江苏省家禽遗传育种重点实验室扬州225125 扬州大学兽医学院江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

【目的】本研究旨在克隆半番鸭神经介素B(NMB)基因并对其进行序列分析,检测NMB基因在半番鸭不同组织中的表达情况。【方法】根据NCBI数据库中鸭NMB基因的预测序列(登录号:XM_027466185.2)设计引物,通过PCR扩增获得半番鸭NMB基因片段,克... 详细信息

【目的】本研究旨在克隆半番鸭神经介素B(NMB)基因并对其进行序列分析,检测NMB基因在半番鸭不同组织中的表达情况。【方法】根据NCBI数据库中鸭NMB基因的预测序列(登录号:XM_027466185.2)设计引物,通过PCR扩增获得半番鸭NMB基因片段,克隆后测序获得NMB基因序列;利用生物信息学分析软件对半番鸭NMB核苷酸和氨基酸序列进行分析,并构建遗传进化树;通过实时荧光定量PCR检测NMB基因mRNA在半番鸭体内多个组织中的表达情况。【结果】本试验克隆获得了半番鸭NMB基因,其CDS序列长度为387 bp,编码128个氨基酸,包括14个氨基酸(GNLWATGHFMGKKS)的蛙皮素保守结构域,与鸡、小鼠、猪、牛和人的NMB的保守结构域完全相同。相似性比对发现,半番鸭与鸡NMB基因核苷酸和氨基酸序列的相似性较高,分别为87.9%和89.8%,与其他动物的相似性较低;半番鸭NMB在进化上与鸡亲缘关系较接近,与牛、马、猪、犬等家畜较远。生物信息学分析结果表明,半番鸭NMB蛋白属于亲水性蛋白,其N-端22个氨基酸为信号肽,二级结构和三级结构中α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲分别占53.91%、14.06%、7.03%和25.00%,半番鸭NMB蛋白主要与NMBR和GRPR蛋白结合发挥作用。实时荧光定量PCR结果显示,NMB基因mRNA在半番鸭中枢和外周多个组织器官中均有表达;以空肠为对照,NMB基因在中枢的小脑、大脑和视叶表达量相对较高(P<0.01),在外周的气管、肺脏、松果体、甲状腺、肾脏和尾脂腺表达量相对较高(P<0.01)。另外,NMB基因mRNA在不同性别半番鸭体内的表达趋势基本一致,但在在小脑和胰腺等组织中母鸭比公鸭NMB基因mRNA的表达量相对较高(P<0.01),但在松果体和肾脏等组织中则相反(P<0.01;P<0.05)。【结论】半番鸭NMB蛋白具有蛙皮素的保守结构域,与鸡的亲缘关系最近、蛋白相似性高,属于亲水性蛋白,有信号肽。NMB基因在半番鸭多个中枢(小脑、大脑和视叶)和外周(松果体、肾脏、尾脂腺、甲状腺和气管等)组织器官中高表达。以上结果可为进一步研究半番鸭NMB基因的功能提供参考。

关键词：半番鸭 NMB基因克隆表达生物信息学

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原花青素对镉致小鼠肝肾损伤的保护作用

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畜牧与兽医 2025年第2期57卷 46-53页

作者：李潭李雅文赵昕蕊李彬刘丹仝锡帅卞建春刘学忠袁燕邹辉刘宗平顾建红扬州大学兽医学院江苏扬州225009 东海县畜牧兽医站江苏连云港222399 中国教育部农业和农产品安全国际联合研究实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009

旨在研究低聚原花青素(OPC)对镉(Cd)致小鼠肝肾损伤的保护作用。Cd与不同剂量OPC(50和100 mg/kg)单独或联合处理6月龄BALB/c雌性小鼠3个月,称取小鼠体重,计算肝脏和肾脏脏器系数,自动生化分析仪检测肝肾相关血液生化指标,HE染色观察肝... 详细信息

旨在研究低聚原花青素(OPC)对镉(Cd)致小鼠肝肾损伤的保护作用。Cd与不同剂量OPC(50和100 mg/kg)单独或联合处理6月龄BALB/c雌性小鼠3个月,称取小鼠体重,计算肝脏和肾脏脏器系数,自动生化分析仪检测肝肾相关血液生化指标,HE染色观察肝脏和肾脏组织病理学变化,试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性和丙二醛(MDA)含量,透射电镜观察线粒体和细胞核形态,免疫组化分析半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达情况,Western blot法检测Caspase-3、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平。结果:与对照组相比,Cd组小鼠体重与肝肾脏器系数降低,血清乳酸脱氢酶活性(LDH)和磷(P)含量升高,肝组织出现水样变性、少量细胞脂肪变性、单核炎性细胞浸润、肝细胞索排列紊乱,肾囊腔扩张、散在单核炎性细胞浸润,肾小管上皮细胞坏死和脱落,肝脏和肾脏组织SOD、GSH-Px活性下降,而MDA水平升高,线粒体和细胞核损伤,促凋亡蛋白Caspase-3升高,Bcl-2/Bax比值降低。与Cd组相比,OPC+Cd联合处理组上述指标均明显改善。提示:OPC能缓解Cd致小鼠肝肾损伤,是Cd中毒的潜在治疗剂。

