检索结果-内蒙古大学图书馆

扬州大学学报（农业与生命科学版） 2012年第1期33卷 81-85页

作者：沈燕王冬兰孙星刘贤进江苏省农业科学院江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室江苏南京210014

采集江苏稻田种植区872份河水和近河淤泥样品,分析稻田常用农药对河水污染现状,建立丙溴磷、三唑磷、丙环唑和咪鲜胺液质联用检测方法。河水样品经饱和氯化钠溶液和二氯甲烷+丙酮混合溶液萃取,淤泥样品经无水硫酸钠和氯化钠及丙酮+正己... 详细信息

采集江苏稻田种植区872份河水和近河淤泥样品,分析稻田常用农药对河水污染现状,建立丙溴磷、三唑磷、丙环唑和咪鲜胺液质联用检测方法。河水样品经饱和氯化钠溶液和二氯甲烷+丙酮混合溶液萃取,淤泥样品经无水硫酸钠和氯化钠及丙酮+正己烷混合溶液提取,C18反相色谱柱分离,三重串联四极杆质谱仪检测。结果表明:建立的液相色谱质谱联用仪检测方法对丙溴磷、三唑磷和丙环唑在河水和淤泥中的检测限均为0.001 ***-1,定量限均为***-1。咪鲜胺在河水和淤泥中的检测限均为***-1,定量限均为***-1。各农药在0.01～1.0μ***-1范围内与响应值线性相关,决定系数均在0.99以上。对丙溴磷、三唑磷和丙环唑在河水和淤泥中分别添加0.005、0.05和***-1 3个水平,对咪鲜胺在河水和淤泥中分别添加0.01、0.1和***-1 3个水平,结果表明,平均回收率为80%～110%,相对标准偏差均在20%以内。对江苏稻田种植区河水及淤泥样品进行分析,河水中丙溴磷、三唑磷和咪鲜胺检出率分别为3.7%、1.7%和2.5%,淤泥中三唑磷检出率为1.4%,表明河水污染程度高于淤泥。试验建立的方法简便、快速,且灵敏度、准确度高、精密度好,符合农药残留检测规范要求,适用于高通量农药残留检测。

关键词：河水农药残留液质联用检测法

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17β-雌二醇胁迫对青菜种子萌发和幼苗生理特性的影响

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西南农业学报 2016年第3期29卷 531-535页

作者：魏瑞成龚兰张莉莉陈明邵明诚王冉江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地江苏南京210014

以青菜为材料,研究了不同浓度17β-雌二醇处理下,对青菜种子萌芽和幼苗生长、抗氧化酶活性以及17β-雌二醇在幼苗中累积的影响。结果表明,青菜种子的发芽势、发芽率和根长同17β-雌二醇处理浓度呈反比,17β-雌二醇对种子萌发和幼苗生长... 详细信息

以青菜为材料,研究了不同浓度17β-雌二醇处理下,对青菜种子萌芽和幼苗生长、抗氧化酶活性以及17β-雌二醇在幼苗中累积的影响。结果表明,青菜种子的发芽势、发芽率和根长同17β-雌二醇处理浓度呈反比,17β-雌二醇对种子萌发和幼苗生长有抑制作用;低浓度17β-雌二醇胁迫激发细胞抗氧化酶系统（10-50μg/L）,超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性随着胁迫浓度的提高而上升,当胁迫浓度在50-100μg/L时,SOD和POD活性均不同程度地下降;随着17β-雌二醇处理浓度的增加,幼苗中丙二醛（MDA）和脯氨酸（Pro）含量呈增加趋势;幼苗根部17β-雌二醇累积量大于地上组织,并与处理浓度正相关。

关键词： 17β-雌二醇青菜抗氧化酶活性脯氨酸

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单链抗体对Cry1A类毒素的检测方法建立及识别差异初步研究

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农业生物技术学报 2019年第3期27卷 516-525页

作者：曲婷婷张霄董飒刘贝贝李盼王耘张存政刘贤金南京农业大学植物保护学院江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品量安全控制技术与标准重点实验室

为建立一种针对Cry1类毒素的经济高效的检测方法,本研究以杂交瘤细胞株2D10 cDNA为模板,通过重叠延伸PCR(gene splicing by overlap extension PCR, SOE-PCR)技术构建单链抗体(single-chain variable fragment, scFv)基因,转入大肠杆菌(Escherichia coli) BL21 (DE3)表达并建立双抗体夹心酶联免疫吸附测定(double antibody sandwich ELISA, DAS-ELISA)检测方法,通过分子对接模拟分析影响scFv与Cry1A类毒素结合的关键因素。结果成功构建了scFv基因,表达纯化出具有较高识别活性的scFv抗体(约28 kD),所建立的DAS-ELISA方法对Cry1Ab/Cry1Ac毒素的最低检测限(limits of determination, LOD)为20 ng/mL,分子对接结果显示,毒素的三维结构决定了其结合活性,氢键和疏水作用力在scFv与毒素结合过程中起重要作用。本研究利用基因工程抗体技术构建并表达获得了scFv抗体,建立了针对Cry1Ab/Cry1Ac毒素的双抗夹心ELISA检测方法,初步分析研究了scFv与Cry1Ac/Cry1Ab和Cry1Aa的识别差异机制,为进一步改造、研究开发新型广谱scFv提供了理论依据。

