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中华微生物学和免疫学杂志 2021年第6期41卷 484-487页

作者：景丹蕤李筱芳刘维达中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所真菌科南京210042 江苏省皮肤病与性病学分子生物学重点实验室南京210042

耳念珠菌是近年来新发现的病原体,不仅鉴别困难、致死率高、易导致院内传播,还可对多种抗真菌药物产生耐药性。但其耐药机制尚不十分明确。本文综述了ERG11的错义突变或过表达、外排泵、TAC1B突变、额外的5号染色体的获得、Hsp90及生物... 详细信息

耳念珠菌是近年来新发现的病原体,不仅鉴别困难、致死率高、易导致院内传播,还可对多种抗真菌药物产生耐药性。但其耐药机制尚不十分明确。本文综述了ERG11的错义突变或过表达、外排泵、TAC1B突变、额外的5号染色体的获得、Hsp90及生物膜形成在耳念珠菌对唑类药物的耐药性产生中所起的作用,以及耳念珠菌对其他药物包括棘白菌素类、多烯类、核苷类似物及丙烯胺类的耐药机制。

关键词：耳念珠菌耐药性研究进展

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白念珠菌菌丝调控小鼠巨噬细胞自噬关键分子微管相关蛋白1轻链3的实验研究

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中华皮肤科杂志 2021年第3期54卷 189-195页

作者：林泽杭段志敏徐松陈旭李岷中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042

目的探讨白念珠菌菌丝对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)自噬流的影响。方法白念珠菌菌丝分别体外诱导BMDM细胞0.5、4、12 h,以不加菌丝处理的0 h组作为对照,Western印迹法检测各时间点自噬关键蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转... 详细信息

目的探讨白念珠菌菌丝对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)自噬流的影响。方法白念珠菌菌丝分别体外诱导BMDM细胞0.5、4、12 h,以不加菌丝处理的0 h组作为对照,Western印迹法检测各时间点自噬关键蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转换及磷酸化雷帕霉素机制性靶蛋白(p-mTOR)的表达。白念珠菌菌丝分别联合4种溶酶体阻断剂,包括半胱氨酸蛋白酶抑制剂E-64d+胃蛋白酶抑制剂pepstatin、巴弗洛霉素-A1(BAF-A1)、氯化铵及氯喹,体外诱导小鼠BMDM细胞4、12 h,观察白念珠菌菌丝对BMDM细胞基础自噬流的影响。统计分析采用非配对t检验、析因设计的方差分析及LSD-t检验。结果白念珠菌菌丝体外处理小鼠BMDM 0.5、4和12 h后,与0 h组(0.983±0.030)相比,LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ转换均增加(1.254±0.118、1.629±0.391、1.598±0.379),差异有统计学意义(t值分别为3.875、2.856、2.804,均P<0.05),但各组p-mTOR的蛋白表达无明显差异。白念珠菌菌丝联合E-64d+pepstatin体外处理BMDM细胞4和12 h后,LC3-Ⅱ的蓄积水平较E-64d+pepstatin单独处理组明显增高,差异均有统计学意义(t值分别3.691、6.648,均P<0.05)。与相应溶酶体阻断剂组相比,白念珠菌菌丝联合BAF-A1、氯化铵或氯喹4和12 h后,LC3-Ⅱ的蓄积水平均显著升高(均P<0.05)。结论白念珠菌菌丝体外诱导可增加小鼠BMDM细胞基础自噬流中LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转换。

关键词：白色念珠菌菌丝巨噬细胞自噬微管相关蛋白质类

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白藜芦醇对中波紫外线照射的人角质形成细胞凋亡及细胞周期的影响

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中华皮肤科杂志 2021年第5期54卷 408-413页

作者：陈虹颖陈旭李莉顾恒中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病医院理疗科江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042

目的探讨白藜芦醇对中波紫外线(UVB)照射后人原代角质形成细胞(HEK)凋亡和细胞周期的影响。方法0、25、50、100、150和200μmol/L白藜芦醇处理人原代角质形成细胞12 h,分别采用CCK-8、BrdU和LDH法检测白藜芦醇对细胞增殖活性和死亡的影... 详细信息

