检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验血液学杂志 2025年第1期33卷 193-197页

作者：杜佳豪赵丽丽杨标戴克胜苏州大学苏州医学院江苏省血液研究所苏州大学附属第一医院卫生部血栓与止血重点实验室放射医学与防护国家重点实验室血液学协同创新中心江苏苏州215006

目的:探究构建三氯化铁(FeCl_(3))损伤小鼠颈动脉血栓模型的主要影响因素。方法:FeCl_(3)损伤颈总动脉后,将损伤后血管取下进行固定、包埋、冷冻切片和HE染色,并统计血栓面积比。FeCl_(3)浓度分5%、10%和15%3组,FeCl_(3)损伤时间选取2、... 详细信息

目的:探究构建三氯化铁(FeCl_(3))损伤小鼠颈动脉血栓模型的主要影响因素。方法:FeCl_(3)损伤颈总动脉后,将损伤后血管取下进行固定、包埋、冷冻切片和HE染色,并统计血栓面积比。FeCl_(3)浓度分5%、10%和15%3组,FeCl_(3)损伤时间选取2、4和6 min 3组,小鼠的周龄分4-5、6-8和10周3组。0.075μg/g和0.1μg/g剂量R300注入小鼠眼球后静脉丛,4 h后进行血小板计数,探究血小板数量对FeCl_(3)诱导血栓模型的影响,验证构建的血栓模型的准确性。结果:HE染色观察显示,与5%FeCl_(3)诱导的血栓相比,10%和15%FeCl_(3)氧化损伤血管诱导形成的血栓块更稳定,致密且更大。10%FeCl_(3)损伤血管内皮4 min和6 min后诱导形成致密和大的血栓块,而损伤2 min时诱导形成的血栓更松散且血栓面积小。选取的4-5、6-8和10周龄的小鼠在对10%FeCl_(3)损伤诱导形成的致密血栓和血栓面积差异上并不明显。结论:FeCl_(3)损伤的小鼠血栓模型受到许多因素的影响。10%FeCl_(3)、损伤时间4 min、6-8周龄小鼠作为最佳的实验条件,对于构建稳定的颈动脉血栓模型是合适的。

关键词：血小板颈动脉三氯化铁

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抗人活化血小板单克隆抗体SZ—51可变区基因的克隆与序列分析

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1995年第3期27卷 319-322页

作者：顾建明张效民万海英李佩霞阮长耿江苏省血液研究所苏州医学院血栓与止血研究室

抗人活化血小板单克隆抗体ＳＺ—５１可变区基因的克隆与序列分析顾建明，张效民，万海英，李佩霞，Ｍ．Ｐ．ＬＥＦＲＡＮＣ阮长耿（江苏省血液研究所，苏州医学院血栓与止血研究室，２１５００７）法国Ｍｏｎｔｐｅｌｌｉｅｒ分子遗传... 详细信息

抗人活化血小板单克隆抗体ＳＺ—５１可变区基因的克隆与序列分析顾建明，张效民，万海英，李佩霞，Ｍ．Ｐ．ＬＥＦＲＡＮＣ阮长耿（江苏省血液研究所，苏州医学院血栓与止血研究室，２１５００７）法国Ｍｏｎｔｐｅｌｌｉｅｒ分子遗传研究所关键词单克隆抗体，免疫球蛋白...