关键词： Cry1Ab Cry1Ac scFv DAS-ELISA 分子对接

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单核细胞增生李斯特氏菌内化素InlJ对噬菌体敏感性及生物被膜形成的影响

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食品科学 2023年第16期44卷 198-204页

作者：刘半红胡梁斌陆睿吴立婷包红朵周艳王冉张辉陕西科技大学食品与生物工程学院陕西西安710021 江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所江苏南京210014 江苏大学食品与生物工程学院江苏镇江212013

为深入探索单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,Lm)inlJ基因在噬菌体敏感性和生物被膜中的作用及功能,本研究通过同源重组构建inlJ基因缺失株Lm NJ05-ΔinlJ,鉴定其生长、黏附及侵袭特性,解析其对噬菌体敏感性和生物被膜形... 详细信息

为深入探索单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,Lm)inlJ基因在噬菌体敏感性和生物被膜中的作用及功能,本研究通过同源重组构建inlJ基因缺失株Lm NJ05-ΔinlJ,鉴定其生长、黏附及侵袭特性,解析其对噬菌体敏感性和生物被膜形成中的作用机制。结果表明:与野生型Lm NJ05相比,构建的缺失株Lm NJ05-ΔinlJ对RAW264.7细胞的黏附率和侵袭率分别为20.05%和4.42%,黏附和侵袭能力显著减弱;Lm NJ05-ΔinlJ对李斯特菌噬菌体vB-LmoM-NJ05的成斑率提高至2.72倍;体外裂解分析表明噬菌体vB-LmoM-NJ05对缺失株Lm NJ05-ΔinlJ裂解效果更强;噬菌体效价分别在105PFU/mL和108PFU/mL能够完全抑制和清除Lm NJ05-ΔinlJ生物被膜;生物被膜形成相关基因的转录分析表明,噬菌体作用缺失株Lm NJ05-ΔinlJ后,degU、agrA、agrD、luxS、yneA、recA和hpt基因的转录均下调(表达水平趋向于0)。由此可见,inlJ基因的缺失能够增强Lm对噬菌体敏感性,下调Lm对细胞侵袭力和生物被膜形成能力。因此,内化素基因inlJ不仅具有调控Lm自身的作用,还能够调节其对噬菌体的相互作用,为噬菌体的生物防控技术开发和应用奠定基础。

关键词：单核细胞增生李斯特氏菌内化素InlJ 噬菌体敏感性细胞黏附和侵袭生物被膜

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基于同源建模与分子对接技术构建抗Bt Cry1类毒素单链抗体定点饱和突变库

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现代食品科技 2016年第3期32卷 12-17页

作者：焦凌霞徐茜茜刘媛张霄刘贝贝梁颖刘贤金江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室江苏南京210014 河南科技学院食品学院河南新乡453003

转基因食品中苏云金芽胞杆菌(Bt)Cry毒素种类较多,对生态环境和食品安全等造成的潜在风险日益受到关注,制备针对多种Cry毒素的高效广谱抗体,进而建立广谱性快速检测方法,是对转Bt基因作物进行监管并确保生态环境和食品安全的基础。本研... 详细信息

转基因食品中苏云金芽胞杆菌(Bt)Cry毒素种类较多,对生态环境和食品安全等造成的潜在风险日益受到关注,制备针对多种Cry毒素的高效广谱抗体,进而建立广谱性快速检测方法,是对转Bt基因作物进行监管并确保生态环境和食品安全的基础。本研究利用基因工程抗体易于定向修饰及Cry毒素具有相似结构的特点,以实验室前期获得的人源化抗苏云金芽胞杆菌(Bt)Cry1Ac毒素单链抗体为材料,通过同源建模模拟单链抗体及五种Cry1类毒素的三维结构并利用分子对接技术分析单链抗体与Cry1类毒素结合的关键氨基酸位点;在此基础上利用重叠延伸PCR技术对关键氨基酸位点及其邻近位点进行定向改造,以构建定点饱和突变库,为筛选检测多种Cry1类毒素的广谱特异性抗体提供实验材料。

关键词： Cry1毒素单链抗体同源建模分子对接重叠延伸PCR 定点饱和突变

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猪鼻支原体血清抗体间接ELISA检测方法的建立

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畜牧兽医学报 2017年第10期48卷 1932-1938页