关键词：原花青素镉肝脏肾脏氧化应激凋亡

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产蛋鸡群细菌性感染的病原分离与鉴定

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中国禽业导刊 2025年第3期42卷 62-65页

作者：王建茹筱娴刘书颜袁璟闫彩虹羊扬金文杰武进区畜牧兽医管理服务中心江苏常州213100 扬州大学兽医学院江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 扬州大学动物疾病检测与技术服务中心江苏扬州225009 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室江苏扬州225009

鸭源鸡杆菌作为革兰氏阴性菌,隶属于巴氏杆菌科鸡杆菌属,其宿主多样,常作为条件性致病菌,主要引发输卵管炎、卵巢炎等;奇异变形杆菌亦属革兰氏阴性菌,归类于肠杆菌科变形杆菌属,可以在各种各样的环境中生长,是人和动物胃肠道的共生菌,... 详细信息

鸭源鸡杆菌作为革兰氏阴性菌,隶属于巴氏杆菌科鸡杆菌属,其宿主多样,常作为条件性致病菌,主要引发输卵管炎、卵巢炎等;奇异变形杆菌亦属革兰氏阴性菌,归类于肠杆菌科变形杆菌属,可以在各种各样的环境中生长,是人和动物胃肠道的共生菌,主要引起泌尿系统的感染。本实验以3只出现典型病变特征的病死蛋鸡为研究对象,观察其病理变化,并且通过细菌分离培养、生化试验、质谱仪检测及16S rDNA基因序列分析等方法,以鉴定其细菌性感染病原为鸭源鸡杆菌和奇异变形杆菌,同时进行药敏试验,为疾病防治提供理论依据。

关键词：奇异变形杆菌细菌性感染条件性致病菌细菌分离培养鸭源鸡杆菌动物胃肠道典型病变输卵管炎

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基于BOPPPS结合翻转课堂的模式在系统解剖教学中的应用和思考

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中文科技期刊数据库(全文版)教育科学 2025年第2期 152-155页

作者：孙玉祥徐莉扬州大学医学院转化医学研究院江苏扬州 225001 江苏省老年病预防与中西医结合治疗重点实验室江苏扬州 225001

系统解剖学作为医学教育中的核心课程,对于医学生掌握人体结构知识、理解生理功能及病理变化具有不可替代的重要性。然而,该学科知识点密集且记忆要求高,导致学生难以形成长期记忆。本研究创新性地引入BOPPPS教学模型,并结合翻转课堂模... 详细信息

系统解剖学作为医学教育中的核心课程,对于医学生掌握人体结构知识、理解生理功能及病理变化具有不可替代的重要性。然而,该学科知识点密集且记忆要求高,导致学生难以形成长期记忆。本研究创新性地引入BOPPPS教学模型,并结合翻转课堂模式,旨在提升学生对系统解剖学知识点的掌握程度,激发其学习热情和自主学习能力。通过构建理论与实践相结合的教学体系,本研究旨在培养能够将医学理论与临床实践融会贯通的专业人才。该教学模式不仅实现了课堂内外的有效衔接,形成了闭环反馈的教学设计,而且促进了知识的深入内化与实践应用。本文深入分析了当前国内系统解剖学教学中存在的问题,并探讨了如何将BOPPPS模型与翻转课堂模式有效融合,以期为系统解剖学教学的优化提供切实可行的建议。

关键词： BOPPPS 翻转课堂系统解剖学

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非洲猪瘟病毒分子信标荧光定量PCR检测方法的建立

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中国兽医科学 2025年第2期55卷 203-209页

作者：钟健豪高寒杨吉飞邝麒元高校鹏李跃牛庆丽关贵全殷宏张桂红卢刚孙彦阔华南农业大学兽医学院广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室广东广州510642 中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730046 华南农业大学非洲猪瘟防控技术研究中心国家非洲猪瘟区域实验室(广州)广东广州510642 甘肃省病原生物学基础学科研究中心国家非洲猪瘟区域实验室(兰州)甘肃兰州730046 扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

本试验旨在利用新型荧光探针-分子信标建立一种检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的分子信标实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法。根据ASFVB646L基因序列的保守区域设计特异性引物和分子信标探针,通过反应体系和反应条件的优化,建立标准曲线,测定本方... 详细信息