目的探讨白藜芦醇对中波紫外线(UVB)照射后人原代角质形成细胞(HEK)凋亡和细胞周期的影响。方法0、25、50、100、150和200μmol/L白藜芦醇处理人原代角质形成细胞12 h,分别采用CCK-8、BrdU和LDH法检测白藜芦醇对细胞增殖活性和死亡的影响。分别采用50 mJ/cm^(2)UVB和100μmol/L白藜芦醇处理HEK细胞,分为正常对照组、白藜芦醇组、UVB组和UVB+白藜芦醇组,采用Western印迹检测凋亡相关蛋白多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)和胱天蛋白酶3(caspase-3)以及细胞周期相关蛋白(cyclin)B1和cyclin E1的表达水平,采用流式细胞仪检测细胞凋亡水平和细胞周期分布。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果0、25、50、100、150和200μmol/L白藜芦醇组HEK细胞增殖活性差异有统计学意义(F=46.52,P<0.001),不同浓度组均低于对照组(均P<0.001);100μmol/L白藜芦醇组细胞DNA合成活力(0.761±0.141)低于对照组(2.226±0.141,t=17.92,P<0.001);25、50、100和200μmol/L白藜芦醇组细胞死亡率差异无统计学意义(F=1.938,P>0.05)。UVB和白藜芦醇处理后,4组细胞凋亡率和G1期、G2期、S期的细胞比例以及PARP、caspase-3、cyclin B1、cyclin E1的表达水平差异均有统计学意义(均P<0.05)。UVB组细胞凋亡率(24.69%±3.54%)及PARP、caspase-3的剪切水平(2.190±0.349、0.090±0.016)均高于对照组和UVB+白藜芦醇组(4.00%±0.81%、0.926±0.040、0.024±0.019,均P<0.05);UVB组cyclin E1、cyclin B1蛋白水平(0.116±0.017、0.775±0.080)均低于正常对照组,UVB+白藜芦醇组cyclin E1表达水平(0.287±0.047)高于UVB组、cyclin B1表达水平(0.504±0.009)低于UVB组(均P<0.05);UVB组S期细胞比例低于对照组和UVB+白藜芦醇组,G1期、G2期细胞比例均高于UVB+白藜芦醇组(P<0.05)。结论白藜芦醇可以抑制HEK增殖活力,抑制紫外线照射诱导的细胞凋亡,调控细胞周期进程。

关键词：角蛋白细胞紫外线细胞增殖细胞凋亡细胞周期白藜芦醇

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红皮病性银屑病患者WBC升高的临床意义

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临床皮肤科杂志 2016年第11期45卷 759-761页

作者：胡煜向志栾超郝志敏宗文凯陈敏崔盘根中国医学科学院皮肤病医院江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室江苏南京210042

目的:探讨红皮病性银屑病患者WBC升高与病情的相关性。方法:回顾性分析181例红皮病性银屑病患者的临床资料,分析WBC升高与患者的一般资料、实验室检查结果、治疗方法和疾病预后等的相关性。结果:伴有WBC升高的患者体温降至正常时间和皮... 详细信息

目的:探讨红皮病性银屑病患者WBC升高与病情的相关性。方法:回顾性分析181例红皮病性银屑病患者的临床资料,分析WBC升高与患者的一般资料、实验室检查结果、治疗方法和疾病预后等的相关性。结果:伴有WBC升高的患者体温降至正常时间和皮疹消退时间均高于不伴WBC升高者(P均<0.05)。结论:WBC升高与红皮病性银屑病患者的病情严重程度相关,可作为判断病情和评估预后的参考指标。

关键词：银屑病,红皮病性 WBC 相关性

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早老蛋白增强子2基因沉默对HaCaT细胞增殖及γ分泌酶表达的影响

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中华皮肤科杂志 2021年第4期54卷 318-324页

作者：李文锐张媛媛贾苇雪何艳艳徐浩翔林麟李诚让中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病医院皮肤科南京210042 江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042

目的构建早老蛋白增强子2(PSENEN)基因沉默的人永生化角质形成细胞(HaCaT)模型,探究PSENEN基因表达下调对HaCaT细胞增殖以及γ分泌酶表达的影响。方法设计3组靶向PSENEN基因的shRNA序列,与线性化的LV3-pGLV-h1-GFP-puro载体构建慢病毒... 详细信息