作者：王佳熊祺琰华利忠刘蓓蓓甘源冯志新刘茂军武昱孜邵国青江苏省农业科学院兽医研究所.农业部兽用生物制品工程技术重点实验室南京210014 省部共建国家重点实验室培育基地-江苏省食品质量安全重点实验室南京210014

猪鼻支原体是猪体内的一种常在菌,可引发猪的多发性浆膜炎、肺炎、关节炎、心包炎等炎症。由于猪鼻支原体与猪其他支原体有较高的交叉反应,目前并没有特异性的血清学诊断方法的报道。本试验以建立猪鼻支原体特异性ELISA检测方法为目的,... 详细信息

猪鼻支原体是猪体内的一种常在菌,可引发猪的多发性浆膜炎、肺炎、关节炎、心包炎等炎症。由于猪鼻支原体与猪其他支原体有较高的交叉反应,目前并没有特异性的血清学诊断方法的报道。本试验以建立猪鼻支原体特异性ELISA检测方法为目的,将猪鼻支原体的表面可变脂蛋白Vlp的特定肽段作为包被抗原,优化该方法检测条件,最终确定:其抗原的最佳包被浓度为0.312 5μg·mL^(-1);一抗的最佳稀释度为1∶100,作用时间为30min;二抗的最佳稀释浓度为1∶20 000,最佳作用时间为30min;显色时间为10min;阴阳性的判定值为0.27。交叉性试验结果显示,Vlp抗原与猪其他支原体阳性血清及猪常见传染病阳性血清均无交叉反应。在重现性试验中,批内及批间的变异系数均低于10%,证明重现性良好。利用所建立的方法对已知阴性及阳性样本进行检测,结果显示特异性和灵敏度均良好。最后,用建立的方法对人工感染后28d的猪血清和247份临床样品进行检测,感染猪血清抗体呈阳性,建立的Vlp-ELISA方法、吐温20膜蛋白-ELISA方法对不同猪群临床样品检测的阳性率趋势相同。综上所述,建立的Vlp-ELISA方法特异性、稳定性良好,可以广泛用于临床猪鼻支原体血清抗体检测,为该病的检测和防控提供了重要工具。

关键词：间接ELISA 猪鼻支原体血清学诊断 Vlp

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玉米中伏马毒素B污染高光谱快速检测模型研究

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中国粮油学报 2023年第8期38卷 41-48页

作者：康孝存沈广辉徐剑宏马桂珍史建荣江苏海洋大学连云港222000 江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室南京210014

为提高基于高光谱的玉米伏马毒素B(Fumonisin B,FB)污染检测模型的精度和稳健性,本研究提出了一种通过特征变量筛选结合麻雀搜索算法(SSA)优化BP神经网络的建模策略,并与基于全谱段和特征变量构建的PLS-DA、PLS和BP神经网络模型结果进... 详细信息

为提高基于高光谱的玉米伏马毒素B(Fumonisin B,FB)污染检测模型的精度和稳健性,本研究提出了一种通过特征变量筛选结合麻雀搜索算法(SSA)优化BP神经网络的建模策略,并与基于全谱段和特征变量构建的PLS-DA、PLS和BP神经网络模型结果进行对比。在所有玉米FBs污染等级判别分析模型中,SPA-SSA-BP神经网络与基于全谱段构建的PLS-DA的模型总识别正确率相同且最高,均为95.56%;在玉米FBs污染水平定量分析中,CARS-SSA-BP神经网络模型精度最高,RMSEP和RPD分别为12.41 mg/kg和3.62,SPA-SSA-BP神经网络次之,RMSEP和RPD分别为12.85 mg/kg和3.46。结果表明,CARS和SPA两种算法都能有效提取高光谱特征信息,且SSA算法具有通过对BP神经网络的初始权值和阈值进行优化,提升模型的稳健性,改善BP神经网络预测精度的能力。

关键词：高光谱伏马毒素B BP神经网络快速检测

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3种农药对土壤中白符跳的毒性效应

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农药 2014年第1期53卷 34-37页

作者：严海娟郭晓瑜刘敏丁悦刘贤进江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室南京210014

[目的]在实验室内进行3种农药—毒死蜱、乐果和吡虫啉对白符跳的毒性试验。[方法]试验体系选择拌药的人工土壤,测定跳虫成虫存活率、繁殖率;在亚致死剂量下暴露28 d,测量成虫的体长,并进行总胆碱酯酶(TCHE)和过氧化氢酶(CAT)的测定。[结... 详细信息

