检索结果-内蒙古大学图书馆

江苏农业学报 2011年第2期27卷 301-306页

作者：冯慧芳薛延丰石志琦严少华南京师范大学生命科学学院江苏南京210097 江苏省农业科学院食品质量安全检测研究所江苏南京210014 江苏省食品质量安全重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地江苏南京210014 农业部食品安全监控重点开放实验室江苏南京210014

探讨不同用量水葫芦沼液对青菜体内抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量及其代谢相关酶活性的影响,进而阐明其与青菜体内ASA-GSH循环的关系。以青菜(Brassica chinensis L.)为材料,在25%沼液+75%霍格兰营养液、50%沼液+50%霍格兰营... 详细信息

探讨不同用量水葫芦沼液对青菜体内抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量及其代谢相关酶活性的影响,进而阐明其与青菜体内ASA-GSH循环的关系。以青菜(Brassica chinensis L.)为材料,在25%沼液+75%霍格兰营养液、50%沼液+50%霍格兰营养液、75%沼液+25%霍格兰营养液和100%沼液处理下,测定幼苗内ASA-GSH循环各组分(ASA、脱氢抗坏血酸(DHA)、GSH、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、抗坏血酸氧化酶(AAO)、单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)、脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)和谷胱甘肽还原酶(GR))含量或活性的变化。结果显示:25%沼液+75%营养液处理组与对照(营养液组)相比,对促进青菜生长和其体内ASA-GSH循环有显著影响,还可能对提高青菜抗氧化防御能力有一定作用。

关键词：水葫芦沼液青菜抗坏血酸谷胱甘肽

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肉桂醛对大肠杆菌和绿脓杆菌的作用机制

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江苏农业学报 2011年第4期27卷 888-892页

作者：王帆杨静东王春梅石志琦江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所江苏南京210014 江苏省食品质量安全重点实验室(省部共建国家重点实验室培育基地) 江苏南京210014 农业部食用农产品安全监控重点开放实验室江苏南京210014

本文研究了肉桂醛对大肠杆菌和绿脓杆菌生长、结构和生理指标的影响。采用肉汤稀释法测得肉桂醛对大肠杆菌和绿脓杆菌的最小抑制浓度分别为2.5 mmol/L和5.0 mmol/L,经10.0 mmol/L肉桂醛分别处理2 h和3 h的大肠杆菌和绿脓杆菌的生长完全... 详细信息

本文研究了肉桂醛对大肠杆菌和绿脓杆菌生长、结构和生理指标的影响。采用肉汤稀释法测得肉桂醛对大肠杆菌和绿脓杆菌的最小抑制浓度分别为2.5 mmol/L和5.0 mmol/L,经10.0 mmol/L肉桂醛分别处理2 h和3 h的大肠杆菌和绿脓杆菌的生长完全受到抑制,扫描电镜结果显示此时大肠杆菌细胞表面出现凹陷,绿脓杆菌周围产生了大量絮状物质。在肉桂醛处理后,大肠杆菌的过氧化氢(H2O2)含量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力均有提高,而绿脓杆菌没有明显变化,表明肉桂醛可能通过氧化胁迫损伤大肠杆菌菌体,并导致其死亡;而绿脓杆菌在肉桂醛作用下,虽能形成菌膜,保护菌体免受氧化损伤,但抑制了其生长。

关键词：肉桂醛大肠杆菌绿脓杆菌作用机制

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4种有机磷农药DNA适体的筛选及结构分析

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南京农业大学学报 2013年第6期36卷 117-122页

作者：王丽刘贤金张存政刘媛屠康南京农业大学食品科技学院江苏南京210095 安徽科技学院食品药品学院安徽凤阳233100 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/农业部食品质量安全监控重点开放实验室江苏南京210014

利用SELEX技术从一个固定的随机ssDNA库中同时筛选甲拌磷、丙溴磷、水胺硫磷、氧化乐果4种有机磷农药的DNA适体。随着筛选轮数的增加,4种有机磷农药从固定的随机库中洗脱的ssDNA逐渐富集,经过12轮的筛选,筛选效率达到40.8%。对第12轮洗... 详细信息