目的构建早老蛋白增强子2(PSENEN)基因沉默的人永生化角质形成细胞(HaCaT)模型,探究PSENEN基因表达下调对HaCaT细胞增殖以及γ分泌酶表达的影响。方法设计3组靶向PSENEN基因的shRNA序列,与线性化的LV3-pGLV-h1-GFP-puro载体构建慢病毒重组表达质粒,经酶切及测序鉴定后,进行慢病毒的包装、纯化和滴度测定。将HaCaT细胞分为5组进行转染:shRNA1组、shRNA2组、shRNA3组分别加入含沉默PSENEN基因的shRNA1、shRNA2、shRNA3慢病毒原液,NC组加入含阴性对照shNC慢病毒原液,空白组不加病毒液。转染完成后,荧光显微镜下观察荧光表达,流式细胞仪检测转染效率。CCK8法测定HaCaT细胞增殖活性,实时荧光定量PCR(qPCR)、Western印迹法分别检测PSENEN、呆蛋白(NCT)、早老蛋白1(PS1)、前咽缺陷蛋白1a(APH1a)mRNA、蛋白的相对表达量。统计分析采用重复测量方差分析、单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果倒置荧光显微镜下观察到shRNA1~shRNA3组、NC组均有荧光表达,流式细胞仪示转染效率均达98%以上。qPCR、Western印迹法显示,与NC组(1.054±0.272、1.076±0.075)相比,shRNA1、shRNA2、shRNA3组PSENEN mRNA(0.187±0.010、0.163±0.022、0.174±0.009)、蛋白(0.219±0.097、0.208±0.014、0.185±0.062)表达均显著降低(均P<0.001)。CCK8法显示,与NC组相比,shRNA1组细胞增殖活性在0、12、36、48 h均显著增高(均P<0.05),24和60 h差异无统计学意义(均P>0.05);shRNA2、shRNA3组在0、12、24、36、48、60 h细胞增殖水平均显著高于NC组(均P<0.05)。shRNA1组、shRNA2组、shRNA3组、NC组、空白组间NCT、PS1、APH1a基因mRNA表达差异无统计学意义(F值分别为8.168、4.644、1.981,均P>0.05),mNCT、imNCT、PS1-CTF、APH1a蛋白相对表达差异有统计学意义(F值分别为39.268、5.929、27.842、20.663,均P≤0.01)。与NC组相比,shRNA1、shRNA2、shRNA3组mNCT、PS1-CTF、APH1a蛋白表达均显著降低(均P<0.01),imNCT蛋白表达变化无统计学意义(均P>0.05)。结论成功构建了PSENEN基因沉默的HaCaT细胞模型,PSENEN基因沉默会引起HaCaT细胞增殖活性增强,γ分泌酶其他亚基蛋白含量下降。

关键词：化脓性汗腺炎基因沉默细胞增殖 PSENEN基因 γ分泌酶 HaCaT细胞

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白念珠菌对棘白菌素类药物耐药机制的研究进展

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中华皮肤科杂志 2022年第12期55卷 1114-1117页

作者：杨璐段志敏李岷中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病研究所、江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042

随着棘白菌素类抗真菌药物的应用,对其耐药的白念珠菌菌株越来越多。已发现白念珠菌对棘白菌素类药物耐药主要与FKS突变、MSH2突变、ERG3突变及生物膜形成、细胞自身应激反应、几丁质含量增高、膜鞘脂合成等相关。本文综述白念珠菌相关... 详细信息

随着棘白菌素类抗真菌药物的应用,对其耐药的白念珠菌菌株越来越多。已发现白念珠菌对棘白菌素类药物耐药主要与FKS突变、MSH2突变、ERG3突变及生物膜形成、细胞自身应激反应、几丁质含量增高、膜鞘脂合成等相关。本文综述白念珠菌相关耐药基因及可能的耐药调控机制,有助于临床克服和预防棘白菌素耐药,探索治疗白念珠菌感染的新靶点,开发新药物。

关键词：白色念珠菌抗药性,真菌棘白菌素类点突变 FKS

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自身免疫性皮肤病的新药研发进展

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中国新药杂志 2023年第19期32卷 1953-1958页

作者：史丽晴陆前进中国医学科学院北京协和医学院皮肤病医院中国医学科学院免疫性皮肤病基础与转化研究重点实验室江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室

自身免疫性皮肤病是由于免疫系统对自身抗原发生免疫反应导致免疫失衡，从而引起皮肤损伤伴有或不伴有其他组织器官损伤的一类疾病。传统免疫抑制剂发挥疗效的同时伴随着广泛的不良反应。对发病机制的深入了解促进了各种基于靶向细胞因... 详细信息

自身免疫性皮肤病是由于免疫系统对自身抗原发生免疫反应导致免疫失衡，从而引起皮肤损伤伴有或不伴有其他组织器官损伤的一类疾病。传统免疫抑制剂发挥疗效的同时伴随着广泛的不良反应。对发病机制的深入了解促进了各种基于靶向细胞因子或信号通路药物的研发。这些药物的应用显著改善了患者的病情，但往往需要长期维持治疗，且仍有许多自身免疫性皮肤病缺乏明确的靶标。因此仍需要更多新兴治疗策略和创新药物以重新平衡免疫系统的稳态，诱导疾病的长期缓解，为治疗自身免疫性皮肤病提供新的希望。本研究将根据不同的作用机制及靶点，讨论治疗自身免疫性皮肤病的药物研发进展。

关键词：自身免疫性皮肤病新药免疫稳态细胞因子细胞治疗

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富马酸依美斯汀的作用机理与临床应用进展

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临床皮肤科杂志 2022年第11期51卷 683-686页

作者：陈宇杰徐松顾恒陈旭中国医学科学院皮肤病医院江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室江苏南京210000