本试验旨在利用新型荧光探针-分子信标建立一种检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的分子信标实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法。根据ASFVB646L基因序列的保守区域设计特异性引物和分子信标探针,通过反应体系和反应条件的优化,建立标准曲线,测定本方法的敏感性、特异性和重复性;并通过检测207份临床样本,比较本方法与国家标准qPCR方法和商品化ASF检测试剂盒之间的符合率以及得出kappa系数。结果显示,该方法标准曲线的线性关系良好,相关系数为0.9974,最低检出浓度为1 copies/μL,且与5种常见猪源病原体之间无交叉反应,组内与组间的变异系数均小于1.81%;临床样品检测结果显示,本方法与国家标准qPCR方法和商品化ASF检测试剂盒的总体符合率分别为97.10%和98.55%,kappa系数分别为0.9104和0.9556。结果表明,本试验建立的ASFV检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好、检测结果可靠,为ASF的检测和该病的防控提供了技术支持。

关键词：非洲猪瘟病毒分子信标实时荧光定量检测方法

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一种羊种布鲁氏菌复方新诺明耐药株荧光定量PCR检测方法的建立

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畜牧兽医学报 2025年第3期56卷 1465-1472页

作者：杨晓雯宁文晴周师众袁雅琴侯雪新丁家波中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(北方) 北京100193 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室北京102206 山东农业大学动物医学院泰安271001 扬州大学兽医学院禽类预防医学教育部重点实验室江苏省动物预防医学重点实验室扬州225009

近年来,世界范围内已分离获得布鲁氏菌复方新诺明耐药株,快速检测样品中是否含有耐药株有助于指导临床用药。目前国内外尚无布鲁氏菌复方新诺明耐药株的快速检测方法。本研究旨在建立一种羊种布鲁氏菌复方新诺明耐受株的快速检测方法。... 详细信息

近年来,世界范围内已分离获得布鲁氏菌复方新诺明耐药株,快速检测样品中是否含有耐药株有助于指导临床用药。目前国内外尚无布鲁氏菌复方新诺明耐药株的快速检测方法。本研究旨在建立一种羊种布鲁氏菌复方新诺明耐受株的快速检测方法。基于前期的研究筛选最小抑菌浓度较高的我国羊种布鲁氏菌分离株,利用基因组测序分析全基因组SNPs并筛选SNPs位点,利用MGB探针建立荧光定量检测羊种布鲁氏菌复方新诺明耐药株。研究发现,羊种布鲁氏菌2型标准株可作为耐药株分析的参考株,且64个SNPs和InDels为耐药株特有;12个突变位点可用于建立耐药株快速检测方法;利用染色体1中2014308位点的A/G多态性建立荧光定量检测方法特异性良好,最低能检测2×10^(1)CFU菌量,可用于临床样品是否含有复方新诺明耐药株的检测。本研究建立了一种羊种布鲁氏菌复方新诺明耐药株的荧光定量检测方法,为我国布病耐药株的防控提供科学依据,同时也为临床用药提供参考。

关键词：羊种布鲁氏菌复方新诺明全基因组SNPs MGB探针

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致奶牛乳房炎大肠埃希菌的分离鉴定及耐药分析

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现代畜牧兽医 2025年第3期 16-20页

作者：丁颖张伟魏铭清刘非凡张倩周霞王震张辉石河子大学动物科技学院新疆石河子832000 昌吉州动物疾病预防疾控中心新疆昌吉831000 新疆农垦科学院畜牧兽医研究所新疆石河子832000 江苏省人兽共患病学重点实验室(扬州大学) 江苏扬州225009

试验旨在了解石河子地区引起奶牛乳房炎的大肠埃希菌耐药性与致病性情况。试验对石河子周边地区患乳房炎奶牛的乳样进行细菌分离纯化,对分离株进行细菌生化鉴定、革兰氏染色镜检、16S rDNA鉴定以及致病性试验、药敏试验。结果显示:试验... 详细信息

试验旨在了解石河子地区引起奶牛乳房炎的大肠埃希菌耐药性与致病性情况。试验对石河子周边地区患乳房炎奶牛的乳样进行细菌分离纯化,对分离株进行细菌生化鉴定、革兰氏染色镜检、16S rDNA鉴定以及致病性试验、药敏试验。结果显示:试验分离出一株疑似大肠埃希菌,其形态呈卵圆形或杆状菌,革兰氏染色呈红色,经生化鉴定后的鉴定值为A070,对其进行16S rDNA测序比对鉴定为大肠埃希菌。药敏试验结果显示,分离株对β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类等药物均具有一定的耐药性。致病性试验结果显示,分离株可致使小鼠死亡,死亡小鼠肝脏肿大,肝脏、脾脏、心脏均有淤血点。研究表明,试验成功从生鲜乳样本中分离到一株致病性大肠埃希菌,该菌株对部分抗生素具有一定耐药性,研究结果可为养殖场治疗奶牛乳房炎临床用药提供参考。

关键词：大肠埃希菌分离鉴定药敏试验致病性试验

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