利用SELEX技术从一个固定的随机ssDNA库中同时筛选甲拌磷、丙溴磷、水胺硫磷、氧化乐果4种有机磷农药的DNA适体。随着筛选轮数的增加,4种有机磷农药从固定的随机库中洗脱的ssDNA逐渐富集,经过12轮的筛选,筛选效率达到40.8%。对第12轮洗脱的ssDNA进行克隆、测序,挑选的15个阳性克隆均测序成功,由于部分克隆具有完全一致的序列,最终筛选到5条ssDNA序列。一级结构序列分析表明5条ssDNA具有一定的同源性,二级结构预测表明5条ssDNA的二级结构主要以茎环结构为主,表明茎环结构可能是适体结合4种有机磷农药的基础。

关键词：有机磷农药 DNA适体指数富集的配体系统进化(SELEX) 筛选结构分析

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Cry2Aa毒素结合十二肽的筛选与鉴定

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江苏农业学报 2015年第4期31卷 929-941页

作者：武爱华张霄刘媛赵扬赵岩岩张存政谢雅晶刘贤金江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/农业部食品质量安全监控重点开放实验室江苏南京210014 南京农业大学植物保护学院江苏南京210095

利用Cry-2Aa毒素蛋白对噬菌体展示随机十二肽库进行4轮筛选，并从第4轮筛选产物中随机挑选20个单克隆，进行单克隆ELISA、PCR扩增、DNA电泳及测序，鉴定这些克隆与Cry2Aa毒素的结合活性。结果显示，这20个克隆均能与c巧也Aa毒素发生特... 详细信息

利用Cry-2Aa毒素蛋白对噬菌体展示随机十二肽库进行4轮筛选，并从第4轮筛选产物中随机挑选20个单克隆，进行单克隆ELISA、PCR扩增、DNA电泳及测序，鉴定这些克隆与Cry2Aa毒素的结合活性。结果显示，这20个克隆均能与c巧也Aa毒素发生特异性结合，并推导出8条不同的序列。挑取阳性值最高的克隆GT（氨基酸序列为GTPWHHHRHLIV）建立了基于十二肽的Cry-2Aa毒蛋白的间接竞争ELISA检测方法。该方法的抑制中浓度（IC50）为1｜1390μg／ml，最低检测限IC10为O．0211μg／ml，线性检测范围为0．0478～22.691Oμg／ml（Y=23．09lgx＋48．692，R^2=0．9963）。噬菌体展示肽库筛选方法为快速、准确地检测Cry2Aa毒蛋白提供了新的途径。

关键词： Cry2Aa毒素噬菌体展示肽库:ELISA

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大肠杆菌K88噬菌体的分离鉴定及其生物学特性

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华北农学报 2012年第4期27卷 163-167页

作者：王冉韩晗张辉包红朵王恬江苏省农业科学院、农业部食品质量安全监控重点开放实验室、江苏省畜禽产品安全性研究重点实验室江苏南京210014 南京农业大学动物科技学院江苏南京210095

分离鉴定裂解性产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)K88噬菌体,并研究其生物学特性及裂菌效力。用双层平板法从猪场污水中分离噬菌体,通过透射电镜和酶切基因组对获得的噬菌体进行鉴定;同时测定了噬菌体最佳感染复数、一步生长曲线、酸碱稳定性、... 详细信息

分离鉴定裂解性产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)K88噬菌体,并研究其生物学特性及裂菌效力。用双层平板法从猪场污水中分离噬菌体,通过透射电镜和酶切基因组对获得的噬菌体进行鉴定;同时测定了噬菌体最佳感染复数、一步生长曲线、酸碱稳定性、热稳定性等噬菌体的生物学特性及其体外裂菌效力。结果表明分离获得了一株产肠毒素性大肠杆菌K88强裂解性噬菌体,命名为PK88-4;其噬菌斑清晰透亮,周围无晕环;电镜显示:其头部呈正多面体对称,有可伸缩性尾部;核酸类型为双链DNA(基因组大小约60 kb);该噬菌体能耐受60℃左右高温、在pH值为5～10内效价稳定;最佳感染复数为0.01;潜伏期为10 min,暴发期为40 min,裂解量为40;在5 h内对培养液中的大肠杆菌杀灭率将近100%。PK88-4是一株强裂解性肌尾科大肠杆菌K88噬菌体,具有裂解周期短、杀菌能力强等特点,为畜牧业防治产肠毒素性大肠杆菌K88感染提供了新的思路。