关键词：单克隆抗体免疫球蛋白可变区基因

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纤维蛋白单抗SZ-58嵌合Fab片段在大肠杆菌中的表达

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中华微生物学和免疫学杂志 1996年第2期16卷 100-103页

作者：刘跃夏利军顾建明傅建新万海英阮长耿江苏省血液研究所苏州医学院血栓与止血研究室215007

为减少鼠源单抗的免疫原性，降低其分子量，应用基因重组技术将纤维蛋白单抗ＳＺ－５８可变区基因与人ＩｇＧ１恒定区基因Ｃ_Ｈ１、Ｃｋ进行拼接、扩增。将扩增后的ＳＺ－５８嵌合Ｆａｂ基因克隆至噬菌体质粒，并导入大肠杆菌中进行表... 详细信息

为减少鼠源单抗的免疫原性，降低其分子量，应用基因重组技术将纤维蛋白单抗ＳＺ－５８可变区基因与人ＩｇＧ１恒定区基因Ｃ_Ｈ１、Ｃｋ进行拼接、扩增。将扩增后的ＳＺ－５８嵌合Ｆａｂ基因克隆至噬菌体质粒，并导入大肠杆菌中进行表达。表达的嵌合Ｆａｂ片段为可溶性。放免检测其在表达上清中的含量约为２００μｇ／Ｌ，免疫印迹电泳证实ＳＺ－５８嵌合Ｆａｂ片段能特异地与纤维蛋白Ｄ－Ｄｉｍｅｒ结合。

关键词：单克隆抗体纤维蛋白嵌合Fab片段大肠杆菌

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应用聚合酶链反应对血小板无力症携带者诊断

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中华血液学杂志 1992年第9期13卷 458-460页

作者：王晓冬储小红 215007 江苏省血液研究所苏州医学院血栓与止血研究室 15007 江苏省血液研究所苏州医学院血栓与止血研究室

采用探针片段杂交的方法，将苏州地区正常人血小板膜糖蛋白（GP）IIIa基因T aqI限制酶片段长度多态性（RFLP)位点初步定位于GPIIIa基因第8号外显子。应用聚合酶链反应（PCR)技术，对两个血小板无力症家系进行了该RFLP的连锁分析，... 详细信息

采用探针片段杂交的方法，将苏州地区正常人血小板膜糖蛋白（GP）IIIa基因T aqI限制酶片段长度多态性（RFLP)位点初步定位于GPIIIa基因第8号外显子。应用聚合酶链反应（PCR)技术，对两个血小板无力症家系进行了该RFLP的连锁分析，并成功地对其中一个家系进行了携带者诊断。

关键词：聚合酶链反应血小板无力症携带者

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异构前列腺素及其意义

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生理科学进展 1997年第1期28卷 79-80页

作者：王兆钺苏州医学院血栓与止血研究室江苏省血液研究所

异构前列腺素（ｉｓｏ－ＰＧｓ）是花生四烯酸经氧自由基催化的代谢产物，不依赖于环氧化酶。在体内外脂质过氧化试验中均有大量的ｉｓｏ－ＰＧｓ生成，抗氧化剂有抑制作用。ｉｓｏ－ＰＧＦ２α对肾、肺血管有收缩作用，并影响血小板功... 详细信息

异构前列腺素（ｉｓｏ－ＰＧｓ）是花生四烯酸经氧自由基催化的代谢产物，不依赖于环氧化酶。在体内外脂质过氧化试验中均有大量的ｉｓｏ－ＰＧｓ生成，抗氧化剂有抑制作用。ｉｓｏ－ＰＧＦ２α对肾、肺血管有收缩作用，并影响血小板功能。糖尿病与肝肾综合征病人血浆ｉｓｏ－ＰＧＦ２α增高。ｉｓｏ－ＰＧｓ可做为脂质过氧化的一个新的特异的指标用于临床。

关键词：前列腺素异构前列腺素

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2A型血管性血友病vWF基因Ala737→Glu的突变

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中华血液学杂志 1999年第3期20卷 117-119页

作者：王迎春张敬宇万海英施纪文李震宇阮长耿苏州医学院附属第一医院江苏省血液研究所血栓与止血研究室

目的阐明２Ａ型血管性血友病（ｖＷＤ）临床表现型与基因型的相关性。方法研究来自同一家系的２例患者，他们具有初期止血障碍的出血特点，ｖＷＦ∶Ａｇ和ＦⅧ∶ＣＡｇ减少，瑞斯托霉素诱导的血小板聚集明显降低，大、中多聚物分子消失... 详细信息