富马酸依美斯汀是一种选择性H1受体拮抗剂。该文综述了其药理学研究进展临床应用研究、可能的不良反应以及指南中对富马酸依美斯汀的应用情况。

关键词：富马酸依美斯汀组胺荨麻疹变应性鼻炎瘙痒

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维A酸衍生物ECPIRM对皮肤T细胞淋巴瘤HH细胞增殖、凋亡的影响及其机制初探

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中华皮肤科杂志 2021年第6期54卷 493-498页

作者：李弘扬王程蔡宝乐陶蕾魏峻李玲珺马鹏程中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病研究所药物研究室江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042

目的探讨维A酸衍生物ECPIRM对人皮肤T细胞淋巴瘤HH细胞的增殖抑制作用及潜在机制。方法以0(对照组)、5、10、20μmol/L ECPIRM处理HH细胞72 h,采用CCK8法检测ECPIRM对HH细胞增殖活力的影响,采用流式细胞仪检测ECPIRM对HH细胞凋亡的影响... 详细信息

目的探讨维A酸衍生物ECPIRM对人皮肤T细胞淋巴瘤HH细胞的增殖抑制作用及潜在机制。方法以0(对照组)、5、10、20μmol/L ECPIRM处理HH细胞72 h,采用CCK8法检测ECPIRM对HH细胞增殖活力的影响,采用流式细胞仪检测ECPIRM对HH细胞凋亡的影响。以10μmol/L ECPIRM处理HH细胞72 h,采用转录组学测序分析ECPIRM对HH细胞基因表达的调控作用,结合KEGG通路分析和GO功能富集分析比较ECPIRM诱导的差异表达的相关基因。采用反转录qPCR验证相关通路中关键基因的表达变化。组间差异采用单因素方差分析,采用LSD-t检验进行两两比较。结果CCK8结果显示,ECPIRM对HH细胞IC50为(4.91±2.48)μmol/L,对照组与5、10、20μmol/L ECPIRM组HH细胞活力分别为100.00%±2.87%、49.58%±4.53%、48.36%±2.88%、31.44%±2.46%,4组细胞活力差异有统计学意义(F=162.86,P<0.001),5、10、20μmol/L组细胞活力均低于对照组(t值分别为15.36、15.73和20.89,均P<0.001)。流式细胞仪检测结果显示,4组细胞凋亡率差异有统计学意义(11.51%±1.84%、23.83%±5.72%、36.19%±8.33%、49.75%±4.10%,F=17.62,P<0.001),10、20μmol/L组细胞凋亡率均高于对照组(t值分别为4.46、6.92,均P<0.01)。转录组学分析发现,ECPIRM诱导的增殖抑制作用可能与类固醇的代谢调控有关。反转录qPCR验证发现,10μmol/L ECPIRM组L-氨基酸氧化酶(IL4I1)、乙酰辅酶A乙酰转移酶2(ACAT2)、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶1(HMGCS1)、甲羟戊酸二磷酸脱羧酶(MVD)、3-β-羟基类固醇-8,7-异构酶(EBP)、极低密度脂蛋白受体(VLDLR)、3-羟基3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)mRNA相对表达与对照组比较明显受到抑制(均P<0.05)。结论维A酸衍生物ECPIRM对HH细胞可发挥显著的抗增殖及凋亡诱导作用,其机制可能与类固醇代谢关键基因的表达抑制有关。

关键词：淋巴瘤,T细胞,皮肤维生素A酸类细胞增殖细胞凋亡 HH细胞 ECPIRM

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痤疮发病相关的重要皮肤微生物群研究进展

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中华皮肤科杂志 2019年第5期52卷 346-349页

作者：刘宇甄曾荣徐浩翔李岷中国医学科学院北京协和医学院皮肤病医院江苏省皮肤病性病学分子生物学重点实验室南京210042

皮肤微生物群在人出生后不久就开始形成,种类繁多、数量巨大,与皮肤健康密切相关。痤疮是一种微生物感染相关的常见皮肤病。痤疮丙酸杆菌、葡萄球菌属及马拉色菌属等是目前发现与痤疮发病最密切相关的3种微生物。本文综述上述3种微生物... 详细信息

皮肤微生物群在人出生后不久就开始形成,种类繁多、数量巨大,与皮肤健康密切相关。痤疮是一种微生物感染相关的常见皮肤病。痤疮丙酸杆菌、葡萄球菌属及马拉色菌属等是目前发现与痤疮发病最密切相关的3种微生物。本文综述上述3种微生物与痤疮发病的关系,主要包括不同型别细菌或真菌致病能力、与痤疮发病机制的关系及刺激机体产生免疫应答反应的差异等,以期为制定痤疮治疗的新策略提供依据。

关键词：寻常痤疮微生物群落痤疮丙酸杆菌葡萄球菌属马拉色霉菌属

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