关键词：产肠毒素性大肠杆菌K88 裂解性噬菌体生物学特性裂菌效力

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金霉素和其代谢物胁迫对小白菜幼苗生长和抗氧化酶活性及累积效应的影响

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草业学报 2011年第5期20卷 102-110页

作者：魏瑞成裴燕政晓丽朱旭博陈明王冉江苏省畜禽产品安全性研究重点实验室农业部食用农产品安全监控重点开放实验室江苏省食品质量安全重点实验室江苏南京210014 扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 扬州大学植物保护学院江苏扬州225009

通过水培实验研究了在1,10和30mg/L浓度下,金霉素(chlortetracycline,CTC)和其代谢物差向金霉素(4-epi-chlortetracycline,ECTC)胁迫对小白菜种子的萌发、幼苗的早期生长、幼苗中抗氧化酶系统活性的变化以及CTC和ECTC积累进行了研究。... 详细信息

通过水培实验研究了在1,10和30mg/L浓度下,金霉素(chlortetracycline,CTC)和其代谢物差向金霉素(4-epi-chlortetracycline,ECTC)胁迫对小白菜种子的萌发、幼苗的早期生长、幼苗中抗氧化酶系统活性的变化以及CTC和ECTC积累进行了研究。结果表明,根长较其他指标对CTC和ECTC生态毒性实验更为敏感,小白菜体内SOD、POD和CAT活性被CTC诱导,活性逐渐升高,其中SOD、POD活性均高于对照,低浓度ECTC促进了SOD、POD和CAT活性的升高,高浓度时POD和CAT活性被抑制,且随浓度升高,抑制作用加强,表明小白菜抗CTC胁迫的能力强于ECTC。CTC和ECTC能在小白菜地上部分积累,处理浓度越高,吸收和积累量越多,其中CTC被积累作用强于ECTC。

关键词：金霉素差向金霉素小白菜抗氧化酶系统积累

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SELEX技术筛选毒死蜱单链DNA适体

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江苏农业学报 2012年第1期28卷 198-203页

作者：雷兆静张存政刘媛王丽胡秋辉刘贤进南京农业大学食品科技学院江苏南京210095 江苏省农业科学院食品质量安全检测研究所农业部食品安全监控重点开放实验室江苏南京210014

试验旨在利用SELEX技术体外筛选毒死蜱的特异性适体。体外合成全长为91 nt的ssDNA文库,以链亲和素修饰的凝胶为载体、毒死蜱为靶分子进行SELEX(配体指数增强系统进化技术)筛选。利用荧光标记法测定适体的筛选效率、亲和力和特异性,通过M... 详细信息

试验旨在利用SELEX技术体外筛选毒死蜱的特异性适体。体外合成全长为91 nt的ssDNA文库,以链亲和素修饰的凝胶为载体、毒死蜱为靶分子进行SELEX(配体指数增强系统进化技术)筛选。利用荧光标记法测定适体的筛选效率、亲和力和特异性,通过MFOLD分析软件对亲和力较高的适体进行二级结构预测和结合位点分析。结果表明,经过15轮筛选后,DNA文库的筛选效率达到44.00%;最终获得9条ssDNA适体,其中适体N23对毒死蜱具有最高的亲和力,其结合活性显著高于N23与水胺硫磷、丙溴磷、氧化乐果的结合活性;二级结构表明茎环结构可能是毒死蜱与适体相互作用的结构基础。

关键词：适体 SELEX 荧光毒死蜱

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江苏省畜禽养殖场水环境中四环类抗生素污染研究

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农业环境科学学报 2010年第6期29卷 1205-1210页

作者：魏瑞成葛峰陈明黄思瑜王冉江苏省畜禽产品安全性研究重点实验室农业部食用农产品安全监控重点开放实验室江苏省食品质量安全重点实验室南京210014 环境保护部南京环境科学研究所南京210042 南京师范大学食品科学与营养系南京210097

2009年在江苏省范围内采集27个规模化养殖场排水口和周围环境水体样品53个,用高效液相色谱-三重四极杆质谱对其中的土霉素(OTC)、金霉素(CTC)、四环素(TC)和强力霉素(DOX)等四环素类抗生素污染进行了检测。结果显示,土霉素、金霉素、四... 详细信息