目的阐明２Ａ型血管性血友病（ｖＷＤ）临床表现型与基因型的相关性。方法研究来自同一家系的２例患者，他们具有初期止血障碍的出血特点，ｖＷＦ∶Ａｇ和ＦⅧ∶ＣＡｇ减少，瑞斯托霉素诱导的血小板聚集明显降低，大、中多聚物分子消失，临床表型符合２Ａ型血管性血友病。用聚合酶链反应方法扩增患者的ｖＷＦ基因的２８号外显子，并用特异性内切酶的方法获得真基因，变性梯度凝胶电泳（ＤＧＧＥ）筛选突变基因，对电泳行为异常的片段进行测序。结果该２Ａ型ｖＷＤ家系ｖＷＦ基因的４３７０～４５９０区域ＤＧＧＥ有明显减慢的条带。ＤＮＡ序列测定，表明在ｖＷＦ基因４４９９位Ｃ→Ａ致ｖＷＦ蛋白Ａ２区域Ａｌａ７３７→Ｇｌｕ。结论该突变有助于研究ｖＷＦ蛋白功能域的精细功能及ｖＷＤ表型与基因型的相关性。

关键词：血友病血管性血友病 vWF基因点突变 PCR

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抗人活化血小板单克隆抗体SZ－51嵌合Fab片段在大肠杆菌中的表达

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中华血液学杂志 1995年第9期16卷 459-461页

作者：顾建明张效民夏利军刘跃阮长耿江苏省血液研究所苏州医学院血栓与止血研究室

单克隆抗体介导的导向显像与导向溶栓是对血栓栓塞性疾病诊断与治疗的有效手段之一。为了降低鼠源性单抗对人体的免疫原性，我们应用基因重组技术将抗人活化血小板α颗粒膜蛋白ＧＭＰ－１４０单克隆抗体ＳＺ－５１可变区基因片段与人免... 详细信息

单克隆抗体介导的导向显像与导向溶栓是对血栓栓塞性疾病诊断与治疗的有效手段之一。为了降低鼠源性单抗对人体的免疫原性，我们应用基因重组技术将抗人活化血小板α颗粒膜蛋白ＧＭＰ－１４０单克隆抗体ＳＺ－５１可变区基因片段与人免疫球蛋白γ１重链ＣＨ１和轻链恒区基因进行拼接，构建噬菌体质粒（ｐＨＥＮ１－５１Ｆａｂ／Ｈｕ），并导入大肠杆菌ＨＢ２１５１中进行表达。表达的嵌合抗体Ｆａｂ片段为可溶性，经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实能特异地与ＧＭＰ－１４０呈结合反应。经ＥＬＩＳＡ定量测定，表达上清液中的抗体含量为２００μｇ／Ｌ。

关键词：单克隆抗体抗人活化血小板 α-颗粒膜蛋白

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抗人纤维蛋白单克隆抗体SZ－63可变区基因的克隆及其基因工程抗体的研究

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中华血液学杂志 1995年第9期16卷 462-464页

作者：夏利军顾建明张效民刘跃万海英李佩霞阮长耿江苏省血液研究所苏州医学院血栓与止血研究室

应用氯化铯－超离心法从抗人纤维蛋白单克隆抗体ＳＺ一６３杂交瘤细胞抽取总ＲＮＡ，经Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）纤维素柱层析分离出ｍＲＮＡ。采用ＲＴ－ＰＣＲ技术，扩增出了ＳＺ－６３重链和轻链可变区基因。应用基因重组技术将ＳＺ－６３... 详细信息