[目的]在实验室内进行3种农药—毒死蜱、乐果和吡虫啉对白符跳的毒性试验。[方法]试验体系选择拌药的人工土壤,测定跳虫成虫存活率、繁殖率;在亚致死剂量下暴露28 d,测量成虫的体长,并进行总胆碱酯酶(TCHE)和过氧化氢酶(CAT)的测定。[结果]白符跳对乐果最为敏感,半致死浓度(LC50)为0.364 mg a.i./kg,繁殖率半数抑制浓度(EC50-repro)为0.277 mg a.i./kg。亚致死剂量暴露后,所有试验组体长均小于对照组,其中毒死蜱浓度0.200 mg a.i./kg、乐果0.013 mg a.i./kg、吡虫啉0.063 mg a.i./kg及以上时,成虫体长极显著小于对照组(P<0.01)。3种农药对跳虫体内的总胆碱酯酶和过氧化氢酶产生了不同程度的抑制作用,其中毒死蜱高浓度组的总胆碱酯酶活性比对照组下降了56.4%,乐果高浓度组的过氧化氢酶活性比对照组下降了45.3%(P<0.01)。[结论]结果表明体长以及体内代谢和抗氧化酶是比繁殖率略敏感的因素,这几种亚致死水平试验互相参照和结合,可用于更全面地评估土壤中农药污染的水平。

关键词：农药白符跳繁殖率体长总胆碱酯酶过氧化氢酶

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高效液相色谱-串联质谱法测定蛋和奶中氨基糖苷类药物残留

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江苏农业学报 2021年第4期37卷 1033-1042页

作者：栾枫婷龚兰朱磊陈明唐敏敏邵雪梅魏瑞成王冉江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地江苏南京210014 江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所江苏南京210014

建立了高效液相色谱-串联质谱法测定蛋和奶中氨基糖苷类药物(双氢链霉素、卡那霉素A、庆大霉素、链霉素、妥布霉素、潮霉素B、大观霉素、阿米卡星、新霉素B和安普霉素)残留。用5%三氯乙酸水溶液提取目标物,经HLB固相萃取柱净化,高效液... 详细信息

建立了高效液相色谱-串联质谱法测定蛋和奶中氨基糖苷类药物(双氢链霉素、卡那霉素A、庆大霉素、链霉素、妥布霉素、潮霉素B、大观霉素、阿米卡星、新霉素B和安普霉素)残留。用5%三氯乙酸水溶液提取目标物,经HLB固相萃取柱净化,高效液相色谱柱分离,梯度洗脱,外标法定量。结果表明,10种药物在各自范围内线性关系良好,R2>0.99,方法的检出限为10.0~50.0μg/kg,定量限为30.0~100.0μg/kg,平均回收率为62.3%~110.4%,相对标准偏差为1.0%~13.6%。该方法简便、准确、灵敏,且扩大了检测范围,适用于蛋和奶中氨基糖苷类药物的定量测定。

关键词：高效液相色谱-串联质谱固相萃取氨基糖苷类药物残留禽蛋奶

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不同包装方式对冷鲜鸡肉微生物菌群多样性的影响

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食品工业科技 2023年第13期44卷 367-374页

作者：麦栩滔王文卓郑宇航刘芳孙芝兰徐为民南京师范大学食品与制药工程学院江苏南京210097 江苏省农业科学院农产品加工研究所江苏南京210014 江苏省食品质量安全重点实验室(省部共建国家重点实验室培育基地) 江苏南京210014

为研究不同包装方式对冷鲜鸡肉贮藏期间菌群组成的影响,本文利用Illumina MiSeq高通量测序分析了不同包装方式下的微生物多样性。结果表明,在4℃冷藏期间,MAP,VP和N_(2)包装能显著降低微生物数量和挥发性盐基氮含量。高通量测序表明冷... 详细信息

为研究不同包装方式对冷鲜鸡肉贮藏期间菌群组成的影响,本文利用Illumina MiSeq高通量测序分析了不同包装方式下的微生物多样性。结果表明,在4℃冷藏期间,MAP,VP和N_(2)包装能显著降低微生物数量和挥发性盐基氮含量。高通量测序表明冷鲜鸡肉贮藏初期菌种丰富度高,贮藏后期优势菌属逐渐演变为假单胞菌属、环丝菌属、不动杆菌属和希瓦氏菌属,说明它们能耐受较低的温度。与PP组相比,MAP组假单胞菌属和不动杆菌属的丰度分别降低14.8%和9.2%,而N_(2)组不动杆菌属和希瓦氏菌属的丰度分别降低9.6%和7.4%。VP组不动杆菌属、环丝菌属丰度下降8%和5.6%。不同包装方式对冷鲜鸡肉中的菌群影响较大,三种包装均能抑制不动杆菌属的生长,气调包装对假单胞菌属抑制效果较好,而充氮包装和真空包装对希瓦氏菌属和环丝菌属有较好的抑制效果,本研究也为未来冷鲜鸡肉所采用的包装方式提供理论基础。

关键词：冷鲜鸡气调包装充氮包装真空包装微生物多样性

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