2009年在江苏省范围内采集27个规模化养殖场排水口和周围环境水体样品53个,用高效液相色谱-三重四极杆质谱对其中的土霉素(OTC)、金霉素(CTC)、四环素(TC)和强力霉素(DOX)等四环素类抗生素污染进行了检测。结果显示,土霉素、金霉素、四环素和强力霉素在水体样品中的检出率分别为60.4%、60.4%、34.0%和17.0%,污染量分别在0.07～72.91、0.10～10.34、0.08～3.67μg·L-1和0.11～39.54μg·L-1之间,检出率以土霉素和四环素最高;猪养殖场中土霉素、四环素和强力霉素的污染量比牛和鸡场的要高,牛场中金霉素和强力霉素的污染量明显低于鸡场;从区域上看,苏南地区受到的污染明显高于苏北。

关键词：金霉素四环素土霉素强力霉素水环境污染

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微囊藻毒素MC-LR通过NO引起青菜幼苗的氧化胁迫反应

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江苏农业学报 2011年第4期27卷 842-847页

作者：钟友明张华陈健石志琦合肥工业大学生物与食品工程学院安徽合肥230009 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所江苏南京210014 农业部食用农产品安全监控重点开放实验室江苏南京210014 江苏省食品质量安全重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地江苏南京210014

研究了微囊藻毒素(MC-LR)对青菜幼苗的胁迫效应。通过回归方程计算得出,浓度为4.23 mg/L的MC-LR处理5 d使青菜幼苗生长减少50%。通过特异性荧光探针DCFH-DA和DAF-2DA实时监测青菜幼苗体内活性氧(ROS)和一氧化氮(NO)含量,发现MC-LR处理... 详细信息

研究了微囊藻毒素(MC-LR)对青菜幼苗的胁迫效应。通过回归方程计算得出,浓度为4.23 mg/L的MC-LR处理5 d使青菜幼苗生长减少50%。通过特异性荧光探针DCFH-DA和DAF-2DA实时监测青菜幼苗体内活性氧(ROS)和一氧化氮(NO)含量,发现MC-LR处理能够诱导ROS和NO的产生。抑制剂研究结果表明,MC-LR胁迫下,NO主要通过硝酸还原酶(NR)途径产生。采用NR抑制剂结合MC-LR共同处理,能够显著缓解MC-LR单独处理引起的ROS含量上升和抗氧化酶基因(Cu/Zn-SOD、CAT、APX)的转录水平升高。这些结果表明,微囊藻毒素MC-LR通过NO引起青菜幼苗的氧化胁迫反应。

关键词：微囊藻毒素青菜一氧化氮氧化胁迫硝酸还原酶

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食用酱油中曲霉的检测方法

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江苏农业学报 2010年第4期26卷 848-852页

作者：王建伟刘昌来周艳红祭芳徐剑宏史建荣南京农业大学植物保护学院植物病理学系农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室江苏南京210095 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所农业部食品安全监控重点实验室江苏省食品安全重点实验室江苏南京210014

为了快速检测酱油中黄曲霉毒素和赭曲霉毒素产生菌的污染,利用现代分子技术并结合曲霉菌的一些菌落与孢子特征差异,建立了曲霉菌快速检测方法。结果表明,使用黑曲霉钙调蛋白基因所设计的黑曲霉特异性引物,能够将黑曲霉与其他曲霉分离,... 详细信息

为了快速检测酱油中黄曲霉毒素和赭曲霉毒素产生菌的污染,利用现代分子技术并结合曲霉菌的一些菌落与孢子特征差异,建立了曲霉菌快速检测方法。结果表明,使用黑曲霉钙调蛋白基因所设计的黑曲霉特异性引物,能够将黑曲霉与其他曲霉分离,黑曲霉中可以扩增出钙调蛋白基因特异性片段,而在米曲霉和黄曲霉中不能扩增到该基因片段。利用aflR等多个已知基因设计特异性引物,扩增结果表明,米曲霉和黄曲霉的菌株并无特异性条带差异。但是,黄曲霉与米曲霉的菌落特征及孢子特征差异显著。由此建立的以PCR检测结合菌株培养特征区分多种曲霉的方法,可以用于检测酱油中黄曲霉毒素和赭曲霉毒素产生菌的污染。

关键词：酱油曲霉钙调蛋白基因 aflR基因 PCR 菌落特征

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