应用氯化铯－超离心法从抗人纤维蛋白单克隆抗体ＳＺ一６３杂交瘤细胞抽取总ＲＮＡ，经Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）纤维素柱层析分离出ｍＲＮＡ。采用ＲＴ－ＰＣＲ技术，扩增出了ＳＺ－６３重链和轻链可变区基因。应用基因重组技术将ＳＺ－６３可变区基因片段与人免疫球蛋白γ１重链ＣＨ１和轻链恒区基因进行拼接，构建噬菌体ＳＺ－６３／ＨｕＦａｂ表达载体，并在大肠杆菌中表达。表达的嵌合抗体Ｆａｂ片段为可溶性，ＥＬＩＳＡ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测证实能特异地与人纤维蛋白呈结合反应，表达量约为２１０μｇ／Ｌ。

关键词：单克隆抗体人纤维蛋白可变区基因嵌合抗体

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2N型血管性血友病临床表现与基因突变

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中华血液学杂志 1996年第3期17卷 116-120页

作者：阮长耿顾建明傅建新程大卫江苏省血液研究所苏州医学院血栓与止血研究室

报道１例２Ｎ型血管性血友病（ｖＷＤ）患者，其临床表现和实验室检查与血友病甲完全相似，以前一直被误诊为血友病甲。运用ｖｏｎＷｉｌｅｂｒａｎｄ因子（ｖＷＦ）－ＦⅧ结合试验，发现患者血浆ｖＷＦ不能与ＦⅧ结合。为了阐明该患者... 详细信息

报道１例２Ｎ型血管性血友病（ｖＷＤ）患者，其临床表现和实验室检查与血友病甲完全相似，以前一直被误诊为血友病甲。运用ｖｏｎＷｉｌｅｂｒａｎｄ因子（ｖＷＦ）－ＦⅧ结合试验，发现患者血浆ｖＷＦ不能与ＦⅧ结合。为了阐明该患者ｖＷＦ缺陷的分子病理机制，通过多聚酶链反应（ＰＣＲ）和变性梯度凝胶电泳，发现该患者在１８号外显子内存在Ｇ→Ａ突变，序列分析表明患者成熟ｖＷＦＮ端ＦⅧ结合区域２２位氨基酸残基甘氨酸（Ｇｌｙ）突变为谷氨酸（Ｇｌｕ）。该Ｇ→Ａ突变产生了一个ＳａｃⅠ限制性酶切位点。

关键词：血管性血友病基因突变临床表现

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变性梯度凝胶电泳检测到一种新的凝血因子Ⅷ基因突变

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中华血液学杂志 1996年第9期17卷 466-468页

作者：李震宇傅建新万海英王泳张威顾建明阮长耿江苏省血液研究所苏州医学院血栓与止血研究室

凝血因子Ⅷ基因的第８号和第１４号外显子的３′端编码ＦⅧ的重要功能区，涉及凝血酶的激活、蛋白Ｃ的降解灭活及与ｖＷＦ结合。应用ＰＣＲ和变性梯度凝胶电泳（Ｄｅｎａｔｕｒｉｎｇｇｒａｄｉｅｎｔｇｅｌｅｌｅｃ－ｔｒｏｐｈｏｒｅ... 详细信息

凝血因子Ⅷ基因的第８号和第１４号外显子的３′端编码ＦⅧ的重要功能区，涉及凝血酶的激活、蛋白Ｃ的降解灭活及与ｖＷＦ结合。应用ＰＣＲ和变性梯度凝胶电泳（Ｄｅｎａｔｕｒｉｎｇｇｒａｄｉｅｎｔｇｅｌｅｌｅｃ－ｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ＤＧＧＥ）技术，研究了２８例血友病甲患者ＦⅧ基因的这两个外显子，发现一例轻型血友病甲患者ＦⅧ基因第８号外显子的ＤＧＧＥ行为发生了改变，经双脱氧链终止法测序证实，该外显子发生了单个碱基的置换：Ｔ（ＧＡＴ）→Ｇ（ＧＡＧ），导致Ａｓｐ３４９Ｇｌｕ。

关键词：血友病甲 FⅧ基因凝胶电泳基因突变凝血